体外培养红细胞的研究进展

红细胞(RBCs)是临床输血治疗中需求最大的血液制品之一,目前主要依靠献血者提供,供需矛盾极其突出.体外培养的可定制RBCs为解决这一矛盾带来了曙光.RBCs可以从人类诱导的多能干细胞(IPSCs)、永生化成体红系祖细胞、胚胎干细胞(ESCs)、脐带血(UCB)和外周血(PB)中提取的造血干细胞或单个核细胞等途径分化培...     

人骨髓干细胞在中空纤维滤器中诱导分化构建生物人工肝反应器的可行性研究

目的 探讨以人骨髓干细胞在中空纤维滤器中直接扩增并诱导分化为类肝细胞,从而直接构建成生物人工肝反应器的可行性. 方法 取志愿者骨髓血,人骨髓间充质干细胞分离、扩增至107数量级后种植入中空纤维滤器,继续培养扩增10 d后,以含重组人肝细胞生长因子(rhHGF)、重组人碱性成纤维细胞生长因子4(rhFGF-4)、重组人制瘤素M(rhOSM)等细胞因子的培养液诱导分化,检测培养上清液中白蛋白、甲胎蛋白(AFP)水平;诱导18 d后检测氨代谢、安定代谢及尿素合成等功能.培养结束后以流式细胞仪检测消化滤器内细胞白蛋白表达率.培养全过程监测滤器内培养液葡萄糖浓度变化. 结果 ①扩增培养期人骨髓间充质干细胞在中空纤维滤器内种植后的葡萄糖摄取量呈进行性升高,在诱导分化期保持相对平稳,诱导培养结束时细胞总数达109数量级.②进行诱导培养后6 d,培养上清液中出现AFP,12 d达到峰值;9 d出现白蛋白并持续进行性升高;诱导培养18 d时,滤器内细胞总体氨清除速率为2.0～2.7 mmol/24 h,尿素产生速率为1.8～2.2 mmol/24 h,安定清除速率为3.2～3.8 mg/24 h.③21 d滤器内细胞白蛋白表达率为66.18%～76.91%. 结论 人骨髓干细胞可在中空纤维滤器内扩增,并分化为肝细胞样细胞,成为具有一定功能的生物人工肝反应器.     

间充质干细胞迁移的研究进展

骨髓中主要包括两种多能干细胞,即造血干细胞(hemato-poietic cell,HSC)和非造血干细胞,后者中以间充质干细胞(mes-encbymal stem cell,MSC)为主.MSC具有自我增殖和多向分化的潜能,特定条件下可分化为中胚层和外胚层细胞,如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞、神经细胞等.     

肝干细胞的研究进展

干细胞(stem cell)是指在适当条件下,具有自我复制、自我更新以及全能或多能分化能力的细胞群. 目前,人们根据干细胞分化能力的不同将其分为3类:①全能干细胞(totipotential stem cells):可以分化形成所有的成体组织细胞,甚至发展成完整的个体,如胚胎干细胞; ②多能干细胞(multi- potential stem cells):具有多向分化潜能,可以分化形成除自身组织以外的其他组织细胞,如造血干细胞、间充质干细胞等;③专能干细胞(unipotenital stem cells):维持某一特定组织细胞的自我更新,如肠上皮细胞等.……     

成体干细胞可塑性研究的理论思考

成体干细胞是存在于发育成熟机体组织中的具有高度自我更新和增殖潜能的未分化细胞。依据细胞的发育潜能,可将干细胞分为全能干细胞(具有分化为全部机体组织细胞类型的能力)、多能干细胞(具有分化为多种不同组织细胞类型的能力)和专能干细胞(只能分化为某一特定类型的组织细胞)。成体专能干细胞的研究已经开展多年,其中造血干细胞和角膜干细胞已经成功应用于临床,表皮干细胞和神经干细胞也取得了良好进展。进入20世纪90年代末,成体干细胞的研究又取得了重要突破。在发育成熟的高等动物甚至人类的多种组织器官中(如骨髓和皮肤等)发现存在有成体多能干细胞。这些成体多能干细胞同样具有很强的分化潜能,甚至可以跨越传统的胚层概念的界限,分化为其他胚层来源的细胞。成体干细胞的发育来源是一重要的理论问题,对干细胞的研究实践具有指导意义。从发育生物学的角度提出了成体干细胞发育来源的一个设想模式,同时对成体干细胞与胚胎干细胞的比较和成体干细胞与肿瘤细胞的联系进行分析,以期有助于对成体干细胞的理解和认识。     

