急性白血病及肾炎患者外周血淋巴细胞电泳观察

细胞电泳是一项从分子水平和细胞水平研究细胞表面结构和功能的生物物理学方法[1 ]我们应用上海医科大学细胞电泳仪对 12例急性白血病病人及 7例肾炎病人进行了淋巴细胞电泳观察 ,现报导如下 :1　材料与方法1 1　仪器　上海医科大学细胞电泳仪1 2　方法　 30～ 40ＩＵ ｍｌ肝素抗凝血 3ｍｌ,稀释一倍后缓慢加入比重为 1.0 77± 0 .0 0 2的淋巴细胞分层液中 ,2 5 0 0～ 30 0 0ｒ ｍｉｎ离心 15ｍｉｎ ,吸出白细胞层 ,以无钙、镁的Ｈａｎｋ’ｓ液洗涤三次 ,配成 1～ 1.5× 10 7 ｍｌ细胞悬液。1 3　将淋巴细胞注入方形管 ,找到静止层 ,显微镜…     

初发急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群的表达

目的：探讨不同类型初发急性白血病患者外周血 T 淋巴细胞亚群及其绝对数量,了解在不同类型急性白血病患者中的意义。方法采用流式细胞仪对66例急性白血病（AL）患者（急性髓细胞性白血病49例、急性B 淋巴细胞性白血病11例、急性 T 淋巴细胞性白血病6例）及30例健康人外周血 T 淋巴细胞亚群的百分率及其绝对值进行检测。结果初诊 AL 与健康对照组比较,急性髓细胞白血病（AML）及 B-ALLCD3＋ T 淋巴细胞百分比明显高于健康对照组（P ＜0．05）,而 T-ALLCD3＋ T 细胞明显低于健康对照组（P ＜0．05）,CD4＋ T 淋巴细胞百分比与健康对照组相比差异无统计学意义（P ＞0．05）;B-ALLCD4＋ T 淋巴细胞明显高于健康对照组（P ＜0．05）,T-ALLD4＋ T 淋巴细胞则明显减低（P ＜0．05）;AMLCD8＋ T 淋巴细胞明显增高（P ＜0．05）,B-ALL 及 T-ALL 增高但差异无统计学意义（P ＞0．05）;T-ALL 及 AMLCD4＋/CD8＋的比值均明显低于健康对照组（P ＜0．05）,B-ALL 增高但无统计学意义（P ＞0．05）;AML、B-ALL 及 T-ALLCD3＋ T 淋巴细胞和 CD4＋ T 淋巴细胞绝对值明显低于健康对照组（P ＜0．05）;CD8＋ T 淋巴细胞差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论不同类型急性白血病 T 淋巴细胞亚群百分率的表达有所差异,不能全面反映急性白血病患者的免疫状态;急性白血病者存在细胞免疫功能混乱,主要表现在 T 淋巴细胞亚群绝对数量的减少,检测外周血 T 淋巴细胞亚群百分率的同时应检测 T 淋巴细胞亚群绝对值,才更有助于急性白血病患者免疫状态的评估。     

慢性淋巴细胞白血病外周血免疫球蛋白异常研究

为了解慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者外周血免疫球蛋白（Ig）异常与年龄、性别、疾病分期及预后的关系,运用免疫速率比浊法测定83例CLL患者血清中IgG、IgA和IgM水平,用多参数流式细胞术（FCM）检测患者外周血CD38、ZAP－70表达水平。结果表明：83例CLL患者中IgG减低12例（14．5％）;IgA减低26例（31．3％）,IgM减低34例（41．0％）。BinetC期组Ig减低发生率明显高于BinetA和B期组（P=0．011）,Rai分期高危组的Ig减低发生率明显高于低危组（P=0．011）。Ig减低组CD38和ZAP－70表达阳性率明显较Ig正常组高（P＝0．033和P=0．038）。CD38和ZAP－70在疾病晚期患者表达阳性率更高,其中BinetC期组ZAP－70表达阳性率明显高于BinetA和B期组（P=0．047）。而年龄和性别与Ig异常没有明显相关性（P〉0．05）。结论：CLL患者体液免疫功能与疾病分期密切相关,检测CLL患者外周血Ig水平的变化,对了解CLL患者免疫功能状态,从而判断病情及预后具有重要作用。     

