干细胞移植治疗慢性肢体缺血性疾病的现状与评价

肢体慢性缺血性疾病包括下肢动脉硬化闭塞症、血栓闭塞性脉管炎和糖尿病足等，传统手术、介入和药物治疗对远端动脉狭窄闭塞、流出道条件差的病人效果不佳，并且此类疾病病人多数高龄体弱，手术风险大。干细胞具有高度增殖并分化为体内各种细胞的潜能，移植后能够提供“种子细胞”与各种成血管细胞因子，促进血管生成与动脉生成，为治疗此类疾病带来希望。目前国内外对干细胞移植治疗慢性肢体和心肌缺血性疾病的前瞻性临床试验已经开展，对其机制研究也正在如火如荼地进行。本文对此领域的研究现状做一简单介绍并稍作评价。     

干细胞移植治疗肢体缺血应趋向标准化

干细胞具有高度自我更新及多向分化潜能,特定条件下能增殖、分化为血管内皮祖细胞,促进缺血肢体的血管新生.干细胞移植治疗肢体缺血性疾病具有广阔的应用前景,开展相关的标准化研究具有重要的意义.     

自体骨髓CD34+干细胞移植治疗严重肢体缺血的实验研究

目的探讨自体骨髓干细胞移植是否能增加缺血肢体的新生血管形成。方法抽取5只犬骨髓20ml,经Ficoll分离单核细胞,免疫磁珠分离CD34+细胞,在体外经血管内皮细胞生长因子诱导分化为内皮细胞,并经vWF抗染色鉴定。建立犬双侧肢体缺血动物模型,将Dil荧光标记的内皮细胞植入缺血肢体中。结果CD34+干细胞移植4周后,激光共聚焦显微镜证实缺血肢体中移植的自体骨髓干细胞参与了新生血管形成;动脉造影见干细胞移植的肢体侧枝循环明显增加,微血管密度检测移植组也明显高于对照组(12.0±2.8vs.5.0±1.6/每高倍镜视野,t=4.17,P<0.05);干细胞移植的肢体ABI平均为0.58±0.14,对照肢体ABI平均为0.32±0.11,差异有统计学意义(t=2.95,P<0.05)。结论自体骨髓干细胞移植能有效的促进缺血组织内的新生血管形成。     

犬自体骨髓干细胞在缺血肢体中新生血管形成中的作用

目的:探讨犬自体骨髓干细胞在缺血组织的新生血管形成中的作用.方法:抽取犬骨髓,经免疫磁珠系统分离出CD 34细胞,体外扩增并向血管内皮细胞诱导分化;建立犬双下肢缺血动物模型,将诱导分化细胞移植入一侧缺血肢体中作为实验组,另一侧缺血肢体植入等体积的生理盐水作为自体对照组.移植后6周,检测缺血肢体中新生血管的形成.结果:细胞移植后6周,动脉造影显示实验组缺血肢体侧枝循环增加,明显多于对照组.微血管密度检测实验组为(14±2.3)个/高倍镜视野,明显高于对照组(6±2.1)个/高倍镜视野(P<0.05).激光共聚焦显微镜证实缺血肢体中移植的自体骨髓干细胞参与了新生血管形成.结论:自体骨髓干细胞移植可以促进缺血肢体组织中的新生血管形成.     

自体骨髓干细胞移植治疗下肢缺血性疾病9例

目的 探讨自体骨髓干细胞移植术治疗下肢动脉缺血性疾病的临床效果.方法 回顾性分析9例行下肢血管造影检查确诊的下肢动脉缺血患者(9条患肢)采用自体骨髓干细胞移植术治疗的临床资料.结果 经治疗后,有6例患者(6条患肢)静息痛缓解或消失,溃疡愈合,间歇性跛行消失或距离延长,3例患者效果不佳.结论 自体骨髓干细胞移植术治疗下肢缺血性疾病具有一定的疗效,方法简单、安全.     