特尔立联合自体骨髓干细胞移植治疗终末期肝病的临床观察与护理

干细胞在骨髓中含量丰富,包括骨髓间充质干细胞(MMSCs)和造血干细胞,MMSCs是一类具有多分化潜能的均质性细胞,目前许多研究表明它可诱导分化为成熟的肝细胞或胆管细胞,而且肝细胞因子等细胞因子或微环境对干细胞的定向分化起重要作用。重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子(特尔立)可刺激骨髓祖细胞的增殖、分化,同时刺激粒细胞、单核细胞的增殖,提高外周血白细胞数量,激活巨噬细胞,增强机体抵抗     

免疫与造血

正常造血与免疫造血干细胞中存在着不同的分化阶段。全能干细胞可分化为髓系和淋巴系多能干细胞.但全能干细胞与多能干细胞等很幼稚细胞的分化与增殖的调节机理尚有许多不明之处。现正在研究由骨髓支持细胞(基质细胞)等形成的造血微环境,以及近年来特别引人注目的白细胞介素3(IL-3)的调节机理。对于分化方     

不同年龄供体间充质干细胞在骨组织工程中的应用

目前临床上对不同年龄阶段人骨髓间充质干细胞( human mesenchymal stem cells, hMSCs)的体外培养增殖能力以及分化情况尚无确切的参数和统一的标准.随着 hMSCs的纯化、体外扩增和诱导分化技术的发展,使其临床应用成为可能.但不是所有患者都能提供足够和有生长活力的种子细胞, hMSCs的质、量受年龄、性别、培养条件、疾病等因素的影响,不同年龄的 MSCs体外增殖、分化特点有很大差异.因此,掌握不同年龄阶段的 hMSCs的生物学特点、所培养的自体 hMSCs是否能满足修复患者骨缺损的需要、确定不同年龄阶段人骨髓间充质干细胞体外增殖、分化的各种参数,为临床上组织工程骨修复骨缺损对种子细胞的需要提供依据.     

干细胞疗法的最新进展

干细胞疗法（ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｔｈｅｒａｐｙ）的研究是９０年代医学和生物学中最此人关注的热点之一。干细胞具有自我更新与增殖分化的生物学特性，是基因疗法一种理想的靶细胞。虽然对于各类干细胞的分离、培养及体外扩增已进行了大量研究，但其检测方法、发生和分化的具体过程等仍鲜为人知。本就造血干细胞、神经元干细胞、胚胎干细胞和肝卵圆细胞研究方面的最新进展作一综述，并探讨它们用于临床治疗造血系统疾病以及其它     

成体干细胞可塑性研究的理论思考

成体干细胞是存在于发育成熟机体组织中的具有高度自我更新和增殖潜能的未分化细胞。依据细胞的发育潜能，可将干细胞分为全能干细胞(具有分化为全部机体组织细胞类型的能力)、多能干细胞(具有分化为多种不同组织细胞类型的能力)和专能干细胞(只能分化为某一特定类型的组织细胞)。成体专能干细胞的研究已经开展多年，其中造血干细胞和角膜干细胞已经成功应用于i临床，表皮干细胞和神经干细胞也取得了良好进展。进入20世纪90年代末，成体干细胞的研究又取得了重要突破。在发育成熟的高等动物甚至人类的多种组织器官中(如骨髓和皮肤等)发现存在有成体多能干细胞。这些成体多能干细胞同样具有很强的分化潜能，甚至可以跨越传统的胚层概念的界限，分化为其他胚层来源的细胞。成体干细胞的发育来源是一重要的理论问题，对干细胞的研究实践具有指导意义。从发育生物学的角度提出了成体干细胞发育来源的一个设想模武，同时对成体干细胞与胚胎干细胞的比较和成体干细胞与肿瘤细胞的联系进行分析，以期有助于对成体干细胞的理解和认识。     

人、鼠神经干细胞的生物特性比较

目的：比较分析体外人及小鼠神经干细胞原代培养的生长特性。方法：用无血清培养与单细胞克隆技术对人及鼠胚胎脑组织进行分离、培养。借用光镜、免疫组织化学对其鉴定，应用透射电镜对不同生长时期神经干细胞生物学特性进行观察。结果：人和鼠胚胎分离的细胞具有连续分化及克隆能力，克隆球与早期的原始细胞神经上皮干细胞蛋白(nestin)抗原呈阳性。诱导后成熟分化的细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经丝-200(NF-200)抗原呈阳性。小鼠神经干细胞电镜结果：1周时，细胞发育较为原始，核大胞质少，细胞器不发达，未观察到细胞突起及神经元与星形胶质细胞具备的特征。培养2周后，其电镜结果与1周结果无明显区别。继续培养到4周，见大部分细胞内出现空泡样变性，部分细胞表现出神经元及星形胶质细胞的一些特征。另外在克隆求内观察到类似细胞连接样结构。而人神经干细胞特性与小鼠神经干细胞相似，空泡样变性比小鼠神经干细胞更为明显。人与鼠神经干细胞经诱导分化10d后，见到典型的神经元及星形胶质细胞特征。结论：人及鼠神经干细胞具有很强的增殖能力，生物特性相似。     

