Comparative studies on immune responses to infection in susceptible B10.BR mice infected with different strains of the murine nematode parasite Trichuris muris

A comparison of immune responses to infection between groups of B10.BR mice infected with different strains of T. muris , S strain (isolated in Sobreda, Portugal), E strain (isolated in Edinburgh), and E-J strain (originally E strain, which has been maintained in our laboratory, Japan), was performed. In mice infected with E and E-J strains, most of the worms were expelled by day 32 after infection, though the expulsion was faster in E-J strain-infected mice. In contrast, no expulsion was observed in S strain-infected mice by day 32 and egg production occurred on day 32. IL-4 production occurred in concanavalin A (Con-A)-stimulated mesenteric lymph node cells (MLNC) from B10.BR mice infected with E and E-J strains, whereas no IL-4 production was observed in S strain-infected mice. IL-4 production did not occur in normal mice. In comparison with normal mice, high levels of IFN-γ production by Con A-stimulated MLNC were detected in mice infected with every strain of  T. muris . IFN-γ production in S strain-infected mice was greater, occurred earlier and was more persistent than in mice infected with E and E-J strains. IgG1 and IgG2a antibodies to T. muris excretory/secretory antigens were observed in B10.BR mice infected with every strain of T. muris . Antibody production showed similar kinetics. These differences in the expulsion kinetics and IL-4 production in B10.BR mice infected with S, E, and E-J strains suggest the involvement of IL-4 in protection against T. muris infection, and confirm the previous conclusion by Else et al . (1994).     

A comparison of local and peripheral parasite-specific antibody production in different strains of mice infected with Trichuris muris

The serum parasite-specific antibody responses of different mouse strains infected with Trichuris muris reflect the nature of the T-helper response mounted by the host, in that resistant Th2-responding strains, such as BALB/K, produce immunoglobulin (Ig)G1 and susceptible predominantly Th1-responding strains, such as AKR, produce IgG2a and IgG1. However, the kinetics of antibody production in the sera, as determined by enzyme-linked immunosorbent assay, do not reflect infection status in that resistant strains can expel their worm burdens before antibodies are detectable in the sera. Here, we show that parasite-specific antibody production by in vitro lipopolysaccharide-stimulated mesenteric lymph node cells (MLN) not only correlate with serum antibody isotypes, but also follow expulsion kinetics. Additionally, the antibody levels seen locally match changes in absolute B220+ cell numbers in the MLN (determined by flow cytometry) and changes in MLN parasite-specific plasma cells in the MLN (determined by ELISPOT). These results show that B cell responses are tightly regulated locally in both resistant and susceptible strains of mice infected with T. muris.     

Th1/Th2细胞因子与蠕虫感染

蠕虫感染后引起复杂的免疫应答中辅助性T细胞处于核心位置,Th1/Th2细胞分泌的细胞因子在蠕虫感染后表达地位的不同,将决定蠕虫感染的发展与转归。本文对Th1/Th2细胞因子在蠕虫感染中的表达研究进展予以综述。     

Modulation of cytokine production and response phenotypes in murine trichuriasis

BALB/K mice are usually resistant to infection with the intestinal nematode parasite Trichuris muris and exhibit a Th2 dominated (IL-5, IL-9) response. Conversely in B10.BR mice, which are unable to expel T. muris, Th1 type (IFN-gamma producing) cells predominate. We have manipulated the course of infection in these two strains of mice such that the period of host-parasite contact is extended in the former and curtailed in the latter. Extension of host-parasite contact in BALB/K mice beyond normal (day 21) resulted in the modulation of cytokines produced by in vitro concanavalin A (Con-A) stimulated MLNC away from IL-5 and IL-9 (Th2-type cytokines) in favour of the Th1-type cytokine IFN-gamma. Curtailment of host parasite contact in B10.BR mice to less than 21 days resulted in elevated production of IL-5 and IL-9 by MLNC in the absence of elevated IFN-gamma levels. Thus modulation of expulsion phenotype also modulates cytokine production by T-cells in the MLN draining the site of infection, with a Th2 response being associated with resistance and a Th1 type response with the inability to expel the parasite. Mechanisms by which the modulated cytokine profiles arise are discussed.     

