大肠癌中多药耐药相关蛋白表达的研究

目的:研究多药耐药相关蛋白在大肠癌的表达及其意义。方法:应用单克隆抗体 QCR-1行 LSAB免疫组化法研究42例大肠癌组织中多药耐药相关蛋白的表达水平。结果:大肠癌组织中多药耐药相关蛋白表达的总阳性率为69.1%,其中乳头状腺癌66.7%,管状腺癌70.0%,粘液腺癌69.2%,大肠癌不同病理类型与 MRP表达间无显著性差异(p>0.05);癌旁正常肠组织呈阴性表达;在大肠癌不同病理分期中,MRP 表达率癌阳性率分别为 Dukes'A 期87.5%,Dukes'B 期91.7%,Dkes'C 期60.0%,Dukes'D 期28.6%,大肠癌 Dukes'A 期与 Dukes'B 期MRP 表达率和 Dukes'D 期比较有显著性差异(p<0.01);大肠癌不同部位的 MRP 表达阳性率比较中,左半结肠62.5%,右半结肠63.7%,直肠73.9%,两者无显著性差异。结论:表明多药耐药相关蛋白是参与大肠癌多药耐药的重要因素,其表达与大肠癌病理分期相关。     

细胞周期素D1在大肠癌中的表达及意义

目的：探讨细胞周期素D1（CD1）与大肠癌的发生、进展及预后的关系。方法：收集24例手术切除的大肠癌标本,同时取距癌灶5cm以外的癌旁组织及10cm以外的正常组织,用原位杂交的方法检测癌组织、癌旁组织及正常组织中CD1mRNA的表达,同时结合临床病理资料进行分析。结果：24例大肠癌组织中CD1mRNA阳性9例,阳性率37．5％;癌旁组织仅有1例阳性,阳性率4．2％;正常组织未见阳性表达。癌旁组织和正常组织均与癌组织有显著性差异（P＜0．01）。CD1mRNA的表达在浸润至浆膜层组明显高于浸润至肌层组（P＜0．05）;有淋巴结转移组及晚期病变（Dukes B C D期）组亦明显高于无淋巴结转移及早期病变（Dukes A期）组（P＜0．05）。CD1mRNA的表达高低与年龄、性别、癌灶直径大小、分化程度及是否有远处转移无明显关系（P＞0．05）。结论：CD1mRNA过度表达与大肠癌的发生、发展及转移有关。     

Survivin基因在大肠癌中的表达与生物学特性的关系

目的　研究Survivin基因在大肠癌中的表达与生物学特性的关系。方法　免疫组织化学法检测 83例大肠癌组织及癌旁正常组织Survivin的表达。结果　Survivin在大肠癌组织中阳性表达率为 68.7% ,而在癌旁正常组织不表达 ,按Dukes分期 ,C、D期阳性率高于A、B期 (P <0 .0 5) ,低分化、中分化、高分化癌组织阳性率无差异 (P >0 .0 5) ,肿瘤直径大于 5cm与小于 5cm者阳性率无差异 (P >0 .0 5)。结论　Survivin基因在大肠癌中高表达 ,与Dukes分期相关 ,但与癌组织分化程度、肿瘤大小无关     

血管生成素-2与基质金属蛋白酶-7在大肠癌中的表达及意义

目的:研究血管生成素-2(Ang-2)及基质金属蛋白酶-7(MMP-7)蛋白在人大肠癌组织中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系．方法:应用免疫组化法检测40例大肠癌及其癌旁正常组织中Ang-2及MMP-7蛋白表达水平．结果:大肠癌组织中Ang-2蛋白表达阳性率为77．5％(31/40),明显高于癌旁正常组织 40％(16/40)(P=0．001);Ang-2表达水平与患者性别、年龄及癌组织的部位、大小、分化程度、淋巴结转移无关(P>0．05);与浸润深度, 远处转移及Dukes’分期相关(分别为P=0．007, P=0．023,P=0．008);大肠癌组织RMMP-7蛋白表达阳性率为85％(34/40),明显高于癌旁正常组织35％(14/40)(P=0．000)．MMP-7蛋白表达阳性率与Ang-2的表达相关(P=0．016)．结论:Ang-2蛋白可能通过促进MMP-7的表达从而促进了大肠癌的生长及转移．     

