胆木提取物对哮喘小鼠肺泡灌洗液中炎性细胞及细胞因子的影响

目的 探讨通过预先应用胆木提取物的干预,了解其对哮喘小鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎性细胞及细胞因子的影响以及剂量相关性。方法 将实验动物随机分为6组（正常对照组,哮喘模型组,胆木提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组,地塞米松组）,每组10只,实验组通过卵白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏,随后每日一次雾化吸入OVA激发复制小鼠支气管哮喘模型,除正常对照组外,每次哮喘激发前30 min腹腔注射给药（低剂量组1.0 mg/kg,中剂量组2.0 mg/kg,高剂量组4.0 mg/kg,地塞米松组2 mg/kg）。在连续雾化激发28 d后断颈处死小鼠,留取BALF,用ELISA方法对IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IFN-γ浓度进行检测;瑞氏染色计数白细胞(white blood cell,WBC)、嗜酸性粒细胞（eosinophile granulocyte,EOS）、中性粒细胞（neutrophile granulocyte,NEU)。结果 与哮喘模型组对比,经胆木提取物干预处理,哮喘小鼠BALF中WBC、EOS、NEU均降低,其数值与胆木提取物的干预剂量呈负相关;而细胞因子IL-2、IL-10、IFN-γ的浓度则比哮喘模型组升高,其升高幅度与干预剂量呈正相关,细胞因子IL-4、IL-5浓度比哮喘模型组降低,降低幅度与干预剂量呈负相关。结论 胆木提取物可能通过影响细胞因子（IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IFN-γ）的分泌及炎性细胞在气道中的浸润,对支气管哮喘小鼠的气道炎症进行调控。     

桑白皮总黄酮对哮喘小鼠气道炎症反应的保护作用

目的：探讨桑白皮总黄酮（TFCM）对哮喘小鼠气道炎症反应的保护作用及机制。方法：将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组,TFCM低、中、高剂量组,地塞米松阳性对照组。除正常组外,其余小鼠给予卵清蛋白（OVA）致敏和激发。TFCM各剂量组给予TFCM（50、100、200 mg/kg）,阳性对照组给予地塞米松 （0.5 mg/kg）,正常组和模型组给予等量0.9%氯化钠溶液。将小鼠置于动物肺功能检测系统中测定肺阻力和肺顺应性值;收集小鼠的支气管肺泡灌洗液（BALF）及血液样本,用于白细胞介素IL-4、IL-5、IL-13、嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）、黏蛋白MUC5AC、MUC5B、IgE水平测定和总细胞、白细胞分类计数;肺组织HE、AB-PAS染色观察气道炎症情况。结果：与模型组比,TFCM处理可以显著升高小鼠肺阻力,降低肺顺应性（P＜0.05）;中、高剂量TFCM显著减少小鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞、嗜酸粒细胞、巨噬细胞数量和下调IL-4、IL-5、IL-13、Eotaxin、IgE、MUC5AC、MUC5B水平（P＜0.05）;另外小鼠肺组织HE、AB-PAS染色结果显示TFCM可以使小鼠肺组织气道炎症明显减轻。结论：TFCM可以减轻小鼠气道炎症反应,且对小鼠哮喘有显著疗效。     

白三烯受体拮抗剂对哮喘患者支气管肺泡灌洗液嗜酸细胞凋亡的影响

目的　观察哮喘是否存在嗜酸性粒细胞 (EOS)凋亡功能的异常及白三烯受体拮抗剂对EOS凋亡的调节作用。方法　分离健康志愿者 (对照组 2 5例 )、支气管哮喘患者 (哮喘组 5 0例 ,其中 30例急性发作期 ,2 0例非急性发作期 )支气管肺泡灌洗液EOS ,测定自发的或经白三烯受体拮抗剂治疗前后的EOS凋亡率。结果　①支气管哮喘急性发作期患者 ,非急性发作期患者EOS凋亡率分别为 (5 7± 18) %、(33± 15 ) % ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;②对照组与哮喘组EOS均发生不同程度的凋亡。EOS凋亡率对照组为 (12 9± 35 ) % ,哮喘组 (平均值 )为 (45± 17) % ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。经白三烯受体拮抗剂治疗后 ,哮喘组凋亡率为 [(95± 2 7) %、(70± 2 3) % ],与治疗前比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　哮喘患者的EOS存在自身凋亡功能的缺陷 ,经白三烯受体拮抗剂治疗后EOS凋亡增加。EOS凋亡是哮喘炎症消退的重要途径之一。     

