SRY基因诊断在临床中的

应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增技术，对１０例染色体核型为４６，ＸＹ和１例为４６，ＸＸ／４６，ＸＹ的性反转、睾丸女性化、两性畸形及男性生殖器发育不良的患者进行了性别决定区（ＳＲＹ）基因检测。结果表明９例４６，ＸＹ和１例，ＸＹ和１例４６，ＸＸ／４６，ＸＹ患者的ＳＲＹ基因存在，１例４６，ＸＹ女性患者的ＳＲＹ基因缺失。该结果表明能够用分子生物学技术对性反转、性发育异常的病因进行分析。     

SRY基因、SOX-9基因检测在性反转中的应用研究

目的探讨在性反转综合征患者中SRY基因和SOX-9基因是否存在和突变对性腺发育的影响。方法分析了5例性反转患者,其中46,XX男性性反转4例,1例46,XY女性性反转的染色体核型,并对SRY基因存在与否用原位杂交(FISH)进行了检测。结果 3例46,XX男性性反转SRY基因阳性,1例46,XY.t(10;13)(p10;q22)女性性反转SRY基因阴性,1例46,XX男性性反转患者SRY基因阴性。5例均检测到SOX-9基因,并对这1例SRY基因阴性而SOX-9基因阳性的患者进行了基因测序,未发现SOX-9基因存在基因的突变。结论 SRY基因在性别分化中的重要基因,SOX-9基因的重复拷贝对性别的分化也十分重要。     

人类SRY基因在产前诊断及外周血造血干细胞移植后患者植活证据鉴定中的应用

目的 :建立一种对性连锁遗传胎儿产前诊断及外周造血干细胞移植后患者植活证据鉴定的方法。方法 :采用聚合酶链式反应 (PCR)扩增男性特异的 SRY基因 ,其片段大小为 2 5 4bp。结果 :对不同标本的扩增表明 ,2 0例男性标本均出现该特异扩增片段 ,而女性无此片段。结论 :聚合酶链式反应 (PCR)特异扩增片段 SRY基因片段 ,可用于 X连锁遗传胎儿产前诊断及外周血造血干细胞移植后患者植活证据鉴定     

性分化异常患者SRY基因检测及病因分析

目的探讨SRY基因在性别分化和发育中的作用。方法应用染色体核型分析和聚合酶链式反应(PCR)对人类性别决定区域(SRY)基因进行特异性扩增。结果在18例患者中有5例为46,XY,SRY( )睾丸女性化综合征患者;4例为46,XX女性性反转患者,其中3例为SRY( ),1例SRY(-);2例为46,XX,SRY( )两性畸形患者;2例为47,XXY克氏征;其他5例患者SRY基因与染色体性别一致,但都伴有不同程度的性发育异常。结论SRY基因的缺失或易位是导致性分化异常的最主要原因,同时性别决定和分化还有其他相关基因参与。     

男性表型性反转综合征一例

[病例]27岁.社会性别:男性.因婚后2年半不孕就诊.查体:患者为男性第二性征,身高170 cm,体重50 kg,骨骼细小,胡须少,喉结不明显,毛发正常,无乳房发育.     

男性表型性反转综合征一例

[病例]27岁.社会性别:男性.因婚后2年半不孕就诊.查体:患者为男性第二性征,身高170 cm,体重50 kg,骨骼细小,胡须少,喉结不明显,毛发正常,无乳房发育.     

16S rRNA基因及多重聚合酶链式反应在新生儿败血症早期诊断中的应用研究

目的分析16S rRNA基因聚合酶链式反应(PCR)检测方法及血培养方法检测疑似新生儿败血症患儿血标本中潜在病原菌的病原学特点,并以此为基础建立一套适用于临床的可检测新生儿败血症常见菌株的特异性引物多重PCR体系。方法建立16S rRNA通用引物PCR检测方法并检测534例疑似新生儿败血症患儿血标本,分析其病原学感染及特点,与常规血培养检测结果进行比较。建立适用于临床的可检测新生儿败血症常见菌株的特异性引物多重PCR体系。结果 534例血标本的血培养阳性率为26%,经鉴定为凝固酶阴性葡萄球菌(44.6%)、大肠埃希菌(14.4%)、无乳链球菌(8.6%)、金黄色葡萄球菌(7.9%)、肺炎克雷伯菌(5.8%)、屎肠球菌(4.3%)、其他菌株(14.4%)。16S rRNA通用引物PCR检测阳性率为37.6%,显著高于血培养检测(P<0.05)。经优化的多重PCR体系可快速准确检测败血症常见菌种。结论 16S rRNA基因PCR方法用于新生儿败血症的检测具有较高的检出率,可用于临床新生儿败血症的快速诊断。本研究初步建立的败血症常见致病菌特异性引物多重PCR体系具有一定的临床应用价值。     