大肠癌中p16和PTEN蛋白的表达及临床意义

运用免疫组织化学法检测55例结直肠腺癌标本中p16、PTEN蛋白的表达.发现55例大肠癌原发灶的p16蛋白表达阳性率为70.91%,PTEN蛋白表达阳性率为69%.p16表达在较早期大肠癌(A、B期)中及无淋巴结转移大肠癌中阳性率明显升高(P均＜0.05);p16蛋白表达阳性率随大肠癌组织分化程度降低而下降,并与大肠癌浸润肠壁深度和Dukes分期的增加有关.PTEN 蛋白表达与大肠癌组织学分级呈正相关(P＜0.05).认为p16、PTEN蛋白联合检测可作为结直肠腺癌预后的预测指标.     

大肠癌免疫组化表达与临床病理的关系

目的:探讨大肠癌CEA、P53、nm23、Ki-67、MRP免疫组化表达特点和相互关系,及其与临床病理的关系．方法:回顾性分析2003-01／2006-07我院收治的73例大肠癌患者的临床病理及随访资料,并对其石蜡标本采用免疫组化SP染色法检测CEA、P53、nm23、Ki-67、MRP,分析其免疫组化特点及其与临床病理之间的关系．结果:CEA、P53、nm23、Ki-67、MRP在大肠癌中的阳性表达率依次为82．2％、68．5％、75.3％、84．9％和64．4％．CEA、MRP与大肠癌患者的各因素无统计学差异．P53、Ki-67和nm23与肿瘤的Dukes分期和淋巴结转移有关, P53、Ki-67在Dukes C、D期的阳性表达率(依次为82．8％和100％1明显高于Dukes A、B期者(59．1％和75．0％)(P<0．05),而nm23在Dukes C、D期的阳性表达率(58．6％)明显低于Dukes A、B期者(86．4％)(P<0．05)．CEA与nm23的表达呈明显的负相关(r=-0．296,P=0．011),而P53和Ki-67表达之间呈现明显的正相关(r= 0．308,P=0．008),其他各指标间的表达无相关性．nm23、P53和Ki-67与预后因素关系明显,nm23在生存期≥3 a患者的阳性表达率(92．9%)高于生存期<3 a者(71．2％)(P<0．05),而P53和Ki-67在生存期≥3 a患者的阳性表达率(依次为42．9％和64.3％)明显低于生存期<3 a者(74．6％和89．8％)(P<0．05)．结论:P53、Ki-67和nm23的表达与大肠癌的侵袭转移和预后密切相关．CEA可能是大肠癌的侵袭转移的促进因素．MRP所引起的耐药机制是一个相对独立的机制．CEA、P53、nm23、Ki-67可作为判断大肠癌恶性程度、侵袭转移以及预后的指标．     

CADM1表达下调与大肠腺癌发生发展的关系

目的探讨CADM1表达下调与大肠腺癌发生发展的关系。方法RT—PCR检测正常大肠组织、大肠腺瘤和大肠腺癌的CADM1mRNA表达;免疫组化法检测正常大肠组织、大肠腺瘤和大肠腺癌的CADMI蛋白表达。结果大肠腺瘤中CADM1表达无缺失或明显减少（P〉0．05）;部分大肠腺癌组织中CADM1表达下调,且有淋巴结转移患者比无淋巴结转移者更常见（P〈0．05）,Dukes’C期和Dukes’D期患者比Dukes’A期和Dukes’B期患者更常见（P〈0．05）。结论CADM1表达下调在大肠腺癌中常见,特别是在进展期大肠腺癌,因此,CADM1在大肠腺癌发病机制中可能发挥重要作用。     

