噬菌体生物扩增法检测结核性胸膜炎患者胸水临床应用研究

目的 评价噬菌体生物扩增法检测胸水中结核分枝杆菌对诊断结核性胸膜炎的临床应用价值.方法 采用噬菌体生物扩增法技术对73例结核性胸膜炎患者,20例非结核性胸膜炎患者胸水中的结核分枝杆菌进行检测.同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 73例结核性胸膜炎胸水.噬菌体生物扩增法阳性率为49.3%(36/73)、涂片抗酸染色阳性率为2.7%(2/731、罗氏培养阳性率为4.1%(3/73).20例非结核性胸膜炎,噬菌体生物扩增法、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性.结论 噬菌体生物扩增法检测胸水中结核分枝杆菌只需2天时间,操作简便、灵敏度高、特异性强,不需要特殊仪器设备,可作为诊断结核性胸膜炎的一种好方法 .     

体液结核分枝杆菌三种检测方法临床应用价值

目的比较体液结核分枝杆菌三种方法检测结果,探究其临床应用价值。方法应用EL ISA法检测结核分枝杆菌抗体、结核分枝杆菌噬菌体生物扩增法、直接涂片抗酸染色法分别对临床可疑结核感染体液标本进行检测。结果结核分枝杆菌噬菌体生物扩增法、结核抗体EL ISA法检测与直接涂片抗酸染色法有统计学差别(P<0.05),结核分枝杆菌噬菌体生物扩增法与结核抗体EL ISA法检测二者无显著性差异(P>0.05),噬菌体生物扩增法与结核抗体EL ISA法阳性符合率为80.3%,阴性符合率为97.2%。结论结核抗体EL ISA法检测和结核分枝杆菌噬菌体扩增法比直接涂片法阳性率高,具有一定的临床应用价值。     

噬菌体生物扩增法对结核病临床诊断的意义

目的 探讨噬蒲体生物扩增法技术检测临床标本对结核病临床诊断的应用价值.方法 采用噬菌体生物扩增法技术对86例活动性肺结核患者痰标本、73例结核性胸膜炎患者胸水、30例肺结核患者肺泡灌洗液,共计189份临床标本进行检测;对非结核病患者痰标本10例、胸水5例、灌洗液5例共计20份标本进行检测.同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 86例活动性结核患者痰标本、73例结核性胸膜炎患者胸水、30例肺结核患者肺泡灌洗液噬菌体生物扩增法检测阳性率分别为53.49%(46/86)、49.32%(36/73)、60.00%(18/30);涂片抗酸染色阳性率分别为24.42%(21/86)、2.74%(2/73)、20.00%(6/30);罗氏培养阳性率分别为44.19%(38/86)、4.11%(3/73)、36.67%(11/30).20份非结核患者标本,噬菌体生物扩增法、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性.结论 噬菌体生物扩增法检测结核病标本的阳性率高于涂片法和罗氏培养,该方法 敏感性高、特异性强、操作简便,对结核病临床诊断有较高的应用价值.     

噬菌体生物扩增法检测涂阴肺结核患者痰标本的临床应用价值

目的 探讨噬菌体生物扩增法对涂阴肺结核临床诊断的应用价值.方法 对110例涂阴肺结核和20例非结核性其他肺部疾病患者的痰标本进行噬菌体生物扩增法检测,并同时进行分枝杆菌罗氏培养.结果 110例涂阴痰标本中46例噬菌体生物扩增法阳性(41.82%);27例罗氏培养阳性(24.55%).结论 噬蒲体生物扩增法检测涂阴痰标本中结核分枝杆菌只需2天时间,操作简便、灵敏度高、特异性强,可作为诊断涂阴肺结核的一种检测方法.     

