17-β雌二醇对肾间质纤维化防治作用的探讨

目的探讨17-β雌二醇对肾间质纤维化防治作用可能的机制。方法雌性SD大鼠30只,随机分为4组：①对照组;②生理雌激素组;③低雌激素组;④17-β雌二醇组。21d后光镜观察单侧梗阻肾组织病理改变;通过免疫组化方法检测转化生长因子（TGF-β1）、α-平滑肌动蛋白（α-SMA）;并用RT-PCR方法检测肾组织α-SMAmRNA的表达。结果单侧输尿管梗阻各组出现肾小管间质纤维化改变,其肾组织TGF-β1。和α-SMA表达上调（P〈0．01）;与生理雌激素组相比,低雌激素组纤维化病变加重,上述物质表达均明显增多（P〈0．05）;而17-β雌二醇组则病变均减轻（P〈0．05）。结论注射17-β雌二醇可能通过下调TGF-β1,和α-SMA的表达,抑制细胞外基质的生成,进而韶到延绣肾间后纤维化的作用．     

黄芪对肾间质纤维化模型大鼠肾组织MMP-9／TIMP-1表达的影响

目的探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）在肾间质纤维化中的表达及黄芪抗纤维化的分子作用机制。方法采用单侧输尿管结扎（UUO组）造模。将24只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（UUO组）、厄贝沙坦治疗组（Irbesartan组）和黄芪治疗组（AM组）4组,每组6只。造模14d后抽血检测肾功能,取结扎侧肾组织观察肾间质病变,免疫组织化学染色法检测肾组织MMP-9和TIMP-1表达。结果①AM组血肌酐和尿素氮水平较UUO组低（P〈0．05）,肾纤维化程度较UUO组有明显改善（P〈0．01）。②肾组织TIMP-1表达,UUO组较Sham组显著升高（P〈0．01）,AM组较UUO组明显降低（P〈0．01）;肾组织MMP-9表达,UUO组与Sham组差异无统计学意义（P〉0．05）,AM组较UUO组显著升高（P〈0．01）。结论黄芪可改善UUO大鼠肾功能,并可通过抑制TIMP-1表达,调节MMP-9／TIMP-1平衡来发挥其抗纤维化的作用。     

泽泻对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织补体C_3及肾纤维化的影响

目的：探讨泽泻对单侧输尿管梗阻（unilateral uretreal obstructire,UUO）大鼠肾小管上皮细胞间充质转分化（epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）的作用及其机制。方法：采用单侧输尿管梗阻方法制作大鼠肾间质纤维化模型。30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、UUO组和泽泻治疗组。术前3d开始,泽泻治疗组给予中药泽泻9g·kg-1·d-1饮片溶于适量生理盐水中灌胃用。术后14d处死大鼠,观察梗阻侧肾组织病理损害和间质纤维化,免疫组化检测α-SMA、E-cadherin、补体成分C3在肾组织中的表达。结果：UUO组大鼠肾间质纤维化明显,泽泻干预后肾间质纤维化程度减轻。免疫组化结果表明UUO组大鼠C3和α-SMA表达明显增加,E-cadherin表达明显减少;泽泻干预后,C3和α-SMA的表达明显低于UUO组（P〈0.05）,E-cadherin的表达高于UUO组（P〈0.05）。结论：UUO大鼠肾小管上皮细胞的C3表达增加,中药泽泻能减轻UUO大鼠C3的表达,抑制肾小管上皮细胞EMT。     

