急性痛风性关节炎大鼠模型的建立及模型维持时间观察

目的 建立急性痛风性关节炎（acute gouty arthritis,AGA）大鼠模型并观察其维持时间。方法 采用25 mg/mL尿酸钠（monosodium urate,MSU）晶体混悬液踝关节腔注射复制大鼠AGA模型,多个时间点动态观察8 d,以大鼠受试踝关节局部皮温、肿胀度、步态、关节液炎性细胞及其滑膜组织病理形态学改变等指标判断是否成模及其维持时间。结果 造模后3 h,生理盐水组和模型组均可见踝关节肿胀,皮温升高,步态异常,关节液炎性细胞数增多,滑膜组织增生、毛细血管充血、滑膜细胞排列紊乱等炎症表现,两组以上指标与空白组比较差异均有显著性（P<0.01）;造模后4 h,生理盐水组以上炎症表现明显减轻,较3 h时差异有显著性（P<0.01）,而模型组较3 h时加重（P<0.01）,并且与生理盐水组比较差异有显著性（P<0.01）;造模后24 h,生理盐水组各项指标恢复正常,而模型组炎症继续加重;造模后48~72 h,模型组肿胀、皮温、步态异常等局部炎症达到高峰;造模后96~168 h,模型组踝关节局部炎症逐渐减轻,但各项指标与空白组比较差异仍有显著性（P<0.01）;造模后192 h,模型组肿胀、皮温、步态异常等外在炎症表现恢复正常,而炎性细胞数及滑膜病理变化与空白组比较差异仍均有显著性（P<0.01）。结论 采用MSU晶体混悬液踝关节腔注射可在造模后4 h成功制备并鉴定出AGA大鼠模型,且至少能维持到造模后168 h。     

法舒地尔对小鼠造影剂急性肾损伤的影响

目的 探讨法舒地尔是否可以通过抑制Rho/ROCK信号通路,减轻氧化应激损伤及炎性反应,从而减轻造影剂急性肾损伤的发生。方法 30只小鼠行单侧肾蒂结扎术,术后1周,随机分为模型组、法舒地尔干预组或对照组（n=10/组）。小鼠经尾静脉注射碘克沙醇注射液（4.0g I/kg）或等剂量的生理盐水（对照组）。法舒地尔干预组在注射碘克沙醇前12h、2h以及注射后4h 3个时间点给予法舒地尔（10mg/kg,腹腔注射）。造模后24h检测小鼠血清肾功能标志物、炎症、氧化应激相关蛋白的表达水平。结果 与模型组相比,法舒地尔可以显著的降低血清Cr水平,减少肾组织活性氧簇（ROS）的产生及其诱导的DNA损伤。Wester blot法检测结果显示,法舒地尔可以显著减少炎性细胞因子TNF-α、IL-6蛋白水平（P<0.05）。结论 法舒地尔可以改善造影剂诱导的血清肌酐升高,其肾脏保护作用机制主要是通过抑制Rho/ROCK信号通路,从而发挥抗炎、抗氧化应激作用。     