噬菌体生物扩增法检测结核性胸膜炎患者胸水临床应用研究

目的评价噬菌体生物扩增法检测胸水中结核分枝杆菌对诊断结核性胸膜炎的临床应用价值。方法采用噬菌体生物扩增法技术对73例结核性胸膜炎患者．20例非结核性胸膜炎患者胸水中的结核分枝杆菌进行检测．同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养。结果73例结核性胸膜炎胸水,噬菌体生物扩增法阳性率为49．3％（36／73）、涂片抗酸染色阳性率为2.7％（2/73）、罗氏培养阳性率为4．1％（3／73）。20例非结核性胸膜炎。噬菌体生物扩增法、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性。结论噬菌体生物扩增法检测胸水中结核分枝杆菌只需2天时间,操作简便、灵敏度高、特异性强,不需要特殊仪器设备,可作为诊断结核性胸膜炎的一种好方法．     

噬菌体技术在结核分枝杆菌快速检测中的应用

目的评价噬菌体技术在结核分枝杆菌快速检测中的应用价值。方法应用噬菌体技术、ESP培养及涂片法同时检测224份临床确诊为肺结核患者的痰标本。结果①224份标本中噬菌体法、ESP法和涂片法检出的阳性率分别是55.4%,51.7%和27.7%,噬菌体法与涂片法比较有显著性差异(2χ=54.91,P<0.005)。②噬菌体法与涂片法阳性符合率为93.5%(58/62),阴性符合率为59.3%(96/162),总体符合率为68.8%(154/224);噬菌体法与ESP法阳性符合率为82.8%(96/116),阴性符合率为74.1%(80/108),总体符合率为78.6%(176/224)。③在162例涂片法阴性的标本中,噬菌体法检出的阳性率为40.7%(66/162),ESP法检出的阳性率为33.3%(53/162),二者比较有显著性差异(χ2=3.93,P<0.05)。结论噬菌体法对结核分枝杆菌的检出率高于涂片法,对痰涂片为阴性的标本,其检出率高于ESP法,且该方法简便、快速。     

噬菌体裂解法快速检测痰中结核分枝杆菌的研究

目的探讨噬菌体裂解法快速检测痰中结核分枝杆菌对肺结核的诊断价值。方法对60例肺结核患者及16例对照组痰标本进行噬菌体裂解试验,并与浓缩涂片法、罗氏培养法相比较。结果噬菌体裂解法特异性100%,阳性率71.7%(43/60)与浓缩涂片法20%(12/60)罗氏培养法43.3%(26/60)相比差别有极显著意义(X2=32.2P<0.01,X2=9.86P<0.01)结论噬菌体裂解法检测痰中结核分枝杆菌,对肺结核具有很高的快速诊断价值。     

噬菌体生物扩增法检测涂阴肺结核患者痰标本的临床应用价值

目的探讨噬菌体生物扩增法对涂阴肺结核临床诊断的应用价值。方法对110例涂阴肺结核和20例非结核性其他肺部疾病患者的痰标本进行噬菌体生物扩增法检测,并同时进行分枝杆菌罗氏培养。结果110例涂阴痰标本中46例噬菌体生物扩增法阳性（41．82％）;27例罗氏培养阳性（24．55％）。结论噬菌体生物扩增法检测涂阴痰标本中结核分枝杆菌只需2天时间,操作简便、灵敏度高、特异性强,可作为诊断涂阴肺结核的一种检测方法。     

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术应用于儿童肺结核快速诊断的效果

目的探讨利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(XpertMTB/RIF)在快速诊断儿童肺结核中的应用价值。方法我院收治经临床诊断的120例肺结核患儿,采集肺泡灌洗液标本,分别行结核分枝杆菌罗氏培养、比例法药敏试验及XpertMTB/RIF检测。结果 120例灌洗液,罗氏培养显示,25例阳性,阳性率20. 83%(25/120); XpertMTB/RIF检测显示,74例阳性,阳性率61. 67%(74/120)。25例罗氏培养阳性的标本中,XpertMTB/RIF检测结核分枝杆菌阳性率为96. 00%(24/25),95例罗氏培养阴性标本中,XpertMTB/RIF检测结核分枝杆菌阳性率为52. 63%(50/95)。以比例法药敏试验结果为"金标准",XpertMTB/RIF检测利福平耐药的敏感度为100. 00%(3/3),特异度为95. 45%(21/22)。结论 XpertMTB/RIF可快速检测儿童肺泡灌洗液中结核分枝杆菌及利福平耐药情况,敏感度较高,对儿童肺结核诊疗有一定价值。     