血管内皮细胞生长因子及生长抑制因子4在大肠癌中的表达

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)及生长抑制因子4(ING-4)在大肠癌中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法选择经手术病理证实的68例大肠癌、20例大肠腺瘤及20例正常的肠黏膜组织,采用免疫组化法检测并比较各组VEGF及ING-4表达情况,分析二者与大肠癌患者临床病理特征及生存期的关系。结果 VEGF蛋白在大肠癌组、大肠腺瘤组及正常组中的阳性表达率依次下降(P<0.05、P<0.01),ING-4蛋白在大肠癌组、大肠腺瘤组及正常组中的阳性表达率依次升高(P<0.05)。VEGF蛋白在浸润浆膜外层的大肠癌组阳性率显著高于浸润肌层及浆膜层者(P<0.05),在Dukes C、D期大肠癌患者中的阳性率高于A、B期者(P<0.05),在发生淋巴结转移的大肠癌组阳性率高于无淋巴结转移者(P<0.05);ING-4蛋白在高、中分化大肠癌组阳性率显著高于低分化组(P<0.05),在Dukes A、B期大肠癌患者中的阳性率高于C、D期(P<0.05),在发生淋巴结转移的大肠癌组阳性率高于无淋巴结转移者(P<0.05)。VEGF阳性大肠癌患者3年生存率及5年生存率均显著低于阴性患者(P<0.05),ING-4阳性大肠癌患者3年生存率及5年生存率较阴性患者无显著差异(P>0.05)。结论 VEGF高表达与大肠癌浸润程度、Dukes分期、淋巴结转移及预后有关,ING-4低表达与大肠癌分化程度、Dukes分期及淋巴结转移有关,可以作为大肠癌的术前诊断、制订手术方案的及预测转移的重要指标。     

Notch-1与Jagged-1蛋白在大肠癌组织中的表达及其意义

目的探讨Notch-1与Jagged-1蛋白在大肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学PV-9000二步法检测大肠癌组织、癌旁组织及癌远端组织中Notch1与Jagged-1蛋白的表达,并分析Notch1与Jagged-1蛋白表达与临床病理参数的关系。结果Notch-1、Jagged-1蛋白在大肠癌中表达的阳性率明显高于癌旁组织及癌远端组织（P〈0．05）;大肠癌中Jagged-1蛋白表达强度与肿瘤组织学分级、Dukes分期及淋巴结转移密切相关（r=0．355、0．385、0．248,P均〈0．05）。大肠癌中Notch-1蛋白与Jagged-1蛋白表达呈正相关（r=0．305,P〈0．05）。结论Notch．1及Jagged-1蛋白可能在大肠癌发生发展中起重要作用。     

大肠癌血管内皮生长因子的表达及其意义

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）mRNA在大肠癌和癌周组织中的表达及其与临床特征之间的关系,为在分子水平干预肿瘤血管形成,预防大肠癌复发和转移打下基础。方法：采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）检测方法,对68例大肠癌手术标本癌和癌周组织中VEGF mRNA的表达水平进行了相对定量研究。结果：肿瘤组织中VEGF mRNA的表达率为67．6％（46／68）,癌周组织表达率为32．4％（22／68）;肿瘤组织中VEGF mRNA表达水平在浆膜浸润组,淋巴结转移,远处转移和Dukes D期组分别显著高于未侵及浆膜组,无淋巴结转移组,无远处转移和Dukes A,B,C期组;肿瘤组织中VEGF mRNA表达水平在肿瘤直径大的大肠癌组（＞5cm)与大小肠癌组（≤5cm)以及不同组织学分组组之间相比差异无显著性。结论：VEGF在大肠癌浸润和转移过程中发挥重要作用,肿瘤血管形成与大肠癌浸润和转移关系密切。     

