人腹水型卵巢癌SCID鼠腹腔移植瘤的建立

目的为研究人腹水型卵巢癌的实验研究提供合适的动物模型。方法将2例伴有大量腹水的卵巢癌患者手术切除标本移植于SCID鼠腹腔，原代移植瘤形成后进行鼠间传代，观察移植瘤的生长、转移及腹水形成情况，腹水细胞学涂片、计数，检测荷瘤鼠血和腹水中卵巢癌相关抗原CA125的浓度，肿瘤组织及器官作病理学检查。结果成功建立3只原代人卵巢癌SCID鼠腹水型移植瘤模型，原代移植成功率为37．5％，自第4代后，移植瘤的传代成功率为100％，随着传代次数的增加，移植瘤的成瘤潜伏期及荷瘤鼠的生存期均明显缩短（P〈0．05），荷瘤鼠血和腹水中CA125的浓度升高，移植瘤仍保持原癌的病理形态特点。结论成功建立了人卵巢癌SCID鼠腹水型移植瘤模型，为研究人腹水型卵巢癌提供较理想的动物模型。     

原位移植人乳腺癌SCID鼠转移模型建立及其生物学特性研究

目的 采用原位移植法建立人乳腺癌SCID鼠转移模型并研究移植瘤的生物学特性。方法 将人乳腺癌细胞系MDA－MB－231瘤块原位移植于SCID鼠乳房的脂肪垫上，用其癌转移淋巴结传代。采用光镜、电镜、免疫组化等对各代移植瘤的形态特征、移植瘤的侵袭和转移等生物学特性进行研究。结果 肿瘤移植成功率为97％，已传至18代；液氮冻存复苏移植成功率为100％，荷瘤小鼠体内出现淋巴道转移，9代后转移率为95％。原位移植瘤病理组织学结果表明移植瘤的形态学特点与原始细胞系安全一致，而原代与晚代移植瘤之间的超微结构有差异，显示进一步恶化的特征。多指标免疫组化检测表明，原代与晚代移植瘤之间存在有癌基因及蛋白表达的差异。结论 该模型为人乳腺癌的实验治疗和基础理论研究的理想模型。     

乳腺癌MCF-7细胞系转移亚克隆的筛选及其生物学特性研究

目的将乳腺癌MCF-7细胞接种SC ID鼠,筛选具有高转移潜能的转移亚克隆,阐明其生物学特性。方法接种培养的乳腺癌MCF-7细胞,取接种的SC ID鼠肺组织做原代细胞培养,将获得的细胞命名为LM-MCF-7。对该细胞进行生物学鉴定,研究其形态学、生长、细胞周期、染色体和乳腺癌特异性标志物等特征,与其亲本MCF-7细胞进行比较,检测二者肿瘤转移相关蛋白表达的差异。将LM-MCF-7细胞回接SC ID鼠,观察其成瘤和转移的能力。结果在接种MCF-7细胞第68天时处死SC ID鼠,经肺组织原代细胞培养,成功获得了MCF-7细胞的转移亚克隆LM-MCF-7。在形态学上LM-MCF-7细胞为典型的上皮样多角形;应用流式细胞仪检测分析显示,G0/G1期细胞为53.40%,S期细胞为17.10%,G2+M期细胞为23.20%;细胞群体平均倍增时间为20 h±14 h;染色体分析显示为人源性异倍体,其数量为16~123条;免疫细胞化学检测显示,乳腺癌特异性标志物CA15-3在LM-MCF-7细胞中呈阳性反应;W estern印迹检测结果显示,与MCF-7细胞相比,LM-MCF-7细胞中肿瘤转移抑制基因nm23和细胞周期相关蛋白p27的表达水平明显下调,而与细胞运动有关的肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及抗细胞凋亡蛋白bc l-2和survivin的表达水平明显上调。将该细胞株接种SC ID小鼠,与亲本MCF-7细胞相比,成瘤时间由7.4 d±1.3 d缩短至5.0 d±0.0 d,在肺脏、肾脏、脾脏、骨髓、淋巴结和心脏等脏器有广泛转移。结论LM-MCF-7细胞株是乳腺癌MCF-7细胞的转移亚克隆,具有高转移潜能。     