白藜芦醇促进巨噬细胞M2极化并缓解小鼠急性痛风性关节炎

目的 观察白藜芦醇对小鼠急性痛风性关节炎的预防效果,并探讨巨噬细胞M2极化是否介导白藜芦醇的作用。方法 18只C57BL/6小鼠随机分为3组,每组6只：假手术组、造模+溶剂对照组、造模+白藜芦醇组。假手术组用无菌生理盐水处理小鼠右侧后肢踝关节,造模+溶剂对照组小鼠右侧后肢踝关节给予单钠尿酸盐（MSU）晶体构建急性痛风性关节炎模型,造模+白藜芦醇组提前给予DMSO溶解的白藜芦醇干预再进行MSU晶体造模。测定各组小鼠双侧足掌厚度,采用H-E染色观察各组小鼠足掌关节滑膜组织炎症情况。分离、提取正常小鼠腹腔原代巨噬细胞,给予白藜芦醇干预后以MSU晶体刺激,用蛋白质印迹法检测巨噬细胞M1极化标志物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达,用实时荧光定量PCR检测巨噬细胞中炎症指标肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）mRNA的表达水平,用流式细胞术检测M2型巨噬细胞标志物F4/80、CD163的表达。结果 成功构建小鼠急性痛风性关节炎模型。造模前给予白藜芦醇干预后,小鼠右侧后肢足掌厚度明显低于溶剂对照组[（1.98±0.02）mm vs（2.49±0.12）mm,P<0.01],小鼠足掌关节炎滑膜组织中中性粒细胞浸润面积减少。体外实验中,白藜芦醇显著抑制了小鼠腹腔原代巨噬细胞中iNOS蛋白和TNF-α、IL-1β mRNA的表达水平（P均<0.01）,提高了F4/80⁺CD163⁺细胞比例（P<0.01）。结论 白藜芦醇可能通过促进巨噬细胞M2极化,抑制炎性因子的产生,从而有效缓解小鼠急性痛风性关节炎。     

高脂血症小鼠铁调素表达与肝功能损伤的关系

目的 观察高脂血症小鼠血清铁调素表达变化,探讨肝功能损伤与高脂血症小鼠铁调素的相关性。方法 60只4周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为6组,每组10只,分别为0、2、4、6、8周组以及8周正常对照组,造模组40只给予脂肪乳灌胃,分别在2、4、6、8周处死,复制高脂血症伴有肝脏损伤模型。对照组给予等体积生理盐水,造模成功后,取血分离肝脏。全自动生化分析仪检测血脂（TC、TG、LDL-C、HDL-C）、肝功能（ALT、AST）、血清铁（FER、TRF）。血清酶联免疫吸附法测：血清铁调素（hepcidin）水平。结果 与空白组比较,模型组TC、TG水平明显升高（P<0.05）造模成功,2周组小鼠hepcidin表达水平明显下降（P<0.05）。与空白组比较,小鼠铁调素（hepcidin）表达水平随高脂喂养时间延长,铁调素表达有升高趋势,以8周组下降差异有统计学意义（P<0.05）。血清铁调素与肝功能损伤程度间呈负性相关（r=0.878,P<0.01）。结论 高脂血症小鼠血清铁调素表达随血脂水平升高而增多。伴随肝功能受损程度加重,铁调素表达下降,表明铁调素水平能反映肝脏损害程度。     

鱼腥草挥发油对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

[目的] 观察鱼腥草挥发油对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及探讨其作用机制。[方法] SPF级C57BL/6小鼠120只,雌雄各半,随机分为假手术组、模型组、辛伐他汀阳性对照组,鱼腥草挥发油高、中、低剂量组,每组20只。造模前连续灌胃给药14 d,其中辛伐他汀阳性对照组灌胃给药20 mg/（kg·d）,鱼腥草挥发油低、中、高剂量组分别灌胃给药5、10、20 mg/（kg·d）,假手术组、模型组灌胃给予等量生理盐水。末次给药1 h后,除假手术组外,其它各组构建小鼠脑缺血再灌注损伤（MCAO）模型,观察各组小鼠行为学、脑梗死面积、脑水含量和脑海马齿状回的变化,检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-8（IL-8）、总超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量。[结果] 与模型组比较,鱼腥草挥发油低、中、高剂量组明显改善行为学评分和脑海马齿状回神经元的形态学变化,降低脑梗死率、脑水含量和血清TNF-α、IL-8含量（P<0.05）,升高血清SOD活性（P<0.05）,降低MDA含量（P<0.05）,且呈剂量依赖性。辛伐他汀阳性对照组也明显改善上述指标。[结论] 鱼腥草挥发油对小鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用且呈剂量依赖性,其作用机制可能与减轻炎症和抗过氧化损伤有关。     

