Fas、FasL和Bcl-2在膀胱癌组织的表达及意义

目的　研究Fas蛋白 (CD95 /Apol 1,Fas)、Fas配体 (Fasligand ,FasL)及Bcl 2在膀胱癌组织中的表达 ,并探讨其临床意义。方法　采用免疫组化LSAB法检测 5 0例膀胱癌组织及 6例正常膀胱黏膜中Fas、FasL和Bcl 2的表达。结果　Fas、FasL及Bcl 2在膀胱癌组织中的阳性表达率分别为 5 0 %、38%、4 2 %。膀胱癌组织FasL和Bcl 2的阳性表达率明显高于正常组织 (P <0 .0 5 ) ,Fas明显低于正常组织 (P <0 .0 5 )。Fas的表达与膀胱癌病理分级、复发有关 (P <0 .0 5 ) ;FasL、Bcl 2表达与各项病理指标均无关 (P >0 .0 5 )。结论　Fas的表达降低与膀胱肿瘤的恶性化程度有关。     

Fas配体在膀胱肿瘤细胞系免疫逃逸中的作用

目的　探讨膀胱肿瘤细胞系的免疫逃逸机制。　方法　采用免疫细胞化学方法检测膀胱癌细胞系BIU 87中Fas配体 (FasL)的表达 ,应用BIU 87与JurkatT淋巴细胞共培养的方法体外研究FasL诱导T淋巴细胞凋亡的作用。　结果　膀胱癌细胞系BIU 87FasL表达阳性。BIU 87与JurkatT淋巴细胞共培养T细胞凋亡率为 (33.2± 6 .5 ) % ,应用抗体NOK 2中和BIU 87细胞FasL后 ,T细胞凋亡率减少为 (10 .1± 2 .7) % ,两组相比 ,差别有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　膀胱肿瘤细胞系可能通过表达FasL主动诱导T淋巴细胞凋亡从而在膀胱肿瘤的免疫逃逸中发挥作用     

抗人膀胱癌/抗血管内皮生长因子双功能基因抗体对膀胱癌的生长抑制作用

目的　对抗人膀胱癌 /抗血管内皮生长因子 (VEGF)双功能基因抗体进行免疫定位研究并观察其对人膀胱癌生长的抑制作用。　方法　采用免疫组化和免疫电镜前染色法对 6 0例膀胱癌患者的手术切除标本进行免疫定位研究 ;构建人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤模型并注射双功能抗体 ,观察肿瘤生长情况 ,同时检测肿瘤微血管密度 (MVD)值及肿瘤细胞凋亡指数 (AI)。　结果　 6 0例膀胱癌标本 ,抗原检测阳性 5 3例 ( 88.3% ) ;对照组 2 0例 ,抗原检测阳性 1例 ( 5 .0 % )。治疗后第 2周 ,实验组小鼠皮下种植肿瘤大小 ( 2 1.4 7± 6 .5 7)mm2 ,对照组 ( 5 9.85± 15 .4 3)mm2 ;实验组MVD 2 14 8± 10 9,对照组为 4 0 5 6± 36 7;实验组肿瘤细胞AI为 17.2 6 ,对照组为 7.0 9。组间比较 ,差异均有显著性意义。　结论　抗人膀胱癌 /抗VEGF双功能基因抗体对人膀胱癌有较好的靶向性 ,能够通过抑制肿瘤微血管形成和加速肿瘤细胞凋亡而抑制实验性人膀胱癌的生长     

低剂量丝裂霉素C诱导膀胱癌细胞凋亡分子机制的研究

目的　探讨低剂量丝裂霉素C(MMC)诱导膀胱癌EJ细胞凋亡的分子机制。方法　采用细胞增殖动力学和细胞形态学观察低剂量MMC对EJ细胞死亡和增殖的影响 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法检测增殖 ,脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)法检测凋亡细胞 ,流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期 ,免疫组织化学观察Fas、FasL、半胱氨酸特异性蛋白酶 (Cas pase) 3蛋白表达。 结果　EJ细胞增殖抑制率为 67.18%。凋亡率为 (69.40± 0 .80 ) % (P <0 .0 5 )。G0 /G1期出现凋亡峰。Fas、Caspase 3蛋白上调表达 ,分别为 (65 .49± 6.2 8) %、(63 .5 6± 5 .0 5 ) %(P均 <0 .0 5 )。Fas与FasL的表达具有相关性 (r =0 .871,P <0 .0 5 )。结论　MMC诱导EJ细胞凋亡的分子机制可能与上调细胞表面的Fas表达 ,启动Caspase凋亡信号传导 ,促进细胞凋亡有关。     

