自身免疫性内耳病的诊治

自身免疫性内耳病（autoimmune inner ear disease，AIED）是一种免疫介导的累及耳蜗和前庭的罕见疾病，现就我院1995年以来确诊的7例AIED进行分析，并复习1979年后有关文献，以提高对AIED的认识。     

突发性聋与免疫炎性反应的相关性研究进展

虽然当前尚未清楚地明确突发性聋的发病机制,但是基于相关研究和临床实践的深入,可以认为突发性聋的发病可能与多种因素存在关联性。本文从免疫应答与内耳的损伤、淋巴免疫机制与内耳疾病、细胞炎性因子与内耳损伤、糖皮质激素在内耳免疫性疾病中的作用几个方面就突发性聋与免疫炎性反应的相关性研究进展展开论述。     

特异性体液转移免疫致豚鼠先天性感音神经性聋实验研究

目的：探讨并证实孕豚鼠针对内耳组织抗原特异性抗体是否可以通过胎盘进而造成其子鼠自身免疫性先天性感音神经性聋。方法：采用同种粗制内耳抗原免疫豚鼠,造成自身免疫性感音神经性聋（ASNHL）动物模型[ELISA法测定示血清抗体水平升高和耳蜗电图（EcochG）示听神经复合动作电位和（或）耳蜗微音器电位阈值或伪闽升高],取其血清（含特异性抗内耳组织抗原的抗体）持续转移免疫妊娠豚鼠,采用EcochG测试被动免疫妊娠母鼠和子鼠的听觉功能,再采用颞骨火棉胶切片和HE染色,光镜观察内耳组织形态学改变。结果：各组出现听觉损伤的动物情况是：采用ASNHL模型动物血清被动免疫的8只妊娠母鼠中有5只（7耳）和其所产子鼠8只中有6只（10耳）、采用非ASNHL模型动物血清免疫的妊娠豚鼠所产子鼠5只中有1只（2耳）。出现听损的被动免疫母鼠和子鼠内耳病理形态学改变主要为螺旋神经节细胞变性和Rosenthal管中炎症细胞（以单个核细胞为主）浸润,部分动物出现膜迷路积水。结论：同种体液转移免疫可造成自身免疫性内耳病变：子鼠产生听觉功能障碍主要是由于母鼠所产生的特异性抗内耳组织抗原抗体经胎盘到达子鼠体内所致。     

自身免疫性内耳病发病机制的研究现状

<正>内耳由于存在血迷路屏障、缺乏淋巴管,外淋巴液中免疫球蛋白含量仅为血清的1/1000,所以内耳曾被认为是免疫豁免器官.1958年Lehnhardt首先针对特发性突聋提出免疫反应的病因学说.1979年McCabe基于对1例乳突根治术后进行性感音神经性耳聋患者的病理研究和全身类固醇治疗使听力提高这一现象,首次提出自身免疫性感音神经性耳聋的概念.以后的研究发现自身免疫性损害不仅可累及耳蜗,也可累及前庭,故McCabe又称之为自身免疫性内耳病(autoimmune innerear disease,AIED).后来发现其损害还可累及第八对颅神经.AIED是以进行性、波动性、双耳或单耳感音神经性聋为特点,可伴有耳鸣、眩晕、病程为数周、数月或数年,听力检查结果为耳蜗性,蜗后性或混合性聋.随着内耳免疫学的发展,为进一步探讨某些不明原因的内耳病,特别是自身免疫性内耳病的发病机制开辟了新的途径,并为AIED的治疗提供理论依据.本文就有关自身免疫性内耳病发病机制的研究现状进行综述:     

自身免疫性内耳疾病探讨

晚近对内耳免疫的了解日益增进,并倡立了“免疫性内耳疾病”的学说.但因研究尚欠深入,检测手段亦嫌不足,对自身免疫性内耳疾病(简称AIED)的发生、发展、诊断和治疗等方面的认识犹未完臻.笔者通过对拟诊为AIED的11例分析,作如下探讨.     

