非小细胞肺癌中hMLH1启动子的甲基化

目的 探讨在非小细胞肺癌（NSCLC）中DNA修复基因hMLH1启动子甲基化与基因转录失活的关系,观察5-Aza-CAR的干预作用。方法 甲基化特异的PCR（methyl-specific PCR,MSP）和RT-PCR法分别测定基因的甲基化率和转录水平。结果 NSCLC癌／癌旁组织中的甲基化率分别是hMLH1为55％和14％;〉65岁组hMLH1甲基化率明显高于≤65岁组（P〈0．01）,hMLH1甲基化率随吸烟指数增高而升高（P〈0．05或P〈0．01）;hMLH1的甲基化率随TNM临床分期进展而逐渐增加（P〈0．05或P〈0．01）。甲基化的NSCLC标本hMLH1基因mRNA转录下降或失活,在细胞株水平5-Aza-CdR处理后hMLH1恢复转录活性。结论 启动子甲基化是调节hMLH1转录活性的重要机制,5-Aza-CDR具有逆转甲基化而恢复转录的作用。     

NSCLC患者血浆p16和MGMT基因甲基化检测及临床意义

目的：检测非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer，NSCLC）患者外周血血浆中p16基因、O^6-甲基乌嘌呤-DNA甲基转移酶（O^6-methylguanine—DNA methyhransferase，MGMT）基因启动子的甲基化状态，探讨p16、MGMT基因启动子的异常甲基化在NSCLC筛查及早期诊断中的意义。方法：利用巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测NSCLC患者外周血血浆p16、MGMT基因启动子的甲基化状态。结果：65例NSCLC血浆样品中分别发现19例（29．23％）p16基因启动子异常甲基化和16例（24．62％）MGMT基因启动子异常甲基化，45例正常对照血浆组未检测到p16、MGMT基因启动子的异常甲基化（P〈0．05），血浆中两基因甲基化检出率与NSCLC的分型及临床分期无明显相关性（P〉0．05）。结论：利用巢式甲基化特异性PCR法检测外周血血浆中p16、MGMT基因启动子的甲基化，可为NSCLC的筛查、早期诊断及预后判断提供有价值的信息。     

NSCLC患者血清中p16、DAP基因甲基化的研究

目的：探讨p16、死亡相关蛋白激酶（death-associated protein kinase,DAP）基因的异常甲基化作为非小细胞肺癌（NSCLC）患者诊断的基因标志物的可行性。方法：采用甲基化特异性PCR（MSP）法检测30例NSCLC患者肿瘤组织及对应血清中p16、DAP基因的异常甲基化，结果：NCSLC肿瘤中60．0％（18／30）检测出至少一个基因启动子呈甲基化改变，在18例肿瘤组织检测到异常甲基化的患者中，50．0％的患者（9／18）在血清中检测到相应的改变。所有的癌旁组织、健康对照组的血清中及正常肺组织均未检测到p16、DAP的甲基化，结论：检测NSCLC患者血清中p16、DAP基因异常甲基化有可能成为肺癌诊断的分了标志物。     

Disabled －2基因去甲基化对肺癌细胞系 Wnt 通路及增殖能力的影响

目的：探讨 Dab2启动子区的甲基化状态及其对 Dab2表达的影响,对 Wnt 通路和肺癌细胞增殖能力的影响。方法：BSP 检测去甲基化试剂处理前后 BE1细胞启动子区 Dab2甲基化状态;Real －time PCR 检测去甲基化试剂处理前后 Dab2 mRNA 水平;Western blot 检测去甲基化试剂处理前后 Dab2变化和 Wnt 通路的变化;MTT 法检测 BE1细胞经去甲基化试剂处理后增殖能力的变化。结果：BE1细胞 Dab2基因启动子区处于高甲基化状态,经去甲基化试剂处理后 Dab2启动子区发生明显去甲基化（37％ vs 10．3％,P ＜0．01）,Dab2 mRNA 在去甲基化试剂处理后明显上调,Western blot 检测显示 BE1细胞经去甲基化试剂处理后 Dab2蛋白表达明显上调,而 Wnt 通路关键分子β－catenin 及其下游 Cyclin D1表达下调,BE1细胞经去甲基化试剂处理后增殖能力明显下调。结论：Dab2基因启动子区高甲基化抑制肺癌细胞中 Dab2转录水平和表达,Dab2基因去甲基化抑制 Wnt 通路,进而抑制肺癌细胞的增殖能力。     

