桂枝茯苓丸对荷瘤鼠p53及CD44的影响

目的：研究桂枝茯苓丸（GFW）对S180荷瘤小鼠移植瘤生长和转移的抑制作用,探讨其作用机制。方法：复制S180荷瘤小鼠模型,计算抑瘤率。采用SABC免疫组化法检测肿瘤细胞中细胞周期调控基因p53及细胞黏附分子CD44表达。结果：桂枝茯苓丸有抑瘤作用,抑瘤率为33.48%。GFW与环磷酰胺（CY）合用抑瘤作用显著提高,抑瘤率为57.17%。桂枝茯苓丸可下调肿瘤细胞突变型p53蛋白的表达,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。且可抑制细胞黏附分子CD44的表达,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：桂枝茯苓丸具有明显抑瘤作用,且对化疗药物环磷酰胺抗S180肉瘤具有增效作用。其抑瘤机制可能是GFW影响肿瘤细胞细胞周期调控基因p53和细胞黏附分子CD44的表达,即通过影响肿瘤细胞增殖周期,降低肿瘤细胞与基质之间的黏附,从而达到抑制肿瘤细胞生长和转移的作用。     

桂枝茯苓丸诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的探讨桂枝茯苓丸诱导肿瘤细胞凋亡机制,为桂枝茯苓丸(GFW)开发应用提供实验依据.方法计算抑瘤率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,免疫组化法测定P21waf/cip蛋白表达,原位杂交法检测Survivin mRNA表达,电镜观察肿瘤细胞超微结构.结果GFW抑瘤率为38.93%,流式细胞仪检测GFW组凋亡率17.79%,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).GFW上调肿瘤细胞P21waf/cip蛋白表达,下调Survivin mRNA表达.GFW组镜下可见瘤细胞以凋亡变化为主.内膜结构完好,核膜清晰,细胞核固缩,染色质团块状散布核内或边集核膜下,并可见凋亡小体.结论GFW诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与上调P21及下调Survivin mRNA表达密切相关.     

桂枝茯苓丸对荷瘤鼠细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:探讨桂枝茯苓丸诱导肿瘤细胞凋亡机制,为桂枝茯苓丸(GFW)开发应用提供实验依据。方法:计算抑瘤率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,免疫组化法测定P21waf/cip蛋白表达,原位杂交法检测Survivin mRNA表达,电镜观察肿瘤细胞超微结构。结果:GFW抑瘤率为38.93%,流式细胞仪检测GFW组凋亡率17.79%,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。GFW上调肿瘤细胞P21waf/cip蛋白表达,下调Survivin mRNA表达。GFW组镜下可见瘤细胞以凋亡变化为主。内膜结构完好,核膜清晰,细胞核固缩,染色质团块状散布核内或边集核膜下,并可见凋亡小体。结论:GFW诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与上调P21及下调Survivin mRNA表达密切相关。     

桂枝茯苓丸对荷瘤小鼠瘤组织Survivin及P21~(waf/cip)的影响

目的:探讨桂枝茯苓丸抑瘤作用的机制。方法:取30只小鼠,每只鼠右侧腋下皮下注射0.2ml的S180瘤细胞悬液,将其随机分为模型组、中药桂枝茯苓丸(GuizhiFuling Bolus,GFW)组、环磷酰胺(cyclophosphane,CY)组,每组10只,另取10只未荷瘤小鼠作为正常对照。模型组用生理盐水灌胃,每天0.2ml/10g;中药组用GFW给小鼠灌胃,每天0.2ml/10g;环磷酰胺组于小鼠腹腔注射CY,每天20mg/kg。各组小鼠均于接种后次日给药,每天给药1次,连续10d后,小鼠脱颈处死,取腋下实体瘤,计算抑瘤率。免疫组化法测定P21waf/cip蛋白表达,原位杂交法检测存活素(Survivin)mRNA表达。结果:GFW抑瘤率为38.93%,GFW上调肿瘤细胞P21waf/cip表达,下调Survivin表达。结论:GFW可抑制肿瘤细胞生长,其机制可能与上调P21waf/cip及下调Survivin mRNA表达密切相关。     