血管腔内成形术联合自体外周血干细胞注射治疗下肢缺血性疾病

目的 研究血管腔内成形术(pereutaneous transluminal angioplasty,PTA)联合自体外周血干细胞(peripheral blood stem cells,PBSC)注射治疗下肢缺血性疾病的临床疗效.方法 回顾性分析2006年3月至2008年6月收治的的82例患下肢缺血性疾病患者的临床资料,治疗组42例下肢缺血性疾病患者行PTA术联合自体PBSC注射治疗,对照组40例患者行单纯PTA术,比较两种方法之疗效.结果 所有患者顺利接受治疗.治疗组ABI由术前0.32±0.11提高至术后第3个月的0.50±0.14和术后第6个月的0.49±0.13(t=-6.765和-6.040,P＜0.05),TcPO_2由术前(26.1±2.3)mm Hg提高至术后第3个月的(32.7±4.2)mm Hg和术后第6个月的(34.5±2.7)mm Hg(t=-8.901和-14.250,P＜0.05),对照组ABI由术前0.30±0.12提高至术后的0.47±0.15及0.47±0.13(t=-5.631和-5.873,P＜0.05),TcPO_2由术前(25.9±2.4)mm Hg提高至术后第3个月的(28.9±2.9)mm Hg及术后第6个月的(28.9±2.1)mm Hg(t=-5.090和-5.389,P＜0.05).治疗组术后TcPO_2高于对照组(P＜0.05).结论 PTA和自体PBSC注射是治疗缺血性下肢血管病有效的手段,自体PBSC注射有持续性升高TcPO_2的作用,两者的联合运用效果优于单纯PTA术.     

膝下血管成形术治疗重症肢体缺血的临床疗效

目的评价膝下经皮腔内血管成形术(PTA)治疗重症肢体缺血(CLI)的临床疗效。方法回顾性分析48例(50条患肢)接受膝下PTA治疗的下肢CLI患者,统计PTA的技术成功率、围术期并发症、PTA术后的缺血症状缓解情况、治疗血管的通畅情况和大截肢情况。结果共针对64条膝下动脉施行PTA,技术成功率为85.94%(55/64);围术期并发症发生率为12.50%(6/48)。平均随访(16.25±2.65)个月;PTA术后1、3、6、12、24、36个月的1期血管通畅率分别为92.0%、85.7%、79.0%、75.8%、59.8%、29.9%;保肢率分别为92.0%、92.0%、89.7%、86.4%、82.1%、72.9%。50条患肢中,1、3、6个月时的缺血症状缓解率分别为42.00%(21/50)、70.21%(33/47)和86.36%(38/44)。结论膝下PTA治疗CLI技术可行,安全性高,能有效缓解CLI的静息痛症状、促进肢体溃疡的愈合,避免大截肢的发生。     

自体骨髓干细胞移植治疗下肢慢性缺血性疾病的疗效观察

目的探讨自体骨髓干细胞移植应用于下肢慢性缺血性疾病的临床疗效评价其疗效。方法分析应用自体骨髓干细胞移植法治疗的下肢慢性缺血性疾病患者40例的临床资料。将患者随机等分为2组。第1组采用自体骨髓干细胞下肢肌内注射法移植,第2组采用下肢动脉腔内注射法移植。患者在抽取骨髓前均使用粒细胞集落刺激因子(GCSF)动员骨髓细胞2～3d,300μg/d,动员末日抽取骨髓血200mL,经分离纯化后移植入患肢(双下肢患者选取症状重侧)。每月定期电话随访症状的变化。6个月后复查皮温、经皮氧分压(TcPO2)、踝肱指数(ABI)、数字减影血管造影(DSA),随访内容包括疼痛、冷感、麻木、跛行距离、溃疡坏疽情况。结果全部患者获得随访,移值后6个月各项观察指标与移植前对比,患肢皮温、TcPO2变化差异有统计学意义(P0.01);ABI变化差异无统计学意义(P0.05);侧支循环再生及临床症状各指标总有效率均≥60%。无严重并发症发生。结论经动员刺激后的自体骨髓干细胞移植治疗下肢慢性缺血性疾病是一种简单、安全、有效的方法 。     

骨髓干细胞移植促进缺血肢体血管新生的研究

我们通过建立大鼠肢体缺血模型。采用骨髓内皮祖细胞(EPC)移植于缺血肢体，观察缺血组织血管新生及血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况，探讨自体骨髓干细胞移植在治疗肢体缺血性疾病中的价值。     