可溶性Fas阻断肝癌细胞通过Fas/FasL 途径触发T淋巴细胞的凋亡

目的　通过阻断Fas介导T细胞凋亡 ,建立快速大量激活制备肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的方法。方法　分离肝癌细胞和肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)。选择FasL表达阳性的肝癌标本 ,在体外将两者混合 ,并在CD2 8单抗共刺激下 ,激活制备特异性CTL。应用可溶性Fas受体阻断肝癌细胞通过Fas FasL途径触发激活T细胞凋亡 ,与对照组比较观察阻断凋亡作用 ,通过3H掺入法和51 Cr释放法了解T细胞增殖杀伤活性。结果　流式细胞术仪检测未阻断组较阻断组和未阻断对照组凋亡率明显升高 ,未阻断组凋亡率达 4 7 82 %± 0 13% ,静息性T淋巴细胞组为 3 76 %± 0 2 5 % ,阻断组为 8 2 2 %± 0 2 6 % (P <0 0 1) ,DNAladder显示未阻断组T淋巴细胞出现明显梯状条带 ,阻断组为阴性。51 Cr释放法表明阻断后T淋巴细胞杀伤活性增加 ,较未阻断组及未阻断对照组差异有显著性 (P<0 0 1)。3H掺入法检测证实可溶性Fas受体阻断激活T细胞凋亡后 ,细胞增殖明显升高 ,较未阻断组差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　体外实验可获得大量激活T细胞 ,并可杀伤肿瘤细胞 ,     

环孢素对大鼠膀胱肿瘤细胞增殖、凋亡和新生血管形成的影响

目的 探讨环孢素对N-丁基-N-(4-羟丁基)亚硝胺(BBN)诱导的大鼠膀胱肿瘤细胞增殖、凋亡及肿瘤新生血管形成的影响.方法实验组大鼠10只在用BBN诱导膀胱肿瘤的同时用环孢素进行药物干预,对照组大鼠10只仅用BBN诱导膀胱肿瘤.取2组大鼠膀胱标本免疫组化方法检测肿瘤增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况,计算肿瘤细胞增殖指数;TUNEL方法检测肿瘤细胞凋亡情况,计算肿瘤细胞凋亡指数;免疫组化方法检测肿瘤CD31表达情况,计算肿瘤微血管密度(MVD).结果 实验组和对照组肿瘤细胞增殖指数分别为(35.3±8.6)%和(28.7±8.0)%,P＜0.05;凋亡指数分别为(2.5±0.8)%和(4.3±1.3)%,P＜0.05;微血管密度分别为32.5±8.2和26.3±8.1,P＜0.05.结论 环孢素可能通过影响肿瘤细胞增殖、凋亡和肿瘤新生血管形成等机制对膀胱肿瘤生长产生促进作用.     

血管形成抑制剂TNP-470对膀胱癌抑制作用的实验研究

目的　探讨血管形成抑制剂烟曲霉菌衍生物TNP 470抑制膀胱癌生长的作用机制。　方法　采用TNP 470 (6 0mg/kg)皮下注射治疗T739膀胱癌荷瘤鼠 ,观察肿瘤生长情况。 17天后杀鼠 ,观察TNP 470对肿瘤微血管密度 (MVD) ,肿瘤细胞凋亡指数及增生指数的影响。　结果　TNP 470治疗组肿瘤生长明显缓慢 ,肿瘤抑制率为 46 3 %。组织学检查显示 ,治疗组与对照组相比 ,MVD明显减少 (P <0 0 1) ,肿瘤细胞凋亡指数明显增加 (P <0 0 1) ,增生指数无明显变化 (P >0 0 5 )。　结论　TNP 470对膀胱癌生长有明显的抑制作用 ,其机理可能为抑制肿瘤血管形成 ,引起肿瘤组织缺血 ,从而导致肿瘤细胞凋亡增加     

