CD4^＋CD25%＋FoxP3^＋调节性T细胞在肺癌患者体内检测及其意义

目的研究肺癌患者外周血和肿瘤组织CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞（Treg）的异常聚集,探讨其在肺癌患者体内调节免疫抑制作用。方法采用流式细胞术对28例肺癌患者的癌组织,相应的癌旁组织和外周血及15例正常志愿者外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞的检测。结果肺癌患者癌组织中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞在CD4^＋T细胞中所占比例是（10．5±1．6）％;外周血中和癌旁组织表达分别是（5．2±2．1）％和（3．6±1．2）％,癌组织明显高于外周血和癌旁组织（P〈0．05）。肺癌患者外周血中Treg细胞（5．2±2．1）％明显高于志愿者（1．8±1．2）％。结论CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞在肺癌组织及外周血中高表达,促进了肿瘤的进一步恶化,在癌组织学分型上也存在明显差异,肺腺癌表达阳性较高,可以作为肺癌免疫治疗的靶点。     

甘露聚糖肽对围手术期食管癌患者免疫功能的影响

目的观察围手术期食管癌患者细胞免疫功能变化及甘露聚糖肽对细胞免疫的影响。方法68例食管癌患者随机分两组,实验组同术期给予甘露聚糖肽;对照组给予生理盐水。术前2d（T1）、术毕（T2）、术后1d（T3）、术后3d（T4）、术后7d（T5）测定T细胞亚群（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋）含量以及NK细胞含量。结果术前两组指标差异无统计学意义。术毕以及术后1d、3d对照组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋以及NK细胞含量较术前下降,术后7d恢复到术前水平,CD8^＋无明显变化。术毕以及术后1d实验组各指标较术前无明显变化,术后3d、7d各指标和术前比较,差异有统计学意义。术后两组间各指标差异有统计学意义。结论甘露聚糖肽能促进围手术期食管癌患者T细胞亚群的恢复,对细胞免疫具有保护和提高作用。     

IL-21及其受体表达与溃疡性结肠炎分级的相关性

目的探讨溃疡性结肠炎（UC）患者炎性反应严重程度分级与IL-21及其受体表达之间的关系。方法收集34例UC患者（包括轻度组10例、中度组8例、重度组6例、缓解组10例）和30例健康成人外周血标本,分离血清和外周血单个核淋巴细胞（PBMC）,双抗夹心法ELISA检测血清IL-21水平,流式细胞仪检测外周血CD4^＋、CD8^＋T细胞、B细胞和NK细胞IL-21R的表达。结果UC患者血清IL-21水平及外周血CD4^＋、CD8^＋T细胞、B细胞和NK细胞IL-21R表达水平与健康对照比较显著升高（P〈0．01）,并且与病情严重程度有一定相关性。结论IL-21及其受体IL-21 R在UC肠黏膜炎症病变过程中起着重要作用,可能参与了肠道黏膜组织免疫损伤过程。     

CD4^＋CD256＋T细胞表面GITR及血清中IL-6、IL-17在类风湿关节炎中的作用及意义

目的研究类风湿关节炎（RA）患者外周血糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关基因（GITR）在CD4^＋CD25^＋T细胞中的表达及细胞因子IL-6、IL-17的浓度水平变化,探讨两者在RA发病中的作用。方法流式细胞术检测GITR在CD4^＋CD25^＋T细胞的阳性表达率,ELISA法检测血清中IL-6、IL-17的浓度水平并分析GITR阳性表达率与RA患者DAS28的关系。结果 RA组中的CD4^＋CD25^＋Treg细胞表面GITR阳性表达率（3.03±1.95）%明显低于健康对照组（7.68±2.01）%,RA组中IL-6,IL-17浓度水平明显高于健康对照组（P〈0.05）。GITR阳性表达率与DAS28呈明显负相关。结论 RA患者GITR＋CD4^＋CD25^＋T细胞阳性表达率低下,与RA发病及疾病的活动性有一定的相关性。     