谷氨酰胺对哮喘模型小鼠血清和肺泡灌洗液中白细胞介素-4及白细胞介素-6水平的影响

[目的]观察谷氨酰胺对哮喘模型小鼠白细胞介素(IL)-4,IL-6水平的影响.[方法]取Balb/c小鼠,应用卵蛋白及氢氧化铝致敏,再利用雾化吸入卵蛋白激发气道的方法制作哮喘小鼠模型.随机分为正常对照组、哮喘模型组、谷氨酰胺小、中、大剂量组.谷氨酰胺小、中、大剂量组分别在末次哮喘激发后腹腔注射给予0.40,0.75,1.50g/kg谷氨酰胺,并在注射后30min采血.取小鼠血清,用ELISA方法检测IL-4,IL-6水平.气管插管后取肺泡灌洗液,离心后取上清液检测IL-4,IL-6水平.[结果]哮喘模型组血清及肺泡灌洗液中IL-4,IL-6水平均明显高于正常对照组(P<0.05),谷氨酰胺小、中、大剂量组血清及肺泡灌洗液中IL-4,IL-6水平与哮喘模型组比较明显降低(P<0.05),且呈剂量效应(P<0.05).[结论]谷氨酰胺可降低哮喘小鼠血清和肺泡灌洗液中的IL-4,IL-6水平,起到抗炎作用,对哮喘有治疗作用,且作用呈现剂量依赖性.     

轻度哮喘患者支气管肺泡灌洗液中的肥大细胞计数

目的 :介绍哮喘患者支气管肺泡灌洗液 (BALF)的处理方法和肥大细胞计数。方法 :来源于稳定期轻度哮喘患者 (36人 )的BALF经过滤和冲洗后 ,取 10 μL与等量的 0 1%锥虫蓝混合并计数有核细胞总数。根据计数的结果将余下的细胞稀释成 5× 10 5有核细胞 mL ,然后进行细胞离心 ,每张载玻片上加 5× 10 4 个有核细胞。肥大细胞经Carnoy s固定溶液固定后 ,用甲苯胺蓝染色 ,并在脱水后用DPX封片。每张片子至少计数 5 0 0个有核细胞 ,并计数肥大细胞占有核细胞的百分率。结果 :肥大细胞呈深紫色 ,在淡蓝色背景上清晰易辨。稳定期轻度支气管哮喘患者的BALF中的肥大细胞占有核细胞的 (0 2 0± 0 2 4 ) %。结论 :本文的实验程序适合于哮喘患者BALF中的肥大细胞计数。     

黄芪对支气管哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液及血清中NO、IL-5和炎症细胞的影响

目的:探讨黄芪对支气管哮喘模型大鼠血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中一氧化氮(NO)、白细胞介素5 (IL-5)和炎症细胞的影响,阐明黄芪对哮喘的治疗效果.方法:60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、激素干预组及黄芪干预低、中、高剂量组,每组10只,除正常对照组外以卵白蛋白(OVA)致敏并吸入激发法制备大...     

哮喘患儿诱导痰液、支气管肺泡灌洗液中炎症细胞、炎症因子的比较

目的 :探讨诱导痰液 (SI)检测方法在评价哮喘患儿气道炎症方面的意义。方法 :对 11例哮喘间歇期患儿的 SI、支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中的炎症细胞、活化嗜酸性粒细胞 (EG+ 2 细胞 )、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 (ECP)、白介素 5 (IL- 5 )进行比较分析。结果 :SI中的有核细胞总数及中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、EG+ 2 细胞百分数均较 BAL F中明显增高 [分别为 (16 .0 ± 2 .3)× 10 5/m l与 (8.1± 1.5 )× 10 5/m l,(2 9.2± 10 .3) %与 (4.5± 1.8) % ,(11.7± 4 .4 ) %与 (3.0± 1.2 ) % ,(8.2± 3.1) %与 (2 .0±0 .9) % ],SI中 ECP[(10 8.1± 116 .2 )μg/L ]明显高于 BAL F中 ECP[(7.2± 10 .5 )μg/L ],SI中 IL - 5 (5 9.2± 4 0 .8ng/L )明显高于 BAL F中 IL - 5 (<10 ng/L )。嗜酸性粒细胞、EG+ 2 细胞在 SI与 BAL F之间呈正相关 (均 P <0 .0 5 )。结论 :SI检测法可作为检测哮喘患儿气道炎症的一种可靠方法 ,SI中的细胞和可溶性介质比 BAL F的更密集 ,可检出气道分泌物中含量较低的化学物质 ,适用于临床动态观察 ,可指导抗炎治疗     