缬沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏氧化应激的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ-1型受体拮抗剂（AT1Ra）缬沙坦对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾脏氧化应激的影响。方法：Wistar大鼠行左侧输尿管结扎术,分为UUO模型组（n=11）,缬沙坦治疗组（n=11）,同时设假手术对照组（n=7）。术后第14天处死各组大鼠,进行HE和Masson染色,观察肾脏病理变化;比色法测定肾组织丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量;免疫组织化学方法测定α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达。结果：UUO组与假手术组大鼠比较,肾脏病理改变加重,肾组织MDA含量明显升高（P〈0.01）,SOD含量下降（P〈0.05）,肾组织α-SMA和TGF-β1的表达显著增加（P〈0.01）。缬沙坦治疗组与UUO组大鼠比较,肾间质纤维化减轻（P〈0.05）,肾组织MDA含量降低（P〈0.05）,SOD含量升高（P〈0.05）;同时肾组织α-SMA和TGF-β1的表达降低（P〈0.05）。结论：缬沙坦可通过减少UUO组肾组织脂质过氧化物的产生,增加抗氧化酶的含量,下调TGF-β1的表达,从而显著改善UUO所致的肾间质纤维化。     

补肾排毒合剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质MMP-9与TIMP-1基因表达的影响

目的：研究单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction，UUO）后大鼠肾间质MMP-9、TIMP-1基因的表达变化，探讨补肾排毒合剂对肾间质纤维化的保护作用。方法：采用UUO诱导肾间质纤维化的动物模型，将大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（UUO组）和补肾排毒合剂治疗组（REM组），用RT—PCR技术检测肾组织在术后3、10、20、30d MMP-9、TIMP-1的基因表达。结果：UUO组TIMP-1 mRNA的表达明显高于Sham组（P〈0．01），REM组TIMP-1 mRNA表达均明显低于UUO组（P〈0、01）。MMP-9 mRNA在UUO术后明显升高，第10天达到高峰，继之下降。REM组10d后下降幅度较小，在20、30d时间点高于UUO组（P〈0，01）。结论：补肾排毒合剂影响MMP-9／TIMP-1的基因表达，从而促进了ECM的降解过程，延缓肾间质纤维化的进展。     

骨形态发生蛋白-7在幼年大鼠肾小管间质损伤中的表达及意义

目的：探讨单侧输尿管梗阻（UUO）幼年大鼠肾间质纤维化形成过程中骨形态发生蛋白-7（BMP-7）的表达趋势及其与转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的相关关系;观察血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）和血管紧张素受体拮抗剂（ARB）的干预作用。方法：采用单侧输尿管结扎制备UUO模型。3～4周龄幼年Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组和干预组。于实验第3、7、14、28天取大鼠8只处死。HE及Masson染色观察肾组织的病理改变;免疫组化半定量检测各组大鼠肾组织BMP-7、TGF-β1及α-SMA蛋白表达。了解BMP-7与TGF-β1、α-SMA、肾间质纤维化程度的关系。结果：随梗阻时间延长,模型组BMP-7表达逐渐下降,TGF-β1、α-SMA表达进行性增高,干预组BMP-7表达较模型组显著增加（P〈0.05）;TGF-β1、α-SMA表达较模型组明显减少（P〈0.05）。模型组肾小管间质TGF-β1、α-SMA表达明显增高（P〈0.05）,BMP-7表达显著减少（P〈0.05）。与模型组相比,干预组肾小管间质TGF-β1、α-SMA表达显著减少（P〈0.05）,而BMP-7表达显著增多（P〈0.05）。BMP-7与TGF-β1、α-SMA、肾间质纤维化程度成负相关（r分别为-0.844、-0.787、-0.952,P均〈0.01）。结论：BMP-7表达减少伴随着肾小管上皮细胞转分化出现,提示BMP-7可能具有维持小管上皮细胞表型作用。苯那普利联合氯沙坦可能通过下调TGF-β1、α-SMA蛋白的异常高表达,上调BMP-7蛋白的异常低表达,直接或间接负性调控肾小管上皮细胞转分化,阻止肾间质纤维化进展。     