体外扩增小鼠CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的研究

目的研究体外扩增小鼠CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的表面分子标志、分化途径及细胞属性。方法获取超抗原SEB活化后体外扩增的小鼠效应细胞,用抗CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE、NK1.1-APC、TcRVβ8-FITC和CD69-FITC荧光抗体染色后,用流式细胞仪（FCMCalibueBD,USA）鉴定CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的表面分子标志和分化途径。用逆转录聚合酶链反应测定细胞内各种细胞因子和Foxp3基因转录水平。结果体外扩增的细胞中91.92%是CD8^＋T细胞,其中22.75%的细胞是CD8^＋NN1.1＋NKT细胞,高于正常值（0.21±0.19,n=12）108倍以上。19.61%NKT细胞是TcRVβ8＋NN1.1＋NKT细胞。CD69分子的表达由原始0.11%增加到85.95%。CD4＋T、CD3＋T细胞亚群和CD4＋NKT、CD3＋NKT及CD4-CD8-NKT细胞亚群没有增加。扩增细胞TGF-β的mRNA表达呈阳性,不表达Foxp3和细胞因子IL-2、4、5、6、10及IFN-γ。CD8^＋NKT细胞直接由CD8^＋T细胞分化而来。结论 CD8^＋NK1.1^＋NKT细胞的分子特征为CD69＋Foxp3-TcRVβ8＋TGF-β＋CD8^＋NK1.1^＋;它们既不是CD8^＋T调节细胞（Treg.）,也不是CD4^＋NKT细胞,直接由CD8^＋T细胞分化而来,带有TCRVβ8受体,应属于T细胞亚群。     

各类胸腹水中淋巴细胞亚群分布水平的研究

目的 了解各类胸腹水中淋巴细胞分布水平及其对胸腹水性质鉴别诊断的意义.方法 采用流式细胞术测定结核性（30例）和癌性患者（31例）外周血及胸腹水中T淋巴细胞亚群分布,ELISA法检测辅助T淋巴细胞（Th）1和Th2类细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）、IL-12和IL-4的含量.结果 结核性和癌性胸腹水中CD3＋CD4＋T淋巴细胞含量[（73±6）%与（67±20）%]均高于外周血[（51±19）%与（48±14）%]（均P＜0.05）.尽管结核性胸腹水中CD3＋T淋巴细胞数量高于癌性胸腹水（P＜0.05）,但两者CD3＋CD4^＋和CD3＋CD8^＋T淋巴细胞亚群分布差异无统计学意义（P＞0.05）.结核性胸腹水中Th1与Th2类细胞因子比值（IFN-γ/IL-4与IL-12/IL-4）为54±24与82±19,明显高于癌性胸腹水的8±6与19±10（t值分别为10.34和16.28,均P＜0.01）.结论 结核性和癌性胸腹水中均存在CD3^＋CD＋T淋巴细胞聚集,仅靠CD3^＋CD4^＋和（或）CD3^＋CD8^＋淋巴细胞亚群分析不足以鉴别炎性与恶性胸腹水,而Th1、Th2类细胞因子的测定有助于两者的鉴别诊断.     

T细胞亚群、NK细胞活性及Th1/Th2细胞因子漂移在FOLFOX化疗前后的动态变化

目的研究FOLFOX化疗对肠癌根治性术后患者免疫功能的影响。方法83例肠癌患者根治性术后6周取外周静脉血,采用抗体标记流式细胞仪检测T细胞亚群细胞,MTT法测NK细胞活性,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中Th1/Th2细胞因子。1个月为1个疗程,共化疗6个疗程。分别于化疗开始前、化疗结束时和化疗结束后6个月监测外周血CD3^＋T、CD4^＋T和CD8^＋T数量比例,NK细胞活性,以及血清中白细胞介素-2（IL-2）、干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）的动态水平变化。结果CD8^＋T、CD4^＋T/CD8^＋T化疗后明显下降（均〈0.05）,化疗结束后6个月恢复至化疗前水平。化疗组的NK细胞活性在化疗结束时较对照组和自身化疗前低（均〈0.01）;化疗结束后6个月NK细胞活性略低于自身化疗前及对照组同期水平,但差异无显著意义（P〉0.05）。化疗结束时IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平较对照组或自身化疗前低,化疗结束后6个月恢复正常（均P〈0.05）。结论FOLFOX化疗可能降低肠癌根治性术后患者的CD8＋T的数量比例及NK细胞活性,引起Th1、Th2细胞因子血清水平下降,抑制抗肿瘤免疫功能。     

