人血清中牛磺酸的HPLC-荧光法测定方法学研究

目的：建立测定人血清中牛磺酸浓度的HPLC-荧光法。方法：以阿德福韦为内标,待测血清样品经乙腈沉淀,上清液加入荧光胺生成衍生化物,色谱柱为PhenomenexKromasilNH2柱,乙腈-水（47：53,磷酸调pH到4．0）为流动相,流速1．2ml／min,荧光检测波长275nm（激发波长）、420nm（发射波长）。结果：每个样品分析时间约10min,扣除血清中内源性牛磺酸,牛磺酸的线性范围为1．875～120．000μg／ml,日内、日间精密度的RSD均小于15％,低、中、高浓度（3．750、15.000、60．000μg／ml）的平均提取回收率分别为88．9％、96．O％和98．7％。结论：该法操作快速、简单、准确,可用于临床药代动力学的研究。     

HPLC法测定血浆中5-氟尿嘧啶水平

目的：建立快速测定人血浆中5-氟尿嘧啶（5-Fu）浓度的方法。方法：乙酸乙酯提取血浆中5-Fu，高压液相色谱法测定其浓度。色谱柱为YWGC18，流动相为0．03mol磷酸氢二钾（2．5：1），pH7．0，流速为1．0mL／min。紫外检测波长254nm。结果：分别在血浆低浓度（0．1μg／mL～5μg／mL）和高浓度（5μg/mL～40μg／mL）呈良好线性关系。5-Fu在5μg／mL、10μg／mL、40μg／mL、300μg／mL、500μg／mL5个浓度点日间平均回收率和RSD分别为95．2％、4．6％；90．5％、6．9％；95．9％、0．93％；107％、8．5％；106％、6．0％。结论：本方法快速、准确，适合于5-Fu临床用药浓度的观察及个体药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定复方阿司达莫人体血药浓度

目的：建立高效液相色谱法测定复方阿司达莫人体血药浓度。方法双嘧达莫色谱条件采用ODS C18（4．6mm×215;250mm ,5μm ）色谱柱;流动相甲醇-1％醋酸（25：75）;流速1．0 mL·min^-1;柱温30℃;检测波长285nm。水杨酸色谱条件ODS C18（3．9mm×150mm ,5μm）色谱柱;流动相为甲醇-1％醋酸（33：67）;柱温30℃;流速为1．0mL·min^-1;检测波长234nm。结果在0．05～8μg·mL^-1范围内,双嘧达莫最低定量限为0．05μg·mL^-1,线性关系良好（r＝0．9998,n＝6）,方法回收率80．14％～104．78％,低、中、高三种浓度质控样品的日内、日间变异小于2．5％;在0．1～8μg＆#183;mL -1范围内,水杨酸最低定量限为0．1μg·mL^-1,线性关系良好（r＝0．9999,n＝6）,方法回收率95．19％～100．06％,低、中、高三种浓度质控样品的日内、日间变异小于2．5％。结论该方法定量准确,灵敏度高,适用于复方阿司达莫人体药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定外周血BPDE-DNA加合物的含量

【目的】建立高效液相色谱（high performance liquid chromatographv,HPLC）紫外检测法测定反式二羟基环氧苯并（a）芘[（＋）-anti-benzoa）pyrene diol-epexide,BPDE]在人体内形成的BPDE—DNA加合物的含量,对其质量进行控制。【方法】采用Kromasil—C18柱（150mm×4．6mm,5μm）为分析柱,以甲醇-水-磷酸（80：20：0．1,v／v）为流动相,流速1．0ml／min紫外检测器检测,检测波长254nm。【结果】在4．016-803．2ng／ml的浓度范围内,BPDE峰面积与浓度呈良好的线性,相关系数r=0．9997;平均回收率均在85％～115％之间,RSD为1．32％-1．72％。【结论】本法准确、方便,可用于测定空气中苯并（a）芘在体内代谢产物BPDE～DNA加合物的含量。     

