病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡与外周血淋巴细胞凋亡的研究

目的:研究心肌炎小鼠柯萨奇B3(CVB3)病毒性心肌炎模型外周血淋巴细胞凋亡与心肌细胞凋亡的关系。方法:采用AnnexinV/PI双参数法在流式细胞仪上定量检测CVB3心肌炎小鼠外周血淋巴细胞凋亡及心肌细胞凋亡百分率。结果:CVB3感染所致心肌炎小鼠外周血淋巴细胞凋亡以及心肌细胞凋亡均显著高于正常对照小鼠(P<0.001),且两者呈显著正相关(r=0.80,P<0.01);外周血淋巴细胞及心肌细胞凋亡百分率与心肌病理积分亦呈明显正相关(r=0.72,P<0.01;r=0.85,P<0.01)。结论:病毒性心肌炎外周血淋巴细胞凋亡可以反映心肌细胞凋亡情况,而且两者均与心肌炎病理损害程度密切相关。     

小儿病毒性心肌炎外周血淋巴细胞凋亡及其意义

目的　探讨心肌炎患儿淋巴细胞凋亡的改变、细胞免疫状况及干预治疗的效果。方法　选择临床诊断心肌炎患儿 2 0例 ,采用光镜技术及原位末端标记法 (TUNEL)检测患儿外周血淋巴细胞凋亡情况 ,同时检测患儿治疗前后心肌酶谱、T淋巴细胞亚群的动态变化。另外以 13例正常健康查体儿童作为对照组。结果　心肌炎患儿外周血淋巴细胞凋亡检出率为 10 0 % ,凋亡率为 5 .5 % ,明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,急性期T淋巴细胞亚群中的CD4,CD8下降 ,与治疗后及对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。心肌酶谱在治疗前后有明显变化 (P <0 .0 1)。结论　病毒性心肌炎的发病过程与细胞凋亡过度导致T淋巴细胞免疫功下降有关 ,其相关性呈动态变化 ,可作为病情变化的观察指标     

小儿病毒性心肌炎外周血T淋巴细胞亚群测定

小儿病毒性心肌炎外周血Ｔ淋巴细胞亚群测定倪世宏，艾艳华，缪薇马鞍山钢铁总公司医院儿科（２４３０００）关键词病毒性心肌炎；Ｔ淋巴细胞为了探讨Ｔ淋巴细胞亚群在病毒性心肌炎发病机理中的作用，我们应用单克隆抗体（Ｍ。Ａｂ）对病毒性心肌炎患儿进行了外用血Ｔ细胞...     

糖皮质激素对柯萨奇B3病毒感染小鼠免疫状态的调控

目的:研究病毒性心肌炎时应用糖皮质激素治疗对机体免疫指标的调控作用.方法:将240只4周龄Balb/c小鼠随机分为6组,每组40只,包括正常对照组、激素对照组、病毒对照组、早期激素治疗组、中期激素治疗组和晚期激素治疗组.正常对照组每只小鼠腹腔接种0.1 ml不含病毒的Eagle液,其他组每只小鼠均腹腔接种0.1 ml 107.5TCID50/ml的柯萨奇B3(CVB3)病毒液.正常及病毒对照组小鼠均予以生理盐水0.2 ml灌胃,激素治疗组小鼠分别在感染病毒后不同时期给予泼尼松1 mg/kg,灌胃给药10 d.采用膜联蛋白V(Annexin V)联合碘化丙啶(PI)染色双参数技术,即Annexin V/PI法,通过流式细胞术定量检测各组小鼠外周血、胸腺、脾脏淋巴细胞的凋亡,应用流式细胞仪自动细胞计数法测定外周血及脾脏T淋巴细胞亚群CD 3、CD 4、CD 8.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗心磷脂抗体(ACA).结果:正常小鼠外周血、胸腺、脾脏有少量淋巴细胞凋亡,短期服用激素不升高淋巴细胞凋亡率;病毒性心肌炎小鼠淋巴细胞凋亡增加,应用激素治疗可诱导活化淋巴细胞凋亡,减少其对心肌细胞的浸润.病毒性心肌炎小鼠外周血CD 3、CD 4、CD 8下降与应用激素治疗的心肌炎小鼠CD 3、CD 4、CD 8下降无显著性差异.正常小鼠抗心磷脂抗体阳性率很低,病毒性心肌炎小鼠ACA阳性率升高,早期及中期应用激素可降低ACA阳性率.结论:病毒性心肌炎应用激素治疗对细胞免疫功能无严重不良影响,还可明显抑制细胞毒T淋巴细胞对心肌的损害作用以及降低自身免疫应答.     

