甲型肝炎灭活疫苗的研究

目的研制甲肝灭活疫苗.方法甲型肝炎病毒TZ84株、吕8株接种人胚肺二倍体细胞2BS、KMB17株,经培养繁殖、收获、提纯、甲醛溶液灭活和氢氧化铝吸附制成灭活疫苗.结果纯化的甲肝病毒经HPLC、SDS-PAGE等方法检测表明具有良好的纯度.灭活工艺经验证盲传三代证明灭活可靠.甲肝灭活疫苗在豚鼠、小白鼠、ICR小鼠、恒河猴和普通狨猴上具有良好的安全性和免疫原性;经539例临床研究表明,该疫苗儿童组和成人组副反应均轻微,全程免疫后接种者100%抗体阳转,儿童组0,6月注射500u全程免疫后抗体水平达4535mIU/ml,成人组注射500u 0,6月全程免疫后抗体水平为1657mIU/ml,均可获得较长期的保护效果;该疫苗2～8℃保存21个月、37℃保存32天,质量稳定.结论甲肝灭活疫苗安全、有效、稳定.     

甲型肝炎灭活疫苗的研究

目的：研制甲肝灭活疫苗。方法：甲型肝炎病毒TZ84株、吕8株接种人胚肺二倍体细胞2BS、KM17株,经培养繁殖、收获、提纯、甲醛溶液灭活和氢氧化铝吸附制成灭活疫苗。结果纯化的甲肝病毒经HPLC、SDS－PAGE等方法检测表明具有良好的纯度。灭活工艺经验证盲传三代证明灭活可靠,甲肝灭活疫苗在豚鼠、小白鼠、ICR小鼠、恒河猴和普通狨猴上具有良好的安全性和免疫原性;经539例临床研究表明,该疫苗儿童组和成人组副反应均轻微,全程免疫后接种者100％抗体阳转,儿童组0,6月注射500u全程免疫后抗体水平达4535mIU/ml,成人组注射500u0,6月全程免疫后抗体水平为1657mIU/ml,均匀可获得较长期的保护效果,该疫苗2－8℃保存21个月、37℃保存32天,质量稳定、结论甲肝灭活疫苗安全、有效、稳定。     

甲型肝炎减毒活疫苗（H2株）的猴体保护试验

采用恒河猴进行甲型肝炎(简称甲肝)活病毒减毒株(H2株)即活疫苗株的保护试验．当疫苗组(5只猴)于接种5个月后已产生效价为1：10～1：20抗甲肝抗体时，与对照组(6只猴)同时接受甲肝病毒强毒株“合32”的攻击，结果发现对照组动物在1～7周均产生效价为1：20～1：1280的抗体。并出现丙氨酸转氨酶(全部动物)和乳酸脱氨酶同功酶(5／6动物)的异常升高；而疫苗组除抗体水平稿有上升外，并没有上述两种酶的异常升高。这说明活疫苗株(H2株)具有良好的免疫原性和弱毒性质，可保护猴体耐受甲肝病毒强毒株“合-32”的攻击，并且还髓明恒河猴可作为甲肝病毒动物模型的可靠性。     

甲型肝炎减毒活疫苗病毒的水平传播

目的 探讨甲型肝炎（甲肝）减毒活疫功接种后的病毒水平传播。方法 在昆明市安宁县2个观察点筛选出丙氨酸转氨酶（ALT）正常、甲肝（HAV）抗体（抗－HAV）阴性的4－7岁儿童199人,按1：1.4比例分接种组（82人）和接触组（117人）进行H2株甲肝减毒活疫苗病毒的水平传播观察;另外,取接种者和接触者HAV检测阳性的粪便悬液上清,分别静脉接种于8普通狨猴（Callithrix jacchus）体内,观察粪便HAV毒力水平。结果 接种组接种后6周抗体阳转率为97.6％（80／82）,接触组9周时抗体阳转率为13.7％（16／117）,两组儿童肝功能均未见异常 种组和接触组的粪便HAV检出率分别为89.5%(34/38)和70.7%(53/75）;以2株接种者粪便HAV和2株接触者粪便HAV感染的8只狨猴,均未检出血清酶升高和肝脏组织病理学改变,抗－HAV和2株接触者粪便HAV感染的8只狨猴,均未检出血清酶升高和肝脏组织病理学改变,抗－HAV阳转时间延迟且效价低。结论 H2株甲肝减毒活安全性及免疫原笥良好,疫苗病毒在人体内增殖活跃,且保持减毒性能稳定,能在人群中造成水平传播,但不会引发甲肝。     

