益气强心饮对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡及Fas FasL基因蛋白表达影响的实验研究

目的：本实验旨在通过动物实验观测中药益气强心饮对慢性心衰大鼠细胞凋亡及Fas、FasL基因蛋白表达的影响。材料与方法：采用腹主动脉缩窄法结合皮质激素造模法建立慢性心衰阳虚水泛证大鼠模型,随机分为模型组、西药对照组、中药对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、假手术组,用药8周后,观察各组大鼠的心肌细胞凋亡及Fas、FasL基因蛋白表达。结果：益气强心饮能明显下调慢性心衰大鼠心肌组织Fas、FasL基因蛋白表达,疗效等同西药对照组。结论：益气强心饮可调控慢性心衰大鼠的心肌细胞凋亡,具有治疗及延缓心衰的发展等作用。     

益气强心饮对慢性心衰阳虚水泛证大鼠心功能及病理改变的影响

目的观察益气强心饮对慢性心衰大鼠心功能及病理改变的影响。方法采用腹主动脉缩窄法结合皮质激素造模法建立慢性心衰阳虚水泛证大鼠模型,随机分为模型组、西药对照组、中药对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、假手术组。用药8周后,观察各组大鼠心功能及病理改变。结果益气强心饮能明显改善慢性心衰大鼠心功能,疗效等同西药对照组,光镜下病理改变中药中剂量组接近正常。结论益气强心饮可改善慢性心衰大鼠的心功能,具有治疗及延缓心衰的发展等作用。     

滋阴益气、息风活血通络法对糖尿病大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡影响的实验研究

目的 观察滋阴益气、息风活血通络法对糖尿病大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡的影响.方法 将60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、中药(降糖舒络方)高、中、低剂量组,采用STZ腹腔注射,建立糖尿病大鼠模型.以实验大鼠精化血红蛋白、血清胰岛素、坐骨神经雪旺细胞凋亡及介导细胞凋亡的caspase-3和调控细胞凋亡的基因蛋白Bcl-2、Bax的表达为观察指标,以达美康加弥可保为对照进行观察.结果 模型组大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡、caspase-3、Bax基因蛋白表达较正常组明显增强,Bcl-2明显下降.中药组和西药组对雪旺细胞凋亡、caspase-3、Bax和Bcl-2基因蛋白的影响与模型组相比均有显著差异;中药中剂量组和大剂量组对雪旺细胞凋亡、caspase-3、Bax和Bcl-2的影响优于西药组.中药组间比较以大剂量组疗效为佳.结论 滋阴益气、息风活血通络法可以改善糖尿病大鼠血清胰岛素水平,降低糖化血红蛋白水平,抑制雪旺细胞凋亡.其作用机制与抑制caspase-3活性和Bax蛋白表达及促进Bcl-2蚩白表达有关,并且对各观察指标的影响基本呈剂量依赖性.     

和营安心方对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察和营安心方对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法以皮下大量注射异丙肾上腺素（ISO）的方法制备慢性心衰大鼠模型,随机分为模型对照组,卡托普利组,参麦注射液组,和营安心大、中、小剂量组。另设正常对照组,用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,用免疫组化方法检测心肌细胞Bax,Bcl-2蛋白表达,计算Bcl-2／Bax比值。结果模型对照组TUNEL法心肌细胞凋亡严重,棕褐色细胞核明显增多,免疫组化图像分析Bax表达明显升高,Bcl-2,Bcl-2／Bax比值明显下降。与模型对照组比较,和营安心方组心肌细胞凋亡数量明显减少,Bax蛋白表达明显下降,Bcl-2,Bcl-2／Bax比值明显升高。结论和营安心方有减抑慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的作用。     

