不同来源的艾氏腹水癌细胞株蛋白质特性的电泳及免疫组织化学比较研究

目的比较 3种来源的艾氏腹水癌 (Ehrlichascitescarcinoma,EAC)细胞蛋白质的特性。方法采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamidegelelectrophoresis ,PAGE)和免疫组织化学染色的方法观察 3种来源的EAC细胞蛋白质组成及Gai、TrkA、PDGF A、CDK2和NF κBp6 5抗体蛋白质表达。 结果电泳结果显示 ,北京来源的EAC蛋白质条带数最多 (2 8条 ) ,其次是山东来源的EAC(2 5条 ) ,武汉来源的EAC最少 (2 2条 ) ;免疫组织化学染色法测定 3个来源的EAC细胞的Gai、TrkA、PDGF A、CDK2和NF κBp6 5抗体蛋白质表达 ,结果不同来源的EAC与抗体的反应情况不同 ,山东来源的EAC 5种抗体的阳性表达分别为 0 %、 2 3.0 %、 0 %、 8.5 %和83.3%,北京来源的EAC分别为 77.8%、 6 .0 %、 9.0 %、 2 4 .0 %和 91.4 %,武汉来源的EAC分别为78.3%、4 .8%、8.0 %、2 7.8%和 10 0 %。结论 3种来源的EAC细胞蛋白质组成不仅有定量差异 ,而且有定性差异。     

艾氏腹水癌克隆细胞株E2G8建立小鼠动物模型生物学特性研究

目的　比较不同品种 (系 )小鼠接种E2G8细胞株的某些生物学特性。方法　将E2G8细胞稀释成不同浓度 ,接种KM、DBA 2、6 15、C57BL 6及BALB c小鼠皮下或腹腔 ,观察小鼠出现可见肿块 腹水时间及小鼠生存时间 ;测量肿块直径 (cm)及瘤重 ;荷瘤小鼠腹腔注射环磷酰胺 (CTX) ,观察E2G8细胞肿瘤模型对CTX治疗的敏感性。结果　E2G8接种BALB c、6 15小鼠皮下毒性最大 ,DBA 2、C57BL 6小鼠次之 ,接种KM小鼠皮下毒性最小 ;接种DBA 2、C57BL 6、6 15小鼠腹腔毒性较大 ,致死性高 ,对BALB c和KM小鼠的致死性弱 ;E2G8瘤细胞在KM和 4种纯系小鼠皮下均能很好生长肿瘤 ,其中在KM小鼠皮下肿瘤生长最大 ,在BALB c小鼠皮下肿瘤最小 ;KM、C57BL 6、6 15、DBA 2、BALB c小鼠皮下接种瘤细胞第 12天瘤重分别为 (2 4 0± 1 30 ) ,(0 90± 0 4 8) ,(1 2 0± 0 38) ,(1 10± 0 2 9) ,(0 80± 0 30 )g ;E2G8细胞接种 5个不同品种 (系 )小鼠制备的肿瘤模型 ,用CTX治疗 ,抑瘤率由高到低依次为6 6 7% (6 15 ) ,5 5 0 % (BALB c) ,5 3 3% (C57BL 6 ) ,5 0 % (KM) ,36 4 (DBA 2 ) ,其中 6 15小鼠建立的模型对CTX的治疗最敏感。结论　E2G8细胞株接种 5个不同品种 (系 )小鼠 ,所测生物学特性不完全相同 ,但是从腹腔 皮下接种、CTX     

不同单位保种的艾氏腹水癌细胞核型及DNA含量的比较研究

目的 比较研究三个单位保种的艾氏腹水癌细胞（EAC）染色体数目及DNA含量。方法 取腹腔接种EAC 6 d的KM小鼠，腹腔注射秋水仙碱，取腹水，经低渗处理，固定后涂片，染色，显微镜下染色体计数；腹水传代的EAC，用70%乙醇固定，流式细胞仪测DNA含量。结果 山东省医学科学院药物研究所（山东）、武汉大学典型培养物保藏中心（武汉）和北京市肿瘤研究所（北京）保种的艾氏腹水癌细胞株，其染色体均数分别为28.31±7.78、29.16±12.25、23.22±10.21条，方差分析表明，除北京与山东外，武汉与北京、武汉与山东两两比较有极显著差异（P<0.01）。直方图分析显示主流染色体范围分别为25-27、22-24、22-24条。北京艾氏腹水癌细胞 DNA含量最多，山东艾氏腹水癌细胞DNA含量最少。结论 三个单位的艾氏腹水癌细胞株在某些方面已出现差异。     