高同型半胱氨酸血症兔致动脉粥样硬化的实验研究

目的 复制可靠的兔高同型半胱氨酸血症（HHcy）致动脉粥样硬化（AS）模型。方法 采用L-蛋氨酸皮下注射法建立HHcy家兔模型,并设生理盐水组为对照,比较两组注射前、注射后4、8、12周血清中Hcy、TC、TG、HDL-C、LDL-C值,实验结束后超声观察腹主动脉狭窄程度及病理切片观察AS形成的情况。结果 皮下注射L-蛋氨酸4周后血中Hcy明显高于正常组（P<0.05）,HHcy模型形成;造模8、12周TC、TG水平显著升高（P<0.05）;造模12周模型组LDL-C水平显著升高（P<0.05）;造模12周后腹主动脉超声与病理均提示有明显的AS征象。结论 L-蛋氨酸皮下注射80mg/（kg·d）4周可建立HHcy模型,12周时动脉粥样硬化表现明显。     

苦参碱对对乙酰氨基苯酚诱导的小鼠药物性肝损伤的保护作用及机制

目的 探讨苦参碱（KSJ）对对乙酰氨基苯酚（APAP）诱导的小鼠药物性肝损伤的保护作用及机制。方法 雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为空白对照组、APAP组、KSJ大剂量组［2.8 mg/（kg·d）］、KSJ中剂量组［1.4 mg/（kg·d）］和KSJ小剂量组［0.7 mg/（kg·d）］,每组8只。空白对照组和APAP组小鼠尾静脉注射10%葡萄糖溶液10 ml/（kg·d）;KSJ大剂量组、KSJ中剂量组和KSJ小剂量组分别注射相应浓度的KSJ葡萄糖溶液10 ml/（kg·d）,连续给药7 d。末次给药后1 h,除空白对照组外其他各组小鼠腹腔注射APAP 400 mg/kg,复制急性药物性肝损伤模型,空白对照组小鼠予以等量无菌生理盐水进行一次性腹腔注射,模型复制结束后禁食不禁水24 h。24 h后,小鼠眼球采血,检测天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测IL-6、TNF-α水平;取肝脏组织行苏木精-伊红（HE）染色,观察小鼠肝脏病理学改变。结果 与APAP组比较,KSJ对APAP诱导的小鼠药物性肝损伤具有一定的保护作用,包括降低血清AST和ALT水平（P <0.05）,提高SOD活力,降低MDA含量（P <0.05）,以及减轻肝脏病理损伤程度和肝细胞凋亡程度。同时KSJ对APAP刺激诱导产生的TNF-α和IL-6具有抑制作用（P <0.05）,并且呈剂量依赖性。结论 KSJ对APAP诱导的小鼠药物性肝损伤具有保护作用,其机制与降低炎症因子水平,降低氧化应激,提高抗氧化能力有关。     

通膝散对急性高尿酸血症小鼠血尿酸的影响

目的 考察通膝散对急性高尿酸血症小鼠的降血尿酸作用。方法 实验分成模型组,别嘌呤醇（10 mg/kg）阳性对照组,通膝散高、中、低剂量（500、300、100 mg/kg）组。除模型组外,其他各组小鼠每天给予相应药物1次,连续给药3 d,末次给药后2 h ip尿酸（450 mg/kg）建立小鼠急性高尿酸血症模型,80 min后检测血尿酸水平。结果 与模型组相比,通膝散高、中剂量组可显著降低小鼠血尿酸水平（P＜0.01）,别嘌呤醇也有显著作用（P＜0.01）,通膝散高剂量的作用强度与别嘌呤醇相当。结论 通膝散对小鼠急性血尿酸升高具有抑制作用。     

