血红素氧化酶-1在大鼠肝移植中保护作用的研究

目的 探讨改变血红素氧化酶-1(HO-1)的活性对大鼠同种异体原位肝移植的影响.方法 用二袖套法建立大鼠同种异体原位肝移植模型,实验分为4组:实验对照组(n=44):供体鼠术前24 h腹腔注射生理盐水5 ml/kg;氯化血红素组(n=44):供体鼠术前24 h腹腔注射氯化血红素100 mg/kg,在供肝4℃生理盐水保存期间,经门静脉注入氯化血红素100 mg/kg;锌原卟啉组(n=44):供体鼠术前24 h腹腔注射锌原卟啉5 mg/kg,在供肝4℃生理盐水保存期间,经门静脉注入锌原卟啉5 mg/kg;正常大鼠作为正常对照组(n=5).分别应用RT-PCR及免疫组化技术检测移植肝脏中HO-1 mRNA及蛋白表达,并用流式细胞仪分析移植肝脏肝细胞的凋亡率.结果 肝移植术后供体肝HO-1表达增强.肝移植术后氯化血红素组HO-I mRNA表达水平高于实验对照组,血清ALT和AST水平低于实验对照组(P<0.05);锌原卟啉组术后肝组织HO-1 mRNA表达水平低于实验对照组(P<0.05),血清ALT和AST水平高于实验对照组(P<0.05).肝移植术后48 h肝细胞凋亡率锌原卟啉组最高,氯化血红素组最低,实验对照组介于二者之间,组间差异有统计学意义(P<0.05).术后7 d实验对照组、氯化血红素组及锌原卟啉组3组的生存大鼠分别为7/12、9/12和4/12,组间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 肝移植手术过程可促进大鼠肝脏H()-1表达增强;术前采用药物诱导HO-1可降低移植术后肝细胞凋亡率,减轻肝脏损伤程度,提高术后生存率.     

肝移植大鼠肝窦内皮细胞的损伤及PGE1对其的保护作用

目的　探讨肝移植大鼠术后早期肝窦内皮细胞功能的改变及前列腺素E1(PGE1)对其的保护作用。方法　用“两袖套法”建立大鼠原位肝移植模型 ,其中A组为正常大鼠空白对照组 ,B组为正常大鼠供体肝移植手术对照组 ,C组为休克性大鼠供体肝移植实验对照组 ,D组为PGE1保护的休克性大鼠供体肝移植实验组 ,每组各 8只。肝移植各组 (无特别说明均指受体 )于术后 6h取血 ,检测其血清中的肝脏酶学 (ALT、LDH )、丙二醛 (MDA)和一氧化氮 (NO) ,以及血浆内皮素 (ET)水平 ,并取肝组织作常规病理学检查 ,比较各组有无差异。结果　各移植组供肝冷保存时间及无肝期均接近 ,分别为 (2± 0 .5 )h和 (15± 3 )min ;B、D组术后 6h全部存活 ,存活率 10 0 % ;C组术后 6h存活 5只 ,存活率 62 .5 %。与C组比较 ,D组ALT、LDH、MDA、ET明显降低 (P<0 .0 5 ) ,NO明显升高 (P<0 .0 5 )。C组肝脏病理学检查发现有明显的组织学损害 ,而B、D组肝脏组织结构基本完好。结论　肝移植可造成肝窦内皮细胞明显损害 ,血清NO和血浆ET水平可较好地反映肝窦内皮细胞的功能状态。PGE1通过稳定血流动力学和稳定肝窦内皮细胞质膜 ,可减轻移植肝肝窦内皮细胞的损害。     

