通络益智散对血管性痴呆大鼠海马CA1区P53蛋白表达的影响

目的:探讨通络益智散对血管性痴呆大鼠海马CA1区P53蛋白表达的影响。方法:用双侧颈总动脉(CCA)法制备大鼠血管性痴呆模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、通络益智散高低剂量组和尼莫地平组。3周后,断头处死大鼠,取大脑海马做病理和海马CA1区P53免疫组化检测。结果:假手术组海马CA1区未见P53阳性细胞,通络益智散大小剂量及尼莫地平组海马CA1区P53阳性细胞平均灰度值均明显高于模型组(P<0.05)。结论:通络益智散能显著降低CA1区P53蛋白的表达,抑制血管性痴呆大鼠脑损伤引起的细胞凋亡,对血管性痴呆大鼠的脑组织有保护作用,这可能是其治疗血管性痴呆的作用机理之一。     

通络益智散对拟血管性痴呆大鼠脑组织中Glu和GABA影响的实验研究

目的:探讨通络益智散对拟血管性痴呆大鼠海马区兴奋性和抑制性氨基酸的影响。方法:选用改良的脑缺血再灌注配合腹腔注射硝普钠降压法复制血管性痴呆模型。将实验大鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、尼莫地平组、通络益智散大剂量组、通络益智散小剂量组。给药3周后,取海马匀浆检测谷氨酸(G lu)含量,并观察海马区γ-氨基丁酸(GABA)的表达。结果:通络益智散可以显著降低拟血管性痴呆模型大鼠海马区G lu的含量、增强GABA的表达(P<0.01)。结论:通络益智散能够通过调节血管性痴呆大鼠海马区G lu和GABA的含量保护脑组织,这可能是其治疗血管性痴呆的作用机制之一。     

复智胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经元细胞凋亡时效的影响

目的:观察复智胶囊对血管性痴呆大鼠海马区自噬正相关蛋白Beclin-1表达的影响及在海马神经元细胞凋亡中的作用。方法:雄性SD大鼠采用双侧颈总动脉分次结扎法,建立血管性痴呆大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机分为模型组、复智胶囊高剂量组、复智胶囊低剂量组及多奈哌齐组,并设假手术组。分别在第3天、第7天、第14天采用Western Blot法检测大鼠海马区脑组织中Beclin-1、Bcl-2和Caspase-3的表达,采用TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡数。结果:术后3 d即对海马神经元细胞造成损害,与假手术组比较,造模后各组各时点的Beclin-1、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平明显增高(P0.05),海马神经元细胞大量凋亡(P0.05)。与模型组比较,相同时点复智胶囊高剂量组、低剂量组Beclin-1和Bcl-2蛋白表达水平明显增高(P0.05),Caspase-3蛋白表达水平明显下降(P0.05),海马神经元细胞凋亡数目明显减少(P0.05)。结论:复智胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经元有一定保护作用,可能是通过上调Beclin-1蛋白表达水平、激活细胞自噬及抑制细胞凋亡来实现的。     

复智胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经元细胞凋亡时效的影响

目的:观察复智胶囊对血管性痴呆大鼠海马区自噬正相关蛋白Beclin-1表达的影响及在海马神经元细胞凋亡中的作用。方法:雄性SD大鼠采用双侧颈总动脉分次结扎法,建立血管性痴呆大鼠模型。选取造模成功的大鼠,随机分为模型组、复智胶囊高剂量组、复智胶囊低剂量组及多奈哌齐组,并设假手术组。分别在第3天、第7天、第14天采用Western Blot法检测大鼠海马区脑组织中Beclin-1、Bcl-2和Caspase-3的表达,采用TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡数。结果:术后3 d即对海马神经元细胞造成损害,与假手术组比较,造模后各组各时点的Beclin-1、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平明显增高(P<0.05),海马神经元细胞大量凋亡(P<0.05)。与模型组比较,相同时点复智胶囊高剂量组、低剂量组Beclin-1和Bcl-2蛋白表达水平明显增高(P<0.05),Caspase-3蛋白表达水平明显下降(P<0.05),海马神经元细胞凋亡数目明显减少(P<0.05)。结论:复智胶囊对血管性痴呆模型大鼠海马神经元有一定保护作用,可能是通过上调Beclin-1蛋白表达水平、激活细胞自噬及抑制细胞凋亡来实现的。     