心肌肌钙蛋白T检测对小儿急性病毒性心肌炎的诊断价值

目的探讨心肌肌钙蛋白T(cTnT)对小儿急性病毒性心肌炎的诊断意义。方法对102例疑似小儿急性病毒性心肌炎患儿分别于入院时即发病(4.5±3.8)d,抽取周围静脉血同时测定cTnT和CK-MB水平,观察小儿急性病毒性心肌炎这两项指标的阳性率。结果 cTnT和CK-MB在小儿急性病毒性心肌炎患儿就诊时的阳性率分别为94.3%、95.5%。两组间的差异无统计学意义(P>0.05)。cTnT检测急性病毒性心肌炎的特异性(92.2%)优于CK-MB(71.4%),其敏感性(94.3%)低于CK-MB(95.5%)。结论在诊断小儿急性病毒性心肌炎时,cTnT检测方便、快速,特异性高,对小儿急性病毒性心肌炎的诊断具有很好的价值,联合检测cTnT及CK-MB,可提高诊断率,减少漏诊率。     

急性病毒性心肌炎患儿血清心肌酶与外周血淋巴细胞凋亡的关系

目的探讨急性病毒性心肌炎(VM)患儿血清心肌酶与外周血淋巴细胞凋亡的关系。方法采用TUNEL法和全自动生化分析仪对43例VM患儿(观察组)、37例健康儿童(健康对照组)外周血淋巴细胞凋亡率和心肌酶谱进行测定,分析外周血淋巴细胞凋亡率和心肌酶谱的相关性。结果观察组外周血淋巴细胞凋亡率和坏死率均显著高于健康对照组(P<0.05);心肌酶谱CK-MB、LDH、CK、HBDH均高于健康对照组(P<0.05),且与外周血淋巴细胞凋亡率呈正相关(r=0.831、0.793、0.783、0.717,P均<0.05)。结论 VM患儿外周血淋巴细胞凋亡率的增加可能是导致患儿免疫功能低下的原因,心肌酶谱与外周血淋巴细胞凋亡率呈正相关。     

CK-MB联合cTnI在小儿病毒性心肌炎诊断中的应用

目的 探讨肌酸激酶同工酶MB质量(CK-MB)联合心肌肌钙蛋白I(cTnI)对小儿病毒性心肌炎(VMC)的诊断价值.方法 对51例病毒性心肌炎和82例非病毒性心肌炎(NVMC)患儿及50例正常健康对照组儿童进行CK-MB及cTnI检测.结果 VMC组CK-MB及cTnI结果与NVMC组及正常对照组结果有显著性差异(P＜0.01);CK-MB诊断小儿病毒性心肌炎的灵敏度和特异性分别为54.90%和89.39%;cTnI诊断小儿病毒性心肌炎的灵敏度和特异性分别为84.31%和96.21%.结论 cTnl对小儿病毒性心肌炎的诊断优于CK-MB,CK-MB联合cTnl可使小儿病毒性心肌炎的诊断效率进一步提高.     

TNF-α及可溶性受体P55在病毒性心肌炎小儿血清表达及意义

目的:探讨病毒性心肌炎患儿血清TNF-α及受体P55表达的意义.方法:采用比色法检测72名病毒性心肌炎患儿(患儿组)血清TNF-α及P55的表达水平,并同60正常健康同龄儿童(对照组)对照,比较病毒性心肌炎患儿同正常健康儿童血清TNF-α及P55表达差异.结果:患儿组血清TNF-α及P55表达水平正常儿童组差异具有统计学意义.结论:TNF-α及P55在小儿病毒性心肌炎血清高表达,其同心肌损伤有关,同时可能参与抗病毒等保护作用.     

心肌肌钙蛋白Ⅰ在小儿病毒性心肌炎中的诊断价值探讨

目的探讨心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTn I)在小儿病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)中的诊断价值。方法采用ELISA法测定72例病毒性心肌炎患儿及50例非心脏疾患患儿的心肌肌钙蛋白I,并与肌酸磷酸激酶同工酶CK-MB比较。并将72例病毒性心肌炎患儿按病程、临床类型分组,进行组间比较。结果病毒性心肌炎患儿的cTnI(0.29±0.48)μg/L明显高于非心脏疾患患儿数(0.06±0.15)μg/L(P<0.01)。其特异性明显强于CK-MB,(P<0.05),且在发病2周以内者有较高的敏感性。结论cTn I是诊断小儿病毒性心肌炎中具有一定特异性的重要指标。     