冷保存供肝肝移植大鼠肝窦内皮细胞损伤机制的研究

目的 探寻肝移植大鼠肝窦内皮细胞(SEC)损伤的详细过程、方式及机制,为冷保存再灌注损伤的保护研究开辟新的途径.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=6)、UW 1 h肝移植组(n:48)、Uw 12 h肝移植组(n=48).大鼠原位肝移植采用双袖套法,分别于术后不同时相点采取血液及组织标本,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)及透明质酸(HA)水平;HE染色观察肝脏病理学变化;TUNEL法检测凋亡,免疫组化法检测Bcl-2及Cleaved Caspase-3的表达状况.结果 UW 1 h、UW 12 h组肝移植后血清ALT、HA均较假手术组明显升高(P<0.05),UW 12 h组又明显高于Uw 1 h组(P<0.05).UW 12 h组ALT水平于术后6 h达高峰,而HA水平却在术后1 h、24 h呈双峰表现.Uw 12 h组首先出现SEC的凋亡继而出现肝细胞的坏死,且UW 12 h组细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)明显高于UW 1 h组(P<0.01).两组大鼠SEC的AI均于术后6 h达高峰,与血中ALT的高峰时相点一致.肝移植术后Bcl-2表达明显减弱(P相似文献   

血管内皮生长因子改善大鼠肝移植术后肝功能

目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)对大鼠部分肝移植术后肝功能的影响.方法 建立大鼠30%肝移植模型.分实验组、对照组,每组60只,分别于术后注射鼠重组VEGF、生理盐水.在术后0、12、24、72、168h监测血清ALT、AST、透明质酸(hyaluronic acid, HA)变化.光镜下观察肝窦结构破坏及炎性细胞浸润程度.结果 在72h,实验组血清ALT、AST、HA较对照组明显降低(t=4.681,4.252,2.853,P<0.05).实验组肝窦内皮细胞结构破坏及炎性细胞浸润程度均较对照组明显减轻.结论 VEGF能明显改善大鼠部分肝移植术后肝功能.这可能与其减轻肝窦内皮细胞损害和炎性细胞浸润程度有关.     

大鼠供肝冷保存时间延长损伤移植肝肝细胞和肝窦内皮细胞

目的 探讨供肝冷保存时间与肝移植后肝细胞和肝窦内皮细胞（SEC）损伤的关系。方法 选取健康雄性SD大鼠作为供、受者，建立原位肝移植（OLT）模型。随机分为3组，冷保存1h组（H=48）：供肝获取后，置于4C的冷保存液中保存1h，再行OLT。冷保存12h组（n=48）：供肝获取后，置于4℃的UW液中保存12h，再行OLT。对照组（H=6）：大鼠只打开腹腔，不进行移植。前2组分别于术后1、6、12、24、48、72、96和168h采取血液及组织标本，对照组仅在开腹时取血液及组织标本，检测各组、各时点血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及透明质酸（HA）的水平；观察移植肝的病理形态学变化，透射电镜观察其超微结构改变；原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记法（TUNEL）检测移植肝细胞的凋亡情况；观察术后168h时的大鼠存活率。结果 冷保存1h和冷保存12h组肝移植后各时点血清ALT、AST及HA均较对照组明显升高（P〈0．05），并且冷保存12h组又明显高于冷保存1h组（P〈0．05）。冷保存12h组术后24h移植肝组织出现片状坏死，而冷保存1h组病理学改变不明显。冷保存12h组肝窦内皮细胞凋亡指数（AI）明显高于冷保存1h组（F=63．58，P〈0．01），两组大鼠移植肝组织均于术后6h出现凋亡高峰，且肝窦内皮细胞的凋亡指数明显高于肝细胞。冷保存1h组和冷保存12h组大鼠肝移植后168h时的存活率分别为100％和50％，两组比较，差异有统计学意义（F=6．39，P〈0．05）。结论 肝移植后肝细胞和肝窦内皮细胞的损伤程度与冷保存时间密切相关。肝窦内皮细胞对冷保存及再灌注损伤的敏感性高于肝细胞，其损伤方式以细胞凋亡为主。     