转录因子SP1对急性T淋巴细胞白血病进程的影响

目的：研究转录因子SP1对支架蛋白ARRB1的转录调节及其在急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）中的作用。方法：构建p GL3-ARRB1-luc、p CDNA3.1-SP1及其他可能结合的转录因子质粒,采用双荧光素酶报告基因实验证明ARRB1启动子区与转录因子结合;利用慢病毒感染构建SP1过表达的稳定细胞株JK-SP1,RT-PCR及Western blot验证SP1与ARRB1表达的关系;进一步流式细胞术检测SP1对细胞凋亡、细胞周期以及细胞活性氧含量的作用。构建NCG小鼠异种移植模型,探讨SP1对白血病小鼠成模能力的影响。结果：p GL3-ARRB1-luc、p CDNA3.1-SP1质粒共转入HEK293T细胞后,虫荧光素高表达（P<0.001）;同时,与对照组相比,稳定细胞株JK-SP1中ARRB1 m RNA水平、蛋白水平均增加（均P<0.01）。进一步体外实验结果显示,与对照组相比,JK-SP1细胞凋亡比例更高（x=22.78%）,细胞周期多阻滞于G1期（63.00%）,活性氧含量增加。体内实验证明,尾静脉输注JK-SP1细胞的NCG小鼠生存时间更长（平均33....     

PD-1在急性白血病异基因造血干细胞移植后T淋巴细胞的表达

目的 探究PD-1在急性白血病患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后外周血T淋巴细胞表达的动态变化及临床意义.方法 采集23例健康志愿者(对照组),40例急性白血病患者allo-HSCT(移植组)后1、2、3、4.5、6个月的外周血标本,采用流式细胞术对各标本CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞程序性...     

急性髓细胞白血病患者外周血淋巴细胞亚群的检验分析

目的应用流式细胞学技术检测急性髓细胞白血病患者外周血淋巴细胞亚群的变化分析,揭示急性髓细胞白血病中外周血淋巴细胞亚群的变化规律,为临床个体化治疗累积分子机制研究资料。方法应用流式细胞学技术检测80例急性髓细胞白血病患者外周血淋巴细胞,应用相应的单克隆抗体检测CD3~+T淋巴细胞百分比、CD4~+T淋巴细胞百分比、CD4~+/CD8~+比值及CD16~+/CD56~+NK细胞百分比。同时通过CD45/SSC设门分析,分别测定多种CD分子的表达率,并通过配对检验分析不同高表达CD分子相关性。结果急性髓细胞白血病(AML)组患者CD3+T淋巴细胞百分比、CD4~+T淋巴细胞百分比、CD4~+/CD8~+比值及CD16~+/CD56~+NK细胞百分比显著低于健康对照组,CD33、CD15、Cyt-MPO和CD64阳性表达不仅比例高,而且表达量高。配对分析表明CD33/CD15和CD33/Cyt-MPO的抗原表达有差异性。结论 AML患者免疫系统低下,外周血CD33、CD15、CD64和Cyt-MPO的表达高。     

同种异体外周血淋巴细胞移植防治白血病复发

同种异体外周血淋巴细胞移植是防治骨髓移植后白血病复发的一种新的有效免疫治疗措施。本文就该治疗的原理、适应症、方法、疗效和副作用等进行综述。     

缺铁性贫血患儿外周血淋巴细胞转铁蛋白受体的表达

铁与细胞生长、分化密切相关,细胞对铁的摄入通过转铁蛋白受体(ＴｆＲ),即ＣＤ71控制。我们采用流式细胞仪对34例缺铁性贫血(ＩＤＡ)患儿外周血ＣＤ71 淋巴细胞进行了检测,其结果如下。病例和方法1　病例　34例ＩＤＡ患儿诊断标准参照1988年全国小儿血液病学术会议的诊断标准[1],Ｈｂ<110ｇＬ,ＭＣＶ<80ｆｌ,血清转铁蛋白饱和度(ｓＴＳ)<10%,血清铁蛋白(ＳＦ)<16μｇＬ。其中男19例,女15例;年龄9个月～11岁,中位年龄4岁。对照组为18名健康儿童,男11名,女7名;年龄1～10岁,中位年龄5岁。均作血常规、血清铁(ＳＩ)和ＳＦ(放射免疫法,深圳拉尔文…     

儿童急性B淋巴细胞白血病变异表达CD13化疗的护理对策

<正>儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)在儿童白血病中发病率较高,B-ALL在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中占80%~85%[1],临床预后比其他急性白血病较好。但在BALL中有一种变异高表达CD13的急性白血病,我们称之为B淋巴细胞白血病变异表达CD13,这种疾病临床预后较差,化疗时副作用大,并发症严重,因此,采取合适的护理对策,不但可减轻患儿的痛苦,还能达到满意的化疗效果。近年来我科     