桂枝茯苓丸对荷瘤鼠肿瘤细胞凋亡的影响

目的：探讨桂枝茯苓丸诱导肿瘤细胞凋亡机制，为桂枝茯苓丸（GFW）开发应用提供实验依据。方法：计算抑瘤率，流式细胞仪测定细胞凋亡率，电镜观察肿瘤细胞超微结构。原位杂交法检测Survivin mRNA表达。结果：GFW抑瘤率为38．93％，流式细胞仪检测GFW组凋亡率17．79％，与模型组比较，差异有统计学意义。GFW组镜下可见瘤细胞以凋亡变化为主。内膜结构完好，核膜清晰，细胞核固缩，染色质团块状散布核内或边集核膜下，并可见凋亡小体。GFW下调肿瘤细胞Survivin mRNA表达，与模型组比较，差异有统计学意义。结论：GFW诱导肿瘤细胞凋亡，其机制可能与下调survivin mRNA表达密切相关。     

乌梅丸对大鼠胃癌及癌前病变中端粒酶和PCNA表达的影响

目的：探讨乌梅丸对胃癌及癌前病变中端粒酶和PCNA的表达的影响。方法：建立大鼠胃黏膜癌病变模型,采用TRAP-ELISA方法检测大鼠胃黏膜端粒酶活性,检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果：低剂量乌梅丸组（简称低剂量组）中重度异型增生病变数少于模型组,存在统计学差异（P〈0.05）,高剂量乌梅丸组（简称高剂量组）中重度异型增生病变数少于低剂量组,存在显著性差异（P〈0.01）;低剂量组端粒酶活性低于模型组,存在统计学差异（P〈0.05）,高剂量组端粒酶活性低于低剂量组,存在统计学差异（P〈0.05）;低剂量组PCNA阳性表达率低于模型组,存在统计学差异（P〈0.05）,高剂量组PCNA阳性表达率低于低剂量组,存在统计学差异（P〈0.05）。结论：乌梅丸能抑制端粒酶活性和PCNA的表达,并且呈剂量依赖性,这可能是乌梅丸干预胃癌及癌前病变的机制之一。     

桂枝茯苓丸与桂枝水煎剂对前列腺增生小鼠影响的实验研究

目的：研究桂枝茯苓丸和桂枝水煎剂对前列腺增生模型小鼠血浆酸性磷酸酶活性、双氢睾酮以及雌二醇水平的影响。方法：皮下注射丙酸睾酮素造成小鼠前列腺增生动物模型。分组给药，于末次给药治疗24小时后，摘眼球取血，检测双氢睾酮（DHT）、雌二醇（E）、总酸性磷酸酶（ACP）含量、非前列腺特异性酸性磷酸酶（NPAP），并计算前列腺特异性酸性磷酸酶（PAP）。结果：桂枝和桂枝茯苓丸各组均明显降低血浆PAP、DHT，与模型组比较差异显著（P〈0.01）；与模型组比较，除桂枝低剂量组外，其余各给药组均可升高雌二醇（E2）（P〈0.05）。中、大剂量桂枝和桂枝茯苓丸组之间的DHT、ACP和PAP水平有显著差异（P〈0．01，P〈0．05）。结论：桂枝茯苓丸和桂枝抑制良性前列腺组织增生的作用与血液特异性酸性磷酸酶及性激素水平变化有关，且桂枝茯苓丸具有中药复方优势。     

血竭加味颗粒对自然衰老子宫肌瘤模型小鼠IGF-Ⅰ表达的影响

目的：建立自然衰老和青年小鼠子宫肌瘤模型,研究血竭加味颗粒对子宫肌瘤模型小鼠子宫组织中胰岛素样因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）的表达。方法：采用雌激素负荷法建立子宫肌瘤模型。将40只11月龄自然衰老小鼠、50只2～3月龄青年小鼠ICR雌性小鼠各随机分成5组,分别为模型组、对照组、血竭加味颗粒组、米非司酮组、桂枝茯苓胶囊组,通过观察子宫系数、子宫组织中IGF-Ⅰ的表达比较各组差异。结果：（1）血竭加味颗粒、米非司酮、桂枝茯苓胶囊均对雌激素负荷子宫肌瘤模型小鼠均有明显抑瘤作用。（2）血竭加味颗粒、米非司酮对自然衰老小鼠子宫组织IGF-Ⅰ的表达有显著抑制作用（P〈0.01）,桂枝茯苓胶囊对IGF-Ⅰ表达的抑制作用相对较小（P〈0.05）。结论：血竭加味颗粒抑制子宫组织中IGF-Ⅰ的阳性表达可能为抑制子宫肌瘤的机制之一。     