RP—HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度

目的：建立测定血浆中头孢拉定浓度的高效液相色谱法。方法：色谱柱为DiamonsilC18柱（200mm×4．6mm，5μm）；流动相：0．05mol／LKH2PO4-乙腈（85：15）；柱温：35℃；流速：1．0ml／min；检测波长：262nm；进样量：20μl。结果：头孢拉定在0．5-40．0μg／ml范围内有良好的线性关系，r=0．9999；血浆中药物最低检测浓度为0．25μg/ml（S／N=3）：提取回收率为75％；血浆中三种浓度回收率分别为（106．0±6．3）％、（103．0±4．6）％、（97．5±1．2）％，日内、日间RSD分别为419％-26％、1．0％及7．9％、3．2％、1．9％。结论：本法操作简单、快捷、专属性强，方法灵敏度和准确度均较高，适用于头孢拉定血药浓度及生物利用度的测定。     

栀子药材中栀子苷和绿原酸含量测定方法研究

目的：建立栀子药材中栀子苷和绿原酸含量测定方法。方法：色谱柱为DiamonsilC18柱（250mm×4．6mm,5μm）;流动相为1．0％的冰乙酸水溶液-1．0％冰乙酸乙腈溶液梯度洗脱;检测波长为238nm;流速1．0mL／min;柱温30℃;进样量10μL。结果：栀子苷在3171-12685μg／mL质量浓度范围内线性关系良好,r=0．9999（n=6）,平均回收率为99．98％,IKSD为0．33％;绿原酸在1．952-78．08μg／mL质量浓度范围内线性关系良好,r=0．9999（n=6）,平均回收率为100．6％,1KSD为0．81％。结论：方法操作简便,结果准确,可用于栀子药材中的栀子苷、绿原酸含量测定。     

TLC法测定调经浓缩片中延胡索乙素的含量

目的 研究中药三类新药调经浓缩片中延胡索乙素的定量方法。方法 双波长扫描法，以苯-石油醚（90℃．120℃）-甲醇-三氯甲烷（3：3：0．5：10）为展开剂，检测波长340nm，参比波长365nm。结果 本法延胡索乙素在0．24-1．44μg之间线性良好，相关系数r=0．9996（n=6），平均回收率99．1％。结论 本法简便、准确，可用于本制剂及延胡索药材的含量测定及质量控制。     

HPLC法测定妇科止带片中盐酸小檗碱的含量

目的建立妇科止带片中盐酸小檗碱含量测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为（Diamongil（TM）C18柱，流动相为乙腈-0．1％磷酸（28：72），检测波长为265nm。结果盐酸小檗碱的线性范围为0．291μg～1．940μg，r=0．9997，回收率为99．5％，RSD（％）=1．371％（n=6）。结论本测定方法简便、准确、重复性好，可用于测定妇科止带片中盐酸小檗碱的含量。     

HPLC法测定小儿解感片中黄芩苷的含量

目的建立小儿解感片中黄芩苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱条件：C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）;乙腈-水-磷酸（25：75：0：2）为流动相;流速1．0mL／min;检测波长280nm;柱温25℃。结果黄芩苷进样量在0．084～0．84μg范围内,其峰面积值与进样量（μg）有良好的线性关系,r=0．9999,回收率为98．4％,RSD为1．42％（n=6）。结论该测定方法快速简便,可用于小儿解感片的质量控制。     

HPLC法测定大黄相关制剂中大黄素的含量

目的建立大黄相关制剂中大黄素的含量测定方法,测定其相关制剂中大黄素的含量。方法采用高效液相色谱法,Agilent EclipseXDB C-18色谱柱,大黄素以乙腈-0．1％冰醋酸溶液（50：50）为流动相,检测波长254nm,流速1．0mLμmin^-1,柱温：30℃,进样量20μl。结果大黄素进样量在1．2μg·mL^-112．0μg·mL^-1范围内与峰面积线性关系良好,γ=0．9999,平均回收率为=101．14％,RSD=1．28％（n=9）。结论本方法快速、简便、准确、重现性好,可用大黄相关制剂中大黄素的含量测定。＼     