燧心胶囊对慢性心力衰竭大鼠凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的:以慢性心力衰竭大鼠为研究对象,测定心肌组织Bcl-2、Bax mRNA水平及其蛋白表达,以探究燧心胶囊干预心室重塑的作用机制。方法:将60只大鼠随机分为假手术组、模型对照组、地高辛组、卡托普利组、燧心胶囊低剂量组、燧心胶囊高剂量组。采用腹主动脉缩窄术建立大鼠慢性心力衰竭模型,连续给药12周。Real time PCR检测心肌细胞凋亡基因Bcl-2 mRNA、Bax mRNA水平;免疫组化法观察大鼠心肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:与模型对照组比较,卡托普利组、燧心胶囊低、高剂量组大鼠Bcl-2 mRNA水平及其蛋白表达增高,Bax mRNA水平及其蛋白表达降低,Bcl-2/Bax则显著性增高,差异具有统计学意义(P0.05或P0.01)。其中燧心胶囊高剂量组对Bcl-2和Bax mRNA及其蛋白的调控程度较低剂量组显著(P0.05)。结论:高剂量燧心胶囊能够调控凋亡基因Bcl-2和Bax mRNA水平及其蛋白表达,抑制心肌细胞程序性死亡,延缓心力衰竭的进程。     

建中强心颗粒治疗大鼠心肌梗死后心力衰竭的实验研究

目的:观察建中强心颗粒对大鼠心肌梗死后心力衰竭的作用,并探讨建中强心颗粒抗心力衰竭的机制。方法:通过结扎大鼠冠状动脉左前降支制作心力衰竭模型并随机分组,对照组、西药组、中药低剂量和高剂量组各10只,对照组予生理盐水、西药组予依那普利、中药低剂量和高剂量组分别予不同剂量建中强心颗粒灌胃,实验结束行有创心功能分析,计算心/体重比(HW/BW))及左室/体重比(LVW/BW),测定心肌组织Bcl-2、Bax水平,并作统计学分析。结果:心功能指标:西药组、中药组左室舒张末压(Lvedp)均低于对照组。中药组左心室内压力最大上升速率(dp/dtmax)高于西药组、对照组,且中药高剂量组dp/dtmax高于低剂量组。西药组及中药高剂量组左心室内压力最大下降速率(-dp/dtmax)高于对照组及中药低剂量组。西药组及中药组HW/BW均低于对照组,且中药高剂量组HW/BW低于西药组、中药低剂量组。西药组及中药组LVW/BW水平均低于对照组,西药组、中药高剂量组LVW/BW低于中药低剂量组。西药组及中药组Bax/Gapdh均低于对照组,且中药高剂量组Bax/Gapdh低于西药组、中药低剂量组。西药组及中药组Bcl-2/Gapdh均高于对照组,且中药高剂量组Bcl-2/Gapdh高于西药组、中药低剂量组。西药组及中药组Bcl-2/Bax均高于对照组,中药高剂量组Bcl-2/Bax高于西药组、中药低剂量组。结论:建中强心颗粒可降低心脏前负荷,改善心梗后心衰大鼠的心脏收缩舒张功能,且能阻断心肌细胞凋亡线粒体信号传导通路,从而可能产生显著的抗心肌细胞凋亡的作用。     

新加生脉饮对阿霉素所致心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响

目的通过观察新加生脉饮对阿霉素所致大鼠心肌细胞凋亡的逆转和防治作用,为阿霉素心肌损伤的临床治疗奠定实验基础。方法利用阿霉素的心脏毒性诱导心肌细胞凋亡大鼠模型。将40只雄性SD大鼠随机分成4组:对照组、阿霉素模型组、卡托普利(10 mg/kg)组、新加生脉饮(3.75 g/kg)组,ig给予相应药物,每日1次,共给药6周。实验过程中观察大鼠的精神、活动、进食、毛色等情况,治疗6周后测定心功能、大鼠左室肥厚指标,HE染色观察心肌病理变化,TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况,免疫组化法检测心肌Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠心功能显著降低。与模型组比较,各药物治疗后可不同程度改善大鼠心功能情况,其中新加生脉饮组疗效显著。与对照组比较,模型组大鼠心体比、左室肥厚指数、心肌细胞凋亡指数均明显升高。与模型组比较,卡托普利及新加生脉饮可不同程度地改善大鼠心肌肥厚及心肌细胞凋亡情况。与对照组比较,模型组大鼠心肌Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax、Caspase-3蛋白表达水平升高;与模型组比较,卡托普利及新加生脉饮可不同程度地增加大鼠心肌Bcl-2蛋白表达水平,减低Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结论新加生脉饮能改善心肌细胞凋亡大鼠心功能情况,通过降低心肌细胞中Caspase-3蛋白的表达或抑制其活性,增加Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白的表达,上调Bcl-2/Bax,从而抑制心肌细胞凋亡。     

