不同采血模式下血培养结果的分析

目的分析不同采血模式血培养的阳性率、病原菌分布及不同菌属细菌阳性报警时间的差异,以明确双套血培养法和阳性报警时间在鉴别血流感染和控制采血污染率中的意义。方法采用BacT/Alert 3D全自动血培养仪对2 849例血培养标本进行培养,阳性标本采用VITEK-2全自动细菌鉴定分析仪进行鉴定,以Excel对培养结果进行统计分析。结果共检出阳性标本333例289株病原菌,总阳性率为11.7%,其中双套采血法的阳性率为21.4%,显著高于单瓶和单套。不同采血模式下病原菌分布有显著区别,双套以肠杆菌科细菌为主,而单瓶和单套以凝固酶阴性葡萄球菌为主。95.5%的病原菌在72h内阳性报警,阳性报警中位数时间最短为肠杆菌科细菌,最长为布鲁菌属。12h内以肠杆菌科细菌为主要检出菌,12~48h以葡萄球菌为主。结论增加血培养采血套数可提高阳性率,降低漏检率,有助于污染菌的鉴别。不同种类微生物阳性报警时间差别可用于判断病原菌的类型并辅助判断污染菌,能为临床快速制订治疗方案提供依据。     

某国产双向血培养瓶细菌培养分离效果的评价

目的对某国产双向血培养瓶的灵敏度和抗菌药物吸附能力分析,并评价其细菌分离效果。方法 (1)灵敏度检测:用无菌生理盐水将标准菌株配制成0.5麦氏单位,倍比稀释形成浓度梯度后分别接种于该双向血培养瓶,常规培养。(2)抗菌药物吸附能力:用MH肉汤稀释头孢噻肟和庆大霉素,形成浓度梯度系列,分析铜绿假单胞菌对未经树脂吸附处理过和经过树脂吸附处理过的药物溶液MIC的变化。(3)150例临床标本同时用Bect/Alert血培养瓶和该双向血培养瓶培养,并对其检出率、检出时间和检出种类进行统计。结果 (1)灵敏度:大肠埃希菌、葡萄球菌均为10~2 CFU/mL,20h检测出阳性;肺炎链球菌10~2 CFU/mL,48h检测出阳性,10CFU/mL,72h检测出阳性,流感嗜血杆菌10~2,CFU/mL 20h检测出阳性;白假丝酵母菌10CFU/mL,48h检测出阳性;(2)抗菌药物吸附:每毫升树脂吸附头孢噻肟、庆大霉素分别为800.00、33.33μg;(3)Bect/Alert血培养瓶和该双向血培养瓶阳性检出率均为20.67%,都检出19种病原菌。结论该双向血培养瓶灵敏度较高,抗菌药物吸附能力强,操作简单易行,价格便宜,适合基层医院。     

医师问答

一、临床上送检的痰、尿、血以及导管等标本常常可以培养获得凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS），如何区分它们是病原菌还是污染菌？ 目前由表皮葡葡萄球菌或溶血葡萄球菌等CoNS引起的医院感染已经越来越多见，但由于CoNS可以是人体的正常菌群，所以需要结合病史和多次实验室检查来确定是否为CoNS感染。CoNS一般不引起呼吸道感染，故痰液标本培养到CoNS一般为定植菌，并非病原菌。尿路感染由CoNS所致者少见，CoNS尿路感染常见于尿路阻塞或留置导尿管、尿路畸形及免疫缺陷的患者，尤其多见于切除前列腺的患者，同时尿培养标本一般需要做菌落计数，2次以上中段尿CoNS菌落计数≥10^5个／mL者为菌尿症或尿路感染，如无相关病史或菌落计数〈10^5个／mL应考虑污染可能。CoNS引起的血流感染常发生于免疫缺陷患者以及有静脉插管、人工瓣膜、人工关节、连续腹透导管以及人工晶体植入等医疗装置植入者。血培养是CoNS血流感染诊断的重要依据。但由于从采血到培养各个环节都有可能污染，故一般必须进行多次培养。从多个静脉点采血，培养出的细菌相同，而且有相应临床表现，才能作出诊断。对于有留置静脉导管相关性血流感染，可以采用定量血培养确诊。即同时从静脉导管和外周静脉采血做血培养进行菌落计数，如2份标本为同一细菌且导管血的菌落计数大于外周血菌落计数的5倍时，CoNS感染诊断成立。仅1次血培养阳性或者无免疫缺陷以及医疗器械植入等因素，应高度怀疑污染可能。     