大肠癌患者T细胞亚群和NK细胞活性检测的意义

目的：通过检测大肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性的表达,研究大肠癌患者免疫状况与肿瘤分期的关系,以预测术后恢复情况。方法：采用流式细胞分析法检测60例大肠癌患者和30例对照者外周血中T淋巴细胞亚群及NK细胞活性。结果：大肠癌患者CD4^＋细胞值、CD4^＋／CD8^＋比值下降且NK细胞活性显著降低,CD8^＋细胞值显著高于对照组,这种变化随临床分期的增高更加显著（P〈0．05）;化疗后CD4^＋细胞值、CD4^＋／CD8^＋比值的下降和NK细胞活性的降低及CD8^＋细胞值的增高更为突出（P〈0．01）;术后发生转移的患者CD4^＋细胞值、CD4^＋／CD8^＋比值下降及NK细胞活性下降,CD8^＋细胞值再回升。结论：大肠癌患者细胞免疫功能明显紊乱,并随病情进展及肿瘤转移而加重,切除肿瘤有助于改善患者细胞免疫功能。     

乌贼墨对小鼠T细胞亚群和T细胞活化的影响

目的：研究乌贼墨对小鼠T细胞亚群和T细胞活化的影响。方法：实验组小鼠每天灌胃5%的乌贼墨0.5ml,连续7d。对照组小鼠给予等量生理盐水。流式细胞术检测小鼠外周血CD4^＋T细胞百分比、CD4^＋/CD8^＋比值及IL-2αR（CD25）表达。结果：实验组小鼠外周血CD4^＋T细胞百分比、CD4^＋/CD8^＋比值及IL-2αR（CD25）表达较对照组小鼠均有明显升高,而CD8^＋T细胞却无显著性变化。结论：乌贼墨通过增高CD4^＋T细胞百分比、CD4^＋/CD8^＋比值及IL-2αR（CD25）表达对小鼠免疫功能进行调节。     

卡介菌多糖核酸对尖锐湿疣患者外周血T细胞亚群及其细胞因子表达的影响

目的 研究卡介菌多糖核酸（BCG-PSN）对尖锐湿疣（CA）患者外周血T淋巴细胞亚群及胞内细胞因子表达的影响，探讨BCG-PSN对尖锐湿疣可能的免疫调节机制。方法 采用三色和双色荧光抗体染色技术经流式细胞仪检测18例CA患者在BCG-PSN治疗前后外周血T淋巴细胞亚群及CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞内IL-2、IL-4、IL-12、IFN-γ染色阳性细胞百分率。结果 在BCG-PSN治疗前，CA患者CD3^＋T细胞、CD4^＋T细胞、CD4^＋／CD8^＋比值明显低于对照组（均P〈O．01），CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞内IL-2、IL-12、IFN-γ阳性细胞百分率较对照组明显下降（均P〈0．01），IL-4阳性细胞百分率与对照组比较差异无显著性意义（P〉0．05）；而治疗后CA患者CD3^＋T细胞、CD4^＋T细胞、CD4^＋／CD8^＋比值明显高于治疗前（均P〈O．01）；CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞内IL-2、IL-12、IFN-γ阳性细胞百分率较治疗前升高（均P〈0．01）。结论 BCG-PSN可通过调节尖锐湿疣患者T细胞亚群，纠正患者Th1／Th2模式及Tc1／Tc2模式失衡现象，起到治疗尖锐湿疣的作用。     