急性心肌梗死患者外周血淋巴细胞凋亡及免疫功能变化的研究

细胞凋亡 (Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)又称程序性细胞死亡 ,是英国病理学家ｋｅｒｒ等于 1972年最早提出的。近些年来随着分子生物学技术的发展 ,其重要意义越来越受到重视 ,我们测定了急性心肌梗死患者不同病期ＰＢＬ凋亡的变化 ,并探讨其临床意义。1　材料与方法1 1　对象　ＡＭＩ患者 8例 ,男女各 4例 ,均为我院 1999年 5～ 8月住院患者。年龄 6 0～ 90岁 ,平均 6 7 7岁。冠心病心绞痛 (ＡＧ)对照组 8例 ,男 5例 ,女 3例 ,年龄 6 0～ 80岁 ,平均6 5 9岁。健康老年对照组 8例 ,男女各 4例 ,年龄 6 0～ 83岁 ,平均 6 6 5岁。1 2　方法1 2 1　…     

Intensive postremission chemotherapy in Taiwanese adults with acute myelogenous leukemia

Intensive postremission chemotherapy has produced disease-free survival comparable to that of bone marrow transplantation in patients with acute myelogenous leukemia (AML), but its efficacy was unknown in Taiwan. We assessed the efficacy of intensive postremission chemotherapy, consisting of high-dose arabinoside-C (HiDAC) with or without transplantation of peripheral blood stem cells, in 33 AML patients from a single institute in Taiwan. Toxic reactions, treatment outcome, prognostic factors, and the size of the peripheral blood stem-cell harvest after HiDAC were analyzed. After a median follow-up of 21 months, 18 patients remained in continuous complete remission. The actuarial leukemia-free survival at 4 years was 51%. Relapse occurred in 12 patients, at a median of 12 months after initial diagnosis. All 6 patients with acute promyelocytic leukemia remained disease free after HiDAC therapy. Age, sex, and number of remission-induction or intensive consolidation chemotherapy courses had no effect on the risk of relapse. Intensive postremission chemotherapy can effectively prolong the duration of remission in young (<60 years of age) adults with AML.     

急性白血病初诊患者血细胞参数分析

目的分析急性白血病初诊患者血细胞分析参数的特点,揭示血细胞分析参数在急性白血病诊断和分型中的意义,为临床医生初诊和检验人员血细胞分析复检提供依据。方法对已确诊的140例白血病初诊患者血细胞分析参数与参考值进行对照分析。结果急性白血病患者血细胞分析参数主要特点为血红蛋白(Hb)、红细胞比容(HCT)、中性粒细胞百分比(NEU%)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)降低,红细胞分布宽度(RDW)、淋巴细胞百分比(LYM%)、单核细胞绝对值(MONO)、嗜碱性粒细胞绝对值(BASO)、单核细胞百分比(MONO%)、白细胞(WBC)、淋巴细胞绝对值(LYM)升高;急性非淋巴细胞白血病参数主要特点为Hb、HCT、RBC、NEU%、PLT降低,RDW、BASO%、MONO%、MONO、BASO、中性粒细胞绝对值(NEU)升高;急性淋巴细胞白血病参数主要特点为Hb、HCT、NEU%、RBC、PLT、NEU、EOS%降低,LYM%、RDW、WBC、LYM升高。结论急性白血病患者血细胞分析参数特点为贫血且红细胞大小不一,PLT减少,NEU%和EOS%减低,淋巴细胞和单核细胞绝对值及百分数增高,BASO和WBC总数增高。急性非淋巴细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的血细胞分析区别在于急性非淋巴细胞白血病以BASO%、MONO%、MONO、BASO、NEU升高为主要特点,急性淋巴细胞白血病则以LYM%、WBC、LYM升高,NEU、EOS%降低为主要特点。     