成都某院血培养报阳时间、病原菌分布与耐药性研究

目的 分析该院临床血培养报阳时间、主要病原菌分布及其耐药性,为制定预防控制血流感染提供实验室依据。方法采用法国梅里埃公司BacT/ALERT 3D全自动细菌培养检测系统对血培养标本进行培养,法国梅里埃公司VITEK2-compact全自动细菌鉴定仪对所有细菌进行鉴定及药敏试验。结果 共收集临床非重复血培养标本2 370份,其中血培养阳性标本233份,阳性率为9.83%;48h内报阳时间占85.83%,72h内报阳时间占93.56%;血培养阳性标本平均报阳时间和中位数为(34.27h/21.75h)。共分离出病原菌238株,其中革兰阴性菌136株,占57.14%,革兰阳性菌75株,占31.51%,真菌27株,占11.34%;以大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌的检出率分别列前5位;亚胺培南、厄他培南和阿米卡星对革兰阴性菌有较好的抗菌活性;葡萄球菌属未检出对万古霉素、利奈唑烷、替加环素和奎奴普丁/达福普丁耐药株。结论 该院临床血流感染以革兰阴性菌为主,结合血培养报阳时间与临床其他指标,对早期判断检出菌为病原菌或污染菌有参考价值;根据药敏试验结果选择合适的抗菌药物,以提高血流感染治愈率。     

全自动血液培养系统在血流感染诊断中的价值及影响因素

目的 研究BacT／Alert3D240型全自动血液培养系统诊断血流感染病原菌的影响因素。方法 对374例患者标本的检测结果 分析其阳性检出率;观察在不同细菌浓度、温度、送检时间、抗菌药物以及采血量及采集套数对血培养结果 的影响。结果 374份血标本中共检出63株各类病原菌,阳性率为16．8％,假阳性率为1．1％,假阴性率为0．2％。65．1％的细菌在24h内检出,28．5％的细菌在24～48h内检出,6．3％的细菌在48h后检出。检测速度与细菌浓度呈正比;温度对检出率影响不大;送检时间的延迟不影响病原菌检测,检出时间减少;部分患者在接受抗菌药物治疗后阳性检出率无变化,但检出时间延长。成人采血量为5～10mL检出率为90．21％,儿童采血量为2～5mL检出率为87．68％;采集数为3套时检出率最高（96．87％）。结论 血培养的检出时间与细菌浓度及种类、温度、送检时间、抗菌药物、采血量及采集套数相关。     

荧光原位杂交法快速鉴定血培养阳性葡萄球菌的临床应用

目的 快速鉴定血培养中的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS),结合临床快速判定是否为污染菌。方法 采用荧光原位杂交法鉴定血培养中的金黄色葡萄球菌和CoNS,杂交结果若为CoNS,根据临床资料进行判断,并与文献推荐的污染判断法进行结果比较。结果 探针的特异性经由标准菌株和临床分离菌株证实。金黄色葡萄球菌探针的特异性和敏感性均为100％,CoNS探针的特异性和敏感性分别为100％和95．5％。179株CoNS中117株判断为污染菌,污染率为68％,与文献推荐的污染判断方法一致。结论 荧光原位杂交法适用于血培养中的金黄色葡萄球菌和CoNS的快速鉴定,以排除CoNS污染。     

荧光原位杂交法快速鉴定血培养阳性葡萄球菌的临床应用

目的快速鉴定血培养中的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS),结合临床快速判定是否为污染菌。方法采用荧光原位杂交法鉴定血培养中的金黄色葡萄球菌和CoNS,杂交结果若为CoNS,根据临床资料进行判断,并与文献推荐的污染判断法进行结果比较。结果探针的特异性经由标准菌株和临床分离菌株证实。金黄色葡萄球菌探针的特异性和敏感性均为100%,GoNS探针的特异性和敏感性分别为100%和95.5%。179株CoNS中117株判断为污染菌,污染率为68%,与文献推荐的污染判断方法一致。结论荧光原位杂交法适用于血培养中的金黄色葡萄球菌和CoNS的快速鉴定,以排除CoNS污染。     