细胞凋亡在小鼠病毒性心肌炎中的作用

目的 :探讨柯萨奇病毒 B3(CVB3)所致小鼠病毒性心肌炎 (VM)心肌细胞损伤的变化 ,观察细胞凋亡在心肌损伤中的作用。方法 :采用 CVB3制备小鼠病毒性心肌炎动物模型 ,分别于腹腔接种 CVB3后第 5、7、10、14、2 1、2 8d,取心肌组织切片 HE染色了解心肌损伤 (坏死 )情况 ;电镜和流式细胞仪检测 ,观察心肌中的细胞凋亡。结果 :心肌坏死方面 :光镜观察见对照组小鼠心肌组织无异常改变 ,实验组病鼠可见心肌细胞坏死和单核、淋巴细胞浸润 ,后期可见纤维化 ;心肌细胞凋亡方面 :电镜观察对照组心肌中未检出凋亡细胞 ,而病鼠心肌凋亡细胞检出率较高 5 8.33% (7/12例 ) ,且细胞凋亡多存在于炎症病灶周围的心肌细胞及病灶处炎性浸润细胞 ;各期病鼠心肌组织中的细胞凋亡比率较对照组明显增加 ,流式细胞仪检测平均心肌细胞凋亡百分率为 2 6 .74± 15 .2 2 % ,感染后第 7～ 14 d心肌细胞凋亡百分率明显高于其余时间 (P<0 .0 0 1)。结论 :小鼠病毒性心肌炎中心肌损伤坏死与凋亡共存 ,其中异常的心肌细胞凋亡与病毒性心肌炎的发病过程有关     

肾上腺皮质激素对病毒性心肌炎小鼠免疫状态的调控作用

目的：研究病毒性心肌炎时应用肾上腺皮质激素治疗对机体免疫指标的调控作用。方法：随机将240只4周龄BALB／c小鼠等分为正常对照组、激素对照组、病毒对照组、早期激素治疗组、中期激素治疗组和晚期激素治疗组,每组40只。正常对照组每只小鼠腹腔接种0．1ml不含病毒的Eagle’s液,其他组每只小鼠均腹腔接种0．1ml 107．5TCID 50/ml的柯萨奇B3（CVB3）病毒液。正常及病毒对照组小鼠均予以生理盐水0．2ml灌胃,激素治疗组小鼠分别在感染病毒后不同时期给予泼尼松1mg／kg,灌胃给药10d。采用膜联蛋白V（Annexin V）联合碘化丙啶（PI）染色双参数技术,通过流式细胞术定量检测各组小鼠外周血、胸腺、脾脏淋巴细胞的凋亡,应用流式细胞仪自动细胞记数法测定外周血及脾脏T淋巴细胞亚群CD^3＋、CD^4＋、CD^8＋。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗心磷脂抗体（ACA）。结果：正常小鼠外周血、胸腺、脾脏有少量淋巴细胞凋亡,短期服用激素不增加淋巴细胞凋亡率;病毒性心肌炎小鼠淋巴细胞凋亡增多,应用激素治疗可诱导活化淋巴细胞凋亡．减少其对心肌细胞的浸润。与应用激素治疗的心肌炎小鼠相比,病毒性心肌炎小鼠外周血CD^3＋、CD^4＋、CD^8＋下降差异无显著性。正常小鼠抗心磷脂抗体阳性率较低,病毒性心肌炎小鼠ACA阳性率增加,早期及中期应用激素可降低ACA阳性率。结论：应用激素治疗病毒性心肌炎对细胞免疫功能无严重不良影响,并可明显抑制细胞毒T淋巴细胞对心肌的损害作用．降低自身免疫应答.     

病毒性心肌炎患儿外周血T淋巴细胞亚群测定的临床意义

测定了３０例不同病期的病毒性心肌炎患儿和１４例正常对照组儿童外周血Ｔ淋巴细胞亚群并进行了Ｅ玫瑰花环试验。各组Ｅｔ和Ｅａ无明显差别。病毒性心肌炎急性期外周血ＯＫＴ４和Ｔ４／Ｔ８明显降低，ＯＫＴ３和ＯＫＴ８无明显改变；迁延期外周血ＯＫＴ３升高，与恢复期差异明显；ＯＫＴ４及Ｔ４／Ｔ８。比值增高，与急性期差异显著，ＯＫＴ８无明显改变；恢复期外周血Ｔ细胞亚群各测定值与对照组无明显差别。结果表明，Ｔ淋巴细胞亚群在病毒性心肌炎发生中具有重要作用；测定外周血Ｔ细胞亚群比Ｅ玫瑰花环测验更能敏感地反映病毒性心肌炎患儿细胞免疫功能的变化，且对判断预后有一定价值。     