大鼠肝缺血/再灌注后肝细胞凋亡的评价及异丙酚对细胞凋亡的影响

目的 观察大鼠肝脏缺血再灌注后肝窦内皮细胞凋亡及异丙酚对肝脏细胞凋亡的影响。方法 选用健康SD雄性大鼠24只,随机分为三组(n=8):A组,肝脏缺血30 min再灌注6 h,再灌注即刻从股静脉输入生理盐水10ml·kg-1·h-1 60 min;B组,再灌注即刻静脉注射异丙酚20 mg/kg,继之输入5％异丙酚50 mg·kg-1·h-1 h;C组,给予假手术处理,未予缺血,余处理同A组。再灌注6 h后取肝组织标本行病理组织学观察,同时测定血浆ALT活性和肝组织MDA含量的变化。采用DNA琼脂糖凝胶电泳、TUNEL染色观察细胞凋亡的情况。结果与C组相比,A组凋亡的肝细胞和肝窦内皮细胞明显增加,且凋亡的细胞主要是肝窦内皮细胞,肝细胞凋亡和坏死则较少。与A组相比,再灌注6 h B组TUNEL阳性肝细胞和肝窦内皮细胞数明显减少(p<0.01),肝组织DNA片段形成也明显减少。同时,B组肝组织坏死程度、血浆ALT活性和肝组织MDA含量均明显低于A组(JD<0.01)。电镜显示B组肝细胞和肝窦内皮细胞损伤也明显轻于A组。结论 细胞凋亡是再灌注早期肝脏细胞死亡的重要机制,肝窦内皮细胞凋亡是再灌注早期肝脏细胞死亡的主要特征。异丙酚可以减少再灌注后的肝脏细胞凋亡和坏死,其抗氧化作用是其减少再灌注后的肝脏细胞凋亡的机制。     

脑死亡状态对大鼠肝脏损伤的影响

目的　探讨大鼠脑死亡状态与肝脏损伤之间的关系。方法　将 50只大鼠随机分为空白对照组 (C)、低血压状态假手术组 (E1 )、脑死亡实验组 (E2 )。各组动物分别于辅助呼吸 1、3h采血检测丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (AST)及透明质酸 (HA)、内皮素 1 (ET 1 ) ,辅助呼吸 4h取肝组织行形态学检查。结果　 1、3h血清ALT、AST以及HA、ET 1水平E2组较C、E1组显著升高 (P <0 .0 5) ;E2组中 3h较 1h显著升高 (P <0 .0 5)。电镜下E2组大鼠肝脏Kuffer细胞明显活化 ,肝窦内皮细胞与基质部分脱落、肝窦内皮窗孔扩大 ;C、E1组Kuffer细胞活化不明显 ,内皮细胞基本完整。结论　大鼠脑死亡状态能明显导致肝实质细胞与非实质细胞损伤     

诱导HO-1改善氧化应激状态减轻老年供肝缺血-再灌注损伤

目的观察诱导血红素氧合酶-1(HO-1) 生成能否减轻老年供肝移植后缺血-再灌注损伤.方法取老年(16个月龄)SD大鼠5只和成年(3个月龄)大鼠5只,分别测定其肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性及维生素E(Vit E)、维生素C(Vit C)和丙二醛(MDA)含量; 另取老年SD大鼠60只作为供体,随机均分为血晶素(Hemin)组和对照组,分别于取肝前24 h腹腔注射Hemin或生理盐水,然后将其肝脏移植给同种大鼠,同时观察再灌注后肝脏组织学变化和细胞凋亡.结果老年大鼠肝脏组织中SOD活性明显低于成年大鼠,Vit C含量亦少(P＜0.05),而MDA明显增高(P＜0.05).用Hemin预处理的老年SD大鼠供肝在切取前,SOD活性增加,Vit E、Vit C含量增加,MDA含量降低(P＜0.05); 肝移植后血清ALT明显降低,肝组织HO-1活性明显增高,肝脏组织学检查示再灌注后凋亡细胞明显减少(P＜0.05).结论老年SD大鼠肝脏存在氧化应激和脂质过氧化状态,HO-1可通过改善这种状态而减轻其缺血-再灌注损伤.     