参芪益心方对CHF大鼠心肌细胞凋亡指数及Bax、Bcl-2表达的影响

目的:研究参芪益心方对阿霉素所致慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞凋亡指数及Bax、Bcl-2表达的影响及其作用机制。方法:将90只雄性大鼠随机平均分为6组:正常对照组、模型组、依那普利对照组、芪苈强心胶囊对照组、参芪益心方低剂量组、参芪益心方高剂量组。利用阿霉素复制CHF大鼠模型,Tunel法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化法测定心肌细胞凋亡基因Bax、Bcl-2的表达。结果:各治疗组CHF大鼠心肌凋亡指数均有所降低,且与模型组比较具有统计学意义(P0.05)。各治疗组均能抑制CHF大鼠心肌细胞Bax基因的表达;同时各治疗组能够促进大鼠心肌细胞Bcl-2基因的表达,且与模型组比较具有显著性差异(P0.05),其中以参芪益心方高剂量组为优。结论:参芪益心方可能调控凋亡基因从而抑制心肌细胞凋亡,进而延缓心室重塑的发生、发展或部分逆转心室重塑,从而起到治疗CHF的效果。     

活血、益气方药对心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达影响的研究

目的：对比观察活血、益气方药对心衰大鼠心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法：采用心梗后心衰大鼠动物模型，对比观察由丹参、川芎等组成的活血注射液和由党参、黄芪组成的益气注射液对心衰大鼠心肌细胞凋亡和Bax、Bcl-2蛋白表达的形态学结构和平均光密度等指标的影响。结果：活血注射液对心衰的治疗作用机制之一是通过抑制心肌细胞凋亡及影响相关基因蛋白而起到了治疗作用。     

制川乌与瓜蒌相反配伍对慢性心衰大鼠血流动力学及其机制研究

目的观察制川乌与瓜蒌配伍对慢性心衰大鼠血流动力学的影响,为乌附类中药与瓜蒌配伍应用提供可靠的依据。方法建立大鼠慢性心衰模型,测定川乌相反配伍瓜蒌对心衰大鼠血流动力学指标的影响,并采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶(S-P)法检测心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达。结果制川乌与瓜蒌配伍高、中、低剂量组均可改善慢性心衰大鼠血流动力学指标,高剂量组上调Bcl-2抑制凋亡基因的表达,提高Bcl-2/Bax比值。结论适当剂量的制川乌配伍全瓜蒌的共煎液对慢性心力衰竭大鼠心肌具有保护作用。     

强心胶囊对心衰大鼠心肌细胞凋亡调控蛋白表达的干预作用

目的:观察强心胶囊对充血性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:用Wistar大鼠腹腔注射阿霉素造模,分中药预防组、中药治疗组和西药对照组治疗,原位末端标记法检测心肌细胞凋亡,免疫组化检测Fas/Bcl-2心内表达水平。结果:强心胶囊明显抑制充血性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡,抑制Fas蛋白表达,提高Bcl-2表达。结论:强心胶囊能明显抑制心肌细胞凋亡和调节Fas/Bcl-2,这可能是其延缓充血性心力衰竭进展的作用机理之一。     

软坚消瘿汤对甲状腺自身抗体及Bcl-2/Bax表达的影响

[目的]观察软坚消瘿汤对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠甲状腺抗体和凋亡蛋白Bcl-2/Bax影响,从凋亡蛋白角度探讨其作用机制。[方法]运用甲状腺球蛋白与弗氏佐剂混合免疫注射法,联合饮用高碘水模拟大鼠实验性自身免疫性甲状腺炎。酶联免疫法检测甲状腺抗体,免疫组化法检测甲状腺细胞Bcl-2/Bax变化。[结果]软坚消瘿汤能显著降低甲状腺抗体和Bax水平,增加甲状腺细胞Bcl-2表达。[结论]软坚消瘿汤可能通过降低抗体及Bax水平,提高Bcl-2表达从而减轻甲状腺细胞凋亡。     