人卵巢癌顺铂耐药细胞SCID小鼠腹腔移植模型的建立及其生物学特性的实验研究

目的建立人卵巢癌顺铂耐药细胞严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠腹腔移植动物模型,探讨其生物学特征.方法以卵巢癌SKOV3细胞作对照,将SCID小鼠腹腔注射人卵巢癌SKOV3/CDDP细胞1×107/ml,建立SCID小鼠顺铂耐药卵巢癌腹腔移植模型,观察小鼠活动、原位移植成瘤率、肿瘤生长以及形态学特征.免疫组化检测卵巢癌相关抗原CA125以及耐药相关基因GST-π和Topo-Ⅱ的共表达率.结果两组SCID小鼠均100%成瘤,病理组织和免疫组化检测,从移植瘤细胞形态学、生长特性和分泌CA125等方面未见明显改变.SKOV3/CDDP组耐药相关基因GST-π和Topo-Ⅱ共表达明显增高(P＜0.05).结论该卵巢癌SKOV3/CDDP细胞SCID小鼠腹腔移植模型,模拟了人卵巢癌腹腔播散的生物学行为,且能保持细胞的耐药性,是研究卵巢癌生物治疗较理想的动物模型.     

SCID小鼠原位移植建立人胃癌高转移模型

为建立人胃癌高转移模型，用人胃癌组织块ＳＧＣ－７９０１原位移植于ＳＣＩＤ小鼠，第４周末移植瘤向淋巴结和肝脏等器官转移，转移率达６６．７％，第６周末转移率高达１００％。结果提示，ＳＣＩＤ小鼠原位移植人胃癌组织块后短期内即可发生胃癌转移，且转移率高，可能成为肿瘤转移机制及其防护研究的较理想模型。     

SCID鼠人宫颈癌组织模型的建立及其生物学特性初探

目的研究人原代宫颈癌组织在SCID鼠体内成瘤性及生物学特性。方法接种人宫颈癌组织于SCID鼠皮下,以建立人宫颈癌SCID鼠模型,观察荷瘤鼠成瘤、一般特性和移植瘤生长,组织学特性,检测肿瘤组织,外周血和肝、脾等脏器HPVDNA表达情况。结果成瘤率为100%,移植瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤。组织学检查所有移植瘤与种植前肿瘤组织病理检查一致,HPVDNA呈阳性,亚型与所种植人宫颈癌组织HPV亚型一致,而外周血与肝、脾等脏器HPVDNA呈阴性。结论初步建立SCID鼠人宫颈癌组织模型,其较好的模拟了人宫颈癌的生物学特性,为进一步探讨宫颈癌的发病机制及鉴定治疗的新方法提供了一个理想的动物模型。     

人T淋巴瘤裸小鼠移植瘤株和细胞系的建立及其生物学特性的研究

一淋巴瘤患者腹水中的瘤细胞在裸小鼠皮下移植成瘤并可传代。以此移植瘤株进行体外培养,建立了一个人T淋巴瘤细胞系,命名H—TL_(90)。此细胞系表现不正常的免疫学标记(CD_3~-,CD_7~ ,CD_4~-,CD_8~),变异的染色体,并有产生自泌生长因子和促淋巴细胞增殖因子的征象。鉴于H-TL_(90)具有上述特点,它可以作为深入研究人T淋巴瘤的一个良好实验模型。     

人子宫内膜癌SCID鼠皮下移植瘤模型的建立及其生物学特性初探

目的建立人子宫内膜癌SCID鼠模型,为子宫内膜癌的体内实验及临床研究提供合适的动物实验模型。方法分别选择低分化与高分化子宫内膜癌组织标本移植于SCID鼠皮下,原代移植瘤形成后进行鼠间传代,对移植瘤进行相关的生物学检测。结果成功建立3只原代人子宫内膜癌SCID鼠皮下移植瘤模型,其中低分化组织成瘤2只,中分化组织成瘤1只,原代移植成功率为37.5%,自第五代后,移植瘤的传代成功率为100.0%。病理组织学证实:连续传代的移植瘤仍保持原癌组织病理形态特点及人类肿瘤的特点。在子宫内膜癌SCID鼠皮下移植瘤模型中,100.0%移植瘤模型雌激素受体表达为阳性,33.3%孕激素受体表达为阳性,与有关文献报道一致。结论成功建立了人子宫内膜癌SCID鼠皮下移植瘤模型,移植瘤保持了原子宫内膜癌生物学特征,为人类子宫内膜癌的体内实验及临床研究提供了较理想的动物模型。     