噬菌体生物扩增法对结核病临床诊断的意义

目的探讨噬菌体生物扩增法技术检测临床标本对结核病临床诊断的应用价值。方法采用噬菌体生物扩增法技术对86例活动性肺结核患者痰标本、73例结核性胸膜炎患者胸水、30例肺结核患者肺泡灌洗液,共计189份临床标本进行检测;对非结核病患者痰标本10例、胸水5例、灌洗液5例共计20份标本进行检测。同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养。结果86例活动性结核患者痰标本、73例结核性胸膜炎患者胸水、30例肺结核患者肺泡灌洗液噬菌体生物扩增法检测阳性率分别为53．49％（46／86）、49．32％（36／73）、60．00％（18／30）;涂片抗酸染色阳性率分别为24．42％（21／86）、2．74％（2／73）、20．00％（6／30）;罗氏培养阳性率分别为44．19％（38／861、4．11％（3／73）、36．67％（11／30）。20份非结核患者标本,噬菌体生物扩增法、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性。结论噬菌体生物扩增法检测结核病标本的阳性率高于涂片法和罗氏培养,该方法敏感性高、特异性强、操作简便。对结核病临床诊断有较高的应用价值。     

PCR反向点杂交技术快速鉴定BALF中分枝杆菌菌种的应用研究

目的探讨PCR-反向点杂交技术(PCR-RDBHA)快速鉴定支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid BALF)标本中分枝杆菌菌种的临床应用价值。方法对临床306例活动性肺结核患者、疑似非结核分枝杆菌感染肺病患者BALF标本采用PCR-反向点杂交技术和传统的改良罗氏培养法进行分枝杆菌菌种鉴定。结果 306例BALF标本PCR反向点杂交技术检测出分枝杆菌127例,阳性率为41.5%(127/306),其中结核分枝杆菌复合群(MTC)108例,占分枝杆菌的85.0%(108/127),非结核分枝杆菌(NTM)19例,占分枝杆菌的15.0%(19/127)。NTM中,6例脓肿分枝杆菌,10例胞内分枝杆菌,2例戈登分枝杆菌,1例瘰疬分枝杆菌;传统的改良罗氏培养法检测出分枝杆菌101例,阳性率33.0%(101/306),经菌种的初步鉴定,其中MTC89例,占分枝杆菌的88.1%(89/101),NTM12例,占分枝杆的11.9%(12/101)。结论 PCR反向点杂交技术能够快速鉴定BALF中分枝杆菌菌种,该方法简便、结果准确,具有良好的临床应用价值。     

噬菌体生物扩增法检测不同标本对结核病临床诊断的意义

目的探讨噬菌体生物扩增法技术检测不同标本对结核病临床诊断的应用价值。方法采用噬菌体生物扩增法技术对86例活动性肺结核患者痰标本、73例结核性胸膜炎患者胸水、30例肺结核患者肺泡灌洗液、7例结核性脑膜炎患者脑脊液,共计196例结核标本进行检测;对非结核病患者痰标本10例、胸水5例、灌洗液5例,共计20例标本进行检测。每例标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养。结果86例痰标本、73例胸水、30例肺泡灌洗液、7例脑脊液噬菌体生物扩增法检测阳性率分别为53．49％（46／86）、49．32％（36／73）、60．00％（18／30）、0（0／7）,涂片抗酸染色阳性率分别为24．42％（21／86）、2．74％（2／73）、20．00％（6／30）、0（0／7）,罗氏培养分别为44．19％（38／86）、4．11％（3／73）、36．67％（11／30）、0（0／7）。20例非结核患者标本,噬菌体生物扩增法、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性。结论噬菌体生物扩增法检测结核病标本的阳性率高于涂片和罗氏培养,该方法敏感性高、特异性强、操作简便,对结核病临床诊断有较高的应用价值。     