TAT-血红素氧合酶-1融合蛋白对大鼠供肝冷保存期炎性反应及肝功能的影响

目的 探讨HIV-1反式激活蛋白-血红素氧合酶-1(TAT-HO-1)融合蛋白对大鼠供肝冷保存期炎性反应及肝功能的影响.方法 成年健康雄性SD大鼠48只,体重250～300 g,开腹游离腹主动脉并结扎,于左右髂总动脉分叉处向心端穿刺腹主动脉,切断肝上下腔静脉,随机灌注4℃HTK液(C组,U=24)或4℃含TAT-HO-1融合蛋白50 μg/ml的HTK液(P组,n=24),至流出灌洗液清亮后停止灌注,取肝脏,置于相应保存液中冷保存.分别于冷保存即刻、6、12和18 h时取保存液并切取肝组织.采用全自动生化分析仪测定保存液谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)及乳酸脱氢酶(LDH)活性,免疫组化法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,光镜下观察肝组织形态学.结果 随冷保存时间延长,两组保存液AST、ALT及LDH活性升高,TNF-α表达上调(P<0.05);与C组比较,冷保存6、12、18 h时P组保存液AST、ALT及LDH活性降低,TNF-α表达下调(P<0.05).结论 TAT-HO-1融合蛋白可抑制大鼠供肝冷保存期的炎性反应,对肝功能具有一定保护作用.     

纤维连接蛋白连接片段-1肽段减轻大鼠移植肝缺血再灌注损伤

目的 探讨纤维连接蛋白连接片段-1(CS1)肽段对大鼠肝移植缺血再灌注损伤的影响及其机制.方法 用Wistar大鼠作为供、受鼠,制作肝移植模型.CS1组供鼠分别于术前3d、取肝时和移植前注射CS1肽段,供肝获取后于UW液中保存18h,肝移植术后3d每天注射CS1肽段;对照组用随机肽段替代CS1,其他操作同CS1组.术后6、24、72 h检测受鼠血清转氨酶水平和肝组织病理改变.免疫组织化学染色显示肝脏中的炎症细胞和肝窦内皮细胞.多聚酶链反应检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和血管内皮细胞生长因子(VEGF) mRNA的表达水平.结果 术后24 h,对照组坏死肝组织面积约占总面积的(25.7±5.4)％,而CS1组为(12.6±3.6)％(P＜0.05).对照组血清转氨酶水平也低于对照组(P＜0.05).术后CS1组移植肝中枯否细胞和中性粒细胞数目均少于对照组(P＜0.05).两组冷缺血18h的供肝中,肝窦内皮细胞均失去正常形态,仅少数内皮细胞特异性标志物阳性.术后72 h,CS1组肝窦内皮细胞基本恢复正常形态,SE-1表达恢复,而对照组肝窦内皮细胞恢复欠佳.术后6和24 h时,CS1组肝组织中TNF-α mRNA的水平低于对照组(P＜0.0)5);术后24 h时,对照组VEGF mRNA的表达高于CS1组(P＜0.05);两组IL-1βmRNA水平的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 用CS1肽段处理供、受鼠可以减少炎症因子mRNA的表达,保护肝窦内皮细胞,减轻移植肝缺血再灌注损伤.     