针刺对局灶性脑缺血大鼠缺血脑组织及血清白介素-8的影响

[目的]观察针刺对局灶性脑缺血大鼠脑组织及血清白介素8(IL-8)含量的影响。[方法]以热凝法阻断一侧大脑中动脉造成大鼠局灶性脑缺血模型,采用放免法测定大鼠脑组织及血清IL-8含量。[结果]脑缺血后各时段模型组与同时段假手术组及正常组比较脑组织及血清IL-8显著升高(P<0.05,P<0.01);治疗后6、12、24、48h各时段针刺组与同时段模型组比较脑组织IL-8含量明显降低(P<0.01),6、12及48h针刺组血清IL-8含量显著低于同时段模型组(P<0.05,P<0.01)。[结论]针刺可能通过抑制缺血区脑组织IL-8的合成和分泌,调节血清IL-8的含量,抑制炎性细胞的黏附及浸润,从发挥脑保护作用。     

分泌性中耳炎患者血清及耳积液IL-8 IL-10 IL-1β水平及意义

目的 探究分泌性中耳炎（SOM）患者血清与耳积液中白介素8（IL-8）、IL-10、IL-1β水平变化及其临床意义。方法 以南阳市中心医院2017年12月至2018年12月收治的97例SOM患者（观察组）和同期97例健康体检者（对照组）为研究对象,观察组依据病程、临床症状以及检查结果分为急性组（n=30）、亚急性组（n=33）以及慢性组（n=34）等亚组。比较观察组患者血清与耳积液、对照组血清炎症因子水平,观察组各亚组患者血清中、耳积液中炎症因子水平,分析血清及耳积液炎症因子水平与病程的相关性。结果 观察组患者血清中IL-8、IL-10、IL-1β水平高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,观察组患者耳积液中IL-8、IL-10、IL-1β水平高于观察组血清中水平（P<0.05）;急性组SOM患者血清与耳积液中IL-8、IL-10、IL-1β水平低于亚急性组和慢性组,亚急性组上述指标水平低于慢性组,差异有统计学意义（P<0.05）;SOM患者血清与耳积液中IL-8、IL-10、IL-1β等炎症因子水平与患者病程之间均呈正相关性（r_血清=0.856,0.763,0.925;r_耳积液=0.776,0.849,0.927;P均<0.05）。结论 SOM患者血清中IL-8、IL-10、IL-1β水平异常上升,而这种异常上升状态在患者耳积液中更显著,炎症因子水平与患者病程关系密切。     

脑膜淋巴管转运功能障碍加重脂多糖诱导的小鼠中枢炎症

目的：探讨脑膜淋巴管（meningeal lymphatic vessel,mLV）转运功能障碍对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小鼠中枢神经系统炎症的影响。方法：①16只C57BL/6雄性小鼠随机分为4组,Control组腹腔注射生理盐水,LPS组分别腹腔注射LPS（2 mg/kg）12、24、72 h,而后观察小鼠mLV转运功能、海马区小胶质细胞（microglial,MG）活化、白介素（interleukin,IL）-6 和IL-1β水平。②将8只小鼠随机分为2组,分别为Control组和VEGFR3抑制剂MAZ51组,观察MAZ51对mLV转运功能的影响。③将24只小鼠分为4组,分别为Control组、MAZ51组、LPS组、LPS+MAZ51组,对MAZ51组和LPS+MAZ51组预先腹腔注射 MAZ51（10 mg/kg）,每周5 d,共30 d,6周后对LPS组和LPS+MAZ51组注射LPS,1 d后行为学实验评估小鼠的逃避恐惧能力;免疫组化检测MG 活化情况;ELISA 法检测IL-6、IL-1β的表达量。结果：小鼠腹腔注射LPS 24 h后脑膜LYVE-1面积和颈深淋巴结内OVA-647面积明显减少（P < 0.01）,72 h内均低于基础水平（P < 0.01）,24 h后海马MG活化、IL-6和IL-1β均明显增加 （P < 0.01）。与Control组相比,MAZ51组OVA-647荧光面积显著减少（P < 0.01）。LPS组小鼠海马区MG活化和IL-6、IL-1β的表达相对Control组均明显增加（P < 0.01）且小鼠僵直时间明显降低（P < 0.01）;与LPS组相比,LPS+MAZ51组小鼠海马区MG 活化和炎症因子的表达均增加（P < 0.01）且僵直时间明显减少（P < 0.01）。结论：mLV转运障碍通过增加炎性介质聚积,活化 MG,加重LPS诱导的小鼠中枢炎症和认知功能障碍。     

