BAMB胃幽门螺旋杆菌染色法的临床应用

目前检测胃幽门螺旋杆菌（Ｈｐ）已成为诊断、治疗Ｈｐ 感染和药效观察、流行病学调查等方面的重要手段 ,国内外仍然公认 ,在胃窦及胃体同时取活检 ,同时进行尿素酶试验、组织学检查及细菌培养 ,是诊断Ｈｐ感染最可靠的方法 ,我们应用硼酸美兰（ＢＡＭＢ）染色法对胃粘膜组织蜡块进行Ｈｐ检测 ,取得较好效果。１材料和方法１．１临床资料标本来源于我院门诊及住院的肝病患者５０例 ,行常规胃镜检查时 ,取胃粘膜标本 ,分别做ＢＡＭＢ染色及尿素酶染色 ,记录两者阳性率。１．２ＢＡＭＢ染色法试剂配制 :硼酸１ｇ、美兰１ｇ、蒸馏水１００ｍｌ…     

应用美兰与W-S银染法显示幽门螺杆菌的比较

资料与方法材料:选取20例由本院胃镜室送至的胃镜活检标本,10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片厚度4μm,每例3张切片,分别进行常规HE、美兰、W-S银染。染液的配制:100ml双蒸水中加入1g美兰粉剂,制成1%的美兰染液。W-S银染液按传统方法配制。染色步骤。美兰染色:①切片脱蜡至水;②滴加美兰染液,染色2~3分钟;③蒸馏水洗去染液;④自然风干后松节油或二甲苯透明,中性树胶封固。W-S银染按常规进行。结果美兰染色:幽门螺杆菌(Hp)呈蓝色,形状弯曲或呈短棒状,位于胃黏膜表面或腺腔内,散在或呈片呈团分布。W-S银染法:Hp呈黑色,背景棕黄色,分布与形态…     

石蜡切片的标本固定与石蜡精练对制片的影响

含有组织块的蜡块 (简称蜡块 )是ＨＥ石蜡切片和用作免疫组化标记、原位分子杂交的原材料。蜡块的质量不仅影响日常病理检验诊断工作 ,而且关系到用于科研的第一手材料是否可靠。本文通过石蜡切片制片过程中标本加强固定以及将制作蜡块的石蜡进行精练 ,从而对提高蜡块的质量进行探讨。1　材料和方法1.1　材料　收集 1999～ 2 0 0 0年我院外检组织 ,所有标本均用我院配制的固定液固定。固定液配制方法 :福尔马林原液(4 0 %甲醛 ) 12 0ｍｌ,蒸馏水 880ｍｌ,磷酸二氢钠 (ＮａＨ2 ＰＯ4 ·Ｈ2 Ｏ) 4 ｇ ,磷酸氢二钠 (Ｎａ2 ＨＰＯ4 ) 13ｇ ,使 …     

活性E花环标本染色法的改进

人类Ｔ淋巴细胞表面具有绵羊红细胞 (ＳＲＢＣ)受体 ,因此 ,ＳＲＢＣ能粘附于Ｔ淋巴细胞表面形成玫瑰花样的细胞团 ,故名为Ｅ攻瑰花环形成试验。是免疫学中的基本实验。Ｅ花环标本在Ｇ -Ｗ染色中 ,使ＳＲＢＣ及嗜酸性颗粒着鲜明的伊红色 ,但核着色浅甚至不着色 ,不利于在镜下观察。通过本法之染色 ,一般可使淋巴细胞呈蓝紫色 ,ＳＲ ＢＣ呈鲜明的红色易于观察。1　材料和方法1 1　试剂配制1 1 1　瑞氏染液　瑞忒氏染粉 0 1ｇ ,甲醇 (不含有醋酮 )6 0ｍｌ,将瑞忒氏染粉置于研钵内 ,研溶于甲醇中 ,保存于紧密之棕色瓶内 ,可永久保存 ,且时间愈…     