杜仲对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的：观察杜仲对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠肾间质纤维化的影响并探讨其可能机制。方法：采用单侧输尿管梗阻（UUO）肾间质纤维化模型,将32只大鼠随机分为4组,每组8只,即假手术组、模型组、替米沙坦组和杜仲组。替米沙坦组给予替米沙坦10 mg.kg-1.d-1、杜仲组给予杜仲6 g.kg-1.d-1治疗。术后2周处死大鼠,收集血清测定尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）,光镜下观察Masson和HE染色肾间质的病理改变,并应用免疫组织化学方法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和纤维连接蛋白（FN）的表达。结果：模型组与两治疗组大鼠血清Scr、BUN上升,与假手术组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;模型组、杜仲组、替米沙坦组肾间质纤维化程度均较假手术组明显增高（P〈0.05）;模型组α-SMA、FN的表达增加,与假手术组相比差异有统计学意义（P〈0.01）;杜仲组与模型组相比,α-SMA、FN的表达下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;杜仲组与替米沙坦组各指标比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：杜仲能降低UUO大鼠BUN、Scr水平,改善肾功能;能够抑制α-SMA和FN在UUO大鼠肾组织中表达上调,减少UUO大鼠肾间质纤维化面积。     

依普利酮对大鼠单侧输尿管梗阻模型肾间质纤维化的影响

目的：研究依普利酮对大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）模型肾间质纤维化的影响,探讨依普利酮的抗肾间质纤维化作用机制。方法：42只雄性Wistar大鼠随机分成假手术（SO）组、UUO组和UUO＋依普利酮治疗组（T-UUO组,依普利酮100mg.kg-1.d-1）。于术后7d、14d分别处死各组7只大鼠。免疫组织化学法测定α-平滑肌肌动蛋白（α-smoothmuscle actin,α-SMA）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）、单核细胞/巨噬细胞-1（monocytes/macrophages-1,ED-1）,及增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen,PCNA）的表达。结果：UUO组肾间质α-SMA、MCP-1、ED-1、PCNA的表达较SO组增加（P〈0.05）;在术后各时间点,使用依普利酮治疗的T-UUO组大鼠肾间质α-SMA、MCP-1、ED-1、PCNA的表达较UUO组显著减少（P〈0.05）,但仍高于SO组（P〈0.05）。结论：依普利酮可通过降低α-SMA和MCP-1表达、抑制单核/巨噬细胞浸润和和系膜细胞增生,减轻肾间质纤维化。     

美沙拉嗪对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质NF—kB和TGF—β1表达的影响

目的观察单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质核因子-kB（NF-kB）、转化生长因子β1（TGF-β1）的表达变化,探讨美沙拉嗪干预后对其表达的影响。方法将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组（SOR组）、模型组（UUO组）、美沙拉嗪治疗组（MES组）,每组10只。建立单侧输尿管梗阻大鼠模型72h后灌胃给药：MES组给予美沙拉嗪（200mg·kg-1·d-1）灌胃给药;SOR组、UUO组给予等量生理盐水灌胃给药。建模成功后第10天检测各组血肌酐、尿素氮,并取梗阻侧。肾组织,行HE及Masson染色观察肾脏病理变化;免疫组织化学检测NF-xBp65和TGF-β1在肾间质的表达和变化。结果①UUO组术后第10天梗阻侧肾脏肾小管间质损害指数明显高于SOR组（P〈0．01）,MES组则低于UUO组（P〈0．05）。②UUO组大鼠。肾间质NF-kB p65及TGF-β1表达增加,明显高于SOR组（P〈0．01）,MES组则低于UUO组（P〈0．05）。结论单侧输尿管梗阻大鼠模型肾脏存在肾小管间质的炎症损伤和纤维化,美沙拉嗪通过抑制NF-kB p65和TGF-β1表达而减轻肾间质炎性损害和纤维化。     

