补体结合试验诊断内脏利什曼病的微量法

本文作者用0.025毫升的微量血清(以下简称微量法),以卡介苗(BCG)为抗原,作补体结合试验,同时按老方法用常规量的血清(以下简称大量法)作试验,比较两种方法的结果。试验的血清取自己知的内脏利什曼病现症病人和已愈的病人,大量法试验反应阴性、阳性及可疑的病人和病犬,以及非疫区     

荧光PCR熔解曲线法检测耐多药肺结核患者对左氧氟沙星和莫西沙星耐药性的效能研究

目的: 探究荧光PCR熔解曲线法快速检测耐多药肺结核患者对左氧氟沙星(Lfx)和莫西沙星(Mfx)耐药性的临床价值。 方法: 以2018年11月至2019年12月在黑龙江省传染病防治院采用BACTEC MGIT 960全自动分枝杆菌培养及比例法药物敏感性试验(简称“药敏试验”)确诊为耐多药肺结核的195例患者为研究对象,同时经荧光PCR熔解曲线法进行筛查,通过与药敏试验结果进行对比,分析荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌对Lfx和Mfx耐药性的准确性。结果: 195株耐多药结核分枝杆菌经比例法药敏试验检测,对Lfx和Mfx耐药率分别为46.15%(90/195)和48.72%(95/195);以比例法药敏试验结果为标准,荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌对Lfx和Mfx耐药性的敏感度分别为95.56%(86/90)和95.79%(91/95),特异度分别为73.33%(77/105)和77.00%(77/100),一致率分别为83.59%(163/195)和86.15%(168/195),Kappa值分别为0.83和0.85。 结论: 荧光PCR熔解曲线法检测耐多药肺结核患者对Lfx和Mfx耐药的结果与比例法药敏试验结果高度一致,适用于筛查耐多药肺结核患者对Lfx和Mfx的耐药性。     

荧光PCR探针熔解曲线技术检测涂阳患者痰标本中结核分枝杆菌耐药性的价值

目的 评估荧光PCR探针熔解曲线(MeltPro)技术检测涂阳患者痰标本中MTB耐药性的效能。方法 收集2016年9月至2018年8月西安市胸科医院500例痰涂片阳性患者的痰标本,分别进行痰涂片镜检、GeneXpert MTB /RIF检测、BACTEC MGIT 960(简称“MGIT 960”)液体培养、表型药物敏感性试验(简称“药敏试验”),并应用MeltPro法检测痰标本中MTB菌株对利福平、异烟肼、二线注射类和氟喹诺酮类等抗结核药物的耐药性,并以表型药敏试验为标准,评价MeltPro法的检测效能。结果 以表型药敏试验结果为标准,MeltPro法检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为98.7%(76/77)和94.2%(343/364),检测对异烟肼耐药性的敏感度和特异度分别为82.3%(102/124)和96.2%(304/316),检测对阿米卡星耐药性的敏感度和特异度分别为8/9和99.5%(432/434),检测对卷曲霉素耐药性的敏感度和特异度分别为6/7和99.1%(432/436),检测对左氧氟沙星耐药性的敏感度和特异度分别为90.6%(48/53)和99.2%(386/389),检测对莫西沙星耐药性的敏感度和特异度分别为88.1%(37/42)和96.5%(386/400)。以表型药敏试验结果为标准,GeneXpert MTB/RIF检测MTB对利福平耐药性的敏感度和特异度分别为94.8%(73/77)和94.0%(342/364)。GeneXpert-MTB/RIF和MeltPro法与表型药敏试验结果一致性均较好(Kappa值分别为0.81和0.84),但MeltPro法检测效能与表型药敏试验检测结果的一致性更高。结论 MeltPro法检测涂阳患者痰标本中MTB菌株对利福平、异烟肼,以及二线注射类和氟喹诺酮类抗结核药物耐药性有较好的效能。     