白藜芦醇对JurcatT细胞分化为Th1/Th2细胞作用的影响及机制

目的探讨白藜芦醇调节Jurkat T细胞分泌为Th1/Th2型细胞作用的影响。方法将不同浓度的白藜芦醇作用于受植物血凝素（PHA）刺激的Jurkat T细胞,于不同时间点分别用ELISA法检测Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-10;RT-PCR法检测T-bet和GATA-3 mRNA表达。结果白藜芦醇作用后IFN-γ、IL-10及T-bet mRNA、GATA-3 mRNA的表达均明显降低,具有浓度和时间依赖性。结论白藜芦醇对受PHA刺激的JurcatT细胞由Th0向Th1、Th2细胞分化起抑制作用。     

Th1/Th2细胞平衡偏移与自身免疫性甲状腺疾病的相关性研究

目的 明确白细胞介素-2(IL-2)、IL-5与自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发生的相关性,探讨Th1/Th2细胞平衡在自身免疫性甲状腺疾病发病中的作用.方法 选取2007年8月至2008年5月南昌大学第三附属医院内分泌科45例Graves病(GD)、30例桥本甲状腺炎(HT)患者,同时选取20名健康体检者作为对照组.采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测患者和对照组血清中Th1型细胞因子IL-2扣Th2型细胞因子IL-5并进行统计学分析.结果 (1)GD患者血清中IL-5明显高于HT组和对照组(P<0.05),而IL-2与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).(2)HT患者血清IL-2明显高于GD组和对照组(P<0.05),而IL-5与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).(3)HT患者Th1型细胞因子IL-2与甲状腺球蛋白抗体(TCAb)和甲状腺微粒体抗体(TMAb)呈显著正相关(r=0.517,P<0.05;r=0.475,P<0.01).结论 Th1/Th2细胞免疫平衡在HT患者中以Th1细胞免疫占优势为主,在GD患者中以Th2细胞免疫占优势为主.     

日本血吸虫不同免疫原对小鼠Th1/Th2免疫偏移的影响

目的　观察单、双性日本血吸虫感染小鼠后Th1/Th2细胞因子水平的动态变化 ,探讨日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响及与虫卵肉芽肿形成的相关性。方法　用ELISA夹心法检测单、双性日本血吸虫感染小鼠及单性感染 8w双性再感染 0～ 12w ,小鼠脾淋巴细胞培养上清Th1细胞因子IL - 2、IFN -γ和Th2细胞因子IL - 4表达水平。结果　单性感染小鼠 6～ 12w在脾淋巴细胞培养上清中可测出一定量的IL - 2和IFN -γ ,但无明显动态变化 ,而IL - 4未能测出 ;双性感染小鼠IL - 2和IFN -γ在感染后 4～ 6w开始上升 ,8w达高峰 ,随后下降 ,IL - 4则在感染后 8w时迅速上升且随着感染时间延长而明显升高 ,单性感染 8w双性再感染 4w时 ,小鼠脾淋巴细胞培养上清IL - 2、IFN -γ和IL - 4表达水平即迅速升高且在双性再感染 8～ 12w逐渐增强。结论　日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响作用不同 ,Th1优势应答可能主要由虫体抗原诱导 ,Th2优势应答可能主要由虫卵抗原 (SEA)所诱导 ,后者是诱导宿主产生免疫病理反应的主要因素     

Th1／Th2细胞模式与肿瘤相关性的探讨

目的观察Th1／Th2模式与肿瘤的相关性及细胞因子对Th1／Th2分化的影响,为肿瘤的免疫治疗提供依据。方法选择胃癌患者78例（胃癌组）和健康体检者80例（对照组）,采用酶联免疫斑点法检测两组Th1、Th2、Th1／Th2水平;对照组35例行外周血单个核细胞培养并分为A、B、C组,A、B组培养过程中分别加入IL-12＋抗IL4单抗（终浓度分别为4∥L和10rag／L）、IL4＋抗γ-IFN单抗（终浓度分别为20μg／L和10mg／L）,C组不干预,检测各组Th1／Th2细胞的比率。结果胃癌组中Th1明显低于、Th2明显高于对照组,Th1／Th2明显低于正常组,P均〈0．05;与C组比较,A组Th1细胞阳性率升高,Th2细胞阳性率降低,Th1／Th2值升高;B组Th1细胞阳性率降低,Th2细胞阳性率升高,Th1／Th2值降低（P〈0．05）。结论胃癌患者血清呈现TB2优势的分化状态;IL-12＋抗IL4单抗可改变此状态;此为进一步提高肿瘤的免疫治疗效果提供了理论依据。     