甲型肝炎减毒活疫苗免疫原性与保护效果的研究

目的 观察国产甲型肝炎（甲肝）减毒活疫苗（H2株与LA－1株）的免疫原性及预防效果。方法 在广西、河北、上海等地457251例观察对象中进行随机对照试验,比较接种疫苗组与对照组甲肝发病率,观察轩保护效果;并筛选易感者,观察疫苗接种后发生甲肝感染的转归及免疫后甲肝抗体阳性率与持久性。结果 H2株（10^7.0TCID50）与LA－1株（10^6.75TCID50)疫苗保护效果均达95％,抗体阳转率峰值分别出现在疫苗接种后2个月与6个月,为94.9%与86.0%,3年后抗体阳性率下降至75％－80％,但保护效果不变。结论 国产甲肝减毒活疫苗（H2株与LA－1株）具有很好免疫原性与保护效果,可与国外灭活疫苗相媲美。接种者可通过隐性感染获得加强免疫。     

“狨猴饲育技术研究”课题通过鉴定

上海实验动物研究中心“狨猴饲育技术研究”课题于1991年9月27日通过了上海市科委组织的专家鉴定。甲型肝炎疫苗的研制是医学研究的重要课题。在甲肝疫苗试制过程中,需以狨猴为动物模型。此外,狨猴已广泛用于其他传染病的研究、计划生育和生殖的研究、肿瘤学、血液学和免疫学的研究。过去我国研究甲肝所用狨猴都是直接从国外引进,既要耗费外汇,又因产地对野生动物采取保护政策,禁捕禁运,要得到狨猴非常不易。为了提供实验用狨猴,促进我国医学事业的发展,本中心从1987年8月起,开展了该课题的工作。课题组成员经过几年的努力,取得了可喜的成绩。鉴定会专家一致认为:该课题成功地为狨猴研制     

狨猴研究Ⅵ.狨猴肝脏组织的形态学观察

引言我中心于1984～1986年先后从日本和秘鲁引进两批不同品种(Callithrix jacchus和Saguinus mystax)狨猴。为了开展对甲肝病毒疫苗的研究,首次从秘鲁引进了对甲型肝炎病毒具有易感性的白髭狨猴。为了实验对照,在疫苗感染前将全部狨猴进行了肝脏穿刺。经组织病理学检查,白髭狨猴肝脏的组织形态学特点与人类肝组织相似。被检的部分标本中,肝细胞有小灶性退行性变或坏死,肝窦中常见白细胞,枯否氏细胞增生。在半数标本中,可见微丝蚴,肝细胞胞浆内可见淡黄色的色素颗粒,这种轻度非特异性病变,可能与寄生虫感染有关。鉴于正常狨猴的肝穿组织形态学国内尚无报道,谨为开展这方面工作提供一些基础资料。     

组织培养抗原和粪便抗原检测甲型肝炎IgM抗体的比较

1979年Duermeyer等首先应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测甲型肝炎(下称甲肝)患者血清中特异性IgM抗体,并提出这一方法可用于早期诊断。尔后,国内外许多学者相继报道这方面的工作。但到目前为止,检测甲肝IgM抗体所用的抗原大多是从感染甲肝病毒(HAV)的狨猴肝或患者粪便中提取而得。狨猴肝来源极其困难,价格昂贵,难以推广。患者粪便抗原虽可使用,但阳性     

以普通狨猴作为人类甲型肝炎动物模型的初步研究

本文报道以不同剂量的不同 HAV 毒株经静脉和胃肠道分别接种普通狨(Callthrix jacchus)和白须狨(Saguinus mystax)后,其血清 ALT、AST 和 LDH 活性均升高。对酶活性比接种前增加 X+3 SD 值的6只狨猴作肝活组织检查,见有与急性病毒肝炎相一致的组织病理变化。用免疫电镜法检出狨猴粪便中 HAV 粒子,狨猴接种 HAV 后36天,血清 IgM 类和总抗 HAV 抗体均阳转。上述结果提示,普通狨猴有可能作为研究甲型肝炎的理想动激模型。     