孔圣枕中丹对痴呆动物模型抗凋亡作用及机制的研究

目的:研究孔圣枕中丹抗痴呆动物模型海马神经元细胞凋亡的作用及机制。方法:将50只Wister大鼠随机分为正常组、模型组、脑复康组、孔圣枕中丹低剂量组、高剂量组,每组10只。除正常组外,将其余大鼠制成血管性痴呆大鼠模型。给大鼠灌胃后,采用流式细胞技术检测神经元凋亡率及bcl-2的表达,采用免疫组织化学法观察p53的表达。结果:孔圣枕中丹、脑复康均能降低血管性痴呆大鼠脑海马神经元凋亡率和bcl-2表达,提高p53表达,两组比较无显著性差异。结论:孔圣枕中丹能抑制神经元细胞凋亡,其机制可能与增强p53表达、降低bcl-2表达有关。     

血管性痴呆大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的：观察血管性痴呆大鼠海马神经元型一氧化氮合酶（nNOS)阳性神经元的变化。方法：采用改良的Pulsinelli4-血管阻断（4－VO）方法建立大鼠血管性痴呆模型,用免疫组化法研究大鼠海马nNOS的表达的变化。结果：与正常对照组比较,血管性痴呆大鼠海马CA1区和CA3区nNOS阳性神经元数目明显减少。结论：血管性痴呆大鼠海马nNOS阳性神经元的数目减少,与血管性痴呆的形成有关。     

复聪香液对血管性痴呆模型大鼠海马神经元的影响

[目的]观察复聪香液对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元形态结构的影响。[方法]SD大鼠40只随机分为4组,分别为假手术组、模型组、脑复康对照组和复聪香液组,经反复脑缺血再灌流加降血压法造模后,分别给予生理盐水、复聪香液及脑复康溶液,连续15d后脑部取材,苏木素伊红(HE)染色观察海马CA1区组织形态变化。[结果]与假手术组比较,模型组可见大量神经细胞损伤、变性,甚至坏死;而复聪香液及脑复康均能不同程度地减轻神经细胞损伤。[结论]复聪香液对血管性痴呆模型大鼠大脑海马CA1神经元损伤具有一定的保护作用。     

首乌益智胶囊对血管性认知障碍大鼠脑内血管内皮生长因子（VEGF）影响的实验研究

目的观察首乌益智胶囊对血管性认知障碍（VCI）模型大鼠血管新生的影响。方法用改良的大脑中动脉栓塞法制造血管性认知障碍模型,随机分为模型组、脑复康组及首乌益智胶囊组,每组20只,并设假手术组20只。分别连续给药4周后,应用免疫组织化学法测定缺血灶边缘微血管数和应用westernblot法分析大鼠脑内VEGF的表达。结果（1）血管计数：首乌益智组〉脑复康组〉模型组〉假手术组;各组与假手术组相比,差异均有统计学意义（P〈0．01）;与模型组比较,脑复康组、首乌益智组差异均有统计学意义（P〈0．01）;与脑复康组比较,首乌益智组差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）蛋白表达：首乌益智组〉脑复康组〉模型组〉假手术组;各组与假手术组相比,差异均有统计学意义（P〈0．01）;与模型组比较,脑复康组、首乌益智组差异均有统计学意义（P〈0．01）;与脑复康组比较,首乌益智组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论首乌益智胶囊能明显增强VCI模型大鼠缺血灶边缘新生血管密度,促进脑内VEGF的表达,从而诱导血管再生,以此发挥对脑缺血后的修复和保护作用。     