自体骨髓干细胞移植治疗下肢慢性缺血性疾病的护理

目的观察自体骨髓干细胞移植治疗下肢慢性缺血性疾病的护理效果。方法对22例慢性下肢缺血性疾病患者在常规护理基础上加以适当的心理护理,饮食进行科学的指导,增加药物护理,加强患者自身锻炼,观察患者肢血运行情况,对出院的患者进行指导。结果术后22例患者均反映四肢的不适感有所缓解,均恢复正常,1例患者术后1个月出现症状反复现象,2例下肢动脉硬化闭塞患者术后3个月再次出现怕冷、麻木。结论精心护理对手术的成功起到了非常关键的作用。     

严重肢体缺血的干细胞治疗研究进展

大量动物实验和临床试验揭示干细胞移植可望成为一种非常有前途的治疗严重肢体缺血的手段.笔者对干细胞移植治疗严重肢体缺血的适应证、干细胞来源及分离方法、移植途径、安全性及有效性等方面研究进展进行综述.     

膝下动脉支架成形术治疗严重下肢缺血

目的 探讨膝下动脉支架成形术治疗严重下肢缺血的安全性和有效性.方法 回顾性分析13例严重下肢缺血患者的临床资料.男10例,女3例,平均年龄(73±7)岁,平均病程(8±4)个月.下肢间歇性跛行5例,静息痛4例,足趾溃疡2例,坏疽2例.5例支架放于胫腓干动脉,3例于腓动脉近段,2例于胫腓干动脉和近段腓动脉,2例于胫前动脉,1例胫后动脉.2例为单纯小腿动脉支架成形,余11例患者均同时采用介入技术处理了股动脉和(或)胭动脉病变.结果 所有患者手术均获得成功.出院时所有患者再通血管保持通畅.跛行距离均增至500米以上,4例静息痛全部缓解,2例足趾溃疡面积均有所缩小,2例坏疽保持干燥出院,术后踝肱指数(ABI)均有增加.所有患者得到随访,平均随访时间(6.9±2.2)个月.l例下肢坏疽患者的症状6个月后复发(其胫前动脉支架仍然保持通畅)而截肢,坏疽的另外1例患者的第2趾脱落,创面愈合.2例溃疡面愈合,静息痛无复发.结论 膝下动脉支架成形术是治疗严重下肢缺血的安全有效方法.     

药物涂层球囊治疗下肢动脉硬化闭塞症的疗效

目的:探讨紫杉醇药物涂层球囊(DCB)治疗下肢动脉硬化闭塞症的疗效。方法:将28例符合条件的股腘动脉病变患者纳入研究。患者均有中度至重度的间歇性跛行或缺血性静息痛(Rutherford 2~4级),狭窄程度为70%~99%,同时满足病变长度为4~20 cm,或者为累及股浅动脉至腘动脉近端的≤10 cm的闭塞性病变。其中17例采用DCB治疗(DCB组),11例采用金属裸支架(BMS)治疗(BMS组)。主要疗效终点指标为随访12个月后的一期通畅率,靶病变处血运重建和再狭窄的发生等情况。结果:两组患者术前临床资料差异均无统计学意义(均P0.05);12个月后随访,DCB组与BMS组一期通畅率无统计学差异(88.2%vs.72.7%,P=0.35),但DCB组靶病变处血运重建率优于较BMS组(5.9%vs.45.5%,P=0.02);两组均未出现术中死亡或手术相关死亡,均未出现主要肢体的截肢,DCB组与BMS组靶病变处血栓形成率分别为5.9%vs.9.1%;12个月随访显示两组在功能改善效果相似。结论:DCB在治疗下肢动脉硬化闭塞症有良好的临床疗效,无论通畅率或者预防再狭窄以及安全性方面均不劣于BMS。对于股腘动脉病变的患者,DCB可能是重要的治疗选择。     