人多发性骨髓瘤荷瘤SCID小鼠模型的建立及其生长特性

为研究人多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)在SCID小鼠免疫重建前后体内生长的特性和免疫细胞对肿瘤的作用，建立人多发性骨髓瘤(MM)荷瘤SCID小鼠模型。体外培养IL-6依赖的人MM细胞株XG7，接种于SCID小鼠和用人淋巴细胞重建的SCID小鼠皮下；监测成瘤状态，通过免疫组化观察细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes，CTLs)杀伤。结果表明：成瘤后的肿瘤细胞CD28、CD138等分子的表达与接种前没有明显变化；免疫重建后的SCID小鼠成瘤潜伏期延长，瘤体积小；免疫重建后的SCID小鼠肿瘤组织中，有人CD3 T细胞的浸润。结果提示：SCID小鼠是建立肿瘤模型和肿瘤免疫研究的良好动物；免疫重建后的SCID小鼠体内肿瘤生长受抑制：人MM细胞在小鼠体内的生长状态与淋巴细胞免疫有关。     

日本2005年实验动物学会第52届年会将召开

目的探讨裸小鼠和SCID小鼠两种免疫缺陷动物人胃癌原位移植后肿瘤生长和转移等生物学特性的差异。方法将MKN-45细胞株接种至裸小鼠皮下,成瘤后采用组织学完整的组织块移植于裸小鼠和SCID小鼠胃壁建立原位移植模型,观察所建模型的原位成瘤率、移植瘤生长、侵袭和转移情况。结果①两种免疫缺陷动物的原位成瘤率都为100%;②裸小鼠原位移植瘤平均体积2884±1337mm3,腹腔淋巴结、肝、肺、膈转移率分别为67%、83%、33%和8%;③SCID小鼠原位移植瘤平均体积4582±1326 mm3(P<0.05),肝转移率90%(P>0.05),与裸小鼠较为接近, 腹腔淋巴结转移率90%,肺和膈转移率分别为100%(P<0.01)和60%(P<0.05)。结论证明应用T、B细胞联合免疫缺陷的SCID小鼠较裸小鼠更适用于建立胃癌的原位移植模型。     

三氧化二砷对人鼻咽癌小鼠移植瘤生长抑制和诱导分化的初步研究

目的：研究三氧化二砷(As203)对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在SCID小鼠体内生长的抑制作用，并初步研究其对细胞分化的影响。方法：以人鼻咽低分化鳞癌细胞株CSNE-l为研究对象，观察腹腔注射As203(5mg/kg)对人鼻咽癌在SCID小鼠体内生长情况。用光学显微镜和电子显微镜观察形态结构变化、免疫组化方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果：腹腔注射As203后，鼻咽癌SCID小鼠移植瘤生长抑制，抑瘤率75．4％。同时，瘤组织中癌细胞密度减少，细胞皱缩，脑浆红染，瘤组织分化渐成熟，出现角化细胞和角化珠；间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞均出现成熟分化，核浆比例减少，脑浆中细胞器增多，出现大量张力原纤维并围绕核周，可见细胞明显角质化，细胞表面微小突起增多，桥粒增多，细胞之间以桥粒互相连接。癌细胞PCNA在阴性对照组呈高表达，阳性细胞指数(PI)达95％，As203组的细胞PC—NA表达明显减少，PI55％(P＝0．001)。结论：As203抑制SCID小鼠体内人鼻咽低分化鳞癌的生长，这种抑制作用可能与其能够诱导癌细胞向成熟方向分化有关。     

两株新肝癌LXY-1、XMS-1细胞系的建立及其生物学特性观察

目的建立两株新建的肝癌细胞系并观察其生物学特性。方法采用HE染色技术、细胞计数法、琼脂糖电泳法、ELISA、流式细胞仪、核型分析和异种移植等对两株新的肝癌细胞系进行生物学特性研究。结果两株细胞分别命名为LXY-1、XMS-1,均已获得长期体外生长的能力,无论形态学观察,还是LDH同工酶谱的变化,均符合肝癌细胞的一般特征,细胞培养上清及胞质中均不分泌AFP、HBsAg。XMS-1细胞DNA整合有HBV DNA,染色体平均数分别为:LXY-1105条、XMS-150条。两株细胞S、G2-M期细胞比例增加,细胞倍增时间介于19.5～59.2h之间,异种移植成瘤率:LXY-175%,XMS-1不成瘤。结论两株肝癌细胞均具有人肝癌细胞的一般特征,可用于肝癌的防治研究。     

人鼻咽癌多药耐药细胞株CNE2/ADM的建立及生物学特性研究?