甘草酸二胺对输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用及机制

目的：探讨甘草酸二胺对肾间质纤维化的作用及其机制。方法：以Wistar大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）为模型，在不同的时间点（7d、14d、28d）观察梗阻侧肾间质纤维化指数；致纤维化的转化生长因子β1（TGF-β1）的表达情况；肾皮质中与肾脏纤维化相关的Smurf2、Smad7信号蛋白等的mRNA及蛋白表达。结果：（1）随着梗阻时间的延长，肾间质纤维化程度逐渐加重，Smurf2基因和蛋白质明显上调，呈时间依赖性（P〈0．01）；Smad7蛋白呈时间依赖性下调（P〈0．01），Smad7基因在各个时间点无明显变化；TGF-β1基因在UUO后第7d达高峰，此后逐渐下降，但仍然高于假手术组（P〈0．01）。（2）甘草酸能改善UUO所致的肾间质纤维化程度（P〈0．01），下调肾脏组织TGF-β1基因的表达（尸〈0．01）；减少Smurf2基因和蛋白质的表达，同时上调TGF-β1信号传导中抑制性因子Smad7的表达（P〈0．01）。结论：甘草酸二胺能保护UUO所致的肾间质纤维化损伤。其可能的作用机制为减少Smurf2核酸和蛋白质的表达，增加抗纤维化作用的Smad7蛋白表达；减少TGF-β1表达，阻止TGF-β1信号传导，从而阻断肾间质的纤维化。     

金雀异黄素对糖尿病大鼠肾皮质SMemb表达及细胞外基质的作用

目的探讨金雀异黄素(Gen,5,7,4’-三羟异黄酮,又称染料木黄酮)对糖尿病 (DM)大鼠肾组织系膜细胞(MC)表型和细胞外基质的作用。方法雄性SD大鼠45只,分为(1) 正常对照组:10只,普通鼠饲料自由饮食;(2)DM组:再分为4周组9只,8周组8只,普通鼠饲料自由饮食;(3)DM+Gen灌胃组:同样再分为4周组10只,8周组8只,普通鼠饲料自由饮食及 Gen 30 mg．kg-1·d-1。于实验4周、8周末禁食12 h,检测空腹血糖(FBG)、BUN、Scr,肾组织非肌肉型肌球蛋白重链(SMemb)mRNA表达、纤连蛋白(Fn)／肾重及基质金属蛋白酶(MMP)-2／组织基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-I沉积结果。结果 DM大鼠FBG、BUN、Scr、Fn／肾重均高于正常对照组,以8周时最为显著(P<0．01);MMP-2／TIMP-1免疫组化半定量比值显著降低(P< O．01);SMemb mRNA／GAPDH mRNA半定量比值高于正常对照组,于4周达高峰,8周时下降 (0．794±0．037比0．708±0．029)。Gen干预后与同期DM组相比,肾功能部分恢复,SMemb mRNA／ GAPDH mRNA比值明显缩小(P<0．01);Fn／肾重也显著低于DM组(P<0．01);MMP-2／TIMP-1 比值与同期DM组相比也有显著增加(分别P<0．01或<0．05)。结论金雀异黄素可以减轻链脲佐菌素所诱导DM大鼠的肾皮质SMemb的表达,提高MMP-2／TIMP-1比值,改善糖尿病模型大鼠肾功能,可能有延缓糖尿病肾病(DN)进展的作用。     

Histone methyltransferase MLL1 accelerates the development of renal fibrosis via promoting the epithelial-mesenchymal transition of HK-2 cells