桂枝茯苓丸对盆腔炎模型大鼠子宫、卵巢组织MMP-9表达影响的实验研究

目的:观察桂枝茯苓丸对盆腔炎模型大鼠子宫、卵巢组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,旨在为临床运用活血化瘀药物桂枝茯苓丸治疗盆腔炎性疾病提供参考。方法:144只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、甲硝唑组和桂枝茯苓丸组;运用"混合细菌接种"法进行造模,造模成功后第7 d给予相关药物治疗21 d。记录大鼠一般情况,免疫组化法测定各组大鼠子宫、卵巢组织MMP-9的表达。结果:模型组大鼠一般情况、体质量与正常对照组比较差异有统计学意义(P0.05);桂枝茯苓丸组与甲硝唑组比较有显著统计学意义(P0.01)。模型组大鼠子宫、卵巢组织MMP-9表达较正常组明显升高,阳性对照组和桂枝茯苓丸组MMP-9表达较模型组显著降低(P0.01),桂枝茯苓丸组表达低于阳性组(P0.05)。结论:桂枝茯苓丸能够降低盆腔炎大鼠子宫和卵巢组织的MMP-9表达,减轻盆腔组织的粘连。     

青蒿琥酯对H22小鼠肿瘤VEGF表达的影响

目的：观察青蒿琥酯对H22肝癌小鼠的抑瘤作用及对肿瘤VEGF表达的影响。方法：取H22肝癌细胞接种于小鼠右腋皮下,随机分为模型对照组（Control）、环磷酰胺组（CTX）组及青蒿琥酯15mg/kg组、30mg/kg组、45mg/kg组、60mg/kg组,连续腹腔注射给药两周后,剖瘤称重,计算抑瘤率,免疫组化法检测肿瘤VEGF表达情况。结果：与模型对照组比较,青蒿琥酯各剂量组均不同程度的抑制肿瘤生长（P〈0.01）,其中青蒿琥酯45mg/kg组抑瘤率为65.26%,效果与CTX相当,优于青蒿琥酯其它各剂量组（P〈0.01）;各治疗组能降低肿瘤组织VEGF表达,其中ATS 45mg/kg组与CTX组降低作用明显（P〈0.05）。结论：青蒿琥酯明显抑制肝癌细胞生长,抑瘤机理与抑制肿瘤组织VEGF表达有关。     

桂枝茯苓丸对S180荷瘤鼠移植性肿瘤细胞转移影响的实验研究

目的:探讨桂枝茯苓丸(GFW)对S180荷瘤小鼠肿瘤转移的影响。方法:复制S180荷瘤小鼠模型,分为模型组、桂枝茯苓丸组、环磷酰胺组、联合用药组。采用ELISA法检测各组小鼠血清中VEGF的含量,SABC免疫组化法检测肉瘤组织中转移抑制基因nm23H1表达及细胞黏附分子CD44表达。结果:与模型组相比,GFW能显著降低荷瘤鼠血清中VEGF的含量(P<0.05)。GFW可促进转移抑制基因nm23H1的表达,抑制细胞黏附分子CD44的表达,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GFW具有一定的抑制肿瘤转移的作用。     

艾灸预刺激对AD模型大鼠细胞周期蛋白CDK2、p21／cip的影响

目的通过观察艾灸预刺激对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠细胞周期蛋白CDK2、p21／cip的影响,探讨艾灸预刺激防治AD的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、预艾灸组,每组各10只,以大鼠海马注入A131—42制作AD模型,预艾灸组采用艾务温和灸“百会”、“肾俞”两穴,免疫组化实验测定大鼠海马区CDK2、p21／cip蛋白的表达。结果预艾灸组经过2个月的预艾灸治疗,CDK2蛋白阳性细胞教相应减少,p21／cip蛋白阳性细胞数相应增加,与模型组比较有显著性差异（P〈0．01）。蛄论艾灸预刺激可调控细胞周期蛋白的表达,通过降低CDK2的表达,增加p21／tip的表达来抑制AD的病理改变,达到防治AD的目的。     