硝酸盐还原试验与反向斑点杂交试验联合检测结核分枝杆菌耐药性

目的 联合检测结核分枝杆菌耐药性,以提高其灵敏度和特异性.方法 对126株已知耐药浓度的结核分枝杆菌耐药株和敏感株分别采用硝酸盐还原试验( Nitrate Reductase Assay,NRA)和反向斑点杂交试验(reverse-dot blot hybridization,RBH),检测其异烟肼(INH)和对利福平(RFP)的耐药性,并将结果将与绝对浓度法结果相比较.结果 硝酸盐还原试验和反向斑点杂交试验联合检测与绝对浓度法比较有高度的一致性(P＞0.05),异烟肼灵敏度95.5％,特异性100％;利福平灵敏度100％,特异性98.1％.结论 硝酸盐还原试验和反向斑点杂交试验联合检测可作为快速结核分枝杆菌耐药性试验方法.     

快速微量外——斐氏法诊断斑疹伤寒

材料与方法:快速微量外—斐氏凝集试验法(简称快速微量法)所用材料为微型振荡器(WZ—2A型,北京海淀电子医疗仪器厂生产),40℃温箱、外—斐氏反应用OX_(19)OX_2诊断菌液(10毫升菌液70亿/毫升)加沙黄染色液0.06～0.08毫升混合,使菌液呈红色)、斑疹伤寒补体结合试验分型抗原(鼠肺抗原)、诊断血清及溶血素(成都生物制品研究所生产),其它试验材料、血清、菌液     

酶联环卵沉淀试验诊断日本血吸虫病的研究

采用热处理超声干卵抗原环卵沉淀试验结合酶联技术的酶联环卵沉淀试验(ELCOPT),与常规环卵沉淀试验(COPT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接血凝试验(IHA)进行了比较。在粪检阳性患者327例中,ELCOPT阳性率为96.0％(314/327),COPT阳性率为94.2％(308/327),P>0.05,无显著意义。平均环沉率前法为27.9％,后法为15.7％,P<0.01,有极显著意义。ELISA阳性率为89.6％(293/327),P<0.01,有极显著意义。随机抽双港大队106例,IHA阳性率为82.1％(87/106),与ELCOPT阳性率92.5％(98/106)比较,P<0.05,有显著意义。用ELCOPT检测43例正常人,结果全部阴性。本文采用板井法ELCOPT,可提前24小时出报告,底物以0.4％联苯胺为宜。本法适宜作为大规模血清流行病学调查的工具。     

双抗体ELISA检测人血清弓形虫循环抗原的初步研究

应用抗弓形虫抗体酶联免疫吸附试验夹心法(双抗体ELISA),检测不同人群血清循环抗原(CAg)。肉类加工人员、饮食服务人员的阳性率分别为9.3%(15/161)及3.9%(3/76),献血员未检出阳性者(0/72),肉类加工人员与献血员的CAg阳性率间差异非常显著(P<0.01),提示弓形虫感染与接触肉类食品似有密切关系。该法检测抗核抗体、类风湿因子、抗链球菌溶血素“O”等阳性者血清93份,均为阴性。方法的特异性试验的抑制率>70%;重现性试验的变异系数<10%。结果表明,该法具有较高的敏感性和特异性,认为可作为人体弓形虫急性感染的诊断方法。     

两种分子药物敏感性试验与表型药物敏感性试验检测结核分枝杆菌耐药性的效能比较

目的：评价基因芯片法和荧光定量PCR探针熔解曲线法直接检测结核病患者临床标本中结核分枝杆菌(MTB)耐药性的价值。方法：选取解放军总医院第八医学中心结核病医学部住院结核病患者临床标本44份(例),以传统药物敏感性试验(简称“药敏试验”)绝对浓度法为对照,应用基因芯片法直接检测临床标本中MTB对利福平、异烟肼的耐药性,以...     