大鼠BPDE-DNA加合物生成及其高效液相色谱测定

目的研究苯并（a）芘（BaP）诱导大鼠产生（7R，8S）-二羟基-（9S，10R）-环氧-7，8，9，10-四氢苯并（a）芘（BPDE）-DNA加合物的生成。建立以血液为样品的检测染毒大鼠BPDE-DNA加合物的高效液相色谱法。方法选用清洁级SD大鼠，一次性腹腔注射苯并（a）芘二甲基亚砜溶液（以1％羧甲基纤维素钠为助溶剂）100mg／kg，5h后取股静脉血。提取抗凝全血中的DNA，采用琼脂糖凝胶电泳确认DNA的提取效果。将提取的DNA在0．1nmol／L HCl、90℃恒温水浴箱中酸水解4h，乙酸乙酯提取酸水解产物——四醇-苯并（a）芘，高效液相色谱法检测，最后用高效液相色谱-质谱法确认。结果BaP染毒组与溶剂对照组和阴性对照组比较，高效液相色谱检测有新的色谱峰产生，质谱确定其相对分子质量与四醇-苯并（a）芘一致。结论本实验的染毒方法能使大鼠产生BPDE-DNA加合物；建立的高效液相色谱法可以血液为样品检测BPDE-DNA加合物。     

反相高效液相色谱法测定犬脑组织和血浆中的异丙酚含量

目的建立测定犬脑组织中异丙酚含量的高效液相色谱方法。方法采用ZORBAXEclipseXDB-C18（4．6×150mm,5μm）为色谱柱,以甲醇-水（80：20,v／v）为流动相,流速1．0ml／min,检测波长为270nm。结果异丙酚的线性范围0．1～8μg／ml（r=0．9998）,最低检测限和最低定量限为0.02μg／ml（S／N=3）和0．08μg／ml（S／N=10）。低、中、高浓度的平均回收率分别是89．5％、92．0％、96．16％,日内精密度和日间精密度分别为5．0％、4．2％、4．55％和6．74％、2．72％、5．07％。结论本方法快速、简单、准确,可用于测定犬脑组织和血浆中异丙酚的含量。     

当归黄精颗粒中阿魏酸的含量测定

目的：建立当归黄精颗粒中阿魏酸的高效液相测定方法。方法：采用RP—HPLC法测定阿魏酸的含量。色谱柱为AgilentSDBC。8柱（250mm×4．6mm，5μm），以甲醇：水：乙酸（45：54：1）为流动相，柱温为室温，流速为1ml／min，检测波长为316nm。结果：阿魏酸在1．0～12．0μg/ml与峰面积有良好的线性关系（r=0．9997，n=5），平均回收率为98．77％（RSD=2．04%）。结论：该测定方法快速、简便、准确、重现性好。     

HPLC法测定新疆阿魏抗溃疡提取物中阿魏酸的含量

目的：建立新疆阿魏抗溃疡提取物中阿魏酸的HPLC含量测定方法。方法：运用高效液相色谱法（HPI，C法）对新疆阿魏抗溃疡提取物中阿魏酸的含量进行测定并根据10批样品的测试结果确定提取物中阿魏酸的含最限度。采用KromasilODS-1C18柱（250mm×4．6mm，0．5μm），流动相为乙腈-0．085％磷酸溶液（17：83），流速为1ml／min，进样量为10μl，柱温为35℃，检测波长为322nm。结果：线性范围为4．04～161．60μg／ml，相关系数为0．9999，回收率99．47％，RSD=1．33％（n=9）。结论：HPLC法快捷、准确、操作简便、灵敏、重观性好，适用于阿魏酸的含量测定，为阿魏抗溃疡提取物开发利用提供了实验基础。     

高效液相色谱法测定饮料中的咖啡因

目的研究了高效液相色谱法直接测定饮料中咖啡因的新方法。方法采用Hypersil ODS柱,以甲醇＋乙酸铵（0．02mol／L）=15＋85作流动相,流速1．0mL/min,检测波长207nm,柱温30℃。结果6min内将咖啡因与基体分离,咖啡因含量与峰面积在10—200μg／mL范围呈线性关系,相关系数r=0．9998;回收率范围为97．4％-101．4％。结论该法准确,样品处理简单。     