病毒性心肌炎患儿的T细胞免疫改变

目的探讨病毒性心肌炎患儿细胞免疫功能的动态变化规律。方法通过流式细胞技术,检测56例病毒性心肌炎患儿的急性期及恢复期血清中总T淋巴细胞(CD3)、T辅助细胞(CD4)和T抑制细胞(CD8)的水平进行分析,并与正常对照组比较。结果急性期CD3、CD4和CD8均下降,CD4/CD8降低;恢复期CD3及CD4均已恢复正常,仅CD8恢复较慢,仍略低于正常。结果提示病毒性心肌炎急性期细胞免疫功能低下,恢复期多数患儿免疫系统紊乱消失。结论检测外周血T淋巴细胞亚群表达对评估病毒性心肌炎患儿的免疫功能状况、疾病的诊断及病情严重度判断都具有重要的临床意义。     

病毒性心肌炎患儿细胞免疫功能的研究

目的：探讨病毒性心肌炎患儿外周血Ｔ淋巴细胞亚群及血清可溶性白介素－２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）。方法：Ｔ淋巴细胞亚群及ＳＩＬ－２Ｒ测定分别采用ＡＰＡＡＰ法和ＥＬＩＳＡ法。结果：ＣＤ８及ＳＩＬ－２Ｒ明显增高（Ｐ＜００１）,ＣＤ３和ＣＤ４与对照组比较无明显变化。结论：病毒性心肌炎患儿细胞免疫功能紊乱,为临床应用免疫治疗提供依据。     

病毒性心肌炎患儿T淋巴细胞亚群的变化

目的探讨病毒性心肌炎患儿不同阶段T淋巴细胞免疫功能状况，为估计病情和治疗提供依据。方法对病毒性心肌炎患儿（n=20）和健康查体儿（n=13）采用改良碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶（APAAP）法对照检测外周血T淋巴细胞亚群（CD3^ ,CD4^ ,CD8^ ,CD4^ /CD8^ ）含量。结果病毒性心肌炎患儿急性期CD4^ ,CD8^ 细胞百分率及CD4^ /CD8^ 比值降低，与对照组比较差异有意义（P＜0.05）；恢复期CD4^ ,CD8^ ,CD4^ /CD8^ 比值升高，与对照组比较差异无明显性（P＞0.05）。结论病毒性心肌炎急性期T淋巴细胞亚群表达太比例失调，细胞免疫功能紊乱。     

病毒性心肌炎动物模型细胞免疫功能和细胞因子检测的意义

目的探讨T细胞亚群、白细胞介素2（IL-2）和肿瘤坏死因子α（TNF—α）与病毒性心肌炎（VM）的关系。方法用亲心肌细胞株柯萨奇病毒B3感染Balb／c小鼠建立心肌炎模型,用免疫荧光技术检测VM小鼠血液中的T细胞亚群;用双抗体夹心法检测小鼠血清中的IL-2和TNF—α结果VM小鼠血液中CD4＋（Th/Ti）和CD8＋（Tc／Ts）细胞亚群的含量、血清中IL-2和TNF—α水平均明显高于正常小鼠。结论T细胞亚群、IL-2和TNF—α参与病毒性心肌炎的发病,同时也发挥抗病毒作用。     

艾迪注射液对晚期肺癌患者外周血淋巴细胞凋亡及Treg细胞的影响研究

目的:观测艾迪注射液对晚期肺癌患者外周血淋巴细胞凋亡及Treg细胞的动态变化,探讨其对晚期肺癌患者免疫功能的影响。方法:收集2004年7月～2011年9月晚期肺癌患者86例,随机分为艾迪治疗组52例,非艾迪治疗组34例,并以健康志愿者作为对照组。以流式细胞术动态检测各试验组在使用艾迪15 d、30 d、60 d的外周血单个核细胞(PBMC)中淋巴细胞凋亡率及Treg细胞(CD4+CD25+T cell)数量的变化。结果:肺癌患者外周血中淋巴细胞凋亡率明显高于对照组及艾迪治疗组。经艾迪治疗后的肺癌患者淋巴细胞凋亡率明显下调。肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞的数量明显高于对照组及艾迪治疗组,艾迪注射液治疗后肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞的数量可明显下调。结论:艾迪注射液能降低晚期肺癌患者外周血淋巴细胞凋亡率。下调CD4+CD25+T细胞的数量,可能有改善晚期肺癌患者免疫状态的作用。