7种实验方法诊断结核病的临床应用价值

目的评估直接涂片法、浓集涂片法、结核分枝杆菌罗氏培养法、BACTEC MGIT960系统培养结核分枝杆菌法、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)扩增法、结核分枝杆菌IgG抗体检测等7种方法对临床结核诊断的应用价值。方法对临床确诊的672例肺结核患者和62例健康体检者的痰标本用7种结核菌检测方法进行检测。结果 672例患者中检测阳性率分别为直接涂片法17.0%(115/676)、浓集涂片法25.6%(173/676)、改良罗氏培养法32.2%(218/676)、BACTEC MGIT960系统培养结核分枝杆菌法45.7%(309/676)、实时荧光定量PCR 90.1%(609/676)、SAT扩增法96.4%(652/676)、结核分枝杆菌IgG抗体检测法65.4%(442/676)。对照组只有荧光PCR法和结核抗体法检出阳性,阳性率分别为8.1%、12.9%。涂阴标本经罗氏培养法+结核抗体法+SAT法联合检出阳性率高于单一检测方法。结论涂片法操作简便、快速和价格便宜,但阳性率低,在长时期内其依然是基层医院诊断结核病的主要检测手段;结核分支杆菌培养能进行菌种鉴定和药物敏感试验仍是不可缺少的方法,但周期长;结核抗体法方便,简单,仍是结核实验室诊断的重要手段,但不能区分感染与发病;荧光PCR扩增法快速,灵敏,有较好诊断价值,但设备昂贵,技术要求高,易污染;SAT法快速,灵敏,要求较荧光PCR扩增法低,可以辅助诊断结核病。同时联合检测提高诊断率,并满足不同临床需要。     

噬菌体法直接检测痰中结核分枝杆菌敏感性的研究

目的探讨噬菌体生物扩增法结合痰涂片在快速测定结核药敏中的可行性和实用性。方法收集痰厚涂片抗酸染色3＋阳性标本与一定浓度的利福平作用后，加入结核分枝杆菌噬菌体，观察噬菌体斑数量，来测定对利福平的敏感性，同时以改良罗氏法作结核药敏对照。结果从收到标本到药敏报告需时仅3d，93份标本中85份噬菌体生物扩增药敏试验成功，污染2份，6份失败，有效率91．4％（85／93），与改良罗氏法药敏试验比较，敏感性96．9％（31／32），特异性92．5％（49／53），报告时间缩短了近20倍。结论应用噬菌体法直接测定痰中结核分枝杆菌利福平敏感试验，快速、敏感、特异性高，适宜基层正常开展。     

环介导等温扩增技术(LAMP)在肺结核诊断中的应用研究

目的探讨环介导等温扩增技术(LAMP)在肺结核病的诊断中的应用。方法收集140例本院临床诊断为肺结核病或者怀疑为肺结核患者的痰液标本,分别用涂片抗酸染色法、LAMP法和改良罗氏培养法检测痰标本中结核分枝杆菌的阳性检出率、敏感性和特异性。结果 140份痰标本中涂片抗酸染色法、LAMP法和改良罗氏培养法的阳性检出率分别是25.71%(36/140)、43.57%(61/140)和41.43%(58/140)。LAMP法的阳性检出率明显高于涂片法,差异有统计学意义(P0.05)。以改良罗氏培养法为金标准,并结合临床诊断及患者使用抗结核药物的反应性综合判断,LAMP法的敏感性是87.93%(51/58),特异性是87.80%(72/82),两种方法检测结果的一致性κ=0.752,说明LAMP法在检测结核分枝杆菌方面与罗氏培养法有较好的吻合性。结论 LAMP法在检测痰标本中的结核分枝杆菌方面有着比较高的敏感性和特异性,在结核病的快速诊断上具有优势。     

3种结核分枝杆菌检测方法的比较研究

目的比较沉淀集菌法、罗氏培养法和聚合酶链反应(PCR)方法检测结核分枝杆菌的临床价值。方法收集2012年6月至2013年5月张家港市第一人民医院临床确诊且经抗结核治疗两月后结核患者的痰标本102份,用以上3种方法进行平行检查。结果 102份标本中,沉淀集菌法检测结果阳性标本92份,阳性率90.19%,罗氏培养法阳性48份,阳性率47.06%,PCR法阳性77份,阳性率75.49%。沉淀集菌法与罗氏培养法的符合率为56.86%,而PCR法与沉淀集菌法符合率为81.37%,与罗氏培养法符合率为61.76%。结论 3种方法联合运用,可弥补单独采用一种方法阳性率低的缺点,从而提高检测的准确度。     