对恒河猴作为鉴定甲肝减毒活疫苗的动物模型评估

1995～1997年期间,采用10批甲肝减毒活疫苗(H_2株)对50只恒河猴进行甲肝减毒活疫苗接种观察,接种后8周内检测ALT、抗-HAV抗体及肝穿病理检查,其结果表明恒河猴可作为鉴定甲肝减毒活疫苗的较好动物模型。     

慢性肝炎患者血清透明质酸与其肝组织纤维化病理分期的相关性研究

目的 :探讨慢性肝炎患者血清透明质酸与其肝组织纤维化病理分期 (S)的相关性。方法 :随机选择 5 0例慢性肝炎患者 ,抽静脉血检测其血清透明质酸 ,肝组织活检 ,病理检查。结果 :肝组织纤维化活动度越高 ,血清透明质酸值升高愈明显 ,S1 与S2 ,S2 与S3,S3 与S4之间比较 ,呈现显著差异 (P <0 .0 0 5 ) ,(S)与血清HA两者密切相关。结论 :血清透明质酸是观察慢性肝炎患者肝组织纤维化变化的敏感而准确的指标     

秃疮花有效成分对小鼠CCL4肝损伤的保护作用

目的 探讨不同剂量的DLF对小鼠肝脏的保护作用。方法 先用DLF预防给药，再采用CCL4制作小鼠急性化学性肝损伤模型，以BDD为阳性对照。采用全自动生化分析仪测定血清ALT、ALP、AST和LDH的含量；联苯三酚自氧化法测定血清SOD含量；TBA显色法测定肝匀浆中的MDA含量；肝组织常规制片，组织学观察。结果 不同剂量的DLF组血清ALT、ALP、AST、LDH和肝组织中MDA含量明显低于CCL4组，血清SOD组明显高于CCL4组；镜下病理显示，DLF对由CCL4引起的小鼠急性化学性肝损伤造成的肝细胞变性、坏死有一定的保护作用。结论 DLF对由CCL4引起的小鼠急性化学性肝损伤有保护作用，其作用机制可能与其抗自由基有关。     

蓝靛果对四氯化碳损伤小鼠血清谷草转氨酶的影响

[目的 ]观察蓝靛果对四氯化碳损伤小鼠血清谷草转氨酶的影响 .[方法 ]将小鼠随机分为 5组 ,即正常组、模型组、蓝靛果 3个剂量组 (每kg体重 2 0 ,1 0 ,0 5 g) ,实验第 5d测定各组血清谷草转氨酶 .[结果 ]蓝靛果降低小鼠血清谷草转氨酶活力 .[结论 ]蓝靛果对四氯化碳所致的肝损伤可能具有保护作用 .     

牛磺酸对大鼠肝纤维化的防治作用及机制的初步观察

目的观察牛磺酸对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型中星状细胞凋亡的影响及其保护机制。方法将实验动物分为正常对照组、模型组和牛磺酸组,采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,研究牛磺酸对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA)、Ⅱ型前胶原(PCI)、肝药酶和抗转化生长因子β1(TGF-β1)以及对激活的肝星状细胞凋亡的影响。结果与模型组比较,牛磺酸组ALT、HA、PCⅡ水平降低,肝细胞色素P450、细胞色素bs含量提高,TGF—β1的表达明显减少,同时促进了激活的肝星状细胞凋亡,明显减轻纤维化程度。结论牛磺酸有抑制TGF—β1的表达,促进激活的肝星状细胞凋亡的作用,具有明显的抗肝纤维化作用。     

五杞胶囊对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 :探讨五杞胶囊对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 :以四氯化碳、D-氨基半乳糖及醋氨酚诱导小鼠急性肝损伤模型 ,观察五杞胶囊的保肝作用。结果 :五杞胶囊 6、1 2 g· kg-1 (生药 )给小鼠连续灌胃 5 d,可明显对抗急性肝损伤模型小鼠血清 ALT及 AST的活力升高 ,并减轻小鼠肝脏坏死性病理改变。结论 :五杞胶囊具有保肝降酶作用 ,可能与其含有抗氧化作用的三种植物粗多糖及五味子乙素等有效成分有关。     