细胞学涂片硼酸-美蓝快速染色法

硼酸 美蓝 (Ｂｏｒｉｃａｃｉｄ ｍｅｔｈｙｌ ｂｌｕｅＢＡＭＢ)染色 ,由王德尚等〔1〕 首先应用于徒手切片快速简易染色 ,继后 ,黄彩儿〔2〕用于石蜡切片幽门螺杆菌染色 ,均取得满意效果。作者将ＢＡＭＢ染色法应用于细胞学涂片染色也取得良好效果。现报道如下。1　材料和方法1.1　材料　取自宁海县第一医院和广州妇婴医院的子宫颈拭子取样涂片5 0 0例 ,每例涂片 2张 ,分别作ＢＡＭＢ染色和ＨＥ染色进行对照 ,其中阳性片5例1 .2　方法　ＢＡＭＢ染色液配制 :10 0ｍｌ蒸馏水加美蓝和硼酸各 1ｇ。涂片按常规固定后 ,置于ＢＡＭＢ染色液中约3…     

美兰染色法在阴道涂片中的应用

美兰染色法是我们在湖兰染色的基础上经过长期探索和实践改进而成。通过 1万多例应用 ,此法快速、简便、稳定、可靠 ,尤其适用于阴道涂片检查 ,现介绍如下。1　材料与方法1 1　材料　美兰 (亚甲兰 ) 1ｇ,伊红 1ｇ ,过锰酸钾 1ｇ ,85 %酒精10 0ｍｌ。1 2　配制方法　第一液 :(1)美兰 1ｇ溶于 10 0ｍｌ自来水中。(2 )过锰酸钾 1ｇ溶于 10 0ｍｌ自来水中 ,然后将 (1)液与 (2 )液分别装于烧瓶中蒸沸 ,待完全溶解后将 (2 )液倒入 (1)液中 ,混合煮沸 15分钟 ,迅速过滤即可。第二液 :伊红 1ｇ溶于 85 %酒精10 0ｍｌ。1 3　染色步骤　 (1)涂片经甲醇…     

GS组织标本制备及切片染色技术的应用体会

目的探讨GS组织标本制备及切片染色技术替代传统二甲苯透明、脱蜡制片技术的效果.方法应用GS组织标本制备及切片染色技术替代传统技术制作组织蜡块及切片染片技术.结果用此方法制作的组织蜡块,切片形成连续蜡带,制作常规HE切片,细胞核、质染色结构对比清晰结论GS组织标本制备及切片染色技术能够替代传统制片技术,并符合环保要求.     

乳房外Paget病、 Bowen病皮损中细胞凋亡的观察

近年来发现细胞凋亡与肿瘤的发生、发展有密切关系。我科采用原位特异性ＤＮＡ片断标记法 (ＴＵＮＥＬ) ,观察了乳房外Ｐａｇｅｔ病及Ｂｏｗｅｎ病皮损中的细胞凋亡情况 ,现将结果报告如下。方法与结果组织标本　收集我科门诊 1996～ 1997年组织蜡块 10例 ,其中乳房外Ｐａｇｅｔ病 5例 (阴囊 3例 ,肛周 2例 ) ,Ｂｏｗｅｎ病 5例 (阴囊 2例 ,女阴 3例 ) ,同时取 5例正常人右前臂内侧皮肤组织进行对照。组织蜡块作 4～ 5 μｍ连续切片 ,经ＨＥ染色 ,组织病理确诊。方法　切片常规脱蜡、ＰＢＳ洗 ,0 .2ｍｏｌ/ＬＨＣｌ消化 10分钟 ,ＰＢＳ洗 ,1…     