肺腺癌患者胸水中肿瘤耐药相关基因蛋白的表达及临床意义

目的检测P-糖蛋白(P-gp)、肺癌耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)在肺腺癌及恶性间皮瘤患者胸水沉渣包埋组织中的表达及临床意义。方法采用S-P免疫组化方法,对63例未做放化疗的肺腺癌或恶性间皮瘤患者进行检测,记录其胸水沉渣包埋组织中P-gp、LRP、MRP的表达水平。结果肺腺癌患者胸水沉渣包埋组织中P-gp、LRP、MRP的阳性率均高于非肿瘤性胸水患者(P0.05);恶性间皮瘤患者胸水沉渣包埋组织中P-gp、LRP的阳性率均高于非肿瘤性胸水患者(P0.05),但两者MRP阴性率无显著差异(P0.05)。P-gp、LRP、MRP与肺腺癌患者年龄、组织分化程度及淋巴结转移无密切相关(P0.05)。结论肺腺癌及恶性间皮瘤肿瘤细胞对转运蛋白类耐药基因有较强的耐药性,检测Pgp、LRP、MRP的阳性表达对指导临床化疗方案的实施有重要意义。     

广东地区3870例大肠癌的临床流行病学特征

目的探讨广东地区大肠癌的临床特点和发病规律。方法总结分析广州南方医院和惠州市中心人民医院1985—2004年经病理确诊的3870例大肠癌的资料。结果3870例大肠癌患者中位年龄55．3岁。好发年龄为41～70岁。其中青年大肠癌（年龄≤30岁）204例,占5．3％。随年龄增长,直肠癌逐渐减少,而右半结肠癌逐渐增加。男：女为1．42：1。3870例共检测出3958个病灶,其中单病灶3783例（97．8％）,多病灶87例（2．2％）。3958个病灶部位分别位于直肠2243例（56．7％）,左半结肠717例（18．1％）,右半结肠998例（25．2％）。组织学分型为：管状腺癌2943例（76．0％）,乳头状腺癌256例（6．6％）,黏液癌425例（11．0％）,其他246例（6．4％）。青年大肠癌分化不良者占38．2％,而中年和老年大肠癌只占29．9％和14．6％,差异有统计学意义（P〈0．01）。确诊时Dukes分期A、B、C和D期分别占234例（6．0％）,1936例（50．0％）,1310例（33．9％）和390例（10．1％）,其中进展期癌（B、C、D期）共3636例,占94．0％。结论近20年问广东地区大肠癌的收治率逐渐增加,并随年龄增长,直肠癌比例逐渐减少,而右半结肠癌比例逐渐增加。半数大肠癌发生于直肠,其次为右半结肠和左半结肠。广东地区大肠癌已失去中国大肠癌既往的三大临床流行病学特点。     

结肠癌患者细胞凋亡与预后意义的初步研究

目的探讨促凋亡蛋白Bid在大肠癌、大肠腺瘤及正常肠黏膜组织的表达差异，了解其在大肠癌生物治疗中的价值。方法应用免疫组化MaxVision^TM快捷法检测正常肠黏膜18例、结肠腺瘤21例及结肠癌83例的Bid表达。结肠癌Dukes分期为A期22例、B期20例、C期20例及D期21例。表达程度采用半定量积分法。结果Bid在结肠腺瘤中阳性表达为95．2％，高于正常肠黏膜（72．2％）及结肠癌（72．3％），前者与后二者相比，差异显著（P〈0．05）。结肠癌DukesD期Bid阳性表达100％与A、B期（40．9％、55．0％）相比有极显著差异（P〈0．001），DukesD期且有28．6％高表达。在结肠癌的高表达DukesD级病例，虽Bid表达为强阳性但结肠癌细胞仍不受限制持续增殖。结论结肠癌的早期阶段（结肠腺瘤）中Bid阳性率高于结肠癌，说明细胞凋亡属于结肠癌变的早期现象。结肠癌细胞可能存在使抗瘤的T细胞及NK细胞发生免疫识别困难而致免疫逃逸的途经。     