次声对人外周血淋巴细胞的影响

目的探讨次声对人外周血淋巴细胞的影响。方法健康志愿者18人（n=18）空腹抽血并分离其淋巴细胞，按照实验处理方法分为次声组（次声处理，n=18）、对照组（处理同次声组但次声治疗仪处于关闭状态，n=18）、空白组（淋巴细胞分离后一直置于5％CO2饱和湿度的培养箱内培养，n=18）；实验处理15，30，60，90，120min，每时间段依次取样后放入5％CO2饱和湿度的培养箱内进行培养。培养24，48h，检测相关指标，包括台盼蓝染色法、噻唑蓝染色法（MTT法）、流式细胞术以及扫描电镜的检测。结果分离后的淋巴细胞存活率达到95％以上，采用MTT法检测的结果显示，实验处理后培养24，48h，次声组的OD值与对照组之间的差异均无统计学意义（P〉0．05）；但次声组OD值随处理时间呈依次增大趋势，而对照组这种趋势不明显。流式细胞仪检测结果显示，各次声处理组与相应的对照组比较，凋亡细胞以及其他各类细胞的比率，差异均无统计学意义（P〉0．05）。扫描电镜下结果显示：次声处理作用120min且培养48h的细胞大小、形状、表面微绒毛疏密程度与空白组差异不大；而对照组细胞却有细胞表面微绒毛减少、异形细胞增加等变化。结论本研究采用的次声治疗剂量对健康人外周血淋巴细胞的细胞活性可能有一定促进作用，但对其凋亡率影响不大；次声处理可能会引起细胞膜的超微结构变化。     

父母供者外周血单倍体干细胞移植治疗儿童复发难治急性白血病

背景：儿童复发难治急性白血病单纯化学治疗效果极差,异基因造血干细胞移植是治愈该类疾病的惟一有效方法。研究显示单倍体移植与同胞相合及非亲缘全相合造血干细胞移植的治疗效果接近,甚至优于后者,且父母作为供者单倍体造血干细胞移植依从性好,能够保证移植干细胞数量及预防原发病复发,明显提高了患者移植成功率及长期无白血病生存率。目的：回顾分析父母供者单倍体外周血造血干细胞移植治疗儿童复发难治急性白血病的疗效。方法：入选35例父母供者外周血单倍体造血干细胞移植治疗儿童复发难治急性白血病。均采用＂改良1,4-丁二醇二甲磺酸酯/环磷酰胺＋胸腺细胞免疫球蛋白＂预处理方案和环孢素、吗替麦考酚酯及甲氨蝶呤三联短程预防移植物抗宿主病。结果与结论：35例父母供者外周血单倍体造血干细胞移植治疗儿童复发难治急性白血病均植入成功。135例患儿回输单个核细胞中位数为5.82（3.23-8.45）×108/kg,其中CD34＋细胞中位数为4.52（2.37-11.51）×106/kg。2干细胞回输后100 d内,移植相关死亡率为14.3%。33-Ⅱ度急性移植物抗宿主病发生率为34.3%,Ⅲ-Ⅳ度急性移植物抗宿主病发生率为37.1%,慢性移植物抗宿主病总发生率为42.9%。42年无白血病生存率为42.9%,2年总生存率为51.4%,2年原发病复发率为34.3%,中位生存时间为24个月。提示对于无人类白细胞抗原相合同胞供者及不能及时寻找到非血缘人类白细胞抗原相合供者的儿童复发难治急性白血病,父母供者外周血单倍体造血干细胞移植是一种高效可行的治疗方法。     

脓毒症患者连续性肾脏替代治疗后Toll样受体4的改变

目的观察脓毒症患者外周血单核细胞（PBMC）Toll样受体4（TLR4）及下游炎症介质的表达变化，以及持续性血液透析治疗对其调控的作用。方法13例脓毒症患者按预后分为好转组（7例）和治愈组（6例），另选6例健康志愿者为正常对照组。采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测PBMC中TLR4 mRNA的表达；用流式细胞仪检测PBMC表面TLR4的表达；用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中自细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度。结果经过高容量血液滤过（HVHF）的连续性肾脏替代治疗（CRRT）以及其他综合治疗后，13例患者的血清IL-6和TNF-α明显降低（P均〈0．05），临床症状趋向好转，且治愈组低于好转组，并接近正常对照组水平；同时TLR4的表达也有所降低，但其降低幅度滞后于IL-6和TNF-α的降低幅度，在好转期仍有高水平的TLR4表达。结论CRRT所导致的单核细胞TLR4降低可能在脓毒症患者的治疗中具有重要的意义。     