免疫转印法检测突聋及梅尼埃病患者血清中抗内耳组织自身抗体

应用免疫转印法检测了15例突聋患者及8例梅尼埃病患者血清中抗内耳组织自身抗体，发现4例突聋患者（4／15）、2例梅尼埃病患者（2／8）血清中存在抗内耳自身抗体，说明自身免疫因素（体液免疫）在部分突聋及梅尼埃病患者的发病机制中起一定的作用。     

自身免疫病合并耳聋的患者相关抗体的研究

目的:探讨检测血清抗内耳组织抗体及抗人Ⅱ型胶原抗体对自身免疫病感音神经性聋的临床意义。方法:选取49例自身免疫病住院患者分为耳聋组(A组)和非耳聋组(B组),同期20例健康志愿者为对照组(C组)。间接免疫荧光法检测血清抗内耳组织抗体,ELISA法检测血清抗人Ⅱ型胶原抗体水平。比较各组临床特征及两种自身抗体检测的结果。结果:A组20例(32耳)占免疫病组患者的40.8%(患耳占32.6%)。血清抗内耳组织抗体IgM、IgG阳性率:A组与B组比较无统计学差异(P>0.05),IgM A组B组均高于C组(0%)(P<0.01),IgG A组B组较C组增高,无统计学意义(P>0.05)。血清抗人Ⅱ型胶原抗体水平A组显著高于B组(P<0.01),且均高于C组(P<0.01)。结论:自身免疫病患者中血清抗内耳组织抗体对感音神经性聋的发生无提示意义,血清抗人Ⅱ型胶原抗体水平增高有临床意义。     

自身免疫性内耳病患者血清Ig、C_3与抗内耳组织抗体的关系

为了对自身免疫性内耳病（ＡＩＥＤ）进行深入的研究，按照Ｍｃｃａｂｅ诊断标准筛选出ＡＩＥＤ患者３２例，男１２例，女２０例，其中Ｍｅｎｉｅｒｅ病５例，突聋１２例，神经性聋（ＳＮＨＬ）６例，耳鸣９例，进行血清免疫学检查，同时采用豚鼠内耳组织切片，用免疫细胞化学方法（ＡＢＣ法）检测患者血清抗内耳组织相关抗体。结果显示：４种内耳病的部分患者血清Ｉｇ、Ｃ３有不同程度的升高或降低，３２例ＡＩＥＤ患者血清抗内耳组织相关抗体经ＡＢＣ染色显示２１例有明显的阳性反应，阳性率达７０％。ＡＢＣ呈色反应在耳蜗分布部位不同，…     

实验性内耳免疫损伤及免疫功能测定

正常大白鼠20只,随机分为两组。A组用天然小牛Ⅱ型胶原免疫,B组为对照组、每次间隔10天,共3次。末次免疫后10天测试动物脑干电位,处死后,做淋转及IL-2水平测定结果发现A组潜伏期和阈值较B组高。淋转结果A组反应性高于B组。A组IL-2水平高于B组。研究表明免疫功能与内耳免疫损伤有关。     

大鼠肾虚型颈椎病模型的建立

目的：采用病、证模型复合的方法建立大鼠肾亏型颈椎病动物模型。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、颈椎病模型组和肾虚型颈椎病模型组,每组10只。采用动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型复合去卵巢肾虚亏模型的方法建立肾虚型颈椎病模型。通过检测大鼠子宫及附件形态和质量、血清雌二醇（estradiol,E2）含量验证肾虚证;通过颈椎间盘组织病理学、Ⅱ型和Ⅹ型胶原的免疫组化检测及聚集蛋白聚糖（aggrecan-1,Agc1）、Ⅱ型前胶原基因（typeⅡprocolla-gen gene,Col2a1）、基质金属蛋白酶-13（matrix metalloproteinase-13,MMP-13）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TI MP-1）的基因表达情况评判椎间盘退变。结果：与正常组和颈椎病模型组相比,肾虚型颈椎病模型组动物子宫及附件形态萎缩、质量减轻,血清雌二醇含量降低,颈椎间盘组织病理学退变更加明显,Ⅱ型胶原蛋白表达减少,Ⅹ型胶原表达增高,Agc1和Col2a1基因表达降低,MMP-13基因表达增高。结论：通过病、证模型复合的方式建立了肾虚型颈椎病模型,肾虚可以加重颈椎间盘的退变。     

酶标抗体法在研究免疫性内耳病中的应用

采用豚鼠耳蜗制作抗原片，用酶标抗体法检测，筛选临床上疑为免疫性内耳病的病人血清。通过不断改进，基本上建立了具有准确、可靠、简单、重复性好等优点的检测方法。为研究免疫性内耳病提供了一种手段，为临床对免疫性内耳病的诊断、疗效评估及预后等提供了参考依据。     