近3年血培养结果的回顾性分析

目的探讨该院近3年血培养中阳性标本的病原菌分布及药敏情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法对近3年送到检验科的血培养标本进行回顾性分析。结果共检出阳性血培养标本5 921例,检出的病原菌中肠杆科细菌占36.83%（2 181/5 921）,非发酵菌30.67%（1 816/5 921）,葡萄球菌属10.55%（625/5 921）,肠球菌属9.30%（551/5 921）,真菌6.92%（410/5 921）,污染菌6.08%（280/5 921）,布氏杆菌0.98%（58/5 921）。结论血培养中葡萄球菌是极为重要的致病菌,但革兰阴性菌所引起的感染也不容忽视。抗菌药物耐药率高,且具有高耐药与多重耐药的特点,治疗需以药物监测为依据。了解血液感染细菌的分布特征和耐药性,对减少院内感染,指导临床合理使用抗菌药物有重要意义。     

血培养假阳性结果的分析

血培养的阳性率与血液中的微生物种类和浓度相关。生长缓慢的苛养菌、血中细菌数少以及用过抗菌药物治疗均会影响阳性率。血培养假阳性的根本原因就是血培养的污染。中心静脉导管和血管植入物的普遍应用使血培养的污染更为常态,因此临床医生面对阳性血培养报告必须综合考虑患者临床表现,对真阳性和假阳性加以鉴别。     

儿童血培养病原菌分布及耐药性分析

目的 回顾性分析该院2010年1月至2011年12月儿童血培养病原菌分布和耐药性特点,为该院儿童血流感染抗菌药物使用提供依据.方法 血培养采用BACTEC自动化血培养仪,菌株鉴定使用VITEK-32细菌鉴定系统或API鉴定系统.结果 2 134例血培养标本中共分离210株细菌,其中革兰阳性菌株157株(占74.76%),革兰阴性菌株53株(占25.24%).耐甲氧西林金黄色葡萄球菌占金黄色葡萄球菌56.12%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌占凝固酶阴性葡萄球菌79.07%,未检出耐万古霉素、替考拉宁革兰阳性球菌;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶分别占55.56%、46.15%,未检出耐碳青霉烯革兰阴性细菌.结论 该院儿童血培养主要病原菌为革兰阳性菌,且耐药株比例较高,重视抗菌药物的合理使用刻不容缓.     

儿童血培养的病原菌分布及耐药性分析

目的 分析住院患儿血培养的病原菌分布及耐药特点,指导临床抗菌剂的合理应用.方法 采用BACTEC 9240全自动血培养仪和MicroScan WalkAway 96SI全自动微生物鉴定系统进行病原菌的培养和鉴定,用K-B法进行细菌药敏实验.结果 5 750例血培养中379例检出阳性,阳性率为6.59%.共检出病原菌381株,包括革兰阳性菌260株,占68.24%;革兰阴性菌81株,占21.26%;真菌40株,占10.50%.按年龄分组,各年龄段患儿检出的病原菌均以凝固酶阴性葡萄球菌居多,又各有其分布特点;凝固酶阴性葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁敏感,对β-内酰胺类和大环内酯类耐性率高(>80.00%);大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均未分离出亚胺培南耐药菌株,两者对头孢菌素类抗菌剂耐药严重.结论 儿童血培养分离的病原菌以革兰阳性菌为主,常见的病原菌凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌均对多数常用抗菌剂耐药严重.     

婴幼儿血培养分离细菌及其耐药性分析

目的分析住院婴幼儿(≤3个月)血培养分离病原菌的分布及其耐药情况,为临床合理选择抗菌药物治疗血流感染提供参考。方法收集2011年1月至2015年5月该院疑似血流感染住院婴幼儿(≤3个月)血培养阳性标本分离病原菌299株,采用VITEK 2Compact全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药物敏感试验,分析菌株的构成及耐药情况。结果分离的299株病原菌中革兰阳性球菌169株(占56.5%),主要为凝固酶阴性葡萄球菌95株(占31.8%),其次为金黄色葡萄球菌28株(占9.4%);革兰阴性杆菌120株(占40.1%),主要为大肠埃希菌53株(占17.7%);真菌8株(占2.7%);革兰阳性杆菌2株(占0.7%)。药敏结果显示,除万古霉素、利奈唑烷外,革兰阳性球菌对其他所测试的抗菌药物均呈现耐药性;革兰阴性杆菌除对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南高度敏感外,对其他所测试的抗菌药物均有耐药性;真菌对所有抗真菌药物高度敏感。结论住院婴幼儿血液感染病原菌以革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌为主,耐药情况严峻,临床需合理选择抗菌药物,以提高疗效并减少耐药菌株的产生。     