化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的方法学评价

目的 评价化学发光法检测梅毒螺旋体特异性抗体的效果.方法 5家实验室分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光检测法(CLIA)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝胶试验(TPPA)进行临床标本的双盲检测.以TPPA结果为标准,分析其敏感性和特异性.结果 共计检测1 525例血清样品,其中TPPA确证阳性308例,阳性率为20.2%.以TPPA作参照,发光法敏感性为100%(308/308),特异性为99.3%(1 208/1 217),阳性结果预测值(PPV)为97.2%(308/317),阴性结果预测值(NPV)为100%(1 208/1 208);5种ELISA试剂总体敏感性为98.1%(302/308),特异性为97.9%(1 192/1 217),PPV为92.4%(302/327),NPV为99.5%(1 192/1 198).结论 CLIA法具有敏感性高和特异性强的特点,适合于临床实验室进行梅毒的筛查.     

Evaluation of gene chips for the rapid diagnosis of drug-resistance genes in Mycobacterium tuberculosis

目的 探讨基因芯片法在结核分枝杆菌耐药基因快速诊断中的应用价值。 方法 收集2017年6月至2018年6月厦门大学附属第一医院肺科门诊及住院的933例疑似肺结核患者初诊时采集的同一份晨痰标本,同时进行基因芯片法、GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)和BACTEC MGIT 960液体培养及其比例法药物敏感性试验(简称“MGIT 960及其比例法药敏试验”)3种方法进行结核分枝杆菌及其耐药性检测,对检测结果进行对比分析。 结果 933例患者的痰标本中,基因芯片法检测出阳性484例,GeneXpert检测出阳性462例,MGIT 960培养出阳性411例。三种检测方法均为阳性的标本有395例,采用Excel表通过完全随机的方式抽取232例进行耐药性检测,以比例法药敏试验结果为参考标准,基因芯片法检测出异烟肼耐药的敏感度为86.67%(26/30),特异度为96.53%(195/202),一致性为95.26%(221/232),Kappa值为0.798(0.682~0.914);检测出利福平耐药的敏感度为93.75%(30/32),特异度为97.00%(194/200),一致性为96.55%(224/232),Kappa值为0.862(0.768~0.956);GeneXpert检测出利福平耐药的敏感度为84.38%(27/32),特异度为97.00%(194/200),一致性为95.26%(221/232),Kappa值为0.803(0.691~0.915);基因芯片法与GeneXpert对利福平耐药检测的一致性为96.12%(223/232),Kappa值为0.847(0.749~0.945)。Kappa值均大于0.75,具有良好的一致性。 结论 以MGIT 960及其比例法药敏试验结果为标准,基因芯片法敏感度、特异度和一致性高,与GeneXpert也具有良好的一致性,有助于结核病的早期诊断及防控。     

斑点酶免疫法的技术关键

<正> 斑点酶免疫法(Dot-ELISA)是70年代末由Western-blot演变而来的,它是以微孔滤膜为载体的酶联免疫吸附试验。又称斑点免疫吸附试验,抗原斑点试验(Antigen-spot test),斑点免疫结合试验(Dot-Immunobinding assay)及斑点免疫测定(spot Immuno detection)等。该法具有操作简便,不需特殊仪器,敏感性与RIA及E1A相当,包被抗原或抗体用量少,一条膜可同时检测几种不同的抗原抗体系统,便于携带     