RNA酶(RNase)-胶体金法显示艾氏腹水癌细胞RNA的分布

用RNase-胶体金法显示艾氏腹水癌细胞的RNA分布。在癌细胞核的颗粒区RNase-胶体金颗粒的分布比在纤维部密集,癌细胞质内的RNase-胶体金颗粒分布比较均匀。荷瘤小鼠腹腔连续4次注射大蒜乳剂后,多数艾氏腹水癌细胞的细胞核固缩,胞质内出现大量的空泡,癌细胞核及细胞质内的RNase-胶体金颗粒明显减少。结果表明RNase-胶体金标记是显示肿瘤细胞内RNA含量与分布的比较理想的半定量方法。也表明大蒜乳剂可能具有抑制艾氏腹水癌细胞RNA合成的作用。     

氟尿嘧啶对艾氏腹水癌细胞产生多药抗药性的研究

本文用对氟尿嘧啶非常敏感的艾氏腹水癌细胞在小鼠体内用氟尿嘧啶进行长达65周的治疗,致使 EAC 细胞对氟尿嘧啶产生抗药性。该细胞的生长比敏感株缓慢,每只小鼠体内总的细胞体积,细胞计数及平均单一细胞体积均较敏感株明显为小。同时对长春新碱,放线菌素 D,丝裂霉素 C 及鬼臼乙叉甙均产生交叉抗药性,而对阿霉素则产生部分交叉抗药性。     

费氏艾美尔球虫（E.ferrisi）某些生物学特性的研究

采用从自然感染球虫的小鼠粪便中分离的单卵囊接种小鼠获得成功，观察了此种球虫的卵囊形态，孢子化时间，潜隐期和寄生部位等，确定此球虫为费氏艾美尔球虫。为进行费氏艾美尔球虫病的流行病学调查和防治提供了依据。     

清洁级BALB/c近交系小鼠常规生物学特性研究

目的建立BALB/c近交系小鼠常规生物学特性指标.方法采用日本光电MEK-5126血球计数仪、荷兰半自动生化仪、流式细胞仪及常规的实验方法检测.结果血液细胞计数、血液生化指标、体重、脏器重量、脏器指数等常规生物学指标结果比较均一;清洁级BALB/c近交系小鼠的血液细胞计数和血液生化指标同普通级BALB/c近交系小鼠比较差异显著;普通级的CD4^＋/CD8^＋指标雌雄之间及普通级与清洁级的CD4^＋/CD8^＋差异显著.结论清洁级BALB/c近交系小鼠具有比较稳定的生物学特性.     

质谱快速鉴定血培养阳性标本的方法研究

目的 建立快速、精准的细菌质谱鉴定方法,以缩短血培养阳性的实验周转时间。方法 共收 集血培养阳性瓶91 个（活性炭吸附瓶）,采集培养液分别转种肉汤和血平板增菌培养4 h 后,用基质辅助激光 解吸/ 电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行菌种鉴定。以血平板培养24 h 的质谱鉴定结果为对照, 比较2 种方法细菌质谱鉴定符合率。结果 91 株细菌包括51 株革兰阴性菌和40 株革兰阳性菌。4 h 肉汤增 菌法和4 h 血平板培养法鉴定到种的符合率分别为46.15% 和89.01%,无鉴定结果率分别为47.25% 和3.30%, 错误鉴定率分别为3.30% 和4.40%。2 种方法鉴定到种的符合率比较,差异有统计学意义（P <0.05）,4 h 血平 板培养法鉴定到种的符合率高于4 h 肉汤增菌法。2 种方法对革兰阴性菌鉴定到种的符合率分别为58.82% 和 94.12%,差异有统计学意义（P <0.05）,4 h 血平板培养法高于4 h 肉汤增菌法。2 种方法对革兰阳性菌鉴定到 种的符合率分别为30.00% 和82.50%,差异有统计学意义（P <0.05）,4 h 血平板培养法高于4 h 肉汤增菌法。 结论 4 h 血平板培养质谱鉴定法可快速鉴定血培养阳性标本中的病原菌。     