气相色谱法程序升温测定工作场所中的苯系物

目的建立气相色谱法测定工作场所中苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯和苯乙烯的检测方法。方法确立本检测方法的条件试验,如色谱条件等;进行气相色谱法程序升温测定工作场所中苯系物的方法学试验。结果7种成份在11min内完成测定并具有较好的分离效果;在（0．4～700．0）μg／L浓度范围内可获得较好的直线方程,相关系数（r）为0．9990—0．9999;最低检出限分别为：苯0．2μg/L、甲苯2．5μg／L、乙苯3．6μg／L、对二甲苯3．6μg／L、间二甲苯0．9μg／L、邻二甲苯3．4μg/L、苯乙烯1．3μg／L。精密度RSD为1．1％～3．7％,回收率为90．0％-108．1％。结论此方法操作简便、重现性好,提高了灵敏度,适用于检测工作场所中苯系物的含量。     

HPLC法测定侧柏叶及其制剂侧柏V号胶囊和异海松酸胶囊中异海松酸

目的建立异海松酸的HPLC测定方法，控制侧柏叶及其制剂侧柏V号胶囊和异海松酸胶囊的质量。方法采用高效液相色谱法。色谱条件：Kromasil C18柱（200mm×4．6mm，5μm）；流动相：甲醇-水-冰醋酸（60：37；3）；体积流量：1mL／min；柱温：25℃；检测波长；231nm；进样量：10μL。采用外标法计算样品中异海松酸的质量分数。结果异海松酸的线性关系范围为1．25～10．00μg，回归方程为Y=66214X＋2487．9，r=1．000。平均回收率为95．8％，RSD为2．7％（n=5）。侧柏叶药材中异海松酸的测定结果分别为3．09、3．20、3．56mg／g，侧柏V号胶囊的测定结果分别为10．39、9．67、10．99mg／g，异海松酸胶囊的测定结果分别为553．89、541．50、528．83mg／g。结论该方法简便、准确、分离效果好、无干扰，可用于侧柏及其胶囊的质量评价。     

人血浆中病毒唑浓度的高效液相色谱测定法建立

目的建立高效液相色谱法测定人血浆中病毒唑的浓度。方法采用液-液提取法处理血浆样品,色谱柱为C18（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为50mM（pH=3．23）的磷酸缓冲液和乙腈,流速为1．0ml·min^-1,紫外检测波长为235nm,柱温为25℃。结果血浆中内源性物质对样品测定无干扰。血浆中病毒唑浓度在0．08～10．0μg·m^-1范围内,线性关系良好（r=0．9971）,最低定量浓度为0．08μg·ml^-1,平均提取回收率为82．3％,日内、日间RSD分别小于7．2％和11％。结论本法简便、快速、准确,适用于病毒唑的血药浓度监测和药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定新藤黄酸纳米粒中新藤黄酸的含量和包封率

目的：建立新藤黄酸纳米粒中新藤黄酸含量和包封率的测定方法。方法：采用C18-ODS色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇：1．0mol／L磷酸（9：1）,流速为1．0ml／min,检测波长为360nm,进样容积为20μl,柱温为25℃。结果：新藤黄酸在10～120μg范围内线性关系良好,r=0．9999（n=7）;新藤黄酸平均回收率为99．32％,RSD为1．03%（n=3）。平均含量为99．52％,包封率为83．81%.结论：高效液相色谱法准确、可靠、重复性好,可用于新藤黄酸纳米粒含量及其包封率的测定。     

HPLC测定胃安胶囊中盐酸小檗碱的含量

目的：建立胃安胶囊中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法：采用HPLC法测定。SHMADZUVP—ODS（250mm×4．6mm,5μm）为色谱柱;乙腈-四氢呋喃-0．1％磷酸溶液（46：2：52）为流动相;流速为1．0ml／min;检测波长265nm;柱温30℃。结果：盐酸小檗碱在1．02-102．2μg／ml的范围内具有良好的线性关系（r=0．9998）,平均回收率为99．1％,RSD为0．50％（n=9）。结论：该方法简便、准确、重现性好,适用于胃安胶囊中盐酸小檗碱的含量测定和质量控制。