改良一步法从甲醛固定-石蜡包埋组织中提取RNA

作者利用自行改良的一步法(异硫氰酸胍方法),从甲醛固定石蜡包埋组织提取ＲＮＡ并获得成功,现报道如下。一、材料与方法1组织材料及细胞:35例胆囊组织石蜡包埋标本在手术中切下后常规10%甲醛固定2～10ｈ,石蜡包埋。标本在常温下已保存1～7年。ＫＢＶ1细胞株是人类Ｈｅｌａ细胞的子代细胞。从ＫＢＶ1细胞抽提的ＲＮＡ用作逆转录聚合酶链式反应(ＲＴＰＣＲ)实验的对照组。2.从石蜡包埋组织中分离ＲＮＡ:实验过程从一步法[1]中改良得来。根据蜡块中组织块的大小取40～100μｍ组织切片。经脱蜡、离心和梯度乙醇清洗后获取组织。组织干燥后加入0.…     

ABX MICROS60 全自动血球分析仪的实验性能评价

根据美国临床实验室标准化委员会(ＮＣＣＬＬＳ)的有关文件的规定 ,并针对临床血球分析的特点 ,选用ＷＢＣＲＢＣＨＧＢＰＬＴ四个测试项目 ,对本院新引进的ＭＩ ＣＲＯＳ6 0全自动血球分析仪进行性能评价 ,其情况如下 :1　材料和方法1.1.1仪器　法国产ＡＢＸＭＩＣＲＯＳ6 0全自动血球分析仪。1.1.2　试剂　溶血素选用南昌百特生物高新技术有限公司 ,批号为0 2 0 6 2 1;清洗液选用兰桥医学科技有限公司 ,批号为 0 2 110 ;稀释液选用宝利泰医疗电子有限公司 ,批号为 0 2 0 70 8;抗凝剂为自配制 2 0 %ＥＤＴＡ - 2Ｋ ,严格按试剂说明书进行操…     

不同复染剂对肺结核痰厚涂片结果评价

有文献记载抗酸染色可用孔雀绿染色法[1] ,检验抗酸杆菌。为此 ,我们分别用美兰和孔雀绿做复染剂 ,对痰涂片的结果进行了分析和比较 ,其方法介绍如下。1标本来源和涂片方法1.1　标本来源　门诊治疗的肺结核病人痰标本 10 5份。1.2　涂片方法　每份标本同时涂两张片 ,一次性取 0 .2ｍｌ干酪性和脓性血痰 ,反复分别涂两张 2 0ｍｍ× 2 5ｍｍ卵圆形痰片 ,每片涂 0 .1ｍｌ痰量为宜 ,尽量涂匀 ,减少标本间差异 ,自然干凉后 ,火焰固定 ,染色。2　试剂配制和染色方法2 .1　试剂配制2 .1.1　美兰染色法[2 ] 　 (1)染色剂— 5 %石碳酸复红液 :取碱性…     

P-糖蛋白在食管癌中的表达

肿瘤对抗癌药物产生耐药性是化疗失败的主要原因之一。近年来,对肿瘤多耐药基因(ＭＤＲ)的研究使人们对肿瘤的耐药性有了新的认识,Ｐ-糖蛋白作为ＭＤＲ基因的蛋白产物已被人们所认可。为了解食管癌组织中Ｐ-糖蛋白表达水平及其与肿瘤分化及浸润深度的关系,我们进行了有关研究。1　材料和方法1.1　材料　31例食管癌均为我院外科手术切除之标本,经常规10%福尔马林固定,石蜡切片,ＨＥ染色,光镜诊断为食管鳞癌。1.2　方法　Ｐ-糖蛋白(ＪＳＢ1)为美国Ｍａｘｉｎ公司产品,Ｓ-Ｐ试剂盒购自福州迈新公司。切片厚4μｍ,染色步骤如下:(1)石蜡切片常规…     

