罗格列酮对高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的研究罗格列酮对高糖诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）生长的影响，从而探讨其对糖尿病血管并发症的作用及机制。方法利用组织贴块法体外培养SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞并分组给药，采用MTT比色法检测细胞生长活性；用Western blotting检测细胞增殖核抗原的表达；以流式细胞仪检测细胞周期的进程；RT—PCR检测MMP-2mRNA的水平。结果罗格列酮呈浓度依赖性抑制高糖诱导的大鼠VSMC的增殖；降低PCNA的表达（P〈0．05），明显降低细胞的S期数目百分比（P〈0．01），增加G0／G1期数目百分比（P〈0．01）；明显降低MMP-2mRNA（P〈0．01）的表达。结论从细胞分子水平说明罗格列酮可能通过降低PCNA的表达，阻止细胞进入S期，减少有丝分裂来发挥对高糖诱导的VSMC增殖的抑制作用，MMP-2在罗格列酮改善血管重构的过程中可能发挥了重要的作用。     

广枣总黄酮对体外培养大鼠心脏成纤维细胞周期影响

目的：研究广枣总黄酮（totalflavonesoffructuschorspondiatis,TFFC）对血管紧张素Ⅱ（angiontensin,AngII）诱导大鼠心脏成纤维细胞（cardiacfibroblasts,CFs）细胞周期的影响,并进一步探讨其与一氧化氮（nitricoxide,NO）-一氧化氮合酶（nitricoxidesynthase,NOS）系统的关系.方法：建立新生大鼠心脏成纤维细胞系：采用流式细胞仪（flowcytometry,FCM）分析技术检测细胞周期;采用化学比色法测定CFs培养上清乳酸脱氢酶（1actatedehydrogenase,LDH）水平;采用硝酸还原酶法测细胞培养液中NO水平;化学比色法测细胞上清液中NOS水平。结果：25、50、100mg／L的TFFC作用72h后,CFs的G0／G1期细胞百分率较AnglI组显著增高（P〈0．01,P〈0．05）,S期细胞百分率,G2／M期细胞百分率和增殖指数（proliferationindex,PI）则显著低于对照组（P〈0．01,P〈0．05）,且随着作用浓度的增加,TFFC对细胞周期的影响逐渐增强。100mg／L的TFFC干预72h后,CFs培养上清NO浓度为（23．23±0．70）μmol／L,与AngII组（20．20±0．83）μmol／L相比,差异非常显著（P〈0．01）;培养上清NOS活性为（20．43±0．53）U／L,和AngⅡ组（20．90±0．85）U／L相比,亦有非常显著性差异（P〈0．01）oNO浓度和NOS活性呈显著正相关（r=0．964,P〈0．01）o结论：TFFC能够抑制AngⅡ诱导大鼠CFs的细胞周期增殖,其效应可能与上调No—NOS系统活性有关。     

罗格列酮抑制鼠动脉平滑肌细胞增殖的实验研究

目的：探讨PPAR-γ合成型配体罗格列酮对大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响.方法：采用组织贴块法原代培养大鼠主动脉平滑肌细胞并传代,根据细胞生长的形态特点和免疫细胞化学染色进行细胞鉴定.取第五代纯化细胞血清饥饿24h,然后用PDGF-BB或bFGF（20ng/ml）刺激24h,按实验分组在30min前加或不加入不同浓度（1～10umol/L）的罗格列酮进行预处理,应用MTT法检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期分布.结果：镜下培养细胞呈典型的“谷峰状”生长,免疫细胞化学染色显示胞浆内特异的α平滑肌肌动蛋白阳性表达.PDGF-BB或bFGF均能诱导平滑肌细胞增殖,MTT中A490值增加,G0/G1期细胞减少,S期细胞增多.罗格列酮预处理能够抑制平滑肌细胞增殖,抑制细胞从G0/G1期向S期转变,且呈明显的剂量依赖关系.结论：罗格列酮能够抑制生长因子诱导的血管平滑肌细胞的增殖.     