抑制外周神经元PAR2?PKA/ PKCε 通路对痛转化模型大鼠痛阈的影响

目的 探讨外周神经元蛋白酶激活受体2-蛋白激酶A/蛋白激酶Cε(PAR2-PKA/ PKCε)通路在痛转化中的作用,寻找同时干预急性痛和慢性痛的可能方案?方法 SD大鼠随机分为空白组?假诱发组?诱发组?抑制剂1组和抑制剂2组?除空白组和假诱发组,所有大鼠均通过先后足部注射角叉菜胶和前列腺素E2(PGE2)建立痛觉敏化诱发模型?PGE2于角叉菜胶注射后7 d 进行足部注射?抑制剂1组和抑制剂2组大鼠于PGE2 注射前/后,分别给予PAR2抑制剂?观察角叉菜胶/生理盐水,注射前?注射后5 h?3 d?6 d?7 d 0.5 h?7 d 4 h 和7 d 24 h 大鼠机械痛阈(PWTs)的变化,检测角叉菜胶注射后7 d 24 h 造模侧背根神经节(DRG)中PAR2?蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶(PKCε)表达?结果 痛觉敏化诱发模型建立成功?角叉菜胶注射后7 d 给予PGE2,显著延长了PGE2诱发疼痛的存在时间,角叉菜胶注射后7 d 24 h 假诱发组大鼠PWTs 与同期空白组相比差异无显著性( P >0.05),而诱发组大鼠PWTs 明显低于同期空白组和假诱发组大鼠( P < 0.01)?诱发组大鼠造模侧DRG 中PAR2 和PKCε表达在角叉菜胶注射后7 d 24 h 明显提升,高于同期假诱发组和空白组( P <0.05)?给予PAR2 抑制,不论时间均能显著翻转角叉菜胶注射后7 d 24 h,诱发组大鼠由PGE2 诱发的疼痛( P <0.05),并抑制DRG 中PKCε 表达?但,给予PAR2 抑制剂不能影响PGE2 诱发的急性疼痛和调制DRG中PKA含量?结论 抑制PAR2 表达能阻断急性痛向慢性痛转化,这可能与其抑制DRG 中PAR2-PKCε通路激活有关?但抑制PAR2并不能干预急性痛,这可能是因为DRG中PAR2相关通路未参与急性痛的产生?     

红参水提物对哮喘气道炎症小鼠的治疗作用及其机制研究

目的 探讨红参水提物对哮喘气道炎症小鼠模型的治疗作用及其机制。方法 选取BABL/c小鼠75只,采用随机数字表法分为正常组（等量生理盐水）、模型对照组（等量生理盐水）、低剂量组（红参水提物100mg/kg）、高剂量组（红参水提物200mg/kg）、阳性对照组（地塞米松0.5mg/kg）各15只,除正常组外均成功制作哮喘气道炎症小鼠模型,给予对应的处理措施,对比各组小鼠末次激发后24h的肺泡灌洗液（BALF）中的各种炎性细胞因子、血清免疫球蛋白E （IgE）、肺组织中羟脯氨酸含量,并采用HE染色观察各组大鼠肺组织病理变化。结果 模型对照组BALF中白细胞介素-4（IL-4）、IL-5、IL-14、转化生长因子β1（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）、血清免疫球蛋白E （IgE）、肺组织羟脯氨酸均高于正常组（P<0.01）;低剂量组、高剂量组及阳性对照组的BALF中IL-4、IL-5、IL-14、TGF-β1、VEGF水平、血清IgE、肺组织羟脯氨酸均低于模型对照组（P<0.01）;高剂量组BALF中IL-4、IL-5、IL-14、TGF-β1、VEGF水平、血清IgE、肺组织羟脯氨酸均低于低剂量组（P<0.05）。结论 红参水提物主要通过减轻哮喘小鼠模型的气道炎性反应程度达到治疗作用。     