支气管哮喘患者外周血及支气管肺泡灌洗液中T细胞受体δ链多态性研究

目的　探讨γδT细胞在哮喘气道慢性炎症产生或延续机制中的作用。方法　留取 7例哮喘患者和 7例对照者的外周血和支气管肺泡灌洗液 (BALF)。用免疫荧光染色和流式细胞分析技术检测γδT细胞的百分率 ,用RT PCR法和基因扫描法分析T细胞受体Vδ1～Vδ3 亚族的相对取用频率及克隆增殖状态。结果　哮喘患者BALF中γδT细胞比例 (7 8%± 4 7%)较对照组 (3 3%± 3 0 %)显著增加 (P =0 0 4 )。哮喘患者的外周血及BALF中V1～Vδ3 亚族的相对取用频率无显著差异 ,但BALF中Vδ1的相对取用频率 (44%± 13%)较对照组 (19%± 5 %)显著增加 (P =0 0 0 0 2 )。哮喘患者BALF中部分Vδ基因亚家族呈单克隆或寡克隆扩增 ,以Vδ1亚族尤其显著。结论　对单一或数种抗原发生特异性应答的γδT细胞在哮喘的炎症过程中可能发挥了较重要的作用 ,而这种 /些抗原的持续刺激可能是支气管哮喘气道炎症发生与持续发展的原因之一。     

哮喘小鼠模型肺组织、肺泡灌洗液中TNF-α及 IL-12水平比较

目的：观察支气管哮喘小鼠模型肺泡灌洗液（ BALF）中TNF-α,IL-12水平,了解两者的水平及诊断价值。方法40只雌性Balb/C小鼠,随机分成2组：A正常对照组、B支气管哮喘模型组,每组各20只。采用卵蛋白（ OVA）等致敏支气管哮喘模型组;第21天后,哮喘模型组1％卵蛋白溶液雾化吸入,雾化时间共5周,对照组用生理盐水雾化吸入。分别观察两组哮喘发作症状、ELISA检测肺泡灌洗液中TNF-α,IL-12的水平。结果支气管哮喘模型组肺泡灌洗液中TNF-α显著升高,IL-12降低,且IL-12与TNF-α呈密切负相关（ r＝-0．964,P＜0．01）。结论哮喘的发生发展不仅与炎症介质TNF-α的异常释放增多有关,还与内源性的抗炎介质IL-12的释放不足有关,而且IL-12能够抑制TNF-α的合成。     

桑白皮水提取物的抗过敏作用

[目的]观察桑白皮水提取物的抗过敏作用.[方法]用比色法测定桑白皮水提取物对肥大细胞毒性的影响,在光学显微镜下观察桑白皮水提取物对复合物48/80诱导的肥大细胞脱颗粒的影响,通过IgE诱导大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)试验.[结果]正常对照组OD值为1.31±0.40,桑白皮水提取物大剂量组OD值为1.39±0.45,桑白皮水提取物对肥大细胞无毒性作用,伊文思蓝在正常对照组为(62.25±3.23)μg/g,在桑白皮水提取物中剂量组为(172.34±12.84)μg/g,在桑白皮水提取物大剂量组为(122.35±4.97)μg/g,均能明显抑制PCA中血管通透性(P<0.05).[结论]桑白皮水提取物具有抗过敏作用.     

旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠血清及肺泡灌洗液总IgE的影响

【目的】通过研究旋毛虫感染小鼠在过敏性哮喘发病时血清及肺泡灌洗液中总IgE水平变化,探讨旋毛虫感染对过敏性哮喘的影响。【方法】取雌性、8周龄BALB/c小鼠,随机分为3组,A组为空白对照组,B组为单纯过敏性哮喘组,C组为感染旋毛虫后哮喘组。C组经灌胃感染旋毛虫囊包幼虫200～300条;4周后,以卵清白蛋白（ovalbumin,OVA）分别对B组和C组小鼠进行致敏激发,建立过敏性哮喘模型;8周后,取小鼠血清、肺泡灌洗液,检测总IgE水平。【结果】ELISA法检测血清中A、B、C组小鼠总IgE水平分别为（61.79±25.79）、（437.08±75.68）、（251.64±107.27）ng/ml。与B组相比较,C组小鼠总IgE水平降低（P〈0.05）;肺泡灌洗液中A、B、C三组小鼠总IgE水平分别为（43.70±29.49）、（387.49±148.32）、（102.50±49.55）ng/ml。与B组相比较,C组小鼠总IgE水平降低（P〈0.05）。【结论】旋毛虫感染具有降低过敏性哮喘小鼠总IgE水平的作用。     

烟酸对染矽尘大鼠肺灌洗液细胞成份的影响

[目的]观察烟酸对染矽尘大鼠支气管肺泡灌洗液炎性细胞成份的影响.[方法]wistar大鼠随机分为对照组、染矽尘组和烟酸处理组,气管暴露法建立矽肺动物模型,在体全肺肺灌洗法收集支气管肺泡灌洗液,并对白细总数及其分类进行计数.[结果]与对照组比较,染矽尘组相应时间点BALF白细胞总数均不同程度增高,其中1 d、7 d和28 d时增幅较大,均具有显著性差异(P＜0.05),7 d时达高峰.烟酸组相应时间点BALF白细胞总数亦都高于对照组,其中1d、14d和28d时有显著性差异(P＜0.05).烟酸组各相应时间点BALF白细胞总数与染矽尘组比较均无显著性差异(P＞0.05).对照组比较,染矽尘组相应时间点BALF淋巴细胞均不同程度增高,其中1 d、7 d、14 d和21 d时增幅较大,均具有显著性差异(P＜0.05),7 d时达高峰.烟酸组相应各时间点BALF淋巴细胞均不同程度地高于对照组,其中1 d和14 d时具有显著性差异(P＜0.05).烟酸组各相应时间点BALF淋巴细胞与染矽尘组比较均无显著性差异(P＞0.05).与对照组比较,染矽尘组BALF中性粒细胞从第1 d开始增加,一直持续到第28 d,其中7 d时具有显著性差异(P＜0.05).烟酸组BALF中性粒细胞在相应时间点亦均高于对照组,其中1d时具有显著性差异(P＜0.05).烟酸组BALF中性粒细胞与染矽尘组比较无显著性差异(P＞0.05).[结论]矽尘可引起BALF白细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞升高;烟酸对矽尘诱导大鼠BALF细胞总数及中性粒细胞、淋巴细胞增加没有缓解作用.     

支气管哮喘患者血清免疫球蛋白E和支气管肺泡灌洗液中白介素8测定及意义

目的探讨免疫球蛋白E(IgE)和白介素8(IL-8)在支气管哮喘发病机制中的作用以及在诊疗中的意义。方法选择25例支气管哮喘急性发作患者为哮喘组,另选正常健康体检者16例为对照组。采集所有研究对象血清和支气管肺泡灌洗液(BALF),使用多抗体夹心酶联免疫吸附方法检测2组血清IgE和BALF中IL-8含量,比较2组血清IgE和BALF中IL-8含量,并进行相关性分析。结果哮喘组血清IgE水平和BALF中IL-8水平均较对照组明显增高(P<0.01);哮喘组血清IgE和BALF中IL-8水平之间呈显著正相关(r=0.73,P<0.01)。对照组血清IgE和BALF中IL-8水平之间无明显相关性(r=0.26,P>0.05)。结论IL-8和IgE可能参与了哮喘的发病过程,测定二者的水平,对临床诊断支气管哮喘有一定的应用价值。     