非小细胞肺癌组织中3p区抑癌基因启动子的甲基化

目的：探讨3p位点上3个抑癌基因RASSF1α、RAR-β和FHIT启动子甲基化在非小细胞肺癌（non-smallcelllungcancer．NSCLC）组织中的作用。方法：应用甲基化特异的PCR（methyl-specific PCR,MSP）和RTPCR方法分别测定53例NSCLC组织中RASSF1α、RAR-β和FHIT的甲基化率与转录水平。结果：NSCLC癌组织和癌旁组织中的甲基化率分别是FHIT为53％和8％,RAR-β为42％和6％,RASSF1α为57％和9％;FHIT、RASSF1α的甲基化率在吸烟指数〉400年支组高于≤400年支组（P值分别为0．004与0．008）;FHIT、RASSF1α的甲基化率Ⅱ期高于Ⅰ期（P值分别为0．016与0．008）,Ⅲ期高于Ⅱ期（P值分别为0．033与0．029）。结论：3P位点RASSF1α、RAR-β和FHIT基因甲基化的发生与NSCLC的病理生理密切相关,而启动子CpG岛甲基化是导致转录沉默的重要机制。     

肺癌组织细胞中CHFR基因表达水平及其启动子甲基化状态

目的：探讨CHFR（checkpoint with FHA and ring finger）基因表达水平及其启动子CpG岛甲基化状态与肺癌发生发展的关系。方法：实时定量PCR法检测CHFRmRNA在45例肺癌组织、23例癌旁组织与去甲基化剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷处理前后A549细胞株中的表达,同时用甲基化特异性PCR检测CHFR启动子CpG岛甲基化状态。结果：CHFRmRNA在癌旁组织中全部表达,在肺癌组织中表达缺失率为15．56％（7／45）,且表达量低于正常肺组织,F=9．156,P〈0．01;但在不同年龄、性别、肿瘤大小、恶性程度和肿瘤分类中的差异无统计学意义,P〉0．05。CHFR基因启动子在肺癌组织中发生甲基化的频率为22．22％（10／45）,在癌旁组织未发生甲基化,χ^2=5．992,P〈0．05。10例启动子区甲基化的肺癌标本中,7例同时伴有mRNA表达缺失。结论：CHFR启动子甲基化可在肺癌发生和发展中起一定作用。     

肝细胞癌上皮型钙粘素基因甲基化及其临床特征分析

目的：探讨上皮型钙粘素基因启动子CpG岛甲基化与肝细胞癌（HCC）及其临床病理特征的关系。方法：用甲基化特异性PCR技术检测53例HCC肿瘤组织及其癌旁非肿瘤组织和15例肝海绵状血管瘤周围正常肝组织中，上皮型钙粘素基因启动子CpG岛甲基化状况。结果：上皮型钙粘素基因在HCC肿瘤组织中的甲基化率显著高于癌旁非肿瘤组织（P=10．007，P〈0．01），显著高于正常肝组织（P=0．006，P〈0．01）。在Ⅲ～Ⅳ期肿瘤中的甲基化率显著高于Ⅰ～Ⅱ期肿瘤（P=0．037，P〈0．05），在包膜完整的肿瘤中甲基化率显著高于包膜不完整的肿瘤（P=0．043，P〈0．05），在HBV阳性的肿瘤组织中甲基化率显著高于HBV阴性的肿瘤组织（P=-0．024，P〈0．05），在不同大小的肿瘤之间、单个结节与多个结节的肿瘤之间甲基化率的差异均无显著性。结论：上皮型钙粘素基因启动子CpG岛甲基化可能参与肝细胞的癌性转变。     