人Ⅲ型前胶原的提取、纯化与抗血清的制备

本文从雷佛诺尔引产的胎儿皮肤提取、纯化Ⅱ型前胶原，经聚丙酰胺凝胶电泳证实为单一区带；经还原后得到两个亚单位：Proα_1（Ⅱ）与pα_1（Ⅱ），前者分子量为19万，后者为17万。用此抗原免疫家兔获得高效价抗血清。免疫组化可见肝硬化与慢活肝的肝组织中的胶原染为棕色。本文系首次报道从人工流产的人胎皮中提纯Ⅱ型前胶原获得成功。     

交感性迷路炎?——临床迟发性膜迷路积水的免疫因素研究

目的：探讨迟发性膜迷路积水（DEH）的临床特征及发病机制中内耳自身免疫性病理因素的作用。方法：对26例（同侧性19例,对侧性7例）DEH病人进行临床观察,听觉功能测试、非特异性和特异性免疫学试验及疗效分析。结果：导致先期耳聋的常见病因有突发性聋,脑膜炎,麻疹,乳突手术等;6例病人出现针对内耳抗原的特异性免疫反应,其中4例应用免疫抑制剂治疗有效。结论：DEH与原发性感音神经性聋的间隔期差异大,导致先期感音神经性聋的病因较多,内耳自身免疫性病理因素在DEH发病中可能起着重要作用,对侧性DEH病人特异性免疫反应阳性以及免疫抑制剂治疗有效的结果提示其可能为交感性迷路炎。     

尿激酶型纤溶酶原激活物在鼻咽癌的表达及临床意义

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA)在鼻咽癌组织中的表达情况，临床意义以及Ⅳ型胶原的分布形式。方法 应用免疫组织化学SP，对石蜡包埋的80例鼻咽癌标本和30例慢性鼻咽炎（对照组）标本进行检测。结果 （1）uPA阳性表达率鼻咽癌组织（80．0％）显著高于对照组（16．7％）（P＜0．01）；（2）鼻咽癌组织中uPA阳性表达率在Ⅲ-Ⅳ期（85．90％）高于Ⅰ-Ⅱ期（56．3％）（P＜0．05），有颈部淋巴结转移（87．3％），高于无转移（64．0％），（P＜0．05）；鼻咽癌组织中uPA阳性表达级别Ⅲ-Ⅳ期明显高于Ⅰ-Ⅱ期（P＜0．01），有颈部淋巴结转移也明显高于无转移（P＜0．01）。（3）鼻咽癌组织中Ⅳ型胶原分布均呈崩解缺失型，未见包裹型。结论 uPA在鼻咽癌组织扩散中起重要作用，它与鼻咽癌病期进展和颈部淋巴结转移关系密切，可作为判断鼻咽癌恶性度和估计患者预后的生物学指标。     

DBA/1小鼠与C57BL/6小鼠胶原诱导性关节炎模型的比较研究

目的：对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）在不同品系小鼠（DBA/1小鼠和C57BL/6小鼠）的发病情况进行比较研究,以期寻找出一种适合制备CIA模型的小鼠品系。方法：用鸡Ⅱ型胶原（typeⅡcollagen, CⅡ）乳剂分别免疫DBA/1小鼠和C57BL/6小鼠诱导CIA,进行关节外观的观察及关节炎临床评分。结果：免疫后第31天, DBA/1小鼠出现关节红肿,关节炎临床评分升高,在第39天达到高峰。随着时间的推移,小鼠关节红肿等急性炎症现象有所减退。用改进方法免疫的C57BL/6小鼠于第21天开始出现关节红肿、临床评分升高现象。结论：在制备CIA模型时建议首选DBA/1小鼠。     