Objective To investigate the possible effects of histone methyltransferase MLL1 on renal interstitial fibrosis and epithelial-mesenchymal transition (EMT). Methods Forty-two male SD rats were randomly divided into normal group, sham operation group and unilateral ureteral occlusion (UUO) group, and then UUO group was further divided into group 1 d, 1 week, 2 week, 3 week and 4 week after operation. The expression of MLL1, E-cadherin, α-SMA, Vimentin and Col3α1 in UUO rat kidney tissue as well as TGF-β1 stimulated HK-2 cells were detected by real-time PCR and Western blotting. siRNA-MLL1 plasmids was used to inhibit the expression of MLL1 and the protein levels of MLL1, α-SMA, Vimentin, E-cadherin, Col3α1 and H3K4me3 induced by TGF-β1 stimulation were detected by Western blotting. The level of H3K4me3 in promoter region of EMT related genes was observed by chromatin immunoprecipitation (CHIP). Results Compared with normal and sham operated groups, the loss of renal function in UUO group was more obvious with the obstruction time (P＜0.05). The renal fibrosis was most obvious 1 week and 2 weeks after the rats underwent the UUO operation (all P＜0.05), with the highest protein expressions of MLL1, E-cadherin, α-SMA, Vimentin and Col3α1 (all P＜0.05). Compared with the control group, 3 ng/ml TGF-β1 induced the highest expression of MLL1 and the most obvious EMT in HK-2 cells (all P＜0.05). Moreover, the EMT and the high level of H3K4me3 in HK-2 triggered by TGF-β1 were all inhibited by siRNA-MLL1 plasmids transfection (all P＜0.05). Conclusions MLL1 can enhance the occurrence of EMT induced by TGF-β1 in HK-2 cells by increasing the level of H3K4me3 in the promoter region of α-SMA and Vimentin.     

骨形成蛋白7在糖尿病大鼠肾组织中的表达及意义

目的 观察糖尿病大鼠肾组织中骨形成蛋白7(BMP-7)的表达及探讨其在糖尿病肾病中的可能作用。方法 将大鼠分为糖尿病组及正常对照组，分别在第30、60、90、120、150及180 d测定各组的血糖、Scr、24 h尿白蛋白、尿肌酐(Ucr)水平。以HE、PASM染色及Col Ⅳ蛋白表达衡量肾脏病理改变。用免疫组化及RT-PCR方法检测肾组织中BMP-7、TGF-β1的蛋白及mRNA表达水平。 结果 糖尿病组各时间点血糖、尿白蛋白量(24 h)均明显高于对照组(P < 0.01)。糖尿病组伴随病理改变的加重和Col Ⅳ表达的逐渐增强，BMP-7蛋白及mRNA水平(A%，30 d 95.87±1.19；180 d 26.43±1.26)逐渐降低，与对照组(A%，30 d 98.64±0.80；180 d 98.80±0.49)相比，差异有统计学意义(P < 0.01或P < 0.05)；相反，肾组织中TGF-β1的mRNA(A%，30 d 40.26±0.98； 180 d 102.12±6.45)及蛋白水平较对照组显著增加(P < 0.01)。BMP-7与TGF-β1的蛋白及mRNA表达水平均呈显著负相关(P < 0.01)。结论 BMP-7可能是维持肾脏功能稳定的一个重要因子。BMP-7在糖尿病肾病中具有与TGF-β1相反的作用，其水平下降可能参与了糖尿病肾病早期小管间质的损伤。     

冬虫夏草通过诱导血色素加氧酶-1表达抑制肾小管间质纤维化

目的：观察冬虫夏草对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）模型大鼠肾小管间质纤维化进展的保护作用。方法：72只雄性清洁级SD大鼠随机分为4组：假手术组,UUO模型组,UUO加冬虫夏草治疗组,UUO加冬虫夏草和血色素加氧酶抑制剂卟啉锌[（zinc（a）protoporphyrinη,znpp）]治疗组。各组大鼠分别于术后（建模后）第3、7、14天分批处死,留取手术侧（模型组梗阻侧）肾脏组织。采用HE、Masson染色、荧光定量PCR、免疫组织化学染色评价肾小管间质纤维化损伤程度并检测肾脏组织血色素加氧酶-1（hemoglobin oxygenase-1,HO-1）,α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle ac-tin,α-SMA）mRNA及蛋白表达变化情况。结果：冬虫夏草治疗组相对于UUO模型组,肾脏病理损伤及进展程度明显减轻且HO-1的表达上调,α-SMA的表达下调（P〈0.05）,而冬虫夏草加HO-1抑制剂znpp后,以上作用明显减弱。结论：冬虫夏草可以通过诱导血色素加氧酶的表达减轻肾小管间质纤维化程度。     