BacTAlert240全自动血培养仪病原菌分布与药敏分析

目的 了解血培养阳性常见病原菌分布及其耐药情况,为临床正确选用抗生素提供依据.方法 用BacT/Alert 240全自动血培养仪对4458份血液标本进行检测,用VITEK-32鉴定系统对细菌进行鉴定,药敏试验采取K-B纸片扩散法按CLSI 规定的标准进行.结果 从4458份血培养中共检出430株病原菌,阳性率为8.8%.主要致病菌有凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌5种,占菌株总检出率59%,其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）占凝固酶阴性葡萄球菌的70.8%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）占金黄色葡萄球菌的43.2%,未发现耐万古霉素的葡萄球菌.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的菌株分别为46.7%和28.3%.结论 血培养中病原菌复杂多样,耐药率高及时检测血液中病原菌的耐药性对于指导临床合理用药,防止滥用抗生素减少耐药菌株的产生是十分必要的.     

某三甲医院血培养病原菌分布及耐药分析

目的分析某三甲医院血培养病原菌分布及其耐药性,为临床血流感染(BSI)防控和抗菌药物的合理使用提供依据。方法回顾性分析2014年6月至2016年9月该院住院患者送检的3 241份血培养结果,采用BacT/ALERT 3D和VersaTrek仪器进行血培养,采用VITEK-2Compact和ARIS 2X进行鉴定和药敏试验。结果 3 241份血培养标本中,共分离出病原菌99株,阳性率为3.1%。共分离得到革兰阴性菌42株(42.4%),革兰阳性菌54株(54.5%),真菌3株(3.0%)。分离前3位的革兰阴性菌依次为大肠埃希菌,肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌;革兰阳性菌依次为:凝固酶阴性葡萄球菌,金黄色葡萄球菌,化脓链球菌。肠杆菌科对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星保持100.0%敏感,阳性球菌对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁以及庆大霉素耐药率为0.0%,其余有不同程度耐药。结论大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌是该院血流感染最常见的病原菌,各病原菌对不同抗菌药物耐药性不同,临床需根据药敏试验结果合理选择抗菌药物,减缓耐药菌株的产生。     

2010~2011年血培养病原菌分布和耐药性分析

目的 研究该院2010~2011年血培养病原菌分布及耐药性.方法 回顾性分析该院2010~2011年血培养标本病原菌检出情况及其药敏试验结果.结果 10 128例血培养标本共检出病原菌1 276株,革兰阴性杆菌、革兰阳性球菌及真菌分别占57.1%(728/1 276)、33.4%(426/1 276)、9.5%(121/1 276).革兰阳性球菌以表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌等为主,对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感;粪肠球菌耐药率低于屎肠球菌.革兰阴性菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌为主;超广谱β内酰胺酶阳性肠杆菌科细菌耐药率高于阴性株.碳青霉烯类对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的抗菌活性强于铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌.真菌以白色假丝酵母菌为主.结论 2010~2011年该院血液感染患者较多,应重视血培养标本检测及致病菌耐药性分析,应根据药敏实验结果 及耐药趋势合理应用抗菌药物.     

血培养瓶增菌法快速鉴定和快速药物敏感性试验可行性分析

目的 探讨用血培养瓶增菌法培养脑脊液样本,将报阳样本直接离心富集细菌后,采用激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行快速鉴定和快速药物敏感性试验的可行性.方法 收集2018年12月—2019年7月华山医院脑脊液样本1446例,随机抽取345例采用血培养瓶增菌法培养,1101例采用常规浓缩集菌培养法培养,...     