乐山市2625例高考体检ALT、HBsAg结果分析

1999年～ 2 0 0 2年间 ,我科对乐山市区参加全国高考的考生 2 62 5例进行了ＡＬＴ、ＨＢｓＡｇ检查 ,现将结果报告如下。1　材料与方法1 1　标本来源　乐山市区 1999年～ 2 0 0 2年参加高考的考生共 2 62 5人。1 2　方法　ＡＬＴ检测采用日本和光 (ＷＡＫＯ)原装试剂 ,用双波长连续监测法在ＯＬＹＭＰＵＳＡＳＵ5 60全自动生化分析仪上进行测定 ,校准物采用ＲＡＮＤＯＸ定值质控血清。1 3　ＨＢｓＡｇ检测采用深圳月亮湾酶标试剂 ,用ＢＩＯ ＲＡＤ酶标仪进行检测。2　结果与讨论ＡＬＴ >4 0ｕ/Ｌ :1999年占 13 8% ;2 0 0 0年占 14 1% ;2 0 0…     

肝外胆管癌组织中HBV DNA的检测及意义

1　材料和方法1 1　材料　 5 1例肝外胆管癌 (血清ＨＢｓＡｇ阳性率 3 9% )来自解放军总医院 ,常规石蜡包埋。引物 :5′ＧＣＣＴＴＧＧＧＴ ＧＧＣＴＴＧＧＧＧＣ3′ ,5′ＣＣＴＧＡＧＴＧＣＴＧＴＡＴＧＧＴＧＡ 3′。探针 :5′ＧＡＧＡＴＣＴＣＣＴＴＧＡＣＡＣＣＧＣＣＴＣＴＧＣ 3′,生物素标记 ,上海生物工程公司合成并标记。Ｓ Ａ/ＨＲＰ购自中山生物技术有限公司。原位ＰＣＲ扩增仪为美国ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ公司产品 :ＧｅｎｅＡｍｐＳｙｓｔｅｍ 10 0 0。1 2　方法　切片脱蜡 ,蛋白酶Ｋ消化 ,加扩增反应液每片5 0 μｌ(Ｍｇ2 2…     

美兰染色法在马拉色菌检测中的应用

目的　评价美兰染色和派克墨水染色在马拉色菌检测中的应用。方法　应用美兰染液、派克墨水染液对花斑癣、马拉色菌毛囊炎、头皮屑三种疾病临床标本进行检测 ,比较两种方法的染色效果、检出阳性率。并应用上述两种染色法对马拉色菌和念珠菌染色 ,比较它们对马拉色菌染色的特异性。结果　美兰染液将孢子或菌丝染为深蓝色 ,派克墨水染液将孢子或菌丝染为浅蓝色 ,两种染色法与背景区分均较明显。美兰染色和派克墨水染色对三种疾病中马拉色菌的检出阳性率分别为 96 %和 94 % ,两种方法对马拉色菌的检出阳性率无显著性差异 (P>0 .0 5 )。美兰对马拉色菌和念珠菌均能染色 ,派克墨水对马拉色菌能染色 ,对念珠菌不能染色 ,具有一定特异性。结论　两种染色方法均可用于马拉色菌的临床检测 ,但派克墨水染色法更具特异性     

快速冰冻切片染色的一种新方法

缩短冰冻切片及染色时间 ,提高冰冻切片质量 ,是病理医师进行准确诊断的重要环节 ,也是临床医师及时决定治疗方案的关键所在。为此 ,我们在工作实践中逐步摸索出一种更快速、更简便的冰冻切片及染色方法。这种方法是以 - 2 5℃直接冰冻切片标本 ,用苏木素、伊红的混合液染片 ,使整个冰冻制片过程仅在 1～2分钟内完成 ,染色效果鲜艳且稳定。1　材料及方法1.1　材料　进口或国产冰冻切片机。染液配制 :1固定液 :5 5 %乙醇 85 ml,4 0 %甲醛 10 ml,冰醋酸 10 m l。2苏木精∶伊红混合染液。复制伊红一份 ,Herry苏木精3～ 8份混合即可使用。1.2　…     