益髓颗粒影响ITP小鼠脾淋巴细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的研究

[目的]观察益髓颗粒对免疫性血小板减少性紫癜(ITP)小鼠脾淋巴细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。[方法]40只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、泼尼松治疗组和益髓颗粒治疗组,除正常组外,其余各组均隔日1次按100μl/20g腹腔注射1:4豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)建立ITP小鼠模型,于造模第8天开始,各组均按0.2mL/10g·d~(-1)体积灌胃,其中,正常组、模型组灌服生理盐水,泼尼松按0.0113mg/10g·d~(-1)灌胃,益髓颗粒按0.3g/10g·d~(-1)灌胃,连续8天后处死动物,无菌取脾,石蜡包埋,切片4μm,用原位末端标记(TUNEL)法检测脾淋巴细胞凋亡,免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。[结果]与正常组比较,模型组脾淋巴细胞凋亡减少,Bcl-2蛋白表达增多,Bax蛋白表达减少(P<0.05);与模型组比较,泼尼松及益髓颗粒组脾淋巴细胞凋亡增多,Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增多(P<0.05)。[结论]ITP小鼠存在免疫功能失调可能与淋巴细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达异常相关。益髓颗粒可通过调节淋巴细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达而对ITP免疫失调起调节作用。     

Effect of Qiangxin Huoli decoction on rats with adriamycin-induced chronic heart failure

OBJECTIVE: To investigate the effect of Qiangxin Huoli decoction on rats with chronic heart failure(CHF) induced by adriamycin(ADR), and to investigate the underlying mechanism of this effect.METHODS: Ninety-six healthy Wistar rats were divided into six groups: control, CHF model, CHF treated by Shenfu injection, and three CHF groups treated with Qiangxin Huoli decoction at high, medium, and low doses, respectively. Qiangxin Huoli decoction was administered orally to protect the stomach in the three Qiangxin Huoli decoction groups, while the control group and the CHF model group were administered the same volume of 0.9% physiological saline, and the Shenfu group wereadministered the same volume of Shenfu injection. Ten days later, the CHF model was then induced in all groups except the control group by intraperitoneal injection of ADR at gradient dose intervals. The bodyweights were recorded on days 10, 20, 30, and 40. Hemodynamic indices were recorded, including left ventricular systolic pressure(LVSP), left ventricular end-diastolic pressure(LVEDP), maximum increase in left ventricular pressure(+dp/dt_(max)), maximum decrease in left ventricular pressure(-dp/dt_(max)), heart rate(HR), and electrocardiogram using an eight-channel physiological recorder with LabChart software monitoring. The plasma brain natriuretic peptide(BNP) concentration was determined by enzyme-linked immunosorbent adsorption. The expressions of B-cell lymphoma-2(Bcl-2) and Bcl-2-associated X protein(Bax) were detected by immunohistochemical methods.RESULTS: The CHF model group were in poor condition, and the mean bodyweight was significantly decreased compared with the control group. Furthermore, compared with the control group, the CHF groups had significantly decreased LVSP, +dp/dt_(max), and-dp/dt_(max), and significantly increased LVEDP. The CHF groups also showed significant increases in HR, S-T segment elevation, and plasma BNP levels compared with the control group. Compared with the CHF model group, the treatment groups had significantly increased Bax expression(P 0.05) and significantly decreased Bcl-2 expression(P 0.01), indicating less apoptosis. The high dose Qiangxin Huoli decoction group and the Shenfu group showed the most significant improvements.CONCLUSION: In the rat model of CHF, Qiangxin Huoli decoction significantly reduces the abnormal hemodynamics, improves cardiac function, reduces plasma BNP concentration, regulates the expression of apoptosis proteins, inhibits the apoptosis of myocardial cells, and plays a protective role.     