五脏温阳化瘀汤对动脉粥样硬化血管性痴呆大鼠海马组织Nrf2蛋白通路的影响

目的 建立动脉粥样硬化血管性痴呆大鼠模型,从氧化应激反应中Nrf2-ARE蛋白通路入手,观察不同剂量五脏温阳化瘀汤对血管性痴呆的神经保护机制。方法 制作动脉粥样硬化血管性痴呆大鼠模型,之后采用反复夹闭大鼠双侧颈总动脉方法制备血管性痴呆大鼠模型。术手后4周将大鼠随机分为假手术组、模型组、中低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、脑复康组,之后灌胃给药,持续4周,进行Morris水迷宫行为学检测,观察各组大鼠空间学习及记忆能力,western blot检测大鼠海马区Nrf2蛋白细胞核与细胞浆内的表达,同时检测下游蛋白HO-1蛋白的表达。结果 五脏温阳化瘀汤中剂量组和高剂量组从第3天开始可以明显缩短动脉粥样硬化血管性痴呆大鼠Morris水迷宫的逃避潜伏期,与假手术组\模型组比较P<0.01,有统计学差异。空间搜索实验中药中剂量组和高剂量组有效停留时间和有效停留距离明显延长,与假手术组\模型组比较P＜0.05有统计学差异。动脉粥样硬化血管性痴呆大鼠海马区Nrf2-ARE通路被激活,Western blot检测显示五脏温阳化瘀汤可以使Nrf2蛋白由胞浆转移到胞核内,并激活下游蛋白HO-1,使其表达增强,nrf2蛋白胞浆内外的表达以及HO-1蛋白的表达各组与假手术组比较P<0.01,与模型组比较P<0.01,有统计学差异。结论 五脏温阳化瘀汤能改善动脉粥样硬化血管性痴呆大鼠学习记忆能力,其作用机理可能与抑制动脉粥样硬化血管性痴呆大鼠的氧化应激反应,增强脑组织的抗氧化防御机制有关,其中剂量组和高剂量组作用显著。     

参龙健脑胶囊对脑缺血大鼠脑组织海马区BDNF和TrkB表达的影响

目的:观察参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠脑组织神经元的保护作用,并探讨其作用机制。方法:用结扎双侧颈总动脉方法制备缺血性脑损伤大鼠模型,造模成功后随机分为假手术组、模型组、参龙脑胶囊低、高剂量组及脑复康组,参龙健脑胶囊低、高剂量组和脑复康组分别按照0.4、1.2、0.45g.kg-1剂量,灌胃1次/d。灌胃28天后,采用免疫组化方法观察大鼠脑组织海马区的BDNF、TrkB表达。结果:与模型组大鼠比较,参龙健脑胶囊组大鼠脑组织中海马区BDNF、TrkB阳性表达增加(P<0.01)。结论:参龙健脑胶囊对大鼠脑缺血损伤后的神经功能恢复有一定的促进作用,其机制可能与促进BDNF和TrkB表达密切相关。     

救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用

目的 通过观察复方中药救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长以及胰岛素信号通路的影响, 探讨其对神经细胞保护作用的机制。方法 体外培养SH-SY5Y细胞, 分为对照组(C组)、救脑益智1号方组和3号方组, 每组药物剂量分别为0.0625 mg/mL、0.125 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL和1 mg/mL, 测定各组细胞的噻唑蓝(MTT)代谢率, 选定0.125 mg/mL进行细胞免疫荧光染色, 观察细胞形态和胰岛素受体底物-1(IRS-1)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的变化。结果 与对照组相比, 救脑益智组MTT代谢率升高(P<0.05), 细胞形态好, 表现为细胞胞体饱满、贴壁良好、突起延长, IRS-1和CREB表达增加。结论 复方中药救脑益智水提液能促进神经细胞生长, 提高神经元胰岛素信号通路相关因子IRS-1和CREB表达, 推测其神经保护作用机制与胰岛素信号通路有关。     