中药对小鼠前列腺细胞增殖及凋亡的影响

目的　探讨中药方剂 (生牡蛎 30g,地龙 30g ,生黄芪 30g ,皂刺 9g,丹参 30g,川牛膝 9g,海藻 15g ,虎杖 2 0g,王不留行 15g ,当归尾 15g ,蒲公英 15g ,穿山甲 2 0g)对小鼠前列腺细胞增殖及凋亡的影响。　方法　体重 30～ 4 0g雄性昆明种小鼠 12 0只 ,随机分为 5组 :①正常对照组 ,②增生组 ,③阴性对照组 ,④中药方剂组 ,⑤非那雄胺 (保列治 )阳性对照组 ;每组 2 4只。正常对照组小鼠直接处死取前列腺观察湿重 ,对其余小鼠采用尿生殖窦植入方法建立小鼠良性前列腺增生 (BPH)模型 ,增生组小鼠于第 6 1天处死取前列腺观察湿重 ;其他组小鼠分别于第 6 1天开始喂生理盐水、中药方剂及保列治 ,于第 91天处死取前列腺观察湿重 ,应用流式细胞术 (FCM)检测 3组前列腺细胞增殖率及凋亡率的变化。　结果　增生组前列腺重量为 (14 9.30± 8.6 4 )mg ,中药方剂组为 (85 .6 0± 17.97)mg,两组相比差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。增生组前列腺细胞凋亡率为 (3.6 6± 0 .73) % ,增殖率为 (2 6 .0 5± 3.0 2 ) % ;中药方剂组凋亡率为 (6 .6 7± 1.91) % ,增殖率为 (2 6 .2 8± 2 .84 ) % ;保列治组凋亡率为 (6 .2 6± 2 .4 2 ) % ,增殖率为 (2 6 .2 9± 4 .0 7) %。中药方剂组前列腺细胞凋亡率较增生组明显升高 (P <0 .0     

大鼠移植胰腺冷缺血再灌注后细胞凋亡及其调控基因的研究

目的探讨胰腺移植再灌注后胰腺细胞凋亡发生的过程,以及Bax、Bcl2及Fas等调控基因的表达。方法65只SD大鼠随机分成7组假手术组,冷缺血2h组,冷缺血2h再灌注1、3、6、9、12h组。电镜观察胰腺组织的病理变化;采用缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞;采用免疫组织化学方法检测胰腺组织中Bax、Bcl2及Fas蛋白的表达。结果胰腺移植后早期即可观察到细胞凋亡,凋亡的高峰期为再灌注后3h,凋亡指数(AI)为(95±29)%,P<001,再灌注6h组细胞凋亡有所减少,AI为(57±17)%,P<001,再灌注9h及12h组,AI分别为(36±16)%及(33±14)%,P<005。假手术组与冷缺血2h组均未见Bax、Fax蛋白表达。冷缺血再灌注1h组Bax( )、Fas( ),未见Bcl2蛋白表达;至冷缺血再灌注3h组Bax及Fas表达均增强,分别为Bax( )、Fas( ),以后各组表达有所下降。Bcl2蛋白在假手术组、冷缺血2h组及冷缺血再灌注1h组均未见表达,冷缺血再灌注3h及以后各组表达为( )。结论细胞凋亡是胰腺移植后的早期事件,Bax、Fas基因可能促进了胰腺细胞的凋亡,而Bcl2基因可能抑制细胞凋亡。     

反义寡核苷酸抑制Survivin基因表达对PC-3的体外作用

目的　观察Survivin反义寡核苷酸 (ASODN)PC 3细胞表达Survivin蛋白、细胞凋亡、增殖的影响。方法　设计并合成特异性靶向Survivin的ASODN。PC 3分为 6组 :空白对照组、脂质体转染对照组、正义链转染对照组、2 0 0、40 0和 60 0nmol/LASODN转染组。作用 2 4h后收获各组细胞。观察细胞形态变化及超微结构变化 ,免疫组织化学法和流式细胞术法检测各组细胞Sur vivin表达情况 ,流式细胞术检测各组细胞增殖指数 (AI)和凋亡指数 (PI) ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法检测ASODN对细胞的生长抑制率。结果　电镜下可见到典型凋亡样改变 ;各ASODN转染组细胞Survivin表达有不同程度减弱 ;2 0 0、40 0和 60 0nmol/LASODN转染组AI和PI分别为 (8.5 0±0 .79) % ,(13 .78± 0 .5 6) % ,(2 1.3 1± 1.67) %和 (3 7.80± 1.72 ) % ,(2 5 .10± 2 .18) % ,(19.90±0 .97) % ,分别与对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而AI和PI在各对照组间差异无显著性(P >0 .0 5 )。转染后第 3天 2 0 0、40 0和 60 0nmol/LASODN组相对于空白对照组的抑制率分别为60 .0 %、66.0 %、78.6%。结论　SurvivinASODN转染后能下调Survivin蛋白表达 ,诱导PC 3细胞凋亡 ,抑制PC 3细胞增殖。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

