肝癌患者外周血树突状细胞免疫功能的研究

目的 研究树突状细胞(DC)表面免疫分子HLA-DR及B2表达水平及其与DC免疫诱导能力相关性.并进一步探讨DC免疫功能在宿主免疫功能中的作用。方法 以健康成人(n=10)作为对照．检测临床确诊肝癌患(n=10)外周血DC表面免疫分子HLA-DR及B，表达水平及DC免疫诱导能力．结果 肝癌患DC表面HLADR及B2表达水平(6.7±1.6及6.1±1.1)明显低于对照组(10.7±1.4及9.6±1.2VOF,P<0.05).其DC体外诱导T细胞增殖能力(3100±120cpm)亦明显低于对照组(6200±90cpm,P<0.01)：以抗HLA-DR单抗及抗B2单抗完全封闭对照组DC表面HLA-DR及B2．则该DC诱导T细胞增殖能力(3900±1.5cpm)亦明显低于对照组(6200±90cpm．P<0.05)．结论 肝癌患DC表面HLA-DR及B2表达水平下降与DC免疫功能低下密切相关，DC免疫功能低下可能是肝癌(或许包括其它肿瘤)逃避宿主免疫监视的重要原因。     

肝癌患者外周血树突状细胞表面HLA-DR及B_7表达水平的研究

目的研究树突状细胞(DC)表面免疫分子 HLA-DR 及 B_7表达水平及其与 DC 免疫诱导能力相关性,并进一步探讨 DC 免疫功能在宿主抗肿瘤免疫无能中的作用。方法以健康成人(n=10)作为对照,检测临床确诊肝癌患者(n=10)外周血 DC 表面免疫分子 HLA-DR 及 B_7表达水平及 DC 免疫诱导能力。结果肝癌患者 DC 表面 HLA-DR 及 B_7表达水平(6.7±1.6及6.1±1.1)明显低于对照组(10.7±1.4及9.6±1.2,p<0.05),其 DC 体外诱导 T 细胞增殖能力(3100±120cpm)亦明显低于对照组(6200±90cpm,p<0.01):以抗 HLA-DR单抗及抗 B_7单抗完全封闭对照组 DC 表面 HLA-DR 及 B_7,则该 DC 诱导 T 细胞增殖能力(3900±105cpm)亦明显低于对照组(6200±90cpm,p<0.05)。结论肝癌患者 DC 表面 HLA-DR 及 B_7表达水平下降与 DC 免疫功能低下密切相关,DC 免疫功能低下可能是肝癌(或许包括其他肿瘤)逃避宿主免疫监视的重要原因。     

乙型肝炎相关肝癌外周血树突状细胞负载肿瘤抗原前后免疫功能的变化

目的探讨肝癌患者外周血单个核细胞(PBMC)来源树突状细胞(DC)表面分子表达及负载肿瘤抗原前后免疫功能变化与免疫逃逸的关系。方法分离18例乙型肝炎相关原发性肝癌、11例乙型肝炎肝硬化患者和10名健康献血者PBMC,体外培养,并加入重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)诱导DC。以共聚焦显微镜和扫描电镜观察形态,以流式细胞仪检测DC表面人类白细胞抗原(HLA)-DR、CD1a、CD80、CD83、CD86等分子表达水平。以HCCLM6肝癌细胞株制备肿瘤抗原,分别负载3种DC,最后以混合淋巴细胞反应(MLR)测定DC负载前后刺激同种异型T淋巴细胞增殖能力,并测定MLR上清液中IL-12的含量。结果肝硬化和肝癌组PBMC、DC得率低于正常组(P<0.05);HLA- DR、CD1a、CD80和CD86等分子表达水平也低于正常组(P<0.05);负载肿瘤抗原前肝硬化和肝癌组刺激同种异型T淋巴细胞增殖能力和MLR上清液中IL-12含量明显低于正常组,负载肿瘤抗原后3组均提高, 并以肝硬化组提高最为明显,但IL-12含量仍低于正常组。结论DC表型和功能缺陷可能是乙型肝炎病毒产生免疫耐受和肝癌细胞免疫逃逸的重要机制。肝硬化患者DC仍有一定功能。     