雌雄激素联合作用对高脂血症小鼠血脂水平及凝血功能的影响

目的 探讨雌雄激素联合作用对高脂血症小鼠血脂水平及凝血功能的影响。方法 对小鼠行去势手术后通过高脂饮食建立高脂血症模型,通过给予不同激素将老鼠分为5组。造模结束后采集小鼠血液,一部分小鼠分离血清检测小鼠血脂水平,一部分小鼠分离血浆检测凝血功能。结果 高脂饮食后,小鼠血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平较对照组相比明显升高,凝血酶原时间、活化部分凝血酶原时间时间明显缩短(P<0.05),给予雌雄激素联合治疗后,与造模组相比,小鼠血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平较对照组相比明显下降,凝血酶原时间、活化部分凝血酶原时间时间明显延长(P<0.05),而与对照组无明显差异。结论 雌雄激素联合治疗可以调节血脂,显著降低低密度脂蛋白的水平,调节凝血功能,提示雌雄激素联合作用可以降低冠心病的发病风险,为冠心病的激素治疗提供新思路。     

葛花醒酒汤抑制小鼠乙醇性肝纤维化的实验研究

[目的]研究葛花醒酒汤对小鼠肝纤维化模型星形细胞活化、转型和血清Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、层粘连蛋白(LN)水平的影响,探讨葛花醒酒汤对小鼠乙醇性肝纤维化的防治作用。[方法]将60只小鼠随机分成对照组10只、模型组25只,治疗组25只,采用白酒灌胃[60°白酒,0.015mL/20(g·d)]的方法建立小鼠肝纤维化模型,12周末处死小鼠,观察肝组织病理形态改变;免疫组化法检测肝组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、Desmin的表达;酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血清PⅢP、LN水平变化。[结果]与对照组比较,模型组肝组织GFAP、Desmin表达增加(P<0.01),血清PⅢP、LN水平升高(P<0.05),纤维组织增生较明显。和模型组比较,治疗组肝组织GFAP、Desmin表达减少(P<0.01),血清PⅢP、LN水平降低(P<0.05),纤维组织增生不明显。[结论]葛花醒酒汤可以有效抑制小鼠乙醇性肝纤维化的发生和发展。     

补肾活血方保护FSGS小鼠足细胞的实验研究

[目的] 观察补肾活血方对局灶性节段性肾小球硬化（FSGS）小鼠足细胞骨架蛋白desmin,足细胞裂孔膜蛋白nephrin及肾母细胞瘤wt1的影响,探讨此组方保护足细胞的作用机制。[方法] 以阿霉素诱导方式完成FSGS肾病模型制备,在1周之后以补肾活血方开展治疗（设为治疗组）,时间持续6周。然后再设空白对照组与模型组。针对3组的尿、血及肾组织等进行收集,并检测体质量、血清白蛋白（ALB）、24 h尿白蛋白排泄率（UAER）以及尿白蛋白/尿肌酐比值（UACR）等。通过光镜针对肾组织形态变化情况进行观察分析,以免疫荧光完成小鼠的肾组织nephrin荧光强度测定工作;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测3组肾组织当中的desmin、wt1表达水平。[结果] 模型组UAER、UACR显著高于空白对照组与治疗组（P<0.01）,模型组体质量和ALB显著低于空白对照组和治疗组（P<0.01）。空白对照组nephrin免疫荧光表达具有连续性特征,而模型组则是具有少量点状或者片状特征,较空白对照组和治疗组表达明显减少。模型组当中的wt1 mRNA表达水平明显低于治疗组、空白对照组（P<0.01）,而desmin mRNA表达水平明显超过空白对照组、治疗组（P<0.01）。[结论] 采用补肾活血组方可以降低FSGS小鼠蛋白尿,同时有可能和wt1、nephrin表达水平上调,以及desmin表达水平下调存在关系。     