布地奈德福莫特罗粉吸入剂吸入治疗对轻度支气管哮喘患者气道重塑和支气管肺泡灌洗液中炎症介质的影响

目的探讨布地奈德福莫特罗粉吸入剂吸入治疗对轻度支气管哮喘(BA)患者气道重塑和支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性介质的影响及其机制。方法将52例轻度BA患者分为3组,布地奈德福莫特罗粉吸入剂组22例,每晚联合吸入布地奈德和福莫特罗;布地奈德组15例,每晚吸入布地奈德;常规治疗组15例,在哮喘发作期给予茶碱控释片0.2 g,每日2次,口服;沙丁胺醇气雾剂2揿,每日3次,吸入。另选健康受试者10名作为正常对照组。在治疗前和治疗6个月后分别经纤维支气管镜行支气管黏膜活检,测量并比较支气管黏膜网状基底膜厚度(TRBM)和黏膜下组织的肌纤维母细胞计数,酶联免疫吸附实验测定BALF中转化生长因子β1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的水平。结果布地奈德福莫特罗组、布地奈德组和常规治疗组治疗前后BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)计数、TGF-β1和MMP-9含量、TRBM及黏膜肌纤维母细胞计数均显著高于正常对照组(P<0.01);治疗前布地奈德福莫特罗组、布地奈德组和常规治疗组上述指标比较差别均无统计学意义(P>0.05);治疗后布地奈德福莫特罗组和布地奈德组上述指标均低于常规治疗组(P<0.01),布地奈德福莫特罗组BALF中细胞总数和EOS计数与布地奈德组比较差别无统计学意义(P>0.05),而布地奈德福莫特罗组BALF中TGF-β1和MMP-9含量、TRBM和气道黏膜肌纤维母细胞计数均低于布地奈德组(P<0.05)。结论布地奈德福莫特罗粉吸入剂吸入治疗能显著减轻BA患者气道重塑,其机制可能与抑制气道炎症有关。     

染矽尘大鼠早期肺组织的病理学与支气管肺泡灌洗液炎性细胞的关系

阐明大鼠染矽尘早期支气管肺泡灌洗液炎症细胞成份的变化与肺组织病理学观察结果的关系。方法：Wistar大鼠随机分为对照组和矽肺组。气管暴露法建立大鼠矽肺模型。在体全肺肺灌洗法收集支气管肺泡灌洗液，并对其中的炎性细胞总数及其分类进行计数。同时对肺组织作HE染色，普通光镜下观察矽结节的细胞构成。结果：染矽尘后1、7、14、21和28d时，BALF白细胞总数及其分类中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞均有不同程度的升高。早期以中性粒细胞和巨噬细胞增加为主，晚期以淋巴细胞增加为主，与染矽尘大鼠肺组织HE染色结果基本一致。结论：染矽尘大鼠支气管肺泡灌洗液炎症细胞的改变与肺组织普通病理学观察结果基本一致。     

旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5的影响

目的:通过观察小鼠感染旋毛虫并诱发过敏性哮喘后,肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5的变化,探讨旋毛虫感染对小鼠过敏性哮喘的影响.方法:将15只8周龄、BALB/c雌性小鼠,随机分为3组,每组各5只,Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ组为单纯过敏性哮喘组,Ⅲ组为感染旋毛虫并发哮喘组.Ⅲ组小鼠经口感染200～300条旋毛虫囊包幼虫,建立旋毛虫感染动物模型模型.28 d后,以卵清白蛋白致敏(Ovalbumin,OVA)激发Ⅱ组和Ⅲ组小鼠,建立过敏性哮喘小鼠模型;56 d后,取小鼠肺泡灌洗液,以ELISA双抗体夹心法法检测总IgE、IL-4及IL-5水平.结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组小鼠总IgE水平分别为(43.70±29.49)、(387.49±148.32)、(102.50±49.55) ng/mL; IL-4水平分别为(169.16±10.00)L、(232.91±17.95)、(172.35±19.19)pg/L;IL-5水平分别为(12.86±1.78)、(23.85±5.51)、(15.76±4.54) ng/L,与Ⅱ组相比较,Ⅲ组肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5水平降低(P＜0.05).结论:旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5的表达有抑制作用.