Survivin基因在中耳胆脂瘤中的表达及其意义

目的研究Survivin基因在中耳胆脂瘤上皮中的表达情况,探讨Survivin与胆脂瘤上皮增殖的关系。方法采用免疫组织化学(EnvisionSystem)染色技术及半定量RT-PCR方法,从蛋白质和分子水平研究Survivin基因在43例中耳胆脂瘤和10例正常外耳道皮肤的表达。结果 Survivin基因蛋白产物在43例胆脂瘤患者中有69.8%(30/43)染色为阳性,在正常外耳道上皮中未见阳性表达,仅见极少数散在阳性细胞,两者之间的差异具有显著性(P<0.025)。SurvivinmRNA在胆脂瘤组织中可见表达,在正常外耳道皮肤中未见表达。结论 Survivin在中耳胆脂瘤组织中明显表达,在正常外耳道皮肤中未见表达,提示Survivin基因可能参与中耳胆脂瘤的发生、发展,可能与胆脂瘤上皮细胞的过度增殖有关,为将来的基因治疗提供理论依据。     

唐氏综合征产前基因诊断的初步研究

目的:探讨应用21号染色体上D21S1411和D21S1413 STR基因座进行唐氏综合征基因诊断及产前基因诊断的可行性。方法:采用PCR复合扩增体系对34例细胞遗传学确诊的唐氏综合征患者和65例羊水标本、60例绒毛标本进行基因诊断,将基因诊断结果与细胞遗传学结果进行比较。结果:34例唐氏综合征患者基因诊断率为85.3%。65例羊水标本中检测出1例唐氏综合征胎儿;60例绒毛标本基因诊断未发现唐氏综合征胎儿,但染色体核型分析发现1例易位且有嵌合的唐氏综合征胎儿。结论:D21S1411和D21S1413 STR基因座复合扩增体系可以快速、简便地进行唐氏综合征的基因诊断及产前基因诊断。     

分子标记技术及其在药用植物中的应用

目的:介绍现代分子生物技术——分子标记技术及其分析方法在药用植物中的应用和意义。方法:查阅国内外相关文献,进行归纳分析。结果和结论:分析了分子标记技术的特点、适用范围和局限性,以及在药用植物学的研究成果和进展。分子标记技术作为一种现代分子生物技术在药用植物学中具有广阔的应用前景。     

用多重PCR快速检测DMD基因缺失

应用两步多重ＰＣＲ，对２０例无亲缘关系的患者进行基因缺失检测，检出９例患者为基因缺失型，占受检患者的４５％。该方法简便、快速，可用于临床基因诊断     

ACCURATE DETERMINATION OF THE SIZE OF THE FIRST INTRON DELETION IN THE RENIN GENE OF SHR FROM AN AUSTRALIAN COLONY

1. It has been reported that the first intron of the renin gene of the spontaneously hypertensive rat (SHR) is shorter than that of the Wistar-Kyoto (WKY) rat, suggesting a role for this difference in the development of hypertension. 2. The genealogy of some Australian SHR colonies has raised doubts about its similarity to the Japanese, American and European colonies. 3. The polymerase chain reaction (PCR) technique has been used with primers identical to the flanking region of the first intron of the renin gene to determine its length in SHR, WKY and Sprague-Dawley (SD) from an Australian colony. 4. The size of the first intron of the renin gene in SHR, WKY and SD was found to be approximately 3870, 4550 and 5000 base pairs, respectively, results which agree with those previously published. 5. It was concluded that the first intron deletion, and its size, has been conserved in an Australian SHR colony.     

遵义地区汉族人群流行性出血热相关等位基因的分布

目的:从基因水平调查遵义地区汉族人群与流行性出血热(EHF)相关的人类白细胞抗原(HLA)-A*31、B*40、B*58、DRB1*16等位基因分布状况。方法:应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法对遵义汉族200名健康个体进行HLA-A、B、DR位点基因分型,筛选出HLA-A*31、B*40、B*58、DRB1*16阳性标本,进一步做高分辨基因亚型分型,进而对遵义汉族人群的这几组等位基因与其他不同人群的分布情况做比较。结果:遵义地区汉族HLA-A*31、B*58、DRB1*16基因各检出1种亚型,HLA-B*40共检出4种等位基因亚型,其中B*4001、B*4002、B*4006为常见亚型,B*4063为罕见基因亚型。遵义汉族人群所检出的等位基因频率大部分与我国其他地区的相接近,而与日本人比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:本研究获得了遵义汉族人群与EHF相关的HLA等位基因分布特征,为HLA与疾病相关性及本地区群体遗传学等方面的研究提供了重要依据。