右美托咪定对脓毒症小鼠肺泡上皮细胞的保护作用

目的 探讨右美托咪定（DEX）在脓毒症小鼠肺泡上皮细胞炎性反应中的作用。方法 将雄性C57BL/6小鼠随机分为盲肠结扎穿孔（CLP）组和CLP+DEX组,每组36只。CLP组小鼠在CLP术前15 min腹腔注射1 mL无菌生理盐水,CLP+DEX组小鼠在CLP术前15 min腹腔注射50 μg/kg DEX。记录小鼠CLP术后24 h内的存活率,在CLP术后0、6、12、24 h时取小鼠血清和肺泡灌洗液,用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清和肺泡灌洗液中白细胞介素（IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平。体外培养小鼠肺泡上皮细胞MLE12,分为脂多糖（LPS）组（1 μg/mL LPS）和LPS+DEX组（1 μg/mL LPS+0.2 μg/mL DEX）,处理0、6、12、24 h后用ELISA法检测细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α的水平,蛋白质印迹法检测细胞外信号调节激酶（ERK）1/2和c-Jun氨基末端激酶（JNK）的磷酸化水平。结果 CLP+DEX组小鼠CLP术后24 h内的存活率高于CLP组（P<0.05）,6、12、24 h时小鼠血清和肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α的水平均低于CLP组（P<0.05,P<0.01）。6、12、24 h时LPS+DEX组MLE12细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α的水平和ERK1/2磷酸化水平均低于LPS组（P<0.05,P<0.01）,6、12 h时JNK的磷酸化水平也低于LPS组（P<0.05,P<0.01）。结论 DEX能减少脓毒症小鼠血清和肺泡灌洗液中炎性因子的产生,提高脓毒症小鼠存活率,其机制可能与抑制ERK1/2和JNK信号通路的激活有关。     

睡眠剥夺对小鼠肝脏的影响及TNF-α的表达意义

【目的】 研究睡眠剥夺对小鼠肝脏形态、功能的影响以及TNF-α表达变化的病理意义。 【方法】 C57小鼠分为对照组以及24、48、60 h完全睡眠剥夺组,采用H-E染色观察各组小鼠肝脏的组织学变化;血清学检测各组谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性改变作为肝损害的标志;免疫组化检测TNF-α的表达部位及变化情况。 【结果】 (1)组织学改变:与对照组相比,各睡眠剥夺组小鼠肝组织随着剥夺时间的延长出现不同程度的病理改变。24 h睡眠剥夺组可见肝小叶排列紊乱、肝细胞大小不等,形态各异;48 h睡眠剥夺组中部分肝细胞内出现细小空泡,可见细胞及细胞核肿胀或萎缩;60 h睡眠剥夺组部分肝细胞出现脂肪变性及坏死,周围有炎细胞浸润。(2)血清学指标的改变:与对照组相比,各睡眠剥夺组中AST和ALT 水平显著升高 (P<0.05),并呈现出随睡眠剥夺时间延长而快速升高的趋势;对照组、剥夺24 h组及剥夺48 h组雌雄小鼠之间的AST和ALT 水平无差异(P>0.05);剥夺60 h组雄性小鼠的AST和ALT 水平显著高于雌性小鼠(P<0.01)。LDH 在各睡眠剥夺组肝脏中的水平高于对照组,并具有显著性差异(P<0.01);LDH水平随着睡眠剥夺时间延长至48 h达到峰值后呈缓慢下降趋势,至睡眠剥夺60 h后仍明显高于对照组(P<0.01);对照组及睡眠剥夺24 h组的雌雄小鼠血浆中LDH水平无差异(P>0.05),睡眠剥夺48 h组及60 h组的雌雄小鼠之间血浆LDH水平差异明显(P<0.05)。(3)TNF-α的表达变化:TNF-α在睡眠剥夺24 h组、48 h组及正常组的肝脏组织中均呈阴性表达,而在睡眠剥夺60 h组的小鼠肝细胞胞浆中呈强阳性表达,与对照组比较有显著意义(P<0.05);其中,雄鼠肝细胞胞浆中TNF-α的免疫阳性反应程度显著高于雌鼠(P<0.05)。 【结论】 完全睡眠剥夺可对小鼠肝脏的组织结构和功能造成严重损伤,其中雄性受到的损伤更显著提示雌激素可能对这一损伤具有保护作用。睡眠剥夺在导致肝脏损伤的同时可通过活化TNF-α诱发炎症反应而进一步加重肝脏损伤。     