caveolin-1表达在糖尿病大鼠下肢缺血中的作用及其与eNOS/NO通路的关系

背景与目的：研究表明caveolin-1可促进血管新生,并与糖尿病病理过程密切相关。本研究推测caveolin-1可能在糖尿病下肢缺血中发挥作用,并在糖尿病大鼠急性下肢缺血模型实验中探讨其作用及机制。 方法：选用80只健康雄性SD大鼠,应用STZ法构建1型糖尿病大鼠模型,取建模成功的大鼠随机分为4组,分别行单纯股动脉游离（假手术组）、股动脉及分支离断（模型组）、股动脉及分支离断+尾静脉注射含caveolin-1的质粒（转染组）、股动脉及分支离断+尾静脉注射不含caveolin-1质粒脂质体溶液（空转组）。于术后14 d取各组大鼠腓肠肌组织标本,HE染色观察组织形态及炎性细胞浸润情况;ELISA法检测组织中NO水平;免疫组织化学染色检测组织中caveolin-1、eNOS和CD34标记的微血管密度（MVD）。 结果：与假手术组比较,模型组及空转组的腓肠肌组织萎缩明显,组织中有较多的炎症细胞浸润,转染组肌肉萎缩不明显,炎症细胞浸润较少;模型组和空转组的腓肠肌组织中NO表达明显降低,转染组NO表达明显增加（均P<0.01）;模型组、空转组、转染组caveolin-1表达均明显升高,转染组升高更为明显（均P<0.01）;模型组和空转组eNOS表达无明显变化（均P>0.05）,转染组eNOS表达明显升高（P<0.01）;模型组、空转组、转染组MVD均有增加,转染组升高更为明显（均P<0.01）;以上指标在模型组与空转组间的差异均无统计学意义（均P>0.05）。 结论：caveolin-1高表达对糖尿病下肢缺血有明显改善作用,其机制可能是通过活化eNOS/NO通路,从而促进NO生成有关。     

骨髓间充质干细胞联合肝细胞生长因子基因治疗兔肢体缺血

目的探讨联合应用骨髓间充质干细胞(BMSC)和肝细胞生长因子(HGF)基因治疗兔肢体缺血的疗效。方法 32只新西兰兔切除右后肢股浅动脉并结扎股深动脉建立后肢缺血模型,成模后随机均分为空腺病毒对照组(对照组),BMSC细胞治疗组(BMSC组),HGF基因治疗组(HGF组)和联合治疗组(BMSC+HGF组),各组均采用术肢肌肉内原位注射。治疗28 d后通过动脉造影行侧枝血管计数,治疗30 d后用免疫组化和Western blot法检测注射点周围组织中CD31和HGF的表达。结果 BMSC组及HGF组的侧支血管计数与对照组间差异无统计学意义,而BMSC+HGF组侧支血管计数较其余各组明显增加(P<0.05或P<0.01);免疫组化显示,各处理组CD31表达量明显高于对照组(P<0.05或P<0.01),BMSC组和HGF组间CD31表达量无明显差异(P>0.05),但两者均明显低于BMSC+HGF组(均P<0.05);Western blot显示,各处理组HGF表达量均高于对照组(P<0.05或P<0.01),且HGF在BMSC组、HGF组和BMSC+HGF组中的表达量依次增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)...     

常规处理方案联合铜绿假单胞菌制剂治疗乳腺癌疗效的Meta分析

目的:系统性评价铜绿假单胞菌制剂应用于乳腺癌治疗中的效果。方法:检索国内外数据库,检索时间为各数据库建库至2014年11月。纳入在乳腺癌治疗中应用铜绿假单胞菌制剂的随机对照试验(RCT),筛选文献、提取数据和文献质量评价后,用Rev Man 5.1.2软件进行Meta分析。结果:共纳入9篇RCT研究,Meta分析结果显示,常规处理方案联合铜绿假单胞菌制剂明显升高患者完全缓解率(OR=2.22)、总有效率(OR=6.73)、患者Karnofsky评分(MD=9.79)及IL-2水平(SMD=1.56),明显降低患者疾病稳定率(OR=0.36)、疾病进展率(OR=0.18)以及缩短患者术后积液消失时间(MD=-7.52)。结论:联合铜绿假单胞菌制剂可明显提高乳腺癌患者放化疗效果,但该结论仍需要高质量的研究进一步证实。     