腔内注射干扰素治疗晚期恶性胸水与胸水中Th1/Th2的相关性

目的探讨腔内注射干扰素治疗晚期非小细胞肺癌患者恶性胸腔积液的疗效与胸水中Th1/Th2型细胞因子的关系。方法对晚期非小细胞肺癌合并恶性胸腔积液患者每周以干扰素500万单位行腔内注射,连续4周,评价其疗效。同时采用流式细胞术检测胸水中IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平,比较干扰素治疗有效组与无效组治疗前后各细胞因子的变化。结果干扰素治疗有效组IL-2和IFN-γ上升,IL-4和IL-10下降（P〈0.05）;无效组各细胞因子变化无统计学差异（P〉0.05）。结论晚期非小细胞肺癌患者恶性胸水中Th1细胞因子优势化是影响其治疗效果的主要因素之一。     

CpG ODN对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响

目的　观察CpGODN对日本血吸虫感染小鼠后不同时期Th1/Th2细胞因子表达水平的影响 ,探讨CpGODN介导Th1/Th2免疫偏移对控制血吸虫虫卵肉芽肿的作用。方法　取小鼠感染后 4、8、12和 16周的脾淋巴细胞经CpGODN和N CpGODN处理后 ,培养 72h ,用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFNγ和IL - 4表达水平的动态变化。结果　CpGODN能显著上调IFNγ的表达水平 ,下调IL - 4的表达水平 ,而N -CpGODN对IFNγ及IL - 4表达水平无显著影响。CpGODN处理后小鼠脾淋巴细胞Th2分化指数明显减小。结论　CpGODN可以调节Th1/Th2细胞因子的表达水平 ,显著上调Th1型细胞因子水平和下调Th2型细胞因子水平 ,介导小鼠Th1型细胞免疫优势应答 ,为控制日本血吸虫慢性肉芽肿病变提供了一种新途径。     

狼疮肾炎患者血清白细胞介素-18的升高与Th1/Th2型细胞的失衡

目的测定狼疮肾炎（LN）患者血清白细胞介素-18（IL-18）的水平以及外周血单个核细胞（PBMC）内干扰素（IFN）-γ／IL-4的表达情况，探讨LN患者体内Th1/Th2型细胞的平衡情况以及IL-18与Th1/Th2型免疫反应的相关性。方法酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血清IL-18的表达：佛波酯（PMA）和离子霉素联合刺激培养，流式细胞术从单个核细胞水平检测细胞内IFN-γ/IL-4的表达情况。结果LN患者血清IL-18的水平显著高于对照组（P=0．000）；Th1型（IFN—γ^＋）细胞百分率明显高于对照组（P=0．009），Th1/Th2型细胞的比率（IFN-γ／IL-4^＋）明显增高（P=0．005）；Th1/Th2型细胞比率与尿蛋白定量（24h）呈明显正相关；Th1型细胞百分率与血清IL-18的水平呈明显的正相关。结论LN患者血清IL-18水平升高，并与Th1/Th2型免疫反应失衡有关，IL-18可以促进LN患者体内Th1型免疫反应增强。从而加重蛋白尿的发展。削弱Th1型免疫反应重建Th1/Th2型免疫反应的平衡，理论上可能会阻止狼疮肾炎的发病。     

感染刚地弓形虫雄性大鼠Th1/Th2细胞因子漂移对性激素的影响

目的研究弓形虫感染雄性大鼠后引起的Th1/Th2细胞因子漂移对黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平的影响,探讨其对雄性生精细胞损伤的通路。方法选用9~10周龄雄性SD大鼠18只,随机分为健康对照组和弓形虫感染组。弓形虫感染组分为低剂量组和高剂量组2组,分别感染1×103和1×104个速殖子/只(采用腹腔注射法)。感染后第7 d,ELISA检测血清IFN-γI、L-4及NO水平,放射免疫法检测大鼠血清LH、T以及睾丸局部T水平,并对睾丸组织进行病理学观察。结果感染弓形虫雄性大鼠血清IFN-γ与NO水平较健康对照鼠显著升高(P<0.01),IL-4有一定程度升高,但IFN-γ/IL-4比值显著变大(P<0.01);血清及睾丸局部LH水平无显著变化;T水平尤其是睾丸局部T水平显著降低(P<0.01)。病理学检查感染组大鼠生精小管细胞层次混乱,初级精母细胞、次级精母细胞显著减少,管腔内精子稀少甚至管腔关闭。结论雄性大鼠感染弓形虫后,可能是由Th1细胞因子极化作为始动因素介导激素分泌异常,尤其是睾丸局部睾酮水平迅速降低,并进一步诱导生精细胞损伤和生精停滞。     