间充质干细胞在肺组织损伤及修复中的研究进展

干细胞(stem cells)是一类具有无限自我更新和分化能力的特殊细胞,能够控制并维持细胞再生,在受损组织进行局部再生修复.当组织损伤较为严重时,远处的干细胞也可通过横向分化(tmnsdifferentiation)、甚至跨胚层分化的方式募集到受损部位,进行转化与修复.间充质干细胞(mes-enchymal stem cells,MSCs)来源于胚胎发育早期中胚层,具有分化为成骨细胞、脂肪细胞、神经细胞和上皮细胞等多种细胞的潜能,并有向损伤组织趋化的特性,易于体外分离、培养和扩增,易于转染并能长期表达外源基因.MSCs于骨中含量最多,称为骨髓间充质干细胞,是除造血干细胞外存在于骨髓中的另一种干细胞.     

MicroRNA在干细胞增殖与分化过程中的调控作用

背景:研究表明MicroRNA(miRNA)可通过抑制干细胞特定mRNA 序列的翻译来调控干细胞的自我更新和分化.目的:探讨miRNAs 在干细胞增殖和分化过程中的作用.方法:由第一作者检索2000/2010 PubMed 数据库、Elsevier 数据库及Nature 数据库.英文检索词为"stem cell,embryonic stem cell(ESC),induced pluripotent stem cells(iPS cell),microRNA(miRNA)".排除重复性研究.共保留其中的39 篇进行归纳总结.结果与结论:胚胎干细胞有特异性的miRNAs 表达,miRNAs 对胚胎干细胞增殖与分化起重要的调控作用;miRNAs 对造血干细胞分化的多个阶段和方向有调控作用;miRNAs 还参与了神经干细胞、间充质干细胞和皮肤干细胞等成体干细胞分化的调控.干细胞特异性的miRNAs 可提高体细胞重编程的效率.     

成人再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞增殖分化潜能:与健康人的比较

背景:骨髓间充质干细胞具有成脂和成骨分化潜能,再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞可能存在成脂和成骨分化异常。目的:观察再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞增殖及分化潜能与健康人的差异。方法:选择哈尔滨市第一医院血液病肿瘤研究所收治的再生障碍性贫血患者5例,另选5例健康成人作为对照组;采用全骨髓培养法分离骨髓间充质干细胞。结果与结论:采用全骨髓培养法成功分离出骨髓间充质干细胞;与对照组相比,再生障碍性贫血组骨髓间充质干细胞的细胞形态和免疫表型无显著差异,皆表达CD73、CD90、CD105,不表达CD34、CD45和HLA-DR;再生障碍性贫血组骨髓间充质干细胞增殖能力显著低于对照组(P<0.05),成脂肪细胞分化诱导率高于对照组(P<0.05),PPARγmRNA和FABP4 mRNA表达量均高于对照组(P<0.05);而成骨细胞分化诱导率低于正常对照组(P<0.05),ALPmRNA和BGLAP mRNA表达量分别低于对照组(P<0.05)。提示再生障碍性贫血组骨髓间充质干细胞分化潜能存在成脂肪细胞和成骨细胞分化的失衡。     

表皮干细胞研究进展

表皮干细胞具有无限增殖和分化的潜能，对维持表皮的自我更新、保持皮肤的正常结构以及对皮肤的创伤修复具有重要意义。表皮干细胞的研究已引起越来越多科研人员的关注，本文就目前表皮干细胞的生物学特征、表面标记、分布特征、分化调控及其应用前景等方面的研究进展作一综述。     

骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经样细胞的机制

目的探索骨髓间充质干细胞 (MSCs)在体外诱导分化为神经样细胞的机制。方法分离培养大鼠MSCs ,用二甲基亚砜 (DSMO)和丁羟茴醚 (BHA)诱导分化 ,检测诱导分化前、预诱导 2 4h、诱导分化后 6h、2 4h和 48h神经细胞和神经干细胞的特异性标记蛋白的表达。结果诱导分化后 ,大部分MSCs变成双极、多极和锥形 ,并相互交织成网络结构 ,巢蛋白 (Nestin)在诱导分化前不表达 ,在诱导分化后 6h达到最高 ,2 4h和 48h逐渐降低。神经元特异性核蛋白 (NeuN )在诱导分化前不表达 ,在诱导分化后 6h出现表达 ,2 4h和 48h表达增强。结论MSCs经体外诱导先分化为神经干细胞 ,然后分化为神经元样细胞。     