Evaluation of an automated microbiologic blood culture device for detection of bacteria in platelet components

BACKGROUND: Automated culture methods have been used by several investigators to detect bacterial contamination of cellular blood components. We investigated several factors affecting detection by automated culture of bacteria in platelet concentrates (PCs).These factors included the initial contamination level in PCs, the PC sample volume, the PC sample time, and the white cell level in relation to bacteria levels in the PCs. STUDY DESIGN AND METHODS: Staphylococcus epidermidis or Escherichia coli was inoculated into freshly prepared PCs or white cell-reduced PCs to yield colony-forming unit (CFU) levels of 10, 1, or 0.1 per mL. At the time of inoculation (t=0) and at t=6, t=24, and t=48 hours, 0.5, 1.0, and 2.0 mL samples of the contaminated PCs were transferred into culture bottles. The presence of bacteria in the culture bottles was subsequently monitored by an automated blood culturing instrument. Bacteria levels in the PC at the time of first automated culture detection were determined by quantitative plating. RESULTS: E. coli was detected in 92 percent of experiments when 1.0- or 2.0-mL samples were taken at t=6 hours. At t=24 hours, 100-percent detection was observed with all tested inoculation volumes; however, by that time,>10(7) CFU per mL of bacteria were present in every PC. For S. epidermidis, 89 percent and 83 percent of contaminated PCs were detected with a t=24 hour sampling time and 2.0- or 1.0-mL sampling volume. Seven of 36 PCs with a 2.0-mL sampling volume and 10 of 36 PCs with a 1.0-mL sampling volume contained>10(6) CFU per mL of S. epidermidis at the time of first detection. CONCLUSION: Data from this preliminary evaluation suggest that sampling times of 24 hours or more would be necessary to provide confidence in detection of E. coli or S. epidermidis in PCs using this culture method.     

Triplex real-time polymerase chain reaction assay for simultaneous detection of Staphylococcus aureus and coagulase-negative staphylococci and determination of methicillin resistance directly from positive blood culture bottles

We describe here a 1-step, triplex real-time polymerase chain reaction (PCR) assay for the detection and identification of staphylococci directly from signal-positive blood culture bottles containing Gram-positive cocci in clusters (GPCC). The triplex assay targeted and detected tuf, nuc, and mecA genes in a single tube and had a detection limit of 10⁵ CFU/mL for each gene target. A total of 341 GPCC-positive blood culture bottles were collected between November 12, 2008, and August 11, 2009. Among them, 230 methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci (CoNS), 54 methicillin-susceptible CoNS, 22 methicillin-resistant Staphylococcus aureus, 22 methicillin-susceptible S. aureus, and 13 nonstaphylococci species were identified by conventional methods. The results obtained by triplex assay were in agreement with those of conventional methods for tuf (99.7%), nuc (100.0%), and mecA (99.1%), respectively. The triplex assay was found to have sensitivities of 99.7%, 100%, and 99.2% and specificities of 100%, 100%, and 98.7%, respectively, for the tuf, nuc, and mecA gene targets. The triplex real-time PCR assay accurately detects and identifies staphylococci directly from positive blood cultures without nucleic acid extraction prior to amplification.     

阳性报警时间预测血培养葡萄球菌评价

目的探讨阳性报警时间（1vrP）在预测血培养中金黄色葡萄球菌（SA）、凝固酶阴性葡萄球菌（CoNS）和甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）中的价值。方法收集北京大学第一医院2008至2012年血培养阳性标本中SA、CoNS的1TrP,根据SA对苯唑西林的敏感性判定为MRSA或甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）。对同一患者分离的重复菌株,仅留取第1株纳入本研究。分别比较SA和CoNS的TTP差异是否具有统计学意义,MRSA和MSSA的TTP差异是否有统计学意义。用受试者工作特征（ROC）曲线分析1TrP的诊断价值。结果收集到SA共101株（其中MRSA为51株,MSSA为50株）,CoNS共253株。SA和CoNS的TTP分别为（16．63±7．47）h和（24．61±11．09）h,二者差异有统计学意义（P〈0．05）。MRSA和MSSA的TTP分别为（18．22±8．15）h和（15．01±6．40）h,二者差异有统计学意义（P〈0．05）。ROC曲线表明TTP≤16．90h可作为区分SA和CoNS的切点,曲线下面积（AUC）为0．758。TTP〉12．58h可作为区分MRSA和MSSA的切点,AUC为0．630。结论TTP对预测SA和CoNS的准确度为中等,对预测MRSA和MSSA的准确度较低。