眼球的HE整体染色石蜡包埋切片法

眼球切片标本的制作 ,传统方法是用火棉胶包埋切片染色法 ,石蜡包埋切片染色法也有许多报道 ,把ＨＥ块染色法[1 ] 应用于全眼球染色 ,用石蜡包埋切片 ,并进行了改进。结果 ;眼球各部结构染色层次清楚。经反复试验 ,效果良好 ,适合大量制作切片标本 ,方法如下。1　材料与方法1 .1　取材与固定处死动物 ,速取其眼球立即投入ＡＧＦＤ眼球固定液 (丙酮 1 0 0ｍＬ、冰醋酸 4ｍＬ、福尔马林 8ｍＬ、蒸馏水 6ｍＬ) ,1Ｗ后 ,将原液倒出一半 ,再加等量丙酮固定 5ｄ。1 .2　固定后处理将眼球从固定液中取出快速按视神经乳头的平行方向从上、下两侧对称…     

CTB染色法与生理盐水法对白带中滴虫、念珠菌检测的比较

妇科白带涂片多项检查的快速染色法 (简称ＣＴＢ)技术是根据白带病原体具体不同的形态特点 ,采用有多种功能的染液作染色检查的一种实用性较强的形态学检验新技术。此染色液染色白带涂片 ,可在一张涂片中同时作滴虫、念珠菌、纤毛菌、淋球菌、加特纳杆菌、核异质细胞、Ｃａ细胞等 7项检查。我院用ＣＴＢ法和生理盐水法对临床上较常见的滴虫、念珠菌检查进行比较 ,其结果如下 :1　材料与方法1 1　材料　 2 0 8例白带标本选自我院门诊妇科病人。ＣＴＢ试剂由湖南省株洲千金药业股份有限公司提供 ,试剂号 990 816。1 2　方法　每 1份标本同时制…     

血细胞微波快速Wright-Giemsa染色

白细胞分类计数是临床血液常规检测项目之一 ,传统的显微镜检查能够辨认各种血细胞形态 ,仍是必不可少的检查方法 ,但由于染色时间较长 ,工作效率明显偏低。本文应用微波技术快速Ｗｒｉｇｈｔ Ｇｉｅｍｓａ染色 ,并与常规染色法比较 ,具有简单、快速、染色清晰等优点 ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　标本来源 :随机采取贫血患者血片和骨髓涂片各 10例。1.2　Ｗｒｉｇｈｔ Ｇｉｅｍｓａ染色液 :Ｗｒｉｇｈｔ色素 0 .5 ｇ ,Ｇｉｅｍｓａ色素 0 .5 ｇ ,甲醇 5 0 0ｍｌ,配成混合染液。1.3　微波炉 :ＬＧＷＰ 80 0Ｗ ,使用方法参考ＬＧ微波炉使…     

血涂片检查纠正细胞仪计数误差

1　临床资料病例 ,女 ,2 2岁。低热、头晕、鼻出血 ,来院诊治。日本东亚Ｋ - 10 0 0血细胞仪分析。结果 :ＷＢＣ :2 0 .1×10 9 Ｌ ,ＲＢＣ :4 .14× 10 12 Ｌ ,ＨＧＢ 10 0ｇ Ｌ ,ＨＣＴ 0 .357、ＭＣＶ86 .2 8ｆＬ ,ＭＣＨ 2 4 .2Ｐｇ ,ＭＣＨ -Ｃ 2 80ｇ Ｌ ,ＭＣＨＣ 50× 10ｇ Ｌ。因白细胞拒绝分类 ,并提示聚集 (ＷＬ) ,血小板出现(ＰＵ)上识别点错误 ,ＰＤＷ、ＭＰＵ、Ｐ -ＬＣＲ均未测出 ,故推血片镜检 ,发现片中幼稚粒细胞及巨大血小板数较多 ,巨大血小板均呈单个散在 ,且粒细胞数与细胞仪计数结果悬殊较大 ,重抽病人末稍血手工复…