目的：建立人鼻咽癌多药耐药细胞株 CNE2/ADM,并研究其生物学特性。方法以人鼻咽癌细胞株 CNE2为亲本细胞,采用阿霉素(ADM)浓度梯度递增法诱导建立多药耐药细胞株 CNE2/ADM。通过观察细胞形态学变化,药物敏感性试验,测定生长曲线、群体倍增时间、细胞周期及 P-糖蛋白(P-gp)功能和表达情况,评价CNE2/ADM 的生物学特性。结果与 CNE2细胞相比,CNE2/ADM 耐药细胞异形明显,并对 ADM 在内的4种化疗药物产生了耐药性,增殖速度减慢,群体倍增时间延长(P <0.05),G0/G1期细胞增多,S 期、G2/M 期细胞减少(P <0.05),P-gp 的药物泵出功能增强、表达水平升高。结论成功建立了人鼻咽癌多药耐药细胞株 CNE2/ADM,其具有典型的多药耐药表型,可作为进一步研究鼻咽癌多药耐药机制及筛选逆转剂较为理想的细胞模型。     

阿司匹林对卵巢癌细胞生长的影响

目的 :探讨阿司匹林 (ASP)对卵巢癌细胞生长的影响及其相关机制。方法 :采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT法 )检测ASP对CaOV 3细胞生长的抑制作用 ;用流式细胞术分析ASP对细胞凋亡和细胞周期的影响 ;采用细胞免疫化学的方法检测阿司匹林作用前后细胞环氧合酶 2 (COX 2 )、Ki 6 7表达的变化。结果 :ASP对CaOV 3细胞株的生长抑制作用呈量效和时效依赖关系。可诱导细胞凋亡和G0 G1期阻滞 ;细胞免疫组化结果表明随着ASP浓度的增加Ki 6 7表达下降 ,COX 2在高浓度ASP(5mmol·L-1)作用 72h后表达下降 ,在 1mmol·L-1和 3mmol·L-1作用 72h后表达无明显变化。结论 :阿司匹林通过诱导凋亡和细胞周期阻滞来抑制人卵巢癌细胞的生长 ,这种抑制作用具有时效性和量效性。阿司匹林有可能成为卵巢癌防治的有效药物。     

A549人肺癌细胞系/615-SCID小鼠转移瘤的生物学特征

目的通过建立A549人肺腺癌细胞/615-SCID小鼠模型,评价重度联合免疫缺陷615-SCID小鼠在建立人类肺癌转移模型方面的应用价值.方法将1×107A549细胞接种到615-SCID及SCID小鼠右上肢背部皮下,观察成瘤时间、成瘤率、肿瘤生长速度及转移发生.结果两品系小鼠接种后的成瘤率均为100%,615-SCID小鼠移植瘤潜伏期较长、生长较缓慢,更容易发生转移.结论 615-SCID小鼠比SCID小鼠更易于构建人类肺腺癌转移模型,对于肺癌转移特性研究具有较大的意义.     

小剂量K562细胞NOD/SCID小鼠动物模型的建立

[目的]探索建立小剂量(1×106)人急性红白血病K562细胞株的NOD/SCID小鼠动物模型及通过流式细胞仪对NOD/SCID小鼠的肿瘤负荷情况进行评价的可行性.[方法]实验组NOD/SCID小鼠分别经尾静脉接种K562细胞1×106、5×106,比较不同剂量接种实验组小鼠的生存时间、组织病理改变及通过流式细胞术对NOD/SCID小鼠体内的肿瘤标记进行检测.[结果]1×106及5×106 K562细胞接种的NOD/SCID小鼠的生存时间分别为(30.3±4.3)d和(22.2±3.7)d;其外周血、骨髓及肝、肺组织匀浆中均可发现不同比例的肿瘤细胞;通过流式细胞术检测5×106 K562细胞接种组NOD/SCID小鼠外周血、肝匀浆中人CD13表达水平显著高于1×10s接种组,而肺匀浆的CD13表达水平两组无显著性差异.[结论]小剂量(1×106)K562细胞NOD/SCID小鼠动物模型的建立是完全可行的,这有助于降低实验成本.     

食管癌SCID小鼠异位移植模型建立的初步探讨

目的建立人食管癌SCID异位移植模型并对其转移性淋巴来源细胞进行筛选。方法将食管癌细胞系Eca-109细胞悬液注射至SCID小鼠胃壁。三个月后或动物频死时处死解剖,观察肿瘤在小鼠体内的生长转移情况,对肉眼可见的转移病灶先建立皮下移植模型后建立转移性细胞亚系。结果胃壁移植15只SCID小鼠,获得9只胃壁移植瘤动物,其中一只出现纵隔淋巴结转移和肺转移。取淋巴结转移灶部分移植至SCID动物皮下,在动物皮下传代两个月(共4代)后,进行常规组织块培养,初步建立细胞亚系,命名为LnF1/Eca-109。结论肿瘤胃壁移植是建立食管癌免疫缺陷动物自发性移植模型和筛选转移性细胞亚系的可行方法。