Inhibition of Src kinase can ameliorate renal interstitial fibrosis in unilateral ureteral obstruction mice

Objective To investigate the effect and mechanism of Src kinase in renal interstitial fibrosis of unilateral ureteral obstruction (UUO) mice. Methods Male C57BL/6J mice were randomly divided into 4 groups, including sham operation group (n=8), sham operation+PP2 group (n=8), UUO operation group (n=8) and UUO operation+PP2 group (n=8). The mice were injected 2 mg/kg PP2 by intraperitoneal everyday after surgery in sham+PP2 group and UUO+PP2 group. PP2 dissolved in 1% DMSO (formulated with normal saline). Sham and UUO group were given equal 1% DMSO. The mice were sacrificed at 7th day. Renal collagen was observed with Sirius red stain. The activities of Src, protein kinase B (PKB, AKT), p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK), extracellular signal-regulated kinase (ERK) and the protein expressions of α-smooth muscle actin (α-SMA) and fibronectin (FN) were detected by Western blotting. The expression of collagen I (COLⅠ) was detected by immunohistochemistry and the expressions of matrix metalloprotein 9 (MMP-9), tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP-1), transforming growth factor-β1 (TGF-β1), monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1), interleukin-6 (IL-6) were measured by ELISA. Results Compared with sham mice, UUO mice on 7th day displayed obvious renal fibrosis. Meanwhile, UUO mice had increased expressions of COLⅠ and FN, and activities of AKT, ERK and p38 MAPK (all P＜0.05). Their renal expressions of α-SMA, TGF-β1, MMP-9, TIMP-1, MCP-1 and IL-6 were also raised (all P＜0.05). Compared with those in UUO group, in UUO+PP2 group the activities of Src, AKT, p38 MAPK and ERK, and expressions of TGF-β1, MCP-1 and IL-6 decreased (all P＜0.05). Additionally, expressions of COLⅠ, FN and α-SMA, collagen deposition and renal fibrosis receded in UUO+PP2 group (all P＜0.05). However, the expressions of MMP-9 and TIMP-1 were not influenced by PP2 treatment. Conclusions Src kinase promotes myofibroblasts accumulation and inflammatory reaction through activating its downstream signaling pathway in the progressing of renal interstitial fibrosis.     

鞘内注射米诺环素对骨癌痛大鼠脊髓水平酸敏感离子通道蛋白1a表达的影响

目的 探讨鞘内注射米诺环素对骨癌痛(bone cancer pain,BCP)大鼠脊髓水平酸敏感离子通道蛋白1a(acidsensing ion channel 1a,ASIC1a)表达的影响. 方法 选择雌性SD大鼠(体重180～220 g),采用随机数字表法分为4组:假手术+生理盐水组(Ⅰ组)、假手术+米诺环素组(Ⅱ组)、BCP+米诺环素组(Ⅲ组)和BCP+生理盐水组(Ⅳ组).①于造模前1d及造模后3、5、7、10、14、18d测定大鼠(每组选8只)自由行走痛行为评分,同时测定大鼠机械缩足反射阈值(paw withdrawalmechanical threshold,PWMT)至14 d;②于造模前1d及造模后3、5、7、10、14、21 d同一时段随机处死大鼠(每组选4只),取腰段脊髓,采用Western blot法检测ASIC1a的表达;③于造模后1、3、7、14、21 d,采用免疫荧光技术观察大鼠(每组选4只)患侧脊髓ASIC1a和小胶质细胞标记物[离子钙接头蛋白分子1(ionized calcium binding adapter 1,Iba-1)]免疫反应阳性产物的共表达. 结果 ①与Ⅰ组和Ⅱ组比较,造模后14、18dⅢ组、Ⅳ组自由行走痛行为评分明显升高(P＜0.01);造模后5d时Ⅲ组、Ⅳ组PWMT开始下降(P＜0.01),至7、14 d维持在低水平(P＜0.01);与Ⅳ组比较,Ⅲ组PWMT在造模后7、10、14 d均较高(P＜0.05).②与Ⅰ组和Ⅱ组比较,Ⅲ组、Ⅳ组从造模后3d开始ASIC1a表达上调(P＜0.01),于14 d达到高峰(P＜0.01);与Ⅳ组比较,Ⅲ组在造模后5、7、10、14、21 d ASIC1a表达量均较低(P＜0.05).③与Ⅰ组和Ⅱ组比较,Ⅲ组、Ⅳ组在造模后3、7、14、21 d脊髓背角ASIC1a阳性细胞数和活化的小胶质细胞数均较高(P＜0.05),未发现双标细胞;与Ⅳ组比较,Ⅲ组大鼠脊髓ASIC1a阳性细胞数和活化的小胶质细胞数均明显降低(P＜0.01). 结论 大鼠BCP的形成和维持可能与ASIC1a有关;鞘内注射米诺环素可以减轻大鼠的机械性痛觉过敏,其作用可能是通过抑制脊髓ASIC1a的表达实现的.     