卡介菌多糖核酸对哮喘患者外周血CD4^＋T细胞内IFN-γ和IL-4表达的影响

目的观察卡介菌多糖核酸对支气管哮喘患者外周血CD4^＋T淋巴细胞内γ干扰素（interferon-gamma,IFN-γ）、白细胞介素4（interleukin-4,IL-4）的表达的影响。方法60例轻～中度哮喘病患者随机分为卡介菌治疗组（36例）和对照组（24例）,治疗组患者常规治疗加肌肉注射斯奇康1mg,对照组常规治疗＋肌肉注射生理盐水0.5ml,均隔日一次,共12周;用流式细胞仪检测治疗前、后外周血CD4^＋T淋巴细胞内IFN-γ、IL-4的表达。结果治疗组和对照组患者治疗前后表达CD4^＋IFN-γ^＋的细胞百分比无显著变化,而两组治疗后表达CD4^＋IL-4^＋的细胞百分比均下降;并且治疗组较对照组更为显著。结论卡介菌多糖核酸主要通过抑制CD4^＋细胞内IL-4^＋的表达抑制Th2型免疫反应,可能在轻、中度哮喘的治疗中有一定作用。     

模拟HCV HVR1免疫7肽对HCV感染者免疫细胞的影响

目的了解在模拟HCV HVR1免疫7肽f7P）刺激条件下,HCV感染者免疫细胞变化情况。方法分离HCV感染患者外周血单核细胞（PBMC）,和7P共同孵育培养后,应用IL-10、IFN-γ、TNF—α抗体进行细胞内因子染色,应用FACSCalibur流式细胞仪及FACSCalibur软件进行检测分析。结果肝硬化组CD4^＋CD8^-T胞和CD4^-CD8^＋T细胞以及肝炎组的CD4^＋CD8^-T细胞分泌INF-γ明显升高,NK及NKT细胞组也明显升高;肝硬化组CD4^＋CD8^-T细胞及CD4^-CD8^＋T细胞分泌IL-10明显升高,而所有的NK及NKT细胞组则明显下降;NK及NKT细胞分泌TNF—α明显升高。结论7P能够通过调节细胞因子分泌改变免疫细胞的免疫反应方式,可能有利于清除病毒的同时缓解炎症反应。     

糖尿病伴感染病人细胞免疫表型的检测意义

目的探讨2型糖尿病伴感染病人外周血T细胞亚群、NK细胞变化及检测意义。方法用流式细胞仪以单克隆免疫荧光法检测2型糖尿病伴感染病人23例（感染细）和2型糖尿病无感染病人20例（无感染组）T细胞亚群及NK细胞，并与健康体检者对照（对照组）。结果2型糖尿病伴感染组较健康对照组CD3^＋、CD4^＋、NK细胞明显降低（P〈0．01）；2型糖尿病无感染组较健康对照组CD3^＋、CD4^＋、NK细胞显著下降（P〈0．05）；2型糖尿病伴感染组与无感染组比较CD3^＋、CD4^＋、NK细胞显著下降（P〈0．05，P〈0．05，P〈0．01）；2型糖尿病病人CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋比值与健康对照组无显著性差异（P〉0．05）。结论2型糖尿病病人存在机体免疫功能的下降，糖尿病合并感染时可使机体的免疫功能进一步下降，这可能是糖尿病病人易合并感染的重要原因。     

原发性肝细胞癌患者外周血中T细胞及NK细胞的水平变化和临床意义

目的:研究观察原发性肝细胞癌患者外周血T细胞、NK细胞水平,分析T细胞与NK细胞的变化意义。方法:随机抽取2010年7月-2013年2月本院收治的原发性肝细胞癌患者45例、肝脏良性病变患者45例和健康对照组45例作为本次实验的研究对象,检查三组患者的T细胞(包括CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+)及癌组织的NK细胞计数。结果:肝癌组CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD25+均有所下降,与肝脏良性病变组、健康对照组比较差异有统计学意义(P0.05);肝癌组癌组织NK细胞计数有明显上升,与肝脏良性病变组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:原发性肝细胞癌患者有外周血中T细胞的降低,组织NK细胞上升,两者可有效反映患者的免疫状态。     