人脐血和外周血树突状细胞诱导抗肝癌活性

目的　观察人脐血和外周血树突状细胞 (dendriticcells ,DC)的生物学特性及其对效应细胞体外杀伤人肝癌细胞株BEL 740 2 (B)的影响。方法　免疫组化和MTT法检测DC的生物学特性。抗肿瘤实验则分两大组 ,人外周血DC组为B +LAK +DC ,人脐血DC组为B +DC CTL ,检测效应细胞的细胞毒活性。结果　①人外周血和脐血DC均高表达HLA ABC、HLA DR、HLA DQ、CD54和S 10 0蛋白 ;刺激淋巴细胞增殖的效应均比对照组明显增高 (P <0 0 1) ,两种来源DC无显著性差异 (P >0 0 5)。②人外周血DC组和脐血DC组的细胞毒活性均为实验组 >对照组 (P <0 0 1) ,人脐血DC组 >人外周血DC组 (P <0 0 1)。结论　人外周血和脐血DC均为形态和功能成熟的DC ,均能明显增强效应细胞杀伤肝癌细胞的活性 ;而经肿瘤抗原致敏DC诱导的特异性CTL杀伤活性更强。提示临床上可根据患者的具体情况选择DC的来源     

肝癌患者外周血树突状细胞免疫功能的研究

目的研究树突状细胞(DC)表面免疫分子 HLA-DR 及 B_7表达水平及其与 DC 免疫诱导能力相关性,并进一步探讨 DC 免疫功能在宿主免疫功能中的作用.方法以健康成人(n=10)作为对照,检测临床确诊肝癌患者(n=10)外周血 DC 表面免疫分子 HLA-DR 及 B_7表达水平及 DC 免疫诱导能力.结果肝癌患者 DC 表面 HLA-DR 及 B_7表达水平(6.7±1.6及6.1±1.1)明显低于对照组(10.7±1.4及9.6±1.2 VOF,P<0.05),其 DC 体外诱导 T细胞增殖能力(3100±120cpm)亦明显低于对照组(6200±90cpm,P<0.01);以抗 HLA-DR 单抗及抗 B_7单抗完全封闭对照组 DC 表面 HLA-DR 及 B_7。则该 DC 诱导 T 细胞增殖能力(3900±1.5cpm)亦明显低于对照组(6200±90cpm,P<0.05)。结论肝癌患者 DC 表面 HLA-DR 及 B_7表达水平下降与 DC 免疫功能低下密切相关,DC 免疫功能低下可能是肝癌(或许包括其它肿瘤)逃避宿主免疫监视的重要原因。     

慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞功能的研究

目的研究慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞(DC)的免疫功能.方法从慢性乙型肝炎患者外周血中分离单个核细胞,用无血清培养法分离培养DC,用流式细胞仪检测DC表型,用液闪计数仪观察DC对T细胞的增殖作用,用ELISA法检测混合淋巴细胞反应(MLR)中细胞因子的分泌水平.结果患者组DC的CD86的表达率为(70.2±5.2)%,明显低于正常人组(95.3±3.8)%,P＜0.01;其诱导T细胞增殖能力每分钟液闪计数cpm为10000±2000,明显低于正常人组(cpm为30000±3000),P＜0.01患者MLR中IL-12为(120.0±19.7)pg/ml,γ-干扰素为(799.0±161.3)pg/m1,明显低于正常人组的(280.0±41.1)pg/ml和(3359.0±635.4)pg/ml,P＜0.01.结论慢性乙型肝炎患者外周血DC免疫功能低下,并与DC表面CD86的表达率下降及DC分泌IL-12减少密切相关.     

慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞诱导特异性T淋巴细胞应答

目的 探讨慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞(Dc)是否诱导特异性T细胞应答。方法(1)将研究对象分为慢性乙型肝炎患者组、急性乙型肝炎痊愈组、健康志愿者组,分离各组研究对象的外周血单个核细胞(PBMC),细胞内细胞因子染色方法检测其对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异表位多肽乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)18-27的记忆性免疫应答;(2)培养慢性乙型肝炎患者DC,将负载有乙型肝炎抗原表位多肽的DC诱导特异的T细胞应答。采用细胞内细胞因子染色方法检测诱导的T细胞分泌的细胞因子,乳酸脱氢酶释放法测定诱导的T细胞杀伤活性。结果(1)急性乙型肝炎患者PBMC对HBcAg 18-27 CTL特异表位多肽存在记忆的免疫应答,其分泌干扰素-γ的CD8+T细胞占CD8+T细胞总数的(4.3±2.5)％,分泌白细胞介素-2的占总细胞数的(4.8±2.2)％,分泌肿瘤坏死因子-α占总细胞数的(4.6±2.3)％。而慢性乙型肝炎患者和健康志愿者对其记忆应答很低,与急性乙型肝炎患者比较差异有显著性,t值为2.508-3.305,P<0.05。(2)用多肽共孵育过的慢性乙型肝炎患者DC多次诱导的T细胞慢性乙型肝炎患者组,加肽孵育的靶细胞比例为30:1、10:1、3:1时,其杀伤率分别为(57.0±20.3)％、(49.5±20.2)％、(21.8±12.9)％,均高于对照组,表明慢性乙型肝炎患者DC可以诱导特异的T     

粒/巨噬细胞集落刺激因子及白介素-4增强肝癌患者树突状细胞免疫功能

树突状细胞 (ＤＣ)因其独特的免疫学特性 ,在诱导特异性抗肿瘤细胞免疫中起关键作用 ,细胞因子对ＤＣ免疫功能具调节作用[1] 。我们以粒 /巨噬细胞集落刺激因子(ＧＭ ＣＳＦ)及白介素 4(ＩＬ 4)联合刺激肝癌患者外周血ＤＣ ,研究探讨 ,ＧＭ ＣＳＦ和ＩＬ 4对ＤＣ表面免疫分子ＨＬＡ ＤＲ和Ｂ7 2表达水平及ＤＣ免疫功能的影响。材料和方法本院 1995～ 1996年临床确诊ＣｈｉｌｄＣ级原发性肝癌患者共 10例 ,男 9例 ,女 1例 ,年龄为 2 8～ 5 6岁 ,平均 48岁 ,均未接受任何抗肿瘤治疗。ＧＭ ＣＳＦ、ＩＬ 4、抗ＣＤ3 单克隆抗体(ＭｃＡｂ)及抗…     

自身免疫性甲状腺疾病树突状细胞和 HLA-DR 抗原的免疫组化研究

用ＡＢＣ免疫组化法研究桥本甲状腺炎（ＨＴ）和Ｇｒａｖｅｓ病（ＧＤ）患者甲状腺内的Ｓ１００蛋白阳性树突状细胞（ＤＣ）和ＨＬＡＤＲ（ＤＲ）抗原阳性甲状腺上皮细胞（ＴＥＣ）。发现ＨＴ和ＧＤ甲状腺内的Ｓ１００蛋白阳性ＤＣ较正常明显增多，且大多数ＤＣ与ＴＥＣ或浸润淋巴细胞密切接触。ＨＴ和ＧＤ的ＴＥＣ常见ＤＲ抗原异常表达，其主要分布在淋巴细胞浸润区。这说明ＤＣ异常增多、ＴＥＣ异常表达ＤＲ抗原可能与甲状腺自身免疫反应的启动和（或）延续有密切关系。     

自身免疫性溶血性贫血患者外周血树突状细胞数量及协同刺激分子表达

树突状细胞（DC）根据细胞来源、表型特点和功能可分为髓样Dc（mDC）和浆细胞样Dc（pDC），mDC表型为CD11c^＋CD^123，pDC表型为CDU C^-CD^＋123 u。在不同部位、不同微环境和不同细胞因子的刺激下可以发挥不同的功能特征。国外研究发现在自身免疫性溶血性贫血（AIHA）动物模型和AIHA患者的外周血中存在Th1／Th2细胞失衡，付蓉等在自身免疫性血细胞减少症患者体内也有类似的发现。为追溯Th1／Th2失衡的原因，我们在本研究中检测AIHA／Evans综合征患者外周血DC及其亚群数量，同时测定DC表面的协同刺激分子及其功能状态。     