深圳市某两所小学流行性腮腺炎突发疫情的流行病学分析

目的：通过对深圳市某两所小学发生的流行性腮腺炎突发疫情的流行病学特点及差异性进行分析,为制定科学、高效的防控策略提供科学依据。方法2013年5～7月深圳市大鹏新区某两所小学爆发流行性腮腺炎,以学校为整体研究对象,分别标记为学校A（24个班,学生1210例）和学校B（27个班,学生1274例）,对比两所小学的疫情流行病学差异性。结果分析发现,学校A流行性腮腺炎发病率为4.30%,发病班级所占比54.17%,均较学校B1.73%和29.63%高,对比差异有统计学意义（P＜0.05）;分析显示学校A学生出现疫病平均年龄为（11.2±1.1）岁,较学校B（9.34±1.0）岁,对比差异明显（P＜0.05）;且两组疫病患儿在接种疫苗率对比上差异无统计学意义（P＞0.05）;但疫情发生时,学校B疫苗紧急接种率明显高于学校A,对比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论小学作为流行性腮腺炎爆发的主要场所之一,疫病爆发高峰季节前,针对易感染人群给予相应的疫苗接种等预防控制措施,同时加强流行性腮腺炎的监测,对于降低感染人群数量,减轻、遏制疫情有着积极的意义,值得相关防控部门重视。     

Frequency of complications of manipulation of the spine

Summary A survey of all members of the Swiss Medical Association of Manual Medicine was undertaken for the year 1989. Informative data were given by 425 respondents on the frequency of complications of manipulation as related to the spine. The number of thoraco-lumbar manipulations during 1989 (225 working days) was 805 for each respondent, and the number manipulations of the cervical spine 354. Thus, the total number of thoraco-lumbar manipulations was 342 125, and the total number of cervical manipulations was 150 450. The overall incidence of side-effects of transient complications due to cervical spine manipulation such as disturbance of consciousness or radicular signs was 1: 16716. Seventeen patients (ratio 1: 20 125) after manipulation of the lumbar spine presented, in addition to increased pain, a transient sensorimotor deficit with precise radicular distribution. Nine of the 17 patients (ratio 1: 38013) developed a progressive radicular syndrome with sensorimotor defict and radiologically verified disc herniation and had to be referred for surgery. Side effects and complications of cervical and lumbar spine manipulation are rare. Taking in to account the yearly number of manipulations performed by a single physician in Switzerland and the rate of complications, it can be calculated that a physician practicing manual medicine will encoutner one complication due to manipulation of the cervical spine in 47 years and one complication due to lumbar spine manipulation in 38 years of practice. However, it is important that a careful clinical assessment is carried out to avoid complications due to manipulation carried out on the basis of inappropriate indications. Furthermore, the decision as to which technique is indicated for any particular functional disorder of the spine should be made on the basis of rational criteria resting on a knowledge of clinical biomechanics, functional anatomy and neurophysiology. The authors recommend a prospective morbidity study to be carried out among physicians, chiropractors, osteopaths and physiotherapists, taking into account the different indications and therapeutic techniques in relation to complications.     

骨盆骨折的治疗进展

对于骨盆骨折的治疗 ,传统方法以卧硬板床 ,股骨髁上持续骨牵引 ,骨盆兜等保守治疗为主 ,常常引起下肢不等长 ,骶髋痛 ,步态失常等而严重影响生活质量 ,同时长期卧床易引发肺部感染、褥疮、应激性溃疡、泌尿系统结石等并发症而危及生命。下面就骨盆骨折的治疗进展作一综述。1     

Oddi括约肌肌电活动实验模型的建立

目的建立研究Oddi括约肌肌电活动的动物模型和实验方法。方法将双极金属钩状电极通过浆膜层置入Oddi括约肌，记录不同条件干预下家兔的Oddi括约肌肌电活动信号，调整电生理实验参数并经放大、滤波及计算机处理后，对其大小、波形、幅度进行分析。结果不同条件干预下的家兔Oddi括约肌的肌电活动在波形、频率、幅度等方面均有明显的不同，具有明显的规律性。重复实验可得到相似的结果。结论使用双极金属钩状电极配以合理的电生理实验参数调整可以稳定地采集到在体的家兔Oddi括约肌肌电活动信号。这为今后广泛、深入地研究Oddi括约肌肌电活动搭建了一个技术平台。     