喉癌患者外周血细胞免疫水平与预后的关系

目的：探讨喉癌患者外周血细胞免疫水平与预后的关系。方法采用流式细胞术检测41例喉癌患者（其中Ⅰ～Ⅱ期17例,Ⅲ～Ⅳ期24例;无淋巴结转移28例,有淋巴结转移13例;术后复发转移11例,无复发转移30例）手术前后外周血淋巴细胞（ CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD19＋）及自然杀伤细胞（ NK）水平。结果手术后41例患者NK水平升高, CD19＋细胞水平下降（ P＜0．05）, CD3＋、CD4＋、CD8＋水平手术前后比较差异无统计学意义（ P＞0．05）;与Ⅲ～Ⅳ期患者比较,Ⅰ～Ⅱ期患者血CD4＋细胞水平显著降低,CD19＋细胞水平显著升高（P＜0．05）;有淋巴结转移喉癌患者外周血CD4＋细胞水平显著下降,NK细胞水平显著升高（P＜0．05）;术后随访1年,复发或转移组外周血CD4＋细胞水平显著下降,NK、CD19＋细胞水平显著升高（P＜0．05）。结论喉癌患者外周血细胞免疫水平对转移及预后判断有一定的临床参考价值。     

术前放化疗对老年直肠癌患者免疫功能的影响

目的探讨术前同期放化疗对进展期中低位直肠癌老年患者的细胞免疫功能的影响.方法35例60～75岁之间进展期中低位直肠癌老年患者,采用术前口服化疗药物卡培他滨（Capecitabine,Xeloda）单药方案,每日1000mg/m^2,连用2两周,休息1周,共两个疗程;放疗选择在口服化疗药物2d后进行,采用常规分割放疗,照射次数10次,三野照射总计量30Gy.治疗结束3周后手术.分别于入院当天、手术前1天,手术后7d,术后1月抽取患者外周血,采用流式细胞术（flow cyometry,FCM）检测T细胞亚群百分率（CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋）及NK细胞含量变化.结果术前放化疗前后,患者外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋及NK细胞水平无明显差异（P〉0.05）,手术后7d、CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋及NK细胞水平较入院当天明显降低,CD8^＋升高（P〈0.05）,术后1月CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋及NK细胞含量较术后第7天均升高,CD8^＋明显降低（P〈0.05）,与术前相比细胞免疫无明显差异（P〉0.05）.结论术前同期放化疗对进展期中低位直肠癌老年患者的细胞免疫功能无明显影响,是一种安全有效的治疗方法.     

不同麻醉方法对癌症患者T细胞亚群及NK细胞的影响

目的 比较不同麻醉方法对结肠癌根治术患者围术期免疫功能的影响.方法 将60例结肠癌患者随机分成两组,A组采用全凭静脉麻醉,B组采用静脉麻醉复合硬膜外阻滞,分别于麻醉前（T0）、切皮后（T1）、术毕（T2）、术后1 d（T3）、以及术后3 d（T4）从颈内静脉抽取血液,测定CD3＋、CD4＋、CD8＋和自然杀伤细胞（NK细胞）.结果 与T0时点相比较,T1、T2时点两组患者CD3＋、CD4＋、CD8＋和NK细胞均降低;B组在T3时点CD3＋、CD4＋、CD＋和NK细胞有所恢复,A组在T4时点CD3＋、CD4＋、CD8＋和NK细胞有所恢复.结论 结肠癌患者术中和术后存在免疫功能抑制,全麻复合硬膜外阻滞的患者术后免疫功能恢复较早.     

自体CIK细胞治疗恶性肿瘤免疫表型和杀伤活性变化

目的观察自体CIK细胞治疗恶性肿瘤前后免疫袁型和杀伤活性变化。方法采用流式细胞术检测50例肿瘤患者CIK细胞治疗前、后免疫表型的变化,采用3H—TdR释放法检测杀伤活性的变化。结果CIK治疗后,CD3^＋、CD4^＋细胞百分率上升,CD8^＋细胞百分率下调,CD4^＋／CD8^＋比值上升,CD19细胞百分率下降,与治疗前比较差异有统计学意义（P〈0．05）,但CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞绝对值未达到健康者水平（P〉0．05）。治疗后NK细胞百分率明显升高（P〈0．05）,达到健康者水平（P〉0．05）。在杀伤活性的研究中,与CIK细胞治疗前（19±6）％相比,治疗后杀伤活性百分率（22±5）％明显升高,达17．5％（P〈0．01）,但未达到健康者水平（P〈0．05）。结论自体CIK细胞治疗能明显提高肿瘤患者细胞免疫功能。