大肠癌患者外周血树突状细胞免疫功能研究

本实验检测大肠癌患者外周血树突状细胞（ＤＣ）表面ＨＬＡ－ＤＲ及Ｂ７表达水平,并进一步探讨ＤＣ表面ＨＬＡ－ＤＲ及Ｂ７表达水平与ＤＣ免疫功能的相关性及其在肿瘤逃避宿主免疫监视中的作用及机制;１材料和方法１．１材料１９９６／１９９７本院病理确诊ＤｕｋｅＣ期大肠癌患者１１例,男８例,女３例,年龄３０岁～６５岁,平均４９岁,均未接受任何抗肿瘤治疗．健康成人１０例（本校学员）,男女各５例,年龄２０岁～２４岁,平均２１岁．１．２方法参照Ｔｈｏｍａｓ方法［１］分离及纯化,ＤＣ及Ｔ细胞,ＦＩＴＣ荧光素标记的抗ＣＤ…     

慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞HBV感染状态研究初报

有研究发现,树突状细胞(DC)的功能低下是引起慢性HBV感染的关键因素之一,治疗前DC功能状态对疫苗和细胞因子等治疗慢性HBv感染的效果有明显影响,我们通过在慢性HBv感染者PBMC中诱导分化DC,免疫组化法及原位杂交法检测DC内HBV标志(包括HBsAg、HBcAg和HBV DNA),以便为进一步研究DC的功能状态、导致HBV感染慢性化中DC     

肝细胞肝癌中血管内皮生长因子与浸润树突状细胞表达的相关性研究

研究肝细胞癌(HCC)中血管内皮生长因子(VEGF)的表达与浸润性树突状细胞(DC)的相关性。用免疫 组织化学方法研究45例HCC组织标本VEGF的表达及s-100阳性标记的DC数量,并探讨两者的相关性。在HCC 中VEGF的阳性表达和s-100蛋白阳性表达率分别为62．2％(28／45)和46．7％(21／45),VEGF及DC均与肝癌的转 移有关(P均<0．05);VEGF的阳性表达与DC的浸润程度呈负相关(P<0．05)。HCC组织中VEGF的表达与DC的 浸润程度呈负相关,两者在肝癌发生发展中均起重要作用。     

外周血树突状细胞中HCV复制的证据

HCV肝外复制导致机体抗病毒免疫力低下 ,可能是丙型肝炎慢性化原因之一。树突状细胞 (DCs)作为专职抗原提呈细胞 ,能够诱发特异性免疫反应 ,DCs 是病毒的最好靶位。选择HCV阳性患者 2 4例 ,分离其外周血树突状细胞 (PBDCs) ,应用RT PCR技术检测其中的HCV基因序列 ,2 4份样品中检测到 6份阳性 ,并且 ,2 4份样品中检测到 3份复制链HCVRNA。选择1例 ,分析其HCV准种在PBDC分布 ,结果显示 ,主要的氨基酸序列和高变区 1和糖蛋白E2 的理化特性均不同于血清中的病毒株。通过这些资料提示 ,在HCV的自然感染过程中 ,PBDCs成为一个HC…     

乙型肝炎肝硬化患者外周血树突状细胞亚群的鉴定及其临床意义

目的：探讨检测乙型肝炎肝硬化患者外周血树突状细胞（DC）亚群的临床意义。方法采用流式细胞分析技术检测42例乙型肝炎肝硬化患者、45例慢性乙型肝炎患者和30例健康人外周血 DC 细胞亚群和淋巴细胞亚群的构成,比较三者间的差异。结果乙型肝炎肝硬化患者外周血 DC1和 DC2百分数分别为（0.2±0.1）%和（0.2±0.04）%,慢性乙型肝炎患者为（0.3±0.1）%和（0.2±0.1）%,均显著低于健康人群[（0.4±0.1）%和（0.3±0.1）%, P＜0.01];13例 HBeAg 阳性乙型肝炎肝硬化患者外周血 DC2亚群细胞绝对计数为（5.62±1.28）个/μL,显著低于29例 HBeAg 阴性的乙型肝炎肝硬化患者[（8.75±2.32）个/μL,P＆lt;0.05],但是两者 DC1细胞水平无明显差别;乙型肝炎肝硬化患者外周血 CD4＋T 淋巴细胞和 CD8＋T 淋巴细胞计数分别为（588.4±124.2）个/μL 和（338.5±97.4）个/μL,均显著低于慢性乙型肝炎患者[（686.7±106.5）个/μL 和（432.1±102.6）个/μL,P＜0.05],而且乙型肝炎肝硬化患者和慢性乙型肝炎患者外周血 CD8＋T 细胞数均显著低于健康对照人群[（560.2±105.6）个/μL,P＜0.05]。结论乙型肝炎肝硬化患者外周血 DC1和 DC2数量减少,伴 CD8＋T 细胞数降低,可能是导致肝硬化形成的原因之一。     