Pathogenesis of carcinoma of the papilla of Vater

Most adenomas and carcinomas of the small intestine and extrahepatic bile ducts arise in the region of the papilla of Vater. In familial adenomatous polyposis (FAP) it is the main location for carcinomas after proctocolectomy. In many cases symptoms due to stenosis lead to diagnosis at an early tumor stage. In about 80%, curative intended resection is possible. Operability is the most relevant prognostic factor. Most ampullary carcinomas resp. carcinomas of the papilla of Vater develop from adenomatous or flat dysplastic precursor lesions. They can be sited in the ampulloduodenal part of the papilla of Vater, which is lined by intestinal mucosa. They also can develop in deeper parts of the ampulla, which are lined by pancreaticobiliary duct mucosa. Intestinal-type adenocarcinoma and pancreaticobiliary-type adenocarcinoma represent the main histological types of ampullary carcinoma. Furthermore, there exist unusual types and undifferentiated carcinomas. Many carcinomas of intestinal type express the immunohistochemical marker profile of intestinal mucosa (keratin 7–, keratin 20+, MUC2+). Carcinomas of pancreaticobiliary type usually show the immunohistochemical profile of pancreaticobiliary duct mucosa (keratin 7+, keratin 20–, MUC2–). Even poorly differentiated carcinomas, as well as unusual histological types, may conserve the marker profile of the mucosa they developed from. These findings underline the concept of histogenetically different carcinomas of the papilla of Vater which develop either from intestinal- or from pancreaticobiliary-type mucosa of the papilla of Vater. Molecular alterations in ampullary carcinomas are similar to those of colorectal as well as pancreatic carcinomas, although they appear at different frequencies. In future studies, molecular alterations in ampullary carcinomas should be correlated closely with the different histologic tumor types. Consequently, the histologic classification should reflect the histogenesis of ampullary tumors from the two different types of papillary mucosa.     

主动脉窦瘤破裂外科治疗的临床研究

目的　探讨主动脉窦瘤破裂局部病理改变及其合并主动脉瓣关闭不全的手术方法。方法　 3 6例主动脉窦瘤破裂 (RASV)合并主动脉瓣关闭不全 (AI) 15例、室间隔缺损 (VSD) 2 6例。补片修补 3 5例 ,其中合并VSD的均以一片法修补 ,合并AI的主动脉瓣置换 (AVR) 6例 ,主动脉瓣成形 4例。手术取材作病理检查 5例。结果　本组 3 6例中手术死亡 2例 ( 5 .6% )。存活的 3 4例病人均经门诊复查或通信随访 0 .3～ 18年 ,其中 2例死亡。病理检查见RASV合并VSD的瘤壁为纤维素样坏死或玻璃样变性。结论　主动脉窦壁纤维素样或玻璃样变性可能是其形成的病理基础。合并主动脉瓣关闭不全时应探查其病变程度 ,酌情一期矫正 ,瓣膜损伤明显时宜行主动脉瓣置换 ,对主动脉瓣环细小的病例 ,可借修补VSD和RASV的补片扩大主动脉瓣环。     

鼻尖、鼻翼缺损修复方法的探讨

１９５７年以来共收治鼻尖、鼻翼缺损１１９例，据情分别采用以下四种方法修复：①全层皮片移植２７例；②游离耳廓复合组织片移植３６例；③鼻唇沟皮瓣移转１２例；④上臂内侧皮管移植４４例，效果较为满意。我们在文章中就选用的原则、手术方法及注意事项等进行了探讨     

食管穿孔83例分析

８３例不同原因引起的食管穿孔，保守治疗５７例；手术２６例，行单纯食管修补术２０例、开胸行纵隔和／或胸腔引流２例、切除贲门肿物行胃食管吻合１例、颈部食管外置２例（其中１例并行二期结肠代食管手术）、１例开胸取异物形成食管瘘后，行二期修补瘘术。全组死亡８例，其中死于纵隔胸腔感染和主动脉破裂出血各４例。总治愈率８５％。并指出异物假牙造成食管穿孔的重要性，对严重的腐蚀性食管灼伤应早期行食管镜检，并针对食管穿孔部位、种类、间隔期、纵隔与胸腔的感染程度及病人具体情况采取相应的治疗措施。     

手部深度烧伤的临床治疗分析

目的 总结手部深度烧伤的临床治疗经验. 方法 46例54只深度烧伤手,其中深Ⅱ度烧伤30例33只手,Ⅲ度烧伤16例21只手.根据伤情不同,早期选择不同手术方式修复创面,术后早期进行功能锻炼. 结果 54只手的修复方式:中厚皮片移植33只手,异体脱细胞真皮与自体薄皮片复合移植12只手,腹部带蒂皮瓣1只手,前臂骨问背动脉逆行皮瓣3只手,股前外侧皮瓣5只手.治疗后,51只手移植皮片、皮瓣均成活,仅3只手移植皮片后有局灶性坏死,创面得到有效覆盖.按关节活动范围( range of motion,ROM)评定,本组优31只手(57.4％),良17只手(31.5％),中4只手(7.4％),差2只手(3.7％). 结论 手部深度烧伤后,选择合适术式,早期手术修复创面及功能锻炼,可取得很好的疗效.