转移性癌细胞的生物学特性及人类肿瘤转移相关基因的克隆

肿瘤转移是恶性肿瘤最本质和最具破坏性的特性,是导致患者死亡的主要原因。     

不同单位保存的小鼠肝癌H_(22)细胞特性比较研究

目的　对不同单位保存的小鼠肝癌H2 2 细胞株的细胞特性进行比较研究。方法　从三个单位引进小鼠肝癌H2 2 瘤株 ,KM小鼠腹腔传代 ,然后进行染色体、DNA含量、细胞大小比较分析。结果　中国医学科学院药物研究所(北京H2 2 )、山东省医学科学院药物研究所 (山东H2 2 )和武汉大学典型培养物保藏中心 (武汉H2 2 )三个单位H2 2 瘤株的染色体均数分别为 (30 3± 8 9)条、 (33 0± 8 9)条、 (35 6± 10 1)条 ,方差分析表明不同单位瘤株间差异均有显著性 (P <0 0 1) ;直方图分析显示主流染色体范围分别为 2 7～ 2 9、 30～ 32、 33～ 35。武汉H2 2 瘤株细胞面积、长径、短径与北京H2 2 、山东H2 2 比较差异均有显著性。流式细胞术DNA含量分析表明北京H2 2 DNA含量最少 ,武汉H2 2 DNA含量最多 ,统计学分析表明不同单位瘤株间差异均有显著性 ;DNA指数结果表明武汉H2 2 为非整倍体肿瘤 ,北京H2 2 、山东H2 2 为近二倍体肿瘤。结论　不同单位保种和使用的H2 2 瘤株的细胞特性已存在显著差异。     

L1210克隆细胞肿瘤动物模型生物学特性研究

目的　对L12 10细胞及其 4株克隆细胞建立的肿瘤动物模型的某些生物学特性进行比较研究 ,从中筛选出基本符合L12 10细胞生物学特性且一致性更好的克隆细胞。方法　北京肿瘤所L12 10细胞和 4株克隆细胞腹腔接种DBA 2小鼠 ,观察产生腹水的性质、腹水瘤细胞浓度和致小鼠死亡时间 ;皮下接种DBA 2小鼠 ,观察瘤块的生长情况 ;腹腔注射化疗药物环磷酰胺 (CY) ,比较对CY治疗的敏感性。结果　腹腔接种DBA 2小鼠均能生长腹水 ,其中克隆细胞L2H8、L3B12产生血性腹水 ,L3F9的腹水微血性 ,L3E11与肿瘤所L12 10细胞为无血性腹水 ;腹水瘤细胞的浓度及小鼠生存时间亦有差别。肿瘤所L12 10细胞及克隆细胞L3F9、L2H8、L3E11、L3B12第 10天瘤重依次为 1 9± 0 4 6、1 5± 0 3 8、0 75± 0 5 2、2 6± 0 3 0、2 0± 0 3 3g ;用CY治疗的抑瘤率分别是 4 8 7% ,81 3 % ,86 0 % ,78 7%及 67 1%。结论　 4株克隆细胞的生物学特性基本符合L12 10细胞 ,对化疗药物CY的敏感性均高于L12 10细胞     