"补肾益髓"针灸法对痴呆模型大鼠CNS信息转导途径的影响

目的探讨“补肾益髓”针灸法防治阿尔茨海默型老年痴呆(AD)的作用机理。方法以皮下注射ALCL3建立急性衰老痴呆大鼠模型,选取肾俞、悬钟、百会、风府、涌泉五穴,通过各组之间的比较,观察针灸该组穴对大鼠“Y”型电迷宫行为学改变及脑内生长抑素(SS)、神经生因子(NGF)免疫组化阳性细胞表达的影响。结果行为学检测显示造模后大鼠有明显的学习记忆障碍,与空白组比较均有显著差异(均P<0.01),针灸治疗后两组大鼠电击次数较模型组及脑复康组有明显减少(均P<0.01),但未达到空白组水平(P<0.01);针灸防治组与治疗组相比无差异(P>0.05)。免疫组化结果显示:空白组SS阳性细胞数目最多,模型组阳性细胞个数显著减少,与空白组比较有显著差异(P<0.01);针灸治疗的两组阳性细胞与模型组和脑复康组比较有显著升高(均P<0.01)。但较空白组仍有一定差距(P<0.01);针灸防治组与治疗组比较,防治组SS升高水平比治疗组显著(P<0.01)。模型组海马NGF阳性细胞数目与空白组非常接近,无统计学意义(P>0.05);治疗后NGF阳性表达示针灸防治组、治疗组与脑复康组比较无统计学意义(P>0.05),但与模型组比较均有显著升高(P<0.01)。结论ALCL3造模AD大鼠学习记忆能力减退,出现明显老化征象。“补肾益髓”针灸法对防治模型大鼠AD样改变有显著效果,其中预防效果亦好于治疗效果。其作用机制可能是针刺提高SS、NGF的含量来调整神经系统信息转导途径相关环节的障碍,增强脑内营养物质对神经元的保护、修复的作用,减缓细胞凋亡过程,增强记忆功能最终改善脑内与学习记忆有关的神经系统功能。     

健脑益智胶囊对基底节区脑出血术后的疗效观察

目的观察健脑益智胶囊对高血压所致基底节区脑出血术后的临床疗效。方法对于32例高血压所致基底节区脑出血患者,手术后在常规治疗的基础上,从24 h开始加用健脑益智胶囊,在第1、3、7、10 d进行GCS评分和出院时进行生活自理能力评分(Barrble评分),并与对照组比较。结果治疗组较对照组第7、10 d的GCS评分和出院时Barrble评分>60分(生活基本自理)者均优于对照组,有显著差别(P<0.05)。结论:健脑益智胶囊对于高血压所致基底节区脑出血有良好的治疗作用。对于意识障碍和生活能力均有明显改善。     

祛异康对子宫内膜异位症模型大鼠COX-2及KGF表达的影响

目的观察祛异康对子宫内膜异位症大鼠异位内膜COX-2及KGF表达的影响,探讨祛异康治疗子宫内膜异位症的机制．方法采用手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为空白对照组、模型组、祛异康高、中、低剂量组、丹那唑组。造模成功各组给药4W,免疫组化方法检测大鼠在位、异位子宫内膜组织COX-2及KGF的表达。结果各组大鼠异位子宫内膜组织COX-2及KGF与空白对照组比较．表达明显上升（P〈0．05）;祛异康低、中、高剂量组、丹那唑组与模型组相比COX一2及KGF表达明显下降（P〈0．05）。结论祛异康能明显抑制异位症模型大鼠异位内膜的生长,其治疗机理可能是通过降低COX-2及KGF在异位内膜组织中的表达而实现的。     

依达拉奉对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马Chat、NR2B表达的影响

目的：研究依达拉奉对血管性痴呆（vascular dementia,VD）大鼠学习记忆能力及海马胆碱乙酰转移酶（Chat）、N-甲基D-天门冬氨酸受体2B（NR2B）表达的影响。方法：采用＂两血管阻断＋硝普钠降压法＂建立大鼠VD模型,采用Morris水迷宫实验对大鼠的学习记忆能力进行测试,应用免疫组化染色方法对大鼠海马Chat及NR2B的表达进行检测。结果：VD组（B组）与假手术组（A组）、依达拉奉治疗组（C组）、预防治疗组（D组）比较,学习记忆能力明显下降,海马内Chat蛋白及NR2B表达减少（P〈0.05）;A组与D组比较,学习记忆能力差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：依达拉奉可以改善VD大鼠的学习记忆能力,可能由于促进海马Chat蛋白及NR2B的表达;同时,依达拉奉对大鼠认知能力的减退有预防作用。     