基因芯片法在结核分枝杆菌耐药基因快速诊断中的应用价值

目的 探讨基因芯片法在结核分枝杆菌耐药基因快速诊断中的应用价值。 方法 收集2017年6月至2018年6月厦门大学附属第一医院肺科门诊及住院的933例疑似肺结核患者初诊时采集的同一份晨痰标本,同时进行基因芯片法、GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)和BACTEC MGIT 960液体培养及其比例法药物敏感性试验(简称“MGIT 960及其比例法药敏试验”)3种方法进行结核分枝杆菌及其耐药性检测,对检测结果进行对比分析。 结果 933例患者的痰标本中,基因芯片法检测出阳性484例,GeneXpert检测出阳性462例,MGIT 960培养出阳性411例。三种检测方法均为阳性的标本有395例,采用Excel表通过完全随机的方式抽取232例进行耐药性检测,以比例法药敏试验结果为参考标准,基因芯片法检测出异烟肼耐药的敏感度为86.67%(26/30),特异度为96.53%(195/202),一致性为95.26%(221/232),Kappa值为0.798(0.682~0.914);检测出利福平耐药的敏感度为93.75%(30/32),特异度为97.00%(194/200),一致性为96.55%(224/232),Kappa值为0.862(0.768~0.956);GeneXpert检测出利福平耐药的敏感度为84.38%(27/32),特异度为97.00%(194/200),一致性为95.26%(221/232),Kappa值为0.803(0.691~0.915);基因芯片法与GeneXpert对利福平耐药检测的一致性为96.12%(223/232),Kappa值为0.847(0.749~0.945)。Kappa值均大于0.75,具有良好的一致性。 结论 以MGIT 960及其比例法药敏试验结果为标准,基因芯片法敏感度、特异度和一致性高,与GeneXpert也具有良好的一致性,有助于结核病的早期诊断及防控。     

DNA微阵列芯片法检测耐药结核分枝杆菌的临床应用价值研究

目的 评价DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌及其对异烟肼和利福平耐药的检测效能。 方法 收集2011年1月至2017年5月间在江苏省灌云县疾病预防控制中心登记的814例涂阳肺结核患者的痰标本。利用传统罗氏培养法及比例法药物敏感性试验(简称“药敏试验”)和DNA微阵列芯片法,同时对患者的痰标本进行结核分枝杆菌检测,并检测其对异烟肼和利福平的耐药情况;分别以传统罗氏培养及比例法药敏试验为标准,评价DNA微阵列芯片法的检测效能。 结果 DNA微阵列芯片法对涂阳肺结核患者的结核分枝杆菌检出率为86.1%(701/814),高于传统罗氏培养法的82.4%(671/814),差异有统计学意义(χ ²=6.81,P<0.05)。以传统罗氏培养法为标准,DNA微阵列芯片法检测涂阳患者结核分枝杆菌的敏感度和特异度分别为92.4%(620/671)和43.4%(62/143),Kappa=0.39,阳性预测值和阴性预测值分别为88.4%(620/701)和54.9%(62/113)。以药敏试验为标准,对有完整的异烟肼和利福平耐药检测结果的620例患者进行分析,DNA微阵列芯片法检测初治涂阳患者是否对异烟肼与利福平耐药的敏感度分别为78.7%(37/47)和84.6%(22/26),阳性预测值分别为69.8%(37/53)和73.3%(22/30);检测复治涂阳患者是否对异烟肼与利福平耐药的敏感度分别为71.9%(23/32)和89.3%(25/28),阳性预测值分别为85.2%(23/27)和89.3%(25/28)。 结论 DNA微阵列芯片法对结核分枝杆菌的检出率高于传统罗氏培养;对结核分枝杆菌对异烟肼和利福平耐药性检测效果理想,具有较好的应用价值。     

睢县1767份血清HIV检测结果分析

目的调查了解单采血浆者、受血者、艾滋病病毒(HIV)感染者的配偶及子女等人群血清HIV检出率,为艾滋病防治提供科学依据。方法详细登记检测日期、患者姓名、性别、年龄、住址、电话和传播途径(供血史、受血史、不洁性交史等)。HIV阳性者用另一种检测方法证实,并由省、市或县疾病预防控制中心进一步作确证试验。比较酶联免疫吸附试验(ELISA)、明胶凝集法、金标法三种方法的灵敏度。结果供血浆者阳性率50.66%(228/450),受血者阳性率75%(24/32),HIV感染者配偶阳性率50.0%(6/12),HIV感染者子女阳性率31.81%(7/22),孕产妇阳性率0.47%(3/642),术前检查者阳性率0.32%(1/314),医务人员阳性率1.6%(1/60),性病患者阳性率6.66%(2/30),可疑人群阳性率0.97%人(2/205)。三种方法比较157名单采血浆者检出率为:ELISA法54.14%(85/157),明胶凝集法48.40%(76/157),金标法42.67%(67/157)。结论睢县艾滋病传播途径以血液传播为主,配偶间的传播应重视,母婴垂直传播及性传播次之,检测方法以ELISA灵敏度高,特异性好,应列为常规方法。     