黄芪当归合剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏血管活性物质变化的影响

目的 本研究通过观察黄芪当归合剂(A&A)对单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾组织血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)水平及一氧化氮合酶(NOS)的影响，以进一步揭示A&A抑制肾纤维化机制。方法 Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)、UUO和UAA(UUO+A&A)组，造模后0、3、7、10 d分析各组肾脏中NO、Ang-Ⅱ、ET-1水平和NOS活性及3种NOS的表达。结果 (1)造模后UUO组的Ang-Ⅱ和ET-1水平持续增高；A&A仅在第3天时降低Ang-Ⅱ水平(P < 0.05)。(2)造模后UUO组的NO浓度在第10天时才明显增高；而UAA组中NO浓度逐渐增高，第3天时明显高于UUO组(P < 0.05)。(3)UUO组内皮型eNOS在髓质血管内表达增高，且UAA组与UUO组间没有显著性差异。第3天时UAA组神经型nNOS表达低于UUO组(P < 0.05)。UAA组cNOS的活性明显高于Sham和UUO组。诱导型iNOS表达和活性3组间差异均无统计学意义。结论 梗阻性肾病中，A&A在早期降低肾内Ang-Ⅱ水平、且持续增强eNOS活性使NO产生增加，从而可能降低血管张力、改善肾脏的缺血及缺氧状态，减轻肾间质纤维化。     

人arresten基因转染对自体移植静脉内膜增生的影响

目的:探讨体内转染arresten基因对自体移植静脉内膜增生的影响。方法:建立大鼠自体静脉移植模型。血管吻合术前，用脂质体介导重组质粒pSecTag2-AT（Ⅰ组），空载体pSecTag2转染（Ⅱ组）移植血管，等体积脂质体溶液处理移植血管(空白对照组，Ⅲ组）。各组动物均于4周后切取移植血管，RT-PCR检测移植血管中arresten mRNA的表达；常规HE，Verhoeff弹力纤维染色；计算机图象分析检测移植静脉血管内膜及中膜面积、厚度；免疫组化检测移植血管内膜α-SMA及PCNA的表达；Western blot检测TGF-β1蛋白的表达。结果:Ⅰ组转染的移植静脉中有目的基因mRNA的表达, 而Ⅱ、Ⅲ组无Ⅰ组内膜、中膜面积小均于Ⅱ组和Ⅲ组，差异有显著性（P<0.05）。而内膜面积/中膜面积3组间无统计学差异（P>0.05）；Ⅰ组内膜厚度小于Ⅱ组和Ⅲ组，组间比较有统计学差异（P<0.01）；α-SMA染色表明增生内膜中的细胞是血管平滑肌细胞；PCNA阳性细胞数及表达指数Ⅰ组均低于Ⅱ组和Ⅲ组（P<0.05）；Ⅰ组TGF-β1蛋白的表达明显低于Ⅱ组和Ⅲ组。结论:移植血管转染arresten基因，可有效抑制自体移植静脉内膜的增生，在防治血管移植术后再狭窄方面显示出良好的临床应用前景。     