皂角刺抑制小鼠宫颈癌U14的生长及对增殖细胞核抗原和p53表达的影响

目的:研究皂角刺醇提物对小鼠宫颈癌U14生长的抑制作用及对增殖细胞核抗原(PCNA)和突变型p53蛋白表达的影响。方法:观察皂角刺醇提物对U14实体瘤和腹水瘤的抑瘤率和生命延长率,并用免疫组化SP法检测PCNA和突变型p53蛋白阳性细胞表达数。结果:以阴性对照组为基数,皂角刺醇提物3个剂量组及环磷酰胺(CTX)阳性对照组实体瘤各组抑瘤率分别为47.44%,59.49%,63.92%,73.42%(P<0.01);腹水瘤各组生命延长率分别为52.21%,67.26%,78.76%,95.58%(P<0.01)。同时各组药物对PCNA和突变型p53蛋白的表达水平也有不同程度抑制作用(P<0.01,P<0.05)。结论:皂角刺对小鼠宫颈癌U14的生长有一定的抑制作用,其机制可能与抑制PCNA和突变型p53蛋白的表达有关。     

藤蟾方对S_(180)小鼠P53和PCNA蛋白表达的影响

目的　探讨藤蟾方对S180 小鼠的抑瘤作用及对P5 3和增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白表达的影响。方法　通过体内实验 ,观察藤蟾方高、中、低剂量对S180 小鼠的抑瘤作用 ,用免疫组化法检测P5 3和PCNA的蛋白表达水平。结果　给药 10d后 ,藤蟾方高、中、低剂量组及 5 -氟脲嘧啶组抑瘤率分别为 2 6 .5 3% ,32 .5 6 % ,18.0 9%和 6 0 .19%。同时各药物组对P5 3和PC NA的表达水平也有不同程度的影响 ,以藤蟾方中剂量组最为明显。结论　藤蟾方对小鼠肉瘤S180 的生长具有抑制作用 ,其机制可能与抑制突变型P5 3和PCNA的蛋白表达有关。     

冠心舒通胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞凋亡影响的实验研究

目的:探讨冠心舒通胶囊对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤细胞凋亡的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(10只)、药物组(10只)。模型组和药物组大鼠通过穿线结扎左冠状动脉前降支与松开的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型(心肌缺血30min,再灌注3h)。假手术组只穿线不结扎。药物组大鼠在模型建立前5天开始每天给予冠心舒通胶囊,每次按1.5g/kg取药,溶于生理盐水,6mL/kg灌胃,每天两次,假手术组和模型组只给予同等剂量的生理盐水灌胃。各组心肌缺血30min,再灌注3h取材,采用缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数(AI);免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax基因蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组Bax表达增强,Bcl-2表达减弱(P<0.01);与模型组比较,冠心舒通胶囊组,AI、Bax表达下降(P<0.01),Bcl-2表达上调(P<0.05)。结论:冠心舒通胶囊通过抑制心肌细胞凋亡,下调Bax基因蛋白表达,上调Bcl-2基因蛋白表达,起到心肌缺血再灌注损伤的保护作用。     

灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠p53和bcl-2蛋白表达影响的实验研究

[目的]探讨灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及其抑瘤作用机制。[方法]采用体内实验法,于无菌条件下抽取传代7d、生长良好的S180荷瘤小鼠腹水,无菌生理盐水1：3稀释（约含瘤细胞2×10g／L）,按0．2mL／只接种于消毒后的小鼠右前肢腋部皮下,制成肿瘤模型,经口灌胃灵芪胶囊11d后,称取小鼠体质量,脱椎处死小鼠,取脾脏及胸腺称质量并计算胸腺指数和脾脏指数。用免疫组化法检测各组凋亡相关基因突变型p53和bcl-2基因的表达。[结果]灵芪胶囊在明显抑制肿瘤生长的同时不降低体质量,在一定剂量对荷瘤动物的免疫器官指数无明显影响,明显优于化疗药物;灵芪胶囊3个剂量组突变型p53基因和bcl-2基因的表达均小于模型组。[结论]灵芪胶囊对S180荷瘤小鼠有明显抑瘤作用,其机制可能与抑制突变型p53基因和bcl-2基因表达有关。实验证明灵芪胶囊不失为一种很有前途的抗癌中药。     