日本血吸虫感染小鼠CD_4~+ T淋巴细胞协同刺激分子表达谱及其在介导Th1/Th2极化中的作用

目的观察日本血吸虫感染小鼠不同病期体内及体外培养后脾CD4+T淋巴细胞表面的协同刺激分子表达谱,探讨协同刺激分子介导Th1/Th2极化的作用。方法收集血吸虫感染后4w、7w、12w、16w和20w小鼠及正常小鼠脾CD4+T淋巴细胞,以及上述不同病期经SEA诱导72h后脾淋巴细胞培养上清,用流式细胞术检测细胞表面协同刺激分子CD80、CD86、ICOS、CD40、OX40、4-1BB及PD1表达水平,用ELISA法检测培养上清中的Th1细胞因子IFN-γ,Th2细胞因子IL-4、IL-5、IL-10、IL-13。结果血吸虫感染后小鼠脾CD4+T淋巴细胞表面CD86、ICOS、CD40和OX40的表达均随感染时间延长而上调,其中ICOS和CD86表达上调最为显著;经SEA诱导培养72h后CD86、ICOS亦显著上调表达;培养上清检测发现IFN-γ在4w时呈高表达,7w开始随感染时间延长呈下调表达;IL-4、IL-5、IL-10和IL-13的表达水平则从7w开始明显升高,IL-5的峰值出现在12w,其余均16w达高峰,致20w仍维持在较高水平。结论日本血吸虫感染小鼠CD4+T淋巴细胞协同刺激分子表达水平与Th1/Th2免疫偏移密切相关,其中ICOS、CD86在介导Th2极化中可能具有重要作用。     

Th1/Th2及Tc1/Tc2在胃癌患者外周血中的漂移及意义

目的: 研究胃癌患者外周血Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移状况,并分析其免疫预存状态.方法: 2008-10-21/2008-12-05中国人民解放军总医院普通外科新入院的术前胃癌患者外周血样本25例,同期健康献血员正常对照组外周血样本25例.四色流式细胞仪检测胃癌患者及正常对照人群外周血激活的淋巴细胞内细胞因子(IFN-γ、IL-4),并分析Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移状态.结果: 胃癌患者外周血Th1/PBL、Tc1/PBL、Th1/Th2、Tc1/Tc2比值均较正常对照组明显减少(6.242%±4.078% vs 3.047%±1.710%,14.171%±8.984% vs 6.393%±5.235%,3.127%±3.633% vs 1.172%±0.300%,17.200%±25.930% vs 3.252%±8.732%,均P＜0.01).结论: 胃癌患者Th1及Tc1细胞比例减少,并出现Th1/Th2及Tc1/Tc2漂移现象,提示胃癌患者预存免疫状态低下,机体抗肿瘤免疫功能抑制.     

Th1/Th2炎症极化与肺气肿和肺纤维化

肺气肿具有Ⅰ型T辅助细胞（Th1）炎症极化的特征，表现为损伤过度和修复不足，肺实质的破坏增加，肺间质变薄。与之相反，肺纤维则具有Ⅱ型T辅助细胞（Th2）炎症极化，表现为损伤后修复过度，肺间质增厚，胶原沉积。通过调控Th1和Th2的炎症趋势来控制肺组织的损伤和修复的结局可能会为肺气肿和肺纤维化的防治提供新思路。     

哮喘患儿血清Th1/Th2类细胞因子水平及其临床意义的研究

采用 IL ISA法测定了哮喘发作期和缓解期患儿的血清白介素 - 12 ( IL- 12 )和白介素 - 4 ( IL- 4 )。结果发现 ,发作期哮喘患儿 IL - 12水平 ( 3 5 .2± 11.18pg/ ml)显著低于缓解期 ( 4 2 .75± 13 .3 8pg/ ml)和健康儿 ( 4 5 .4 3±2 9.19pg/ ml) ,P分别 <0 .0 1、0 .0 5。发作期和缓解期哮喘患儿血清 IL - 4阳性率 (分别为 5 5 .5 6%和 3 6.3 6% )均显著高于健康儿 ( 9.1% ) ,P分别 <0 .0 1、0 .0 5。IL- 12和 IL- 4呈显著负相关 ( r=- 0 .3 4 ,P<0 .0 5 )。认为哮喘患儿存在明显的 Th1 / Th2 类细胞因子失衡 ,IL- 12和 IL- 4在哮喘发病中都起重要作用。吸入糖皮质激素等治疗可改变这种失衡状态。     