不同来源H22细胞株的生物学特性比较研究

目的　对不同研究单位保存的小鼠肝癌H2 2 细胞株的基本生物学特性进行比较研究。方法　从国内3个不同研究单位 (武汉大学典型培养物保藏中心 ,山东省医学科学院药物研究所以及中国医学科学院药物研究所 )引进小鼠肝癌H2 2 瘤株 (分别简称武汉H2 2 、山东H2 2 、北京H2 2 ) ,KM小鼠腹腔传代 ,然后对其体外培养特性、体内生长特征、病理形态、治疗学特征进行了比较分析。结果　 3株H2 2 细胞在体内、体外生长速度明显不同 ,武汉H2 2 生长速度较其他瘤株快 (P <0 .0 1) ,接种一致性好 ;而山东H2 2 则在 10 4 个细胞 只小鼠时即可接种成功。荷瘤小鼠体内未发现明显转移灶 ,但肿瘤形态各不相同。环磷酰胺治疗时 ,山东H2 2 抑瘤率最高为 74 6%。结论　不同研究单位H2 2 瘤株的生物学特性有很大不同 ,虽为同一起源 ,但经不同单位保存使用一定时间后 ,它们之间的生物学特性已存在较大的差异     

克隆细胞株S2D9建立的肿瘤动物模型基本特性研究

目的研究从S180获得的克隆细胞株S2D9,接种4个不同品(种)系小鼠建立肿瘤动物模型的某些基本生物学特性.方法由KM小鼠腹腔传代的S2D9克隆细胞,用GKN稀释成不同浓度,接种KM、DBA/2、615、C57BL/6小鼠右腋皮下及腹腔,观察小鼠最早出现可见肿块、腹水时间及小鼠生存时间;不同品(种)系小鼠经皮下接种S2D9细胞,建立肿瘤模型,从接种后第5日,每日观察肿瘤生长情况,测量肿块直径(cm),绘制肿瘤生长曲线;S2D9克隆细胞株接种BALB/c小鼠皮下,取接种第7日肿块,经石蜡切片,HE染色,观察病理结果;不同品(种)系小鼠皮下接种S2D9瘤细胞建立的动物模型,经腹腔注射环磷酰胺(CTX)或顺胺氯铂,观察S2D9克隆细胞肿瘤模型对CTX或顺胺氯铂治疗的敏感性.结果S2D9克隆细胞在615及DBA/2小鼠的皮下较KM及C57BL/6小鼠容易生长肿瘤;在KM及DBA/2小鼠腹腔较C57BL/6及615小鼠容易长出腹水;皮下接种KM、C57BL/6、615及DBA/2四个不同品(种)系小鼠,第12天瘤重分别为(2.3±0.9)g,(0.8±0.2)g,(2.0±0.2)g及(1.9±0.1)g;S2D9瘤细胞接种4个不同品(种)系小鼠制备的肿瘤模型,用CTX治疗,抑瘤率分别为80%(615),75%(C57BL/6),68.4%(DBA/2),65.2%(KM);用顺胺氯铂治疗的抑瘤率分别为75%(615),73.6%(DBA/2),62.5%(C57BL/6),65.2%(KM).可见S2D9细胞与615小鼠建立的模型对CTX或顺胺氯铂治疗最敏感.结论S2D9克隆细胞仍具有较强致瘤性,但在细胞均一性、接种小鼠生长肿瘤一致性方面比原代细胞好,对化疗反应更敏感,克隆细胞易于进行质量控制,因而推广使用后,有利于肿瘤动物模型复制的一致性和可重复性.     

同种异体淋巴细胞致狼疮肾炎小鼠模型的研究

目的　制备狼疮肾炎小鼠模型。方法　采用昆明小鼠同种异体脾淋巴细胞经Lectin刺激后输入小鼠腹腔皮下的方法。结果　成功地制备了系膜增生型狼疮肾炎小鼠模型 ,通过光镜、免疫荧光、电镜观察其病理形态、并检测了血清抗ds -DNA抗体、补体以及尿蛋白 ,证实了该模型的可靠性。结论　制备的系膜增生型狼疮肾炎小鼠模型有实用价值     