皮内试验法在肝吸虫病诊断中的应用

近年来,我们应用皮内试验法(下称皮试法),对肝吸虫病流行区人群进行了普查,并以氢氧化钠消化法(下称粪检法)作对照。实践证明,皮试法检测肝吸虫病的阳性率高,且操作简便,可用于肝吸虫病的辅助诊断。一、试验材料①肝吸虫成虫抗原:取麦穗鱼的囊蚴(带囊蚴鱼肉),用人工感染家兔,一月后宰杀家兔,收集肝吸虫成电,以生理盐水冲洗数次后,置于无菌滤纸上,吸去虫体表面的     

被动凝集法和ELISA法检测成人肺炎支原体抗体的临床价值比较

目的比较被动凝集(PPA)法与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测成人肺炎支原体(MP)感染的临床价值。方法分别采用PPA、ELISA法检测90例成人CAP患者的MP抗体及MP-IgA、MP-IgM、MP-IgG抗体并进行分析。结果 PPA法检测MP抗体阳性率为72.2%(65/90),ELISA法检测总抗体阳性率为50.00%(45/90),差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA法检测MP-IgA阳性率为26.7%(24/90),MP-IgM的阳性率为22.2%(20/90),差异无统计学意义(P>0.05),且存在一致性(Kappa=0.520);MP-IgG阳性率为37.8%(34/90),与MP-IgM、MP-IgA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。PPA滴度越高,ELISA法MP-IgA、MP-IgM阳性检出率越高。结论 ELISA检测MPIgA、IgM、IgG联合PPA检测MP抗体效价可以提高CAP诊断的准确性,对早期诊断成人MP感染有重要临床意义。     

梅毒胶体金法在临床诊断中的应用价值

目的了解梅毒胶体金法在自愿咨询检测(VCT)门诊、社区卫生服务中心和非政府组织(NGO)工作室等临床诊断中的应用价值。方法应用梅毒螺旋体(TP)抗体检测试剂(胶体金法)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA),同时对2011-2013年医院哨点监测性病门诊送检的血清标本进行检测。结果对1204例样本进行检测,梅毒胶体金法阳性检出率为20.51%(247/1204),ELISA法为21.01%(253/1204),TPPA法为20.02%(241/1204)。以TPPA为金标准,梅毒胶体金、ELISA的敏感性均为99.59%,特异性分别为99.27%、98.65%。胶体金法与TPPA法和ELISA法经Kappa一致性检验比较(u分别为135.20、137.71,k=0.98,P0.05),具有极强的一致性。结论梅毒胶体金检测敏感性高、特异性强,具有简便、迅速的特点,值得在临床诊断中推广应用。     

CLIA法联合TPPA法在临床梅毒血清学筛查中的应用评价

目的探讨化学发光免疫分析(CLIA)法联合梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA),在临床梅毒血清学筛查中的应用价值。方法用CLIA进行特异性梅毒螺旋体抗体初筛试验,阳性标本再经TPPA和梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)复检。CLIA与TPPA结果不一致者用蛋白印迹法(WB)验证。结果 599例CLIA初筛阳性标本用TPPA法复检阳性568例、阴性31例;TRUST法复检阳性189例、阴性410例。31例TPPA阴性标本经WB试验验证结果为18例阴性、13例阳性。结论 CLIA法联合TPPA法初筛梅毒作为梅毒筛查的流程是可行的,值得推广。     

检测血吸虫病人循环抗原及抗体的比较研究

采用单克隆抗体斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测血吸虫循环抗原;间接血凝试验(IHA)、薄膜干卵片沉淀试验(PVC-COPT)检测血吸虫抗体;聚乙二醇(PEG)比浊法测定循环免疫复合物(CIC),并用PEG浓缩血清法作Dot-ELISA的检测.对急性、慢性、晚期血吸虫病人及健康人血清用以上方法作平行检测,同时与粪检进行了比较.