松果菊苷对2型糖尿病小鼠血脂代谢的影响

目的 探讨松果菊苷对2型糖尿病小鼠血脂代谢影响的特点,并初步探讨其对db/db糖尿病小鼠肝脏组织中成纤维细胞因子21（fibroblast growth factor 21,FGF21）含量的影响,寻找松果菊苷调节2型糖尿病血脂代谢可能的途径。方法 取6周db/db小鼠20只,随机选取10只作为模型组,剩余10只作为实验组,另取6周db/m小鼠8只（SPF级）作为空白对照组,适应2周后检测空腹血糖均>16.7mmol/L进入实验。各组予以灭菌蒸馏水、松果菊苷、灭菌蒸馏水灌喂8周后,取血清测总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL-C）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL-C）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）的水平,并取肝脏组织测FGF21的水平。结果 模型组血清TG、TC及LDL含量明显高于对照组（P<0.01）,血清HDL的含量明显低于对照组（P<0.01）;实验组血清TG、TC及LDL的水平明显低于模型组（P<0.01）,血清HDL的含量明显高于模型组（P<0.01）;模型组小鼠肝脏中FGF21表达的水平显著低于对照组（P<0.01）,实验组小鼠肝脏中FGF21表达的水平显著高于模型组（P<0.01）;模型组小鼠血清ALT、AST的含量显著高于对照组（P<0.01）,实验组小鼠血清ALT、AST的含量显著低于实验组（P<0.01）。结论 松果菊苷给药8周后能够显著改善db/db糖尿病小鼠血脂代谢紊乱,且不加重肝功能损害,其作用机制可能与其提高肝脏组织中FGF21表达水平有关。     

SOCSs在慢加急性肝衰竭大鼠肝组织中的表达变化及意义

目的 探讨细胞因子信号转导抑制因子(suppressors of eytokine signaling,SOCSs)在慢加急性肝衰竭(acute on chronic liver failure,ACLF)大鼠肝组织中的表达及其在ACLF发生中的作用。 方法 健康SD大鼠随机分组,ACLF组大鼠腹腔注射1.5ml/kg的50%四氯化碳花生油溶液,每3天1次,10次后改为2ml/kg,每3天1次,9次后给予250mg/kg D-氨基半乳糖(D-GalN)联合50μg/kg脂多糖(LPS)急性攻击,给药后0、6、12、24h 留取大鼠血及肝组织。血生化检测ALT、AST水平和ELISA法检测TNF-α、IL-6水平。HE染色下观察肝脏病理学变化。RT-PCR检测大鼠肝组织SOCS-1、SOCS-3mRNA表达。 结果 大鼠慢加急性肝衰竭模型复制成功,ACLF组血清ALT和AST水平逐渐上升,在12h升高最明显,血清TNF-α、IL-6水平在造模后0h 即明显高于对照组,至6h达峰值(P<0.05),肝组织SOCS-1、SOCS-3mRNA水平于造模后0h开始升高,12h升高最为显著,之后逐渐下降,与正常对照组相比,各时间点差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 SOCSs在慢加急性肝衰竭过程中升高,其变化与TNF-α、IL-6改变相关,提示SOCSs可能参与慢加急性肝衰竭中的炎症及免疫调节过程。