EVI1基因阳性急性髓系白血病的临床特点与预后分析

目的探讨EVI1基因阳性急性髓系白血病(AML)患者的临床特点、预后并与EVI1基因阴性AML患者进行比较。方法观察309例AML病例,分析EVI1基因阳性AML患者的临床特征、细胞形态学、融合基因、早期死亡(ED)、CR率、总体生存率(OS)、无复发生存率(RFS)、造血干细胞移植效果等,并与EVI1基因阴性AML患者进行比较。结果 EVI1基因阳性AML患者白细胞数显著增高(P0.05),FAB分型中M4/M5比例偏高(P0.05)。EVI1阳性患者的染色体核型主要为预后较差的11q23(MLL基因阳性)、inv(3)/t(3;3)、-7等重现性染色体异常,而一些预后较好的核型如t(15;17)、t(8;21)、inv(16)发生率较低。EVI1基因阳性AML患者CR率明显低于EVI1基因阴性者(54.3%∶74.1%)(P0.05)。allo-HSCT可明显提高EVI1基因阳性AML患者OS(P0.05)。结论 EVI1基因阳性AML白细胞数高,生存期短,化疗效果差,预后不良。     

急性白血病化疗后医院感染危险因素分析

目的探讨急性白血病患者化疗后医院感染的临床特点、病原菌分布和危险因素。方法回顾性调查分析2009—2011年在福建省立医院住院化疗的急性白血病患者的医院感染情况。结果 40例急性白血病患者累计接受188个疗程化疗,医院感染率为32.9%。常见感染病种依次为肺炎30.6%、急性咽炎24.2%、血流感染11.3%、口腔感染11.3%和肠道感染8.1%。革兰阴性菌和革兰阳性菌为常见的病原菌。急性白血病患者化疗后医院感染发生率与年龄、糖尿病、中性粒细胞缺乏时间和白血病疾病状态显著相关。结论年龄、糖尿病、中性粒细胞缺乏时间和疾病病情是急性白血病患者化疗后医院感染的重要危险因素,应针对其采取有效的预防措施和重点监护以降低感染率,从而改善患者预后。     

MDR1 polymorphisms G2677T in exon 21 and C3435T in exon 26 fail to affect rhodamine 123 efflux in peripheral blood lymphocytes

P-glycoprotein (Pgp) is a member of the ABC-transporter family, and in humans, is encoded by the MDR1 gene. Recently, several single-nucleotide polymorphisms in the MDR1 gene were identified. The aim of the present study was to evaluate the effect of the MDR1 genetic polymorphisms G2677T and C3435T on Pgp activity in CD56+ and CD4+ peripheral blood cells. Using flow cytometry, rhodamine 123 (Rh123) efflux was determined in 46 male healthy volunteers. Median Rh123 fluorescence in control sample, after baseline dye uptake, was set as 100%. Rh123 fluorescence in efflux samples, exposed to different efflux periods, was used to calculate the percentage of Rh123 retained in the cells in comparison with control. There was no significant difference in Rh123 efflux in CD56+ cells after 5, 10, 15, and 30 min efflux between individuals with different MDR1 genotypes. Also, in CD4+ cells after 15, 30, 60, and 90 min, Rh123 efflux did not reveal statistically different results for the three genotypes at 2677 and 3435. Rh123 efflux was not enhanced by a 10-day rifampin administration, as determined in 15 individuals before and after rifampin treatment. In conclusion, we found no impact of the MDR1 G2677T and C3435T polymorphisms on Pgp activity in CD56+ and CD4+ peripheral blood lymphocytes.     

急性和慢性髓系白血病患者中螺旋酶抗原基因表达的研究(英文)

本研究旨在探讨螺旋酶抗原基因(HAGE)在急性髓系白血病(AML)和慢性髓系白血病(CML)中的表达状况和临床意义。应用实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测AML和CML患者骨髓单个核细胞中HAGE cDNA的表达。结果表明:74例AML患者中11例(14.8%)存在HAGE过表达(117.12%-9842.70%,中位434.96%);HAGE过表达患者年龄显著高于HAGE阴性者(中位年龄分别为67和45岁,p=0.001)。HAGE表达在单核细胞亚型AML(M4和M5,7/20,35.0%)中明显高于其它亚型AML(4/54,7.4%)(p=0.007)。28例核型正常的AML患者中8例(28.6%)呈HAGE过表达,而40例核型异常的AML中仅3例(7.5%)存在HAGE表达(p=0.041)。9/26例(34.6%)CML患者存在HAGE过表达,加速期和急变期患者中HAGE表达率(4/4,100%)明显高于慢性期患者(5/22,22.7%)(p=0.008)。结论:HAGE cDNA表达与AML单核细胞亚型类别相关,且与CML疾病进展相关。