虚拟肝技术在肝脏外科中的应用

<正>虚拟肝是利用外科学、临床解剖学、现代影像学、计算机图形学、图像处理和虚拟现实技术进行多学科交叉研究,研发出计算机软件系统,利用病     

体外肝切除自体肝移植在复杂肝切除中的应用

目的 评估体外肝切除自体肝移植在巨大肝癌患者复杂肝切除中的临床价值.方法 回顾性分析2008年1月至2010年5月首都医科大学附属北京朝阳医院收治的4例巨大原发性肝癌患者的临床资料.肿瘤最大直径10 ～ 18 cm,病灶不同程度地累及了第一、二、三肝门.患者难以耐受常规肝切除,均行体外肝切除自体肝移植.结果 4例患者顺利完成手术,手术时间690 ～840 min,无肝期250～300 min,术中出血量400～1400 ml,术中无肝期未行门、腔静脉转流术.4例患者在体外肝切除后行下腔静脉或肝静脉及门静脉修复成型,均应用成型异体血管来延长剩余肝脏肝上腔静脉以利于腔静脉吻合及第一肝门的重建.本组患者1例术后肝功能正常,1例出现腹腔出血再次手术止血,1例发生肝功能不全,1例出现肝肾功能不全于术后5d放弃治疗而死亡.3例术后生存的患者术后1～2个月间剩余肝脏均发生不同程度的代偿增生.术后生存的3例患者中2例分别于术后8、9个月发现肺部多发转移瘤,分别于术后13个月及15个月死亡.随访截至2012年4月,1例患者无瘤生存37个月.结论 体外肝切除自体肝移植为复杂肝切除的巨大肝癌患者提供了技术上的可行性,术后肝功能代偿不全及近期肿瘤的复发是限制该手术发展的主要问题.     

同种异体全肝或部分肝可以用作肝功能支持的可行性论证

人工肝支持系统是暂时替代肝脏部分功能的体外支持系统,其通过清除各种有害物质,补充必需物质,改善内环境,为肝细胞再生及肝功能恢复创造条件,或作为肝移植前的桥接.但目前人工肝系统尚无法完全模拟肝脏全部生物功能,使得其在临床应用中并未给患者带来长期获益.而在肝脏外科手术中会产生大量的"废弃"肝脏,如因良性肝脏疾病切除的部分肝...     

不规则肝切除术和规则肝切除术在肝癌手术切除中的比较

【摘要】 目的〓探究不规则肝切除术和规则肝切除术在巨大肝癌手术切除中的临床应用及比较。方法〓本研究回顾性分析2006年6月至2014年6月罗定市人民医院收治的原发性肝癌肝切除手术患者,对已实施的不规则性肝切除术与规则性肝切除术两组病例进行比较。包括两组手术的围手术期各个指标及术中、术后各个指标进行比较。结果〓规则肝切除组中的手术时间、术中出血、输血浆、输红细胞量、住院时间及并发症发生率均明显地高于不规则肝切除组的情况,差异有统计学意义(P<0.05),而肿瘤能完整切除的最大直径显著小于不规则肝切除(P<0.05);二者在死亡率的比较上无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。结论〓与规则肝切除相较,不规则肝切除在腹部手术史引起严重腹腔内组织粘连、肝功能分级较差、肿瘤数目较多及小肝癌中均体现了明显的优势。而对于肿瘤体积较大的肝癌患者,规则肝切除则更为有效。     

Indications for liver biopsy in liver tumors

Significant progress has been made in the assessment of liver dysfunction by application of non-invasive physical and biochemical test procedures. However, liver biopsy remains an important tool for diagnosis, evaluation and prognosis of chronic liver diseases and hepatic neoplasms. Liver biopsy results are most useful when the biopsy is performed for well-defined indications following a complete work-up of the patient. In case of lesions highly suspicious for hepatocellular carcinoma, a biopsy should be performed in case surgical (curative) treatment is no option. Thus for the planning of a surgical intervention, biopsy of the tumor is not necessary. In case of concomitant liver cirrhosis, a biopsy taken from the non-neoplastic (cirrhotic) liver may help to assess the functional capacity or to clarify the etiology. Metastases of the liver with unknown primary tumor should be biopsied to obtain information of the primary tumor and the potential for cytostatic therapy. In case of hemangioma or focal nodular hyperplasia, diagnosed and confirmed by radiology or ultrasound, biopsy is usually not necessary. Concern has been expressed about seeding of the needle tract with malignant cells. Indeed, such instances have been recorded with various carcinomas, but they remain rare events and are seldom of clinical importance. With the use of needles with diameter < 1.3 mm to minimise also the risk of bleeding, the procedure is simple, safe and painless.     