从cTnI探讨强心方对慢性心力衰竭患者心肌保护作用

目的:观察强心方在治疗慢性心力衰竭患者对其心肌肌钙蛋白I(cTnI)及N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平的影响,基于cTnI水平的变化,探讨强心方对心肌损伤的保护作用。方法:选取2016年3月至2017年3月上海中医药大学附属上海市中医医院门诊和住院收治的慢性心力衰竭患者120例,随机分为观察组和对照组,每组60例。其中,观察组采用强心方联合常规西医治疗方法;而对照组仅使用常规西医方法,治疗时间均为8周。结果:治疗后,观察组与对照组cTnI和NT-proBNP水平均有显著降低(P0.05),且与对照组比较,观察组cTnI和NT-proBNP水平显著降低(P0.05)。结论:强心方联合常规西医治疗方法对慢性心力衰竭患者cTnI和NT-proBNP指标均有改善作用,且强心方对慢性心力衰竭患者的心肌损伤有保护作用。     

温阳益心中药预处理对缺血大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的观察温阳益心中药预处理和心肌缺血预处理对缺血再灌注48h缺血大鼠心肌Bcl-2、Bax、细胞凋亡率的影响。方法选用雄性Wistar大鼠,随机分为4组,其中3组正常喂食,1组灌胃中药悬液,10d后选各组健康大鼠行冠脉结扎,建立大鼠心肌缺血模型。假手术组:完成全部手术操作,只穿线不结扎冠脉;心肌缺血-再灌注组(IR组):模型建立后,心肌缺血45min后再灌注48h;温阳益心中药预处理缺血-再灌注组(中药组):模型建立后,心肌缺血45min后再灌注48h;预适应处理缺血-再灌注组(IP组):模型建立后,心肌缺血5min,再灌注5min,重复3次,之后心肌缺血45min,再灌注48h。采用免疫组化检测Bcl-2、Bax阳性细胞表达,原位杂交检测Bcl-2、BaxmRNA阳性表达;流式细胞仪测定细胞凋亡率(AP)。结果 IP组和中药组AP较IR组低,Bcl-2阳性表达心肌细胞数与Bcl-2mRNA表达率比IP组高,Bax阳性表达心肌细胞数与BaxmRNA表达率比IR组低(P0.05)。结论 IP与温阳益心中药对IR的心肌保护均具有抑制心肌细胞凋亡的功能,且有等效性。     

Ox-LDL诱导人肾小球系膜细胞凋亡在肾小球硬化中的作用

目的　探讨氧化低密度脂蛋白 (Ox -LDL)诱导肾小球系膜细胞凋亡的调控机制及其在肾小球硬化中的作用。方法　通过人肾小球系膜细胞体外培养 ,采用原位末端标记检测低浓度Ox -LDL对系膜细胞凋亡的影响 ,免疫组化法检测维生素E干预前后Ox -LDL对系膜细胞Bax/Bcl- 2表达的影响 ;按血浆LDL水平 ,把有不同程度肾小球硬化的慢性肾炎患者肾标本分为LDL正常组和LDL升高组 ,分别采用DNA原位末端标记和免疫组化法检测肾小球细胞凋亡及Bax/Bcl- 2蛋白表达。结果　低浓度Ox -LDL(<10 0mg/L)以剂量依赖方式促进肾小球系膜细胞凋亡 ,并使肾小球系膜细胞Bax的蛋白表达呈时间 -剂量依赖性增加 ,Bcl- 2的蛋白表达轻度升高后呈时间 -剂量依赖性下降 ,导致Bax/Bcl- 2比值增大 ;维生素E干预后这种变化不明显。LDL升高组肾小球细胞凋亡和Bax蛋白表达明显增加 ;Bcl- 2变化不明显 ,血LDL水平与肾小球硬化指数、凋亡指数、Bax/Bcl- 2比值有显著正相关关系。结论　Ox -LDL能诱导肾小球系膜细胞凋亡 ;Bax/Bcl- 2比值上升可能是Ox -LDL诱导肾小球系膜细胞凋亡的重要机制 ;脂质异常可能是导致肾小球硬化中细胞减少的重要原因     

强心汤治疗慢性心力衰竭65例

[目的]探讨强心汤治疗慢性心力衰竭(CHF)的临床疗效。[方法]将128例气虚(阳虚)血瘀、水饮内停证CHF患者随机分为治疗组65例和对照组63例,治疗组在对照组常规治疗基础上加服强心汤,连续治疗8周,比较两组临床症状、中医症候、治疗及心功能水平改善情况。[结果]对照组临床症状、中医症候、心功能均有明显改善,治疗组疗效明显优于对照组。[结论]在患者常规西药治疗基础上加服强心汤,可以进一步改善患者的临床症状、心功能及生活质量,安全有效,且未出现不良反应。