可移植膀胱肿瘤细胞的生物学特性及相关动物模型的初步建立

目的　了解可移植膀胱肿瘤细胞的生物学特性。方法　利用相差显微镜观察其形态特征。为了解MBT 2细胞的生长特性 ,采用计数的方法测定细胞生长曲线 ;MTT法对细胞在不同培养介质中的生长率进行测定。为测定肿瘤细胞的肿瘤形成能力 ,将不同剂量的肿瘤细胞注射到C3H同基因鼠右后侧腹皮下 ,每周两次用测量器测定肿瘤的两径。结果　MBT 2肿瘤细胞多数呈梭形 ,单层贴壁生长。核 质比例约为 1∶2。细胞间界限清楚。细胞接种后生长缓慢 ,第 3天生长速度开始加快 ,第 7天达到高峰。在不同的培养介质中肿瘤细胞的生长速度基本相同。在测定肿瘤的形成能力时我们发现 ,接种了 1× 10 6 肿瘤细胞的小鼠最快形成肿瘤。在接种后第 2 3天 ,小鼠的死亡率高达 90 % ,而此时 ,皮下肿瘤体积尚小。这可能是因为肿瘤转移所致。接种了 1× 10 4 肿瘤细胞的小鼠 ,皮下肿瘤的生长速度较慢。在接种 2周内无肿瘤形成。而接种了 1× 10 5肿瘤细胞的小鼠 ,在接种后第 3周 ,肿瘤的发生率可达 80 % ,而且无死亡发生。结论　不同的培养介质对MBT 2的生长无明显影响。皮下注射建立可移植膀胱肿瘤动物模型时 ,接种剂量为 1× 10 5细胞 只较好。     

HCMV感染动物生殖细胞的实验研究

目的 探讨HCMV感染是否引起大鼠和家兔的睾丸、卵巢组织的损伤。方法 将人巨细胞病毒AD169毒株经静脉接种50只大鼠和30只新西兰兔，30d后以原位杂交和免疫组化方法检验病毒感染动物组织的证据，以组织病理学方法检查动物睾丸、卵巢组织的病理变化。结果 接种病毒之动物睾丸、卵巢组织内可查到病毒抗原或基因，睾丸组织多见生精细胞变性、坏死，精细胞减少甚至消失。结论 HCMV感染可以导致动物睾丸组织生精细胞损伤和生精功能下降。     

不同单位保种的S180细胞核型及DNA含量的比较研究

对四个单位保种的S180 细胞经KM 小鼠腹腔传代,体外培养加秋水仙碱,涂片、染色后,显微镜下计数染色体数目:腹水传代的S180 细胞,用70 % 乙醇固定,流式细胞仪测DNA 含量。结果如下:本学部( 本部) ,中国医学科学院药物所( 药物所) ,武汉大学保种中心( 武汉大学) 和北京市肿瘤所( 肿瘤所) 保种的S180 细胞株,其染色体均数分别为62-8 ±22-8 ,69-1 ±21-2,39-9 ±8-26 ,58-7±9-75 条。四单位S180 细胞株染色体数做方差分析表明,除肿瘤所与本部外,其它两单位比较均有显著统计学差异(P< 0-01) 。直方图分析显示主流染色体范围分别为56 ～60 ,61 ～65,41 ～45,61 ～65 条。流式细胞术DNA 含量分析表明肿瘤所S180 DNA含量最多,武汉大学保种的S180 细胞的DNA含量最少。这些结果均证明四个单位的S180 细胞株在一些方面已出现显著差异。     

小鼠艾氏腹水癌上清液增强分化诱导剂对红白血病细胞的作用

艾氏腹水癌腹水上清液明显增强分化诱导剂对小鼠红白血病细胞(Friend细胞)的作用。经正丁酸、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺和二甲基亚砜等分化诱导剂作用后出现联苯胺染色阳性的细胞,加入腹水上清液则使阳性细胞百分率明显增高。在筛选有分化诱导活性的抗肿瘤抗生素工作中,利用小鼠红白血病细胞作初筛模型,加入腹水上清液可使测定方法更为敏感。腹水上清液中的活性因子可透过半透膜并对热不稳定。