基质细胞衍生因子联合骨髓单个核细胞移植治疗大鼠肢体缺血的实验研究

目的将基质细胞衍生因子(SDF-1)用于自体骨髓单个核细胞(BM-MNC)移植治疗肢体缺血,初步探讨SDF-1促进血管新生的机理和疗效。方法建立大鼠左后肢缺血模型,将动物随机分为非缺血对照组,缺血对照组,SDF-1局部应用组,自体BM-MNC移植组以及两者联合应用组。检测缺血后24 h左后肢腓肠肌SDF-1含量及CD133+细胞数量;于移植后4周动脉造影后处死动物,免疫组化法检测缺血区新生血管密度,评价血管新生情况。结果缺血对照组24 h肌组织SDF-1含量为(1．31±0．20)ng/50μg总蛋白,非缺血对照组为(0．93±0．29)ng／50μg总蛋白(P<0．05); CD133+细胞数(2．10±0．62)vs．(0．24±0．10)个／HP,P<0．01。SDF-1局部应用可增加缺血区CD133+细胞浸润数量(3．64±0．69)个／HP(P<0．01);并可提高四周后组织内新生血管数量;SDF-1与自体骨髓单个核细胞移植联合应用,可进一步提高新生血管数量。结论SDF-1可能在肢体缺血后自体干细胞的动员中起重要作用,其局部应用可促进缺血区血管新生或进一步提高干细胞移植治疗缺血的疗效。     

超声消融联合干细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症的临床研究

目的观察血管内超声消融联合自体骨髓干细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症的疗效。方法分析39例下肢动脉硬化性闭塞症的患者行血管内超声消融联合自体骨髓干细胞移植治疗的临床资料。男21例,女18例;平均年龄63岁。手术首先抽取自体骨髓260mL,分离出单个核细胞,制备干细胞悬浊液40mL。采用经皮股动脉穿刺或切开显露,经股浅动脉上部向下插入超声消融导管,在动脉造影监视下进行血管内超声消融,尔后将干细胞悬浊液一次性分点注射于小腿缺血肌肉内局部。结果39例患者术后静息痛缓解,跛行距离增加,冷、凉感觉得到改善。结论血管内超声消融联合自体骨髓干细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症是一种简便、有效的方法。     

我国2004年至2009年自体干细胞移植治疗糖尿病足文献计量分析

目的 用文献计量法总结我国2004年至2009年自体干细胞移植(ASCT)治疗糖尿病足的文献,介绍其发展、术式,预测发展趋势等.方法 以"糖尿病足"为检索词,从中文生物医学期刊文献数据库和中国生物医学文献数据库获取题录,再获取原文,按作者、手术方式、刊文期刊、发文机构、地区等行计量分析.结果 共检获104篇,主要发文期刊、发文机构、作者、地区发文数量及术式分别是中国组织工程研究与临床康复杂志(6篇),北京首都医科大学(10篇),谷涌泉(9篇),北京(17篇),手术方式以外周血干细胞移植(ABMSCT)和骨髓干细胞移植(APBSCT)为主.结论 概括性介绍我国发表的ASCT治疗糖尿病足的文献,为深入研究提供了可靠资料.阐述此课题的研究现状并预测主要发展趋势:在严格量化适应证前,ABMSCT及APBSCT为ASCT的主要手术方式;量化ASCT的适应证,与其他药物联用使ASCT更好地发挥作用必将是这一课题的研究热点.     

体外冲击波疗法联合自体骨髓干细胞移植治疗股骨头坏死

目的应用体外冲击波疗法（ESWT）联合自体骨髓干细胞移植治疗股骨头坏死（ONFH）,分析其治疗效果,探索该病新的保髋治疗方法。方法收集2006年1月至2009年6月在武警总医院收治的股骨头缺血性坏死患者120例180髋,分为空白对照组,单纯ESWT组,单纯干细胞移植组以及联合治疗组,采用髋关节功能评分标准（Harris评分）对患者进行电话随访以及书信随访,对治疗前后髋关节功能进行评价;统计所收集患者的股骨头塌陷情况,比较随访3年时各组股骨头塌陷率。结果ESWT联合自体骨髓干细胞移植治疗ONFH在harris评分明显优于单纯ESWT组（P〈0．05）,以及单纯骨髓干细胞移植术（P〈0．05）,联合疗法3年时股骨头塌陷率明显低于单纯治疗组。结论ESWT联合自体骨髓干细胞移植在治疗ONFH上具有疗效显著,创伤小,患者易于接受等特点,是ONFH保髋治疗的理想方法。