肺癌组织细胞FHIT 基因启动子甲基化和转录表达

 目的 探讨FHIT（fragile histidine triad，脆性组氨酸三联体）基因表达水平及其启动子CpG岛甲基化状态与肺癌发生发展的关系。方法 用实时定量PCR检测FHIT mRNA在肺癌组织、肺癌旁组织与去甲基化剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza-2’-deoxycytidine、5-Aza—CdR）处理前后A549细胞株中的表达，用甲基化特异性PCR（MS-PCR）检测FHIT启动子CpG岛甲基化状态。结果 FHIT mRNA在肺癌旁组织中全部表达，在肺癌组织中表达缺失率为48．89％（22／45），且表达量低于正常肺组织（t=-15．851，P〈0．001），但在不同年龄和性别、肿瘤大小、恶性程度、肿瘤分类的差异无显著性；FHIT基因启动子在肺癌组织中发生甲基化的频率为40％（18／45）、在癌旁组织中频率8．7％（2／23）（X^2=7．184，P〈0．01），18份启动子区甲基化的肺癌标本中，10份同时伴有mRNA表达缺失。结论 在肺癌组织中，FHIT基因启动子甲基化频率明显升高，其表达缺失或下调，提示FHIT启动子甲基化可在肺癌发生和发展中起一定作用。     

人乳腺癌细胞雌激素受体基因的去甲基化及其表达

目的探讨人乳腺癌雌激素受体（ER）基因启动子的去甲基化和ER蛋白表达功能恢复的关系。方法用甲基化特异性PCR（MSP）和亚硫酸氢盐基因组测序方法检测乳腺癌细胞ER基因启动子的甲基化状态;用RT-PCR方法从mRNA水平检测ER和孕激素受体（PR）基因的表达;用Western blot方法从蛋白水平探测ER基因的表达;MTT方法检测重新表达ER蛋白的功能。结果在ER阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231中,ER基因启动子甲基化的水平较高,而ERmRNA和ER蛋白均不表达。MDA-MB-231细胞用去甲基化剂5-杂氮-2’-脱氧胞嘧啶（5-AZA-2＇-deoxyC）处理,可以恢复该细胞系ERmRNA和ER蛋白的表达,同时伴有ER基因启动子甲基化水平的降低以及PR基因的表达。MDA-MB-231细胞经去甲基化逆转ER表达后,应用三苯氧胺治疗,乳腺癌细胞增殖受到明显抑制（P〈0．05）。结论人乳腺癌ER基因的失活与其基因启动子高甲基化关系密切。去甲基化剂5-AZA-2＇-deoxyC能较好地降低MDA-MB-231细胞DNA甲基化,并有效激活功能性ER基因的再表达,为ER基因阴性的乳腺癌患者接受内分泌治疗提供了新的途径和理论基础。     

肺癌中FHIT基因异常甲基化及其蛋白表达的意义

目的：检测肺癌组织FHIT蛋白表达及基因异常甲基化，探讨其在肺癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组化SP法和甲基化特异性PCR（MSP）检测肺癌组织与癌旁组织（n=60）中FHIT蛋白表达和基因异常甲基化情况，并对基因甲基化扩增产物进行测序，对60例患者随访调查。结果：FHIT蛋白在癌旁组织的阳性表达明显高于癌组织，二者差异存在统计学意义（76．7％vs50．0％，P〈0．05）；FHIT基因异常甲基化在癌组织中的发生率明显高于癌旁组织，二者差异存在统计学意义（68．3％vs35．0％，P〈0．001）；FHIT基因甲基化的发生率在FHIT蛋白阴性患者中高于阳性表达者（83．3％vs53．5％，P〈0．05）；FHIT蛋白表达及基因甲基化发生率均与性别、年龄、吸烟状况、组织学类型、大体分型、TNM分期及淋巴结转移无关（P〉0．05）；FHIT蛋白阳性表达患者生存率高于阴性表达者（P〈0．05），FHIT蛋白是影响无瘤生存时间的危险因素（P〈0．001）。结论：肺癌中FHIT基因异常甲基化频繁发生，FHIT蛋白表达明显下调，FHIT在肺癌的发生发展中可能具有重要的作用，FHIT蛋白可以作为判断患者预后的重要指标。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。