扶正寿康口服液对小鼠免疫功能的影响

目的：探讨扶正寿康口服液对小鼠免疫功能的影响。方法：设药物组，对照组，免疫抑制组，免疫抑制给药组，分别进行免疫器官重量测定，Ｔ细胞测定，巨噬细胞吞噬功能实验，脾细胞总数及空斑形成细胞测定，干扰素诱生实验。结果；对小鼠脾脏无明显增重作用，可促进Ｔ及Ｂ淋巴细胞的免疫功能，增强巨噬细胞的吞噬功能，脾细胞总数及ＰＦＣ均升高，可诱导干扰素的生成。结论；本制剂可增强小鼠的免疫功能，具有对抗免疫抑制作用。     

补肾益脑汤治疗脑梗死的实验研究

目的探讨中药补肾益脑汤对实验性脑梗死大鼠脑细胞保护的作用机理。方法用线栓法制作大鼠大脑中动脉阻断（MCAO）模型,具有脑梗死临床特征者为脑梗死大鼠模型,共50只。对模型随机分为模型组、对照组、治疗高剂量组、治疗低剂量组各10只,同时设正常对照组10只,用药30天后取出大脑,观察梗塞灶周围脑组织中bFGF及VEGF表达情况。结果通过治疗实验性脑梗死大鼠的观察,该药对脑细胞保护已能达到治疗目的。结论补肾益脑汤对实验性脑梗死大鼠有治疗作用。     

脑智灵药理作用研究

研究了脑智灵煎液对小鼠记忆力的影响；对利血平、氢化可的松引起小鼠阳虚证的影响；对动物催眠、自发活动、血压、免疫器官（胸腺、脾脏）、抗寒能力、抗疲劳能力和缺氧耐受力的影响。脑智灵能减轻利血平、氢化可的松引起阳虚动物的证候，减少死亡率，表明本品具有补肾壮阳作用；同时能增强小鼠记忆力（Ｐ＜０．０１），有镇静（Ｐ＜０．０１）、催眠（Ｐ＜０．０１）作用，增加小鼠免疫器官（胸腺、脾脏）的重量（Ｐ＜０．０１），提高免疫功能；还有抗寒（Ｐ＜０．０１）、抗疲劳（Ｐ＜０．０１）、抗缺氧（Ｐ＜０．０１）、降压作用。     

促红细胞生成素预处理对大鼠全脑缺血海马CA1区的保护作用

目的　探讨促红细胞生成素 (erythropoietin ,EPO)进行预处理对缺血海马CA1区神经元是否具有保护作用。方法　采用 4 -VO法制作全脑缺血模型 ,将SD大鼠分为假手术组、生理盐水对照组、EPO处理组。生理盐水对照组和EPO处理组于术前 3h ,分别脑室立体定向注射生理盐水和重组人促红细胞生成素 (rHu -EPO) ,假手术组只进行假手术处理。观察缺血后 72h大鼠的生存情况及海马细胞凋亡和超微结构。结果　EPO处理组海马CA1区较生理盐水对照组有较少的凋亡神经元 (P <0 0 1)。结论　EPO预处理可以对缺血后海马CA1区神经元产生保护作用。     

脑溢安对出血性中风大鼠脑内MAPK信号转导通路的影响

目的 :探讨脑溢安对出血性中风大鼠脑内丝裂原活化的蛋白激活酶 (mitorgenactivatedproteinkinase,MAPK)信号转导通路的影响。方法 :根据Rosenberg法复制大鼠脑出血模型 ,采用免疫共沉淀、激酶方法 ,Westernblot检测脑出血大鼠海马ERK、JNK激酶活性变化及脑溢安对ERK、JNK激酶活性的影响。结果 :脑溢安下调脑出血大鼠海马活化的JNK蛋白表达 ,上调活化的ERK蛋白表达。结论 :中药脑溢安对脑出血大鼠海马组织MAPK信号转导通路起双重调节作用 ,表现为促进ERK生存通路 ,抑制JNK凋亡通路。