广东地区大肠癌临床特征研究

目的探讨广东地区大肠癌临床特点和变化趋势。方法总结分析广东五家医院1990年至2004年经病理确诊的大肠癌6501例资料。结果6501例大肠癌患者中位年龄59岁，好发年龄为61～70岁。青年大肠癌的比例从7．1％下降到3．5％。男：女为1．47：1，男性多于女性；随年龄增长，男女比例逐渐上升，于60岁左右达高峰后下降，呈一单峰曲线。在直肠癌与结肠癌比例为1、1：1，其中降结肠以上占27．6％，但随年龄增长和年份推移，直肠癌逐渐减少，而右半结肠癌逐渐增加。组织学分型以管状腺癌为主，占76．0％。住院患者Dukes分期多为中晚期，进展期癌（Dukes B、C、D期）共占93．9％。结论广东地区大肠癌发病高峰年龄已接近西方国家；青年大肠癌比例下降；男女比例随年龄增长呈先升后降趋势；直肠癌比例逐渐减少，右半结肠癌比例逐渐增加，发病部位右移提示应重视全结肠镜检查。     

VEGF的表达与大肠癌组织生长、侵袭及转移的关系

目的:探讨血管内皮生长因子表达与大肠癌组织的生长、侵袭和转移的关系.方法:手术切除新鲜大肠癌组织、远癌组织标本各23份,结肠息肉16例,另外收集结肠癌患者45例.应用逆转录聚合酶链(RT-PCR)和ELISA法,对大肠癌组织和血清VEGF进行测定,并分析VEGF与大肠癌Dukes临床病理分期的关系.结果:23例大肠癌组血管内皮生长因子mRNA阳性率明显高于远癌组及结肠息肉组(65.22%vs 21.74%,18.75%,均P<0.01).根据Dukes临床病理分期,A和B期VEGFmRNA阳性为3例(37.5%),C与D期阳性有12例(80.0%),两者差异有显著性(P<0.05).45例结肠癌C和D期血清VEGF水平明显高于A和B期(716.71 229.39ng/L vs 312.30 103.61 ng/L),两者差异有显著性(P<0.01).结论:血管内皮生长因子可作为大肠癌生长、侵袭和转移的临床预后判断指标.     

异时大肠多原发癌7例报告

1993年1～12月，我们对97例大肠癌切除术后患者进行随访。发现异时大肠多原发癌7例。现报告如下。临床资料：本文97例大肠癌患者均经病理证实，行根治切除术。术后每3个月、半年后每6个月常规行纤维结肠镜检查1次，如有便血、梗阻症状则随时做相应检查。共发现异时大肠多原发癌7例，其中复查检出2例，因便血、梗阻症状复查检出5例。男6例，女1例；年龄41～74岁。首次癌位于乙状结肠3例．回盲部2例，直肠、结肠肝曲各1例；腺癌4例。未分化癌2例，黏液腺癌1例；Dukes分期B期3例，C期4例。再次癌位于回盲部3例，直肠2例，乙状结肠、吻合口各1例；腺癌5例，黏液腺癌2例；Dukes分期B期1例，C期5例，D期1例。首次癌与再次癌间隔时间7个月至10a，平均3．9a。     

小肠三叶肽在大肠癌中的表达及其意义

目的　探讨小肠三叶肽 (ITF)与大肠癌的发生、进展及预后的关系。方法　收集手术切除的大肠癌标本 ,同时取距癌灶 5cm以外的癌旁组织及 10cm以外的正常组织。用原位杂交法检测癌组织、癌旁组织及正常组织中ITFmRNA ,同时结合临床病理资料进行分析。结果　癌组织、癌旁组织及正常组织均有不同程度的ITFmRNA表达 ,三组间ITFmRNA表达比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。在结肠癌组织中 ,Dukes分期较高 (B、C、D期 )组的ITFmRNA表达 (0 .3 14±0 .119)明显低于Dukes分期较低 (A期 )组的表达 (0 .45 3± 0 .10 2 ) ,两者比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。但在癌旁和正常组织中 ,ITFmRNA的表达在不同Dukes分期组中的表达差异无显著性 (P>0 .0 5 )。不同分化程度组间ITFmRNA的表达差异亦无显著性 (P >0 .0 5 )。ITFmRNA的表达与是否有淋巴结转移及远处转移无密切相关 (P >0 .0 5 )。结论　ITFmRNA不仅表达于正常结肠粘膜 ,亦表达于癌旁和癌组织。ITF的表达在Dukes分期较高组低于分期较低组 ,且与分化程度有潜在的正相关 ,提示ITF可能与肿瘤的进展呈负相关     