脂肪沉着供肝在肝脏移植中的应用

目的探讨供肝脂肪浸润程度与肝脏移植病人预后的关系。方法天津市第一中心医院2002年1～12月间供体采用UW液灌注的首次肝脏移植病人71例，根据供肝脂肪浸润程度分为四组，比较各组问术后谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平、ICU时间及1年移植物存活率等各项指标。结果轻度脂肪肝组与无脂肪肝组的术后ALT、AST、ICU时间、1年移植物存活率均无显著性差异，中度脂肪肝组的术后ALT、AST、ICU时间均高于轻度及无脂肪肝组，但1年移植物存活率一致，三组均无移植物原发无功（PNF）发生。重度脂肪肝组只有2例，故未作统计学分析，其中1例发生PNF，于术后第2天行再次移植手术。结论轻、中度脂肪肝均可应用于l临床肝移植，对病人预后无影响；重度脂肪肝PNF发生率较高，不宜应用。     

腹腔镜解剖性肝叶切除术治疗肝良恶性病变

目的探讨腹腔镜下解剖性肝叶切除术治疗肝良恶性病变的安全性、可行性.方法对2005年1月至2010年2月在我院行腹腔镜下解剖性肝部分切除术的67例患者进行可行性及疗效分析,并对其临床效果进行观察.结果67例完全腹腔镜下解剖性肝叶切除术均获得成功,平均手术时间(50.6±16.2)min;术中平均出血量(220.8±76.5)ml.术中无需阻断肝门血流,术后无并发症发生.术后48 h均能下床活动,术后1～3 d即能进食.术后住院5～7 d,平均(6.6±1.1)d;总住院费用(30767.4±150.1)元.结论对位于肝左叶、右肝表面、肝右叶下段的良恶性病灶,行腹腔镜下解剖性肝叶切除术是安全和可行的,且具有创伤小恢复快的特点,值得临床推广应用.     

Parenchymal liver injury in orthotopic liver transplantation

BACKGROUND: A 35-year period of clinical development resulted in orthotopic liver transplantation (OLT) becoming a standardized surgical procedure. Despite this progress, the rate of technical complications is still high. Although the main problem in most analyses is vascular or bile duct failure, we observed a remarkable number of parenchymal liver injuries that led to intraoperative problems. Our aim, therefore, is to present an overall report on the incidence, treatment, and clinical course of parenchymal liver injuries in OLT. METHODS: Five hundred seventy-two consecutive OLT procedures performed between 1988 and 1998 were analyzed in a retrospective study. Parenchymal liver injury was diagnosed by means of examination of the surgical reports. Donor- and recipient-related data followed the medical report. The lesions were classified according to the Organ Injury Scale. RESULTS: Parenchymal liver injury was diagnosed in 23 patients (4%). The lesions were classified as grade Ia (13.1%), grade Ib (13.1%), grade IIb (52.1%), grade IIIa (17.1%), and grade IIIb (4.3%). In 19 patients (82.6%), the lesion was detected during OLT, and in four patients (17.4%), during relaparotomy. The latter group showed significantly higher-grade injuries. Treatment was suture or fibringlue alone, 17.4%; fibringlue and hemostyptics, 26.1%, mesh wrapping 30.4%, and mesh packing 26.1%. Seven patients (30.4%) underwent relaparotomy. Further active bleeding was not found in any of them. Statistical analysis found a correlation between injury grade and relaparotomy rate. No patients died as a result of parenchymal liver injury. CONCLUSIONS: Parenchymal liver injuries can be treated well, with no adverse effect on patient or graft survival. An early decision concerning the surgical procedure for controlling hemorrhage is required. A basically aggressive therapeutic approach might avoid further complications relating to reperfusion edema.