Effect of intermedin on microvascular injury of unilateral ureteral obstruction rats

Objective To observe the effect of intermedin(IMD) on microvascular injury of renal fibrosis in unilateral ureteral obstruction (UUO) rat model. Methods Seventy-two male Wistar rats were randomly divided into two groups: the sham - operation group (n=24) underwent the left ureteral dissection, the other 48 rats were made as unilateral ureteral obstruction models and sub - divided into model group(UUO, n=24) and IMD group (n=24). At the 7, 14, 21, 28 day after the operation, 6 randomly - selected rats from each of the three groups respectively were blooded by abdominal arotic and their obstructive kidneys were taken out. The renal histopathological changes were observed through HE and Masson staining, the contents of BUN, Scr and cystatin C (CysC) of the obstructive kidneys were determined, the expressions of transforming growth factor - β1 (TGF - β1), α-SMA, bone morphogenetic protein-7 (BMP-7), E-cadherin, thrombospondin 1 (TSP-1) and vascular endothelial growth factor (VEGF) were detected by RT - PCR and immunohistochemistry. Results Compared with the sham-operated group, the pathological changes of kidney in the model group showed that the degree of fibrosis was obvious, tubular interstitial damage aggravated, the levels of BUN, Scr, CysC in the model group increased (P＜0.05), the mRNA expression and protein content of TGF-β1, α-SMA, TSP-1 increased (P＜0.05), while the levels of BMP-7, E-cadherin and VEGF decreased (P＜0.05). Compared with the UUO group, renal tubular damage, interstitial fibrosis in the IMD group were lighter, the levels of BUN, Scr, CysC in the IMD group were lower (P＜0.05), the mRNA expression and protein content of TGF-β1, α-SMA,TSP-1 were down-regulated (P＜0.05), while the levels of BMP-7, E-cadherin and VEGF were up-regulated (P＜0.05). Conclusion IMD can ameliorate the renal interstitial fibrosis, and the mechanism may be related to the fact that VEGF mediated by IMD can reduce vascular injury.     

依贝沙坦对单侧输尿管梗阻小鼠肾脏整合素连接激酶表达的影响及意义

目的研究依贝沙坦（Irb）对单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾脏整合素连接激酶（ILK）表达的影响,并探讨其与肾小管上皮间充质转化的关系。方法将雄性CD-1小鼠随机分为假手术对照组（C,n=20）、UUO组（UUO,n=40）和Irb治疗组（UUO＋Irb,n=40）,分别于术后1、3、7和14d处死小鼠。Masson染色观察肾间质纤维化。免疫组化检测小鼠肾组织ILK、上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达。Western印迹观察小鼠肾组织ILK蛋白表达。荧光实时定量PCR（real-time PCR）检测ILK、E-cadherin、α-SMA和纤连蛋白（FN）mRNA表达。结果与C组相比,UUO组术后1d ILK mRNA及蛋白表达均增高;术后3d FN mRNA表达上调,E-cadherin mRNA及蛋白表达明显减少,α-SMA mRNA及蛋白表达显著增加。与UUO组相同时间点比较,Irb治疗组ILK、FN及α-SMA表达均被显著抑制（P均＜0．05）;E-cadherin表达则增高（P＜0．01）。ILK蛋白表达与α-SMA蛋白表达呈正相关（r =0．707,P＜0．01）,与E-cadherin蛋白表达呈负相关（r=-0．919,P＜0．01）。结论Irb能减轻肾脏纤维化,抑制肾小管上皮细胞转分化,这可能与其抑制肾小管细胞ILK表达有关。