p73、MMP-2在大肠癌中的表达

目的 检测p73、MMP-2基因在大肠癌组织中的表达,并研究其临床病理意义.方法 采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测p73、MMP-2在40例大肠癌中的表达水平.结果 ①Dukes A、B期大肠癌组织与对照组正常大肠黏膜组织p73、MMP-2的表达均有非常显著性差异（P＜0.01）;Dukes C、D期与A、B期p73、MMP-2的表达均有显著性差异（P＜0.05）.②p73在高、中分化腺癌组与低分化腺癌组阳性率表达无显著性差异（P＞0.05）;而MMP-2在高、中分化腺癌和低分化腺癌阳性率表达差异具有显著性（P＜0.05）.③p73、MMP-2在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组检出阳性率具有显著差异（P＜0.05）.结论 p73、MMP-2的表达与大肠癌临床病理特征和生物学行为存在密切关系,p73、MMP-2基因是大肠癌细胞增生活跃的重要影响因素.     

双向凝胶电泳与质谱技术分析Dukes B期大肠癌肿瘤与癌旁组织的差异蛋白质组学

目的研究Dukes B期大肠癌肿瘤与癌旁组织差异蛋白质组学。方法①应用双向凝胶电泳(2-DE)和质谱技术对大肠癌肿瘤与癌旁组织分离分析。②在鉴定出具有差异蛋白质中,选出2个蛋白质烯醇化酶(Enolase)、血红蛋白(Hemoglob in)行蛋白印记实验,验证2-DE结果。结果通过2-DE和质谱技术对大肠癌肿瘤与癌旁组织进行分离分析,21个蛋白质点在组织中的表达量差异显著。通过免疫蛋白印记实验进一步证明2-DE结果的准确性。结论 Dukes B期大肠癌肿瘤与癌旁组织蛋白质具有差异性,其中14个蛋白质点在肿瘤组织上调,7个下调。     

耐药相关蛋白在肺癌组织中的表达及意义

目的　探讨耐药相关蛋白在肺癌组织中的表达及意义。方法　应用免疫组化法检测治疗前 90例肺癌组织标本中 P-糖蛋白 (P- gp)、多药耐药相关蛋白 (MRP)、肺耐药蛋白 (L RP)、谷胱苷肽 S转移酶 (GST- π)、DNA拓扑异构酶 (Topo- )蛋白的表达 ;流式细胞术检测肺癌组织增值指数 (PI)、DNA指数 (DI)及细胞周期各时相分布。结果　非小细胞癌 (NSCL C组 ) P- gp、L RP表达明显高于小细胞癌 (SCL C)组 (P <0 .0 5 ) ,MRP+L RP共表达者高于 SCL C组 (P <0 .0 5 ) ;中、高分化癌组 P- gp、L RP表达高于 SCL C组 (P <0 .0 5 ) ,MRP表达高于低分化癌组 (P <0 .0 5 ) ;腺癌组 MRP、L RP、MRP+L RP、MRP+L RP+GST- π、MRP+L RP+P- gp+GST-π表达高于鳞癌组、SCL C组、低分化癌组 (P <0 .0 5 ) ,MRP+GST- π共表达者高于鳞癌组、低分化癌组 (P <0 .0 1)。P- gp与 Topo 蛋白表达呈正相关 (P <0 .0 5 )。MRP与肺癌组织增殖指数 (PI)、G2 / M期细胞比例呈正相关 (P <0 .0 5 ) ,与 G0 / G1 期细胞比例呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论　联检肺癌组织中耐药相关基因蛋白的表达有助于判断化疗疗效及预后。 P- gp、L RP、MRP、GST-π可作为判断肺癌细胞原发性耐药的指标。