卷柏对实验性肝损伤小鼠保护作用的实验研究

探讨卷柏对实验性肝损伤小鼠保护作用机理.采用四氯化碳（CCl4）导致小鼠急性肝损伤的动物模型,用卷柏水煎剂灌胃给药,并设有联苯双酯（BPD）组为实验对照.结果：卷柏能显著地降低CCl4所致小鼠血清中ALT、AST、NO、PGE2和肝组织中MDA含量的升高;并可使CCl4所致小鼠肝组织中降低的SOD活性升高,改善肝脏组织的病理损伤.结论：卷柏对CCl4所致小鼠肝损伤具有保护作用,其作用机理可能与降酶、抗脂质过氧化反应、清除自由基、抑制NO过量成生,降低PGE2含量等有关.     

鸡血藤总黄酮对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究鸡血藤总黄酮对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的保护作用。方法 60只雄性小鼠随机分为6组,每组10只。除正常组外,其余各组均腹腔注射0.2%的CCl4橄榄油溶液诱导小鼠急性肝损伤,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)的含量,HE染色观察肝组织病理学变化。结果鸡血藤总黄酮明显抑制CCl4致血清ALT、AST活性的升高和肝组织SOD、GSH-Px活性的降低及MDA水平的升高。肝组织形态学观察显示鸡血藤总黄酮能显著改善肝组织的病理变化。结论鸡血藤总黄酮对CCl4诱导小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用。     

维甲酸相关孤核受体α(RORα)在奥曲肽抗大鼠肝纤维化中的作用

目的 观察奥曲肽(OCT)对实验性肝纤维化大鼠肝组织病理学及肝脏血清学的影响,探究维甲酸相关孤核受体α(RORα)在奥曲肽抗大鼠肝纤维化的作用.方法 将36只雄性SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组、OCT组.实验采用四氯化碳( CCl4)建立肝纤维化模型(模型组和OCT组),饲养8周后处死大鼠并随机采集标本,使用HE及VG染色法观察大鼠肝细胞的病理改变;检测大鼠血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、透明质酸(HA)、大鼠层粘连蛋白(LN)、大鼠Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)、大鼠IV型胶原(COL4)含量;使用Ishak评分系统分析各组肝细胞的炎症活动度及纤维化程度;Western blot法检测肝组织RORα受体的表达情况.结果 与对照组比较,模型组和OCT治疗组大鼠肝脏细胞的病理变化程度、肝脏炎症活动度、肝脏纤维化程度、肝脏血清AST、ALT 、HA、LN、PⅢNP、COL4 含量均显著上升,RORα显著下降(P＜0.01).与模型组比较, OCT治疗组大鼠肝脏细胞的病理变化程度、肝脏炎症活动度、肝脏纤维化程度、肝脏血清 AST、ALT、HA、LN、PⅢNP、COL4含量显著下降,RORα下降程度降低(P＜0.05).结论 OCT可降低大鼠体内RORα的下降程度,减少肝功能损害及肝纤维化程度,治疗实验性大鼠肝纤维化效果确切.     

苦参碱对大鼠实验性肝纤维化的影响

目的：研究苦参碱对肝纤维化的防治作用及其机理。方法：应用四氯化碳诱导大鼠实验性肝纤维化，并以苦参碱防治。观察了３，６，１２周对照组、模型组、治疗组的血清丙氨酸转移酶（ＡＬＴ）、透明质酸（ＨＡ）、肝组织羟脯氨酸（ＨｙＰ）含量以及肝脏病理变化。结果：苦参碱５０ｍｇ／ｋｇ和１００ｍｇ／ｋｇ均能显著减轻肝细胞变性、坏死及纤维组织的形成，同时能降低不同实验阶段血清ＡＬＴ（Ｐ＜０．０１）、ＨＡ（Ｐ＜０．０１）以及肝组织中Ｈｙｐ含量（Ｐ＜０．０５）。结论：苦参碱有防治四氯化碳诱发的肝纤维化的作用。