双歧杆菌对食物过敏小鼠肠道屏障功能及Th1/Th2细胞因子的影响

目的:探讨双歧杆菌在改善食物过敏动物肠道屏障功能、调整肠道菌群结构以及对免疫功能调节方面的作用及其机制.方法:无受试蛋白喂养BALB/c小鼠40只,随机分为4组: 分别于0、3、9 d腹腔注射生理盐水,金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB),卵清蛋白(OVA),SEB+OVA; 并于第7、14天给予OVA灌胃.在SEB+OVA致敏组的基础上设立自然恢复组、双歧杆菌作用组、思密达作用组、双歧杆菌+思密达共同作用组,第15天开始分别经灌胃给予不同的药物,连续7 d,每日1次.培养法分析粪便菌群,检测血清二胺氧化酶(DAO)含量,ELISA法测定血清IgE、IL-4、INF-γ含量.对肠系膜淋巴结(MLN)及肝、肾、肺组织进行培养以探讨有无细菌移位(BT)发生.同时,采用流式细胞术分析其脾细胞悬液中CD4+CD25+调节性T细胞的数量变化.结果:与SEB+OVA实验组相比,双歧杆菌作用组小鼠血清IgE、DAO含量(A 值)、血清IL-4(51.314±3.785 ng/L vs 69.980±9.103ng/L,P<0.05)含量显著降低; 血清INF-γ水平显著升高(194.281±12.144 ng/L vs 133.875±33.822 n g/L,P<0.05); 脾细胞悬液中CD4+CD25+T细胞数量显著升高(5.778%±0.773% vs 4.216%±0.439%,P<0.05); 肠道固有菌群中益生菌乳酸杆菌的含量(6.670±0.443 vs 5.654±0.289,P<0.05)、双歧杆菌的含量(8.611±0.295 vs 7.491±0.339,P<0.05)显著升高,条件致病菌大肠杆菌的含量(5.364±0.537 vs 6.718±0.267,P<0.05)、类杆菌的含量(7.427±0.544 vs 8.606±0.317,P<0.05)显著降低; MLN及外周器官细菌移位率显著降低(12.5% vs 37.5%,P<0.05).结论:双歧杆菌可以有效调节机体免疫功能、调整肠道菌群失调及保护肠道黏膜屏障功能.     

健脾补肾法对拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的增效作用及其与Th1/Th2的相关性

[目的]观察健脾补肾法对拉米夫定治疗慢性乙型肝炎(CHB)的增效作用及其与辅助性T细胞Th1/Th2的相关性.[方法]120例CHB E-抗原阳性患者,随机分为2组,观察组采用健脾补肾中药联合拉米夫定治疗,对照组仅用拉米夫定治疗,定期观察肝功能、乙肝三系、乙肝病毒核酸(HBV-DNA)、酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸(YMDD)变异等指标,疗程均为1 a.疗程结束后2组各随机抽取30例,采集外周血检测干扰素γ(IFNγ)和白细胞介素4(IL-4).[结果]观察组与对照组相比,在缩短肝功能、病毒载量恢复时间,提高E-抗原(HBeAg)转换率、延长YMDD变异时间等方面均有统计学意义(均P<0.05),观察组治疗后IFN-γ明显高于对照组,IL-4明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).[结论]健脾补肾中药能够提高拉米夫定治疗CHB的疗效,其与Th1/Th2相关.     

小儿肾母细胞瘤Th1／Th2类细胞因子的漂移及临床意义

采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术,检测正常儿及肾母细胞瘤患儿肿瘤组织,手术前后外周血Th1/Th2类细胞因子的基因表达,观察肾母细胞瘤患儿手术前后Th1/Th2类细胞因子的表达和漂移情况,结果显示肾母细胞瘤患儿外周血,肿瘤组织均出现明显的Th2类细胞因子偏移趋势,手术和化疗可促进Th1/Th2平衡向Th1漂移,肾母细胞瘤患者体内Th2类细胞因子的强势表达,可能与肾母细胞瘤的发生发展有关,Th1/Th2平衡漂移是观察机体抗肿瘤免疫动态变化的良好指标。