基线调查26例结核分枝杆菌涂片阳性培养阴性结果分析

目的 分析佛山市三区自2008年6月至2009年6月26例结核分枝杆菌涂片阳性及培养(SPCN)阴性结果.方法 按全国结核病细菌学操作规程操作,采用改良罗氏酸性培养基,按萋尼抗酸染色法进行涂片染色镜检.结果 在238例涂片阳性标本中培养阳性212例(总培养阳性率为89.1%),培养阴性26例(总培养阴性率为10.9%).其中南海区132例涂片阳性标本中培养阳性率90.9%(120/132);三水区76例涂片阳性标本中培养阳性率88.2%(67/76);高明区30例涂片阳性标本中培养阳性率为83.3%(25/30).结论 了解佛山市三区涂片阳性培养阴性情况,找出其原因,从而进一步提高培养阳性率,以便做出药敏结果,为临床治疗提供科学依据.     

显色固液双相培养基快速检测结核分枝杆菌的临床应用评价

目的探讨固液双相培养基快速检测结核分枝杆菌的临床价值。方法对350例患者的痰标本分别进行涂片抗酸染色、改良罗氏培养法、固液双相培养法、Bactec 960培养法检测。结果 350例痰标本涂片抗酸染色法阳性率为14.8%,改良罗氏培养法为24.0%,固液双相法为35.7%,Bactec 960培养法为40.3%,改良罗氏培养法与涂片抗酸染色法比较,差异有统计学意义(P0.01),固液双相培养法与改良罗氏培养法比较,差异有统计学意义(P0.01),固液双相培养法与Bactec 960培养法比较,差异无统计学意义(P0.05)。改良罗氏培养法平均报告阳性时间为21.5d,固液双相培养法液相平均为13.2d,固相为16.4d,Bactec 960培养法平均为11.8d。结论固液双相培养法操作简便,阳性率高,时间短,适合基层医院快速检测结核分枝杆菌。     

联合检测胸水中TB-Ab和TB-DNA对诊断结核性胸膜炎的应用价值

目的 评价检测胸水中结核抗体(TB-Ab)和TB-DNA对诊断结核性胸膜炎的应用价值.方法 以胸水为标本,用斑点免疫金渗试验检测结核抗体,用荧光探针PCR(TaqManPCR)技术检测TB-DNA,同时对胸水进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 179例结核性胸膜炎胸水,结核抗体阳性率为60.89%(109/179)、TB-DNA阳性率为63.13%(113/179),TB-Ab阳性及/或TB-DNA阳性共135例(75.4%),涂片抗酸染色阳性率为1.1%(2/179)、罗氏培养阳性率为1.68%(3/179).30例非结核性胸膜炎胸水,结核抗体阳性率为6.67%(2/30),TaqManPCR、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性.结论 结核抗体和TB-DNA均是诊断结核性胸膜炎的较好指标,两者联检可进一步提高检测敏感性.     

噬菌体裂解法对涂片阴性肺结核的诊断价值

目的　研究噬菌体裂解法对涂片阴性肺结核的诊断价值。方法　对 15 7例临床诊断为涂片阴性肺结核患者的314份痰标本同时应用噬菌体裂解法和改良罗氏 (L—J)法检测 ,对照分析结果。结果　 15 7例涂片阴性肺结核、噬菌体裂解法检出阳性 6 1例 ,阳性获得率 95 .3% (6 1/ 6 4 ) ;L—J法检出阳性 2 8例 ,阳性获得率 4 3.8% (2 8/ 6 4 )噬菌体裂解法和涂片法两者差别有统计学意义 (p <0 .0 1)。 314份涂片阴性疾标本。噬菌体裂解法检测阳性率 36 .9% (116 / 314 ) ,显著高于L—J法 15 .6 %(4 9/ 314 ) ,两者差别有统计学意义 (p <0 .0 1)。噬菌体裂解法检测的报告时间为 2天 ;改良罗氏培养的阳性报告时间平均为2 8.7天。阴性报告时间为 5 6天。结论　噬菌体裂解法检测涂片阴性肺结核。与改良罗氏法相比 ,具有更高的检出率 ,可以简便、快速地检测结核分支杆菌、全程只需 2天 ,对现代结核病控制工作具有重大意义