川芎嗪对新生大鼠心肌成纤维细胞分泌内皮素和一氧化氮的影响

目的：探讨川芎嗪（tetramethylpyrazine，TMP）对新生大鼠心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）分泌内皮素（endothelin，ET），一氧化氮（nltric oxide，NO）的影响。方法：采用胰蛋白酶消化法和差素贴壁法获取CFs，用放射免疫测定法、硝酸还原酶法分别测定不同条件下培养的CFs培养液上清中的ET和NO水平。结果：在给定浓度范围内川芎嗪可以按剂量依赖的方式抑制CFs分泌ET，有促进CFs分泌NO趋势，但是无统计学意义（P〉0.05）。结论：川芎嗪可以剂量依赖性抑制新生大鼠CFs分泌ET，对NO合成无显著影响，从而改变ET，NO相对关系。川芎嗪可能通过影响CFs分泌的ET和NO改变局部ET和NO平衡关系，发挥其抑制心肌纤维化的作用。     

强心饮对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成以及激活蛋白1 mRNA表达的影响

目的：研究激活蛋白1（activator protein—1．AP-1）在肿瘤坏死因子严世芸：（turnor necrosis factor—α，TNFα）诱导新生大鼠心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）增殖、胶原合成中的作用，探讨强心饮抑制心肌纤维化的作用机制。方法：胰酶消化法分离培养乳鼠CFs．建立TNFα诱导新生大鼠CFs纤维化模型。将CFs按培养方式不同分为正常对照组、模型组和强心饮5％含药血清组、10％含药血清组和20％含药血清组。治疗24h后，采用荧光实时定量聚和酶链式方法检测不同浓度强心坎对CFs AP-1mRNA表达的影响，甲基噻唑基四唑法检测强心欣对CFs增殖的影响；羟脯氧酸法检测对CFs胶原合成量的影响。结果：TNF—α作用CFs24h舌．与空白对照组相比。AP-1mRNA表达明显增加（P〈0．05），细胞增殖和胶原合成增加（P〈0．05）；强心饮干预后，CFs增殖和胶原合成减少（P〈0．05），AP1mRNA表达下调（P〈0．05）。结论：强心饮能够抑制TNF-α诱导的CFs增殖和胶原合成增加，具有抗心肌纤维化作用，其机制可能与下调AP-1 mRNA表达有关。     

强心饮对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成以及激活蛋白1mRNA表达的影响

目的：研究激活蛋白1（activator protein—1．AP-1）在肿瘤坏死因子严世芸：（turnor necrosis factor—α，TNFα）诱导新生大鼠心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）增殖、胶原合成中的作用，探讨强心饮抑制心肌纤维化的作用机制。方法：胰酶消化法分离培养乳鼠CFs．建立TNFα诱导新生大鼠CFs纤维化模型。将CFs按培养方式不同分为正常对照组、模型组和强心饮5％含药血清组、10％含药血清组和20％含药血清组。治疗24h后，采用荧光实时定量聚和酶链式方法检测不同浓度强心坎对CFs AP-1mRNA表达的影响，甲基噻唑基四唑法检测强心欣对CFs增殖的影响；羟脯氧酸法检测对CFs胶原合成量的影响。结果：TNF—α作用CFs24h舌．与空白对照组相比。AP-1mRNA表达明显增加（P〈0．05），细胞增殖和胶原合成增加（P〈0．05）；强心饮干预后，CFs增殖和胶原合成减少（P〈0．05），AP1mRNA表达下调（P〈0．05）。结论：强心饮能够抑制TNF-α诱导的CFs增殖和胶原合成增加，具有抗心肌纤维化作用，其机制可能与下调AP-1 mRNA表达有关。     

罗格列酮对大鼠气道黏液高分泌的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂罗格列酮对丙烯醛所致大鼠气道黏液高分泌的影响及其机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为6组，即对照组（A组）、罗格列酮自身对照组（B组）、模型组（C组）、低剂量罗格列酮组（D组）、中剂量罗格列酮组（E组）和高剂量罗格列酮组（F组）。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和IL-8浓度。分别用阿辛蓝．过碘酸雪夫（AB-PAS）和免疫组化染色检测气道黏蛋白和MUCSAC的表达。结果丙烯醛吸入各组BALF中TNF-α、IL-1β和IL-8浓度，以及气道黏蛋白、MUCSAC表达与A组比较明显增加（P〈0．01，P〈0．05），TNF-α、IL-1β、IL-8浓度与黏蛋白、MUCSAC表达分别呈正相关（r分别为0．827，0．795，0．924,0．805，0．812和0．917；P〈0．01或P〈0．05）。给予低、中、高剂量罗格列酮治疗后，D组、E组和F组BALF中TNF-α和IL-8浓度，以及气道黏蛋白和MUCSAC表达均逐渐降低，其中E、F组与C、D组比较，F组与E组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。结论罗格列酮能够下调TNF-α和IL-8的表达，减轻气道黏液高分泌。     