原发性肝癌患者外周血中NK细胞亚群及杀伤功能的研究

目的对原发性肝癌患者外周血NK细胞数目、亚群及其杀伤功能进行检测,分析原发性肝癌外周血中NK细胞的特点及机制。方法临床确诊原发性肝癌(HCC)患者110例,健康对照69例,采用流式细胞仪检测外周血NK细胞的数目及亚群;将IL-2活化的PBMC与CFSE标记的K562细胞混合,流式细胞仪检测NK细胞的杀伤活性。结果 1)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期原发性肝癌患者外周血NK细胞占淋巴细胞的比率均显著低于健康对照(P均<0.01);2)与健康对照相比,Ⅰ、Ⅱ期原发性肝癌患者外周血CD56bright NK细胞占淋巴细胞的比率无显著变化(P>0.05),Ⅲ期原发性肝癌患者CD56bright NK细胞占淋巴细胞的比率显著升高(P<0.05);3)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期原发性肝癌患者外周血CD56dimNK细胞占淋巴细胞的比率显著低于健康对照(P均<0.01);4)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期原发性肝癌患者外周血NK细胞CD56bright/CD56dim NK cells值显著高于健康对照(P均<0.01);5)原发性肝癌患者外周血NK细胞裂解杀伤靶细胞K562细胞的活性与健康对照相比显著降低(P<0.05)。结论原发性肝癌患者外周血NK细胞数量显著降低,可...     

Ghrelin增强树突状细胞的免疫功能

目的 探讨Ghrelin能否调节树突状细胞(DC)的免疫功能.方法 自人外周血单核细胞制备DC;以TNF-α诱导DC成熟,然后以Ghrelin刺激DC;检测经Ghrelin刺激后DC表面B7-H1的表达和细胞因子的表达,并进一步检测该DC诱导T淋巴细胞增值能力.结果 Ghrelin下调TNF-a诱导的B7H1的表达,并进一步增强其诱导T淋巴细胞增殖活性;抗B7-H1抗体能增强该DC诱导T淋巴细胞增值活性;特异性的PKC抑制剂能逆转Ghrelin对DC免疫功能的调节.结论 Ghrelin通过抑制B7-H1表达增强DC的免疫功能,提示Ghrelin将可能在肿瘤和感染性疾病中发挥重要作用.     

肝癌患者外周血树突状细胞免疫功能低下

目的研究肝癌患者外周血树突状细胞（ＤＣ）表面免疫分子ＨＬＡＤＲ及Ｂ７表达水平及其与ＤＣ免疫功能的相关性．方法以健康成人（ｎ＝１０）作为对照，检测临床确诊中晚期肝癌（ＨＣＣ）患者（ｎ＝１０）外周血ＤＣ表面免疫分子ＨＬＡＤＲ及Ｂ７表达水平及ＤＣ免疫诱导Ｔ淋巴细胞增殖的能力．结果ＨＣＣ患者ＤＣ表面ＨＬＡＤＲ及Ｂ７表达水平（ＶＯＦ）为６７±１６及６１±１１，明显低于对照组（１０７±１４及９６±１２，Ｐ＜００５）．其ＤＣ体外诱导Ｔ细胞增殖能力（ｍｉｎ－１）为３１００±１２０，亦明显低于对照组（６２００±９０，Ｐ＜００１）．结论．ＨＣＣ患者ＤＣ表面ＨＬＡＤＲ及Ｂ７表达水平下降，并与ＤＣ免疫功能低下密切相关．     

人外周血树突状细胞体外培养与扩增的研究进展

树突状细胞是机体内功能最强的抗原递呈细胞，目前其已成为肿瘤生物治疗的热点。如何激活树突状细胞和得到大量树突状细胞是以树突状细胞为基础的肿瘤主动免疫治疗的关键所在。近来树突状细胞的体外培养扩增技术日益成熟，但仍存在树突状细胞大量扩增方法的最优化和树突状细胞的异质性问题。本文介绍了树突状细胞的生物学特性、体外培养方法，体外扩增及其影响因素。