艾灸预刺激对AD大鼠细胞周期调节因子CyclinA,p21/cip的影响

目的通过观察艾灸预刺激对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠细胞周期调节因子CyclinA、p21/cip的影响,以探讨艾灸防治AD的作用机理。方法将SD大鼠随机分为4组,即正常组、假手术组、模型组、预艾灸组,每组10只,以双侧海马注入Aβ1-42制作AD大鼠模型,造模前预艾灸组采用艾条温和灸"百会"、"肾俞"穴,采用免疫组化法测定大鼠海马区CyclinA、p21/cip的阳性细胞数。结果通过3个疗程的预艾灸治疗,预艾灸组大鼠海马区CylinA阳性细胞数较模型组有显著降低(P<0.01),p21/cip阳性细胞数有显著增强(P<0.01)。结论艾灸预刺激对异常表达的细胞周期相关蛋白有一定的调节作用,从而减少AD的病理改变或相关的细胞凋亡,达到防治AD的目的 。     

一贯煎对肝癌JAK1/STAT1信号通路及其下游凋亡相关蛋白表达的影响

目的:观察一贯煎对肝癌细胞增殖和Janus蛋白酪氨酸激酶/信号转导和转录活化蛋白(JAK1/STAT1)信号通路及其下游凋亡相关蛋白原癌基因(C-myc),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),p53表达的影响。方法:雄性昆明小鼠50只,随机均分为模型组,环磷酰胺[CTX,50 mg·kg-1·(2 d)-1]组,一贯煎高、中、低剂量(46,23,11.5 g·kg-1·d-1)组。腋下注射H22细胞建立小鼠荷瘤模型,一贯煎高、中、低剂量组造模前两周开始用药,CTX组造模后开始给药,模型组造模后灌胃等体积生理盐水,造模后继续给药2周。处死各组小鼠,取瘤组织称重,免疫组织化学法检测肿瘤组织JAK1,STAT1蛋白磷酸化水平,蛋白电泳法检测C-myc,Bcl-2,p53蛋白的表达。结果:与模型组比较,一贯煎(46,23,11.5 g·kg-1·d-1)及CTX均具有显著的抑瘤作用(P0.01);一贯煎高、中剂量均可明显降低JAK1蛋白磷酸化水平(P0.05),明显提高STAT1蛋白磷酸化水平(P0.05);一贯煎高剂量可明显降低C-myc蛋白表达,并促进p53蛋白表达,一贯煎高、中剂量可明显降低Bcl-2蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论:一贯煎能抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与控JAK1/STAT1磷酸化,促进其下游p53蛋白表达,抑制其下游Cmyc,Bcl-2蛋白表达,从而促进肝癌细胞凋亡有关。     

白附子混悬液对荷瘤小鼠p16、bcl-2的表达及端粒酶活性的相关性研究

[目的]探讨白附子混悬液(SGTR)对荷瘤小鼠端粒酶活性的调节及对p16、bcl-2的相关表达的研究。[方法]采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测小鼠血清中端粒酶浓度;用免疫组织化学方法测定H22肿瘤组织中p16和bcl-2蛋白的表达情况来推断SGTR对肿瘤细胞凋亡机制的作用。[结果]SGTR可上调p16蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.01);下调bcl-2蛋白的表达水平(P<0.01),抑制H22荷瘤小鼠体内端粒酶活性(P<0.01)。[结论]SGTR通过抑制端粒酶活性、下调凋亡基因bcl-2的表达及上调抑癌基因p16的表达从而促进肿瘤细胞凋亡来达到抗肿瘤的作用。