罗格列酮及环格列酮对血管紧张素Ⅱ体外诱导大鼠主动脉外膜成纤维细胞增殖的抑制作用

目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体（PPAR）γ激动剂罗格列酮、环格列酮对大鼠主动脉外膜成纤维细胞（AF）增殖的影响,并比较电流排除（ECE）、四甲基偶氮唑盐（MTT）2种方法检测增殖的差异。方法：采用组织贴块法原代培养AF并传代。取第5代纯化细胞血清饥饿24h,然后用不同浓度（0、1、5、10、50μmol/L）的罗格列酮、环格列酮加或不加血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激24h,用ECE、MTT2种方法检测细胞增殖活力。结果：与未加AngⅡ组比较,加AngⅡ组的细胞活力升高（P〈0.05）,10、50μmol/L罗格列酮、环格列酮能够抑制AF增殖（P〈0.05）,5、10、50μmol/L罗格列酮、环格列酮能够抑制AngⅡ诱导的AF增殖（P〈0.05）。ECE与MTT结果相关性好（r=0.667,P〈0.001）。结论：罗格列酮、环格列酮能够抑制AngⅡ诱导的AF增殖,ECE法可准确检测细胞增殖。     

罗格列酮对体外培养人肺癌细胞增殖抑制和凋亡的影响

目的探讨罗格列酮（Rosiglitazone, ROS）对体外培养人肺癌细胞系A549细胞增殖抑制和凋亡的影响.方法体外培养人脐静脉内皮细胞系（HUVEC）、人肺癌细胞系（A549）,每种细胞实验组中分别加入不同浓度罗格列酮,对照组加入等量PBS.采用改良MTT比色法分别检测罗格列酮作用HUVEC、A549细胞不同时间后的细胞增殖抑制率;流式细胞仪分析法分别检测HUVEC、A549细胞的细胞周期分布及凋亡率;间接免疫荧光流式细胞仪分析法分别检测HUVEC、A549细胞的细胞内蛋白PPARγ表达.结果罗格列酮对A549细胞的增殖具有抑制作用,呈剂量依赖性和时间依赖性,对HUVEC细胞的增殖抑制作用弱,与A549细胞相比差异有显著性（P〈0.05）;罗格列酮作用于A549细胞后细胞周期分布及凋亡率与HUVEC细胞比较,G0/G1期细胞明显增多,且G1期细胞前出现明显的亚G1凋亡峰;罗格列酮作用于A549细胞后,细胞内 PPARγ的表达进行性上调.结论罗格列酮对肺癌细胞系A549的增殖具有明显抑制作用,其抗肿瘤作用机制可能是通过活化PPARγ途径诱导细胞凋亡.     

Wnt／β-连环蛋白在高糖诱导心肌成纤维细胞增殖中的作用

目的：探讨Wnt／β-连环蛋白（Wnt／[β-catenin）在高糖诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞CFs增殖中的作用。方法：分离新生乳鼠CFs,构建高糖（25mmol／L）诱导CFs增殖细胞模型。采用Wnt／β-catenin抑制剂XAV939以及激动剂SKL2001调控Wnt／8-catenin信号通路。MTr法和细胞计数检测心肌细胞增殖,Westernblot法检测大鼠CFs中β-catenin的表达,实时荧光定量PCR（qPCR）检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果：25mmol／L高糖刺激48h后CFs的细胞增殖显著增加,β-catenin表达显著升高（P〈0．01）,XAV939能抑制CFs增殖（P〈0．01）,降低高糖诱导β-catenin及PCNA的表达（P〈0．01）,SKL2001能对抗XAV939抑制高糖诱导CFs增殖的作用。结论：高糖诱导的CFs增殖可能与激活Wnt／β-catenin途径有关。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。