间充质干细胞在神经系统中的应用

间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)是指一群具有向成骨细胞、成软骨细胞、成脂肪细胞、骨髓基质、肝脏细胞和神经细胞等多种分化潜能的多能干细胞。MSCs不仅能够向多种组织和细胞类型分化,并且在体外易分离培养和扩增。这些特性使MSCs成为在细胞治疗、基因治疗中有效发挥作用的理想工具[1]。1间充质干细胞的来源骨髓来源:骨髓中不仅有造血干细胞(hematopoietic stemcell,HSC),而且还有另一类能够分化为多种骨髓间质成分的干细胞,他们被广义地定义为间充质组织的干细胞,即间充质干细胞。骨髓来源MSCs是目前研究最多、最深入的M…     

干细胞在组织工程及其相关领域的研究进展

干细胞是机体内存在的一类特殊细胞,它们显著的生物学特性是既有自我更新的能力又具有多向分化的潜能。干细胞可分为胚胎干细胞(ESC)和成体干细胞如造血干细胞、骨髓间充质干细胞、神经干细胞、肌肉干细胞、成骨干细胞、内胚层干细胞和视网膜干细胞等。干细胞在组织工程及相关领域应用较广,如最近发现老鼠胚胎干细胞可以向神经细胞分化,可以用来治疗帕金森等神经系统的疾病,并且利用这一分化特性可以作为治疗视网膜退化性疾病的无限的细胞资源。近年来的研究成果给人们显示出干细胞的美好应用前景,关键在于如何确定干细胞是否存在于所有的组织中,如何改进干细胞的分离和培养技术并掌握干细胞向特定谱系定向分化所需的标志物等。尽管如此,使用干细胞的危害性也需提出,尤其是人类的ESC细胞显示出其具有致瘤性,说明未分化的ESC细胞在进行移植前必须完全清除掉。介绍干细胞的概念,就其分类和在组织工程及其相关领域的研究进展。     

骨髓间充质干细胞成脂和成骨分化过程中Wnt信号通路的调控效应

背景:骨髓间充质干细胞的成脂肪分化与成骨分化比例的失衡与许多骨疾病密切相关,而近些年发现Wnt信号通路在调控骨髓间充质干细胞的分化方向中起重要作用.目的:通过Wnt信号通路PCR基因芯片观察大鼠骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞和成骨细胞后相关基因表达的变化,寻找Wnt信号通路中调控骨髓间充质干细胞分化的靶基因.方法:采用大鼠第3代骨髓间充质干细胞分别进行成骨诱导和成脂诱导,7 d后用Trizol萃取培养瓶中的细胞总RNA,倒置显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态特征及成骨诱导后和成脂诱导后细胞形态特征.采用Wnt信号通路PCR芯片(大鼠)进行摹因芯片检测,以未诱导组为对照,计算成脂肪诱导,成骨诱导后相关基因上调/下调的比值.结果与结论:①倒置显微镜下观察,传3代后可获得均一性较高的骨髓间充质干细胞,骨髓间充质干细胞经成骨诱导后向成骨细胞方向分化,经成脂诱导后向脂肪细胞方向分化.②与未诱导组相比,骨髓间充质干细胞成脂诱导后Wnt信号通路表达上调的基因(Dkk-1,kremen,FZD1,FZD7)等15个(ratio＞2),下调的基因(sFrp 5,β-catenin,Dvl3,Tcf7)等16个(ratio＜0.5).成骨诱导后,Wnt信号通路表达上调的基因(Dkk1,kmmen,β-catenin,Wnt11)6个,表达下调的基因(sFrp5,sFRP4,Fzd1)等15个.提示WnI信号通路在骨髓间克质干细胞成脂细胞分化和成骨细胞分化中发挥重要作用.     

干细胞在组织工程及其相关领域的研究进展

干细胞是机体内存在的一类特殊细胞，它们显的生物学特性是既有自我更新的能力又具有多向分化的潜能。干细胞可分为胚胎干细胞(ESC)和成体干细胞如造血干细胞、骨髓间充质干细胞、神经干细胞、肌肉干细胞、成骨干细胞、内胚层干细胞和视网膜干细胞等。干细胞在组织工程及相关领域应用较广，如最近发现老鼠胚胎干细胞可以向神经细胞分化，可以用来治疗帕金森等神经系统的疾病，并且利用这一分化特性可以作为治疗视网膜退化性疾病的无限的细胞资源。近年来的研究成果给人们显示出干细胞的美好应用前景，关健在于如何确定干细胞是否存在于所有的组织中，如何改进干细胞的分离和培养技术并掌握干细胞向特定谱系定向分化所需的标志物等。尽管如此，使用干细胞的危害性也需提出，尤其是人类的ESC细胞显示出其具有致瘤性，说明未分化的ESC细胞在进行移植前必须完全清除掉。介绍干细胞的概念，就其分类和在组织工程及其相关领域的研究进展。