大鼠气虚型颈椎病模型的建立

目的：建立大鼠气虚型颈椎病动物模型。方法：选择3月龄雌性SPF级SD大鼠30只,随机分为正常组、颈椎病模型组和气虚型颈椎病模型组,每组10只。颈椎病模型采用动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型,气虚型颈椎病模型采用动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型复合疲劳加饥饱失常法制造的气虚模型而制成。通过动物的行为、体征、体质量、环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）、乳酸脱氢酶（LDH）来验证气虚证;通过颈椎间盘组织病理学、Ⅱ型和X型胶原的免疫组织化学检测及聚集蛋白聚糖（Agcl）、Ⅱ型前胶原基因（Col2a1）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）和基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的基因表达评判椎间盘退变程度,以证实颈椎病模型的成立。结果：与正常组和颈椎病组比较,气虚型组动物出现明显的精神委靡、倦怠、少动、喜卧、毛乱无光泽、眼睑下垂等气虚证的表现,体质量下降;cAMP、cGMP升高,cAMP／cGMP降低（P〈0．05,P〈0．01）,LDH升高（P〈0．05）;颈椎间盘组织病理学退变更加明显,Ⅱ型胶原蛋白表达减少,X型胶原表达增高,Agcl、Col2al和TIMP-1基因表达降低,MMP-13表达增高（P〈0．05,P〈0．01）。结论：通过病-证模型复合的方式可建立大鼠气虚型颈椎病模型,气虚可以加重颈椎间盘的退变。     

自身免疫性感音神经性聋豚鼠的子代内耳生理功能研究

目的 :观察自身免疫性感音神经性聋 (ASHL)母豚鼠所产子代内耳生理功能的变化 ,探讨针对内耳的自身免疫因素对子代内耳生理功能的影响及其改变特点。方法 :同种内耳抗原 (CIEAg)持续免疫孕豚鼠 ,采用耳蜗电图 (记录cAP、CM )和眼震电图仪 (记录自发性眼震和冷热空气试验 )测试母鼠和子鼠的听觉和前庭功能 ,并检测血清特异性体液免疫反应。结果 :ASHL模型母豚鼠所产子鼠血清中发现有特异性抗体水平升高 ,部分 (3 /9)出现听觉损伤。非ASHL母鼠和对照组母鼠所产子代未见明显异常。结论 :ASHL雌鼠所产子代可出现感音神经性聋 ,其内耳损伤和功能障碍极可能与针对内耳组织的自身免疫反应 (尤其是体液免疫 )有关 ,从而提示内耳自身免疫因素可能为部分先天性非遗传性感音神经性聋的病因之一。     

免疫介导的感音神经性聋的动物模型的建立及评价

感音神经性聋是指内耳、耳蜗神经、脑干听觉通路及听觉中枢病变所致听力损失的统称,其中耳蜗听觉感受器的病变导致感音障碍引起的聋为感音性聋.目前,占人类10%以上的成年人群都患有不同程度的感音神经性耳聋,随着世界人口的老龄化,耳聋占人类群体的比例会进一步升高,像中国这样一个发展中的大国,老龄化人群所占比例会进一步上升[1].感音神经性耳聋主要表现为双耳或单耳的听力下降,可伴有耳鸣、眩晕等症状.其病因主要有:感染、中毒、创伤、噪声、代谢异常、听神经病变、免疫因素等.随着内耳免疫学的深入开展,免疫因素在内耳疾病的发病机制中所发挥的作用亦越来越受到人们的重视.研究发现,内耳并非免疫"豁免"器官,它具有免疫防御系统的解剖学组成和细胞免疫与体液免疫的特性[2～4].     

自身免疫性内耳病研究新进展

自身免疫性内耳病研究新进展附属医院耳鼻喉科刘志明关键词内耳病，自身免疫，病因早在１９５８年Ｌｅｈｎｈａｒｄｌ就针对双侧突聋患者提出了免疫反应病因学说。但是，直到八十年代对自身免疫性内耳病的研究才受到较广泛的重视。许多被临床医生认为病因不清的疾病，例如...     

骨形态蛋白植入大白鼠皮下诱导骨形成过程中Ⅱ型胶原的分布

将骨形态蛋白（ＢＭＰ）Ⅰ型胶原复合体植入到大白鼠皮下组织中,植入７、１４及２１日后应用免疫组织化学方法对植入物的Ⅱ型胶原的分布进行了分析。结果表明,植入７日后Ⅱ型胶原开始出现于软骨细胞周围,１４日后其分布达到高峰,２１日后钙化的骨基质中残留少量Ⅱ型胶原。组织学及免疫组织化学的发现表明,ＢＭＰⅠ型胶原复合体植入物所诱导的成骨过程是软骨化成骨方式。