大鼠脂肪肝肝郁脾虚证的模型

目的:建立适宜于抗脂肪肝肝郁脾虚证中药复方活性发现、药效评价、新药研发及中医方-证对应的病证结合动物模型。方法:根据中医病因病机的演变规律和现代临床病理机制的研究,建立适宜于脂肪肝肝郁脾虚证模型评价的证候积分表,并选择联苯双酯滴丸和三七脂肝丸作为模型反证药物,模型组大鼠每天按分组给予不同配比的高脂低蛋白饲料和不同浓度的乙醇,每周2次腹腔注射猪血清,联苯双酯滴丸组按8.1 mg·kg~(-1)给药,三七脂肝丸组按2.7 g·kg~(-1)给药,连续给药14 d。实验期间,观察大鼠的一般情况、体重、日食量、日水量,并进行中医证候积分,实验结束后,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量,并对肝组织进行病理学检查。结果:与正常组比较,模型组大鼠的体重、日食量、日饮水量增加缓慢,指标ALT,AST,γ-GT,TC,TG,LDL-C水平显著升高,HDL-C水平降低,病理学检查可见脂肪肝大鼠肝脏脂肪变性、脂肪粒,且行为学观察发现,大鼠出现的主证、次证均符合肝郁脾虚证的证候表现,表明3个模型组均造模成功,其中,模型1组有3只大鼠死亡,模型2组有1只大鼠死亡。反证药物组可不同程度改善上述病变表现。结论:脂肪肝肝郁脾虚证动物模型具有死亡率低、耗时短,可用于抗脂肪肝(肝郁脾虚证)中药复方活性发现、药效评价和临床方证相关性研究与机制探讨。     

改良高脂及乙醇加情绪刺激诱导大鼠肝硬化肝郁脾虚证模型的建立

目的:构建能与肝硬化肝郁脾虚证临床证候表现密切相关的、并适宜于中药活性发现和药效评价的稳定可靠的大鼠肝硬化肝郁脾虚证病证结合模型。方法:70只大鼠按体重随机分为正常组;模型Ⅰ组、水飞蓟宾葡甲胺片Ⅰ组:采用79.5%单纯玉米粉加20%猪油,0.5%胆固醇制成的高脂低蛋白饲料饲养;30%乙醇复合因素造模连续4周;改良模型Ⅱ组、水飞蓟宾葡甲胺片Ⅱ组:采用由79.5%单纯玉米粉加20%猪油,0.5%胆固醇制成的高脂低蛋白饲料饲养,10%乙醇灌胃1周,5%乙醇灌胃3周的方法造模;改良模型Ⅲ组、水飞蓟宾葡甲胺片Ⅲ组:采用由89.5%单纯玉米粉加10%猪油,0.5%胆固醇制成的高脂低蛋白饲料饲养,乙醇灌胃方法同模型Ⅱ组;水飞蓟宾葡甲胺片Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组均按0.108 g·kg-1灌胃水飞蓟宾葡甲胺片治疗。实验期间除正常组外其余各组大鼠均给予相同程度、不可预知的情绪刺激,每日观察各组大鼠一般状态,模拟临床肝硬化肝郁脾虚证临床证候表现,分析并提出适宜于大鼠的证候表现,并每日按积分标准进行赋分,记录大鼠的体重、日食日水量,实验结束眼球取血检测大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT),天门冬氨酸转氨酶(AST),透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ),IV型胶原(IV-C),腺苷脱氨酶(ADA),单胺氧化酶(MAO)和A/G等与肝硬化密切相关指标的水平,苏木素-伊红(HE)染色观察各组肝组织病理学变化。结果:正常组无大鼠死亡,营养状况良好;模型组大鼠饮食饮水量降低,体重增加缓慢,毛质粗糙,精神萎靡,个别老鼠趾甲易出血;其中模型Ⅰ组死亡4只,模型Ⅱ组死亡3只,模型Ⅲ组无死亡情况。与正常组比较,模型组大鼠血清ALT,AST,HA,PC-Ⅲ,IV-C,ADA,MAO水平显著升高,A/G显著降低,脏脑比例及证候积分显著升高(P0.01);各给药组大鼠血清ALT,AST,HA,PC-Ⅲ,IV-C,ADA,MAO水平与模型Ⅰ组相比明显降低,A/G明显升高,脏脑比例及证候积分明显降低(P0.05,P0.01),模型组肝组织形态学检查发现有假小叶形成,且汇管区出现典型的病变,阳性药组上述病变可呈现不同程度改善。结论:改良后的大鼠肝硬化肝郁脾虚证模型建立方法可提高造模成功率,降低造模导致大鼠的死亡率,具有成模时间短,与临床肝硬化肝郁脾虚证的证候吻合度高、可行性好,证候表现稳定的特点,以适宜于肝硬化肝郁脾虚证临床方证相关基础性研究和中药复方活性发现、药效评价与机制探讨。     

265例非酒精性单纯性脂肪肝中医证候因子分析

目的 用因子分析的方法探讨非酒精性单纯性脂肪肝的证候规律.方法 收集265例非酒精性单纯性脂肪肝患者的症状、舌、脉等临床资料,运用因子分析法,对37个症状和舌脉指标进行因子分析.结果 得出7个证候,即肝郁化火、脾虚证,脾虚痰湿蕴结证,肝肾阴虚证,肝气郁滞血瘀证,肝郁脾虚证,脾虚证,血瘀证.结论 一些不能直接观测到的证候...     

逍遥散对肝郁脾虚证和肝损伤模型大鼠干预作用的代谢组学研究

目的：利用代谢组学方法探讨肝郁脾虚证和肝损伤模型的共同本质及逍遥散的干预作用。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、肝郁脾虚证模型组、肝郁脾虚证给药组、肝损伤模型组、肝损伤给药组,每组8只。采用夹尾激怒致肝郁联合番泻叶致脾虚的方法制备肝郁脾虚证模型,采用四氯化碳致肝损伤法制备肝损伤大鼠模型。肝郁脾虚证给药组、肝损伤给药组灌胃2 g/ml逍遥散液,其余各组灌胃等体积生理盐水,连续给药28 d。末次给药后12 h,采用气相色谱-质谱法分析各组大鼠血清代谢物谱及含量变化,采用 HE 染色法观察各组大鼠肝组织病理学变化。结果肝郁脾虚证模型组和肝损伤模型组大鼠肝组织均出现细胞核萎缩、崩解、变性坏死并伴有淋巴细胞浸润等病理改变,且血清中甘氨酸、琥珀酸、丙酸、蛋氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸含量较空白对照组升高(P＜0.05)。逍遥散可降低血清中甘氨酸、琥珀酸、丙酸、蛋氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸含量(P＜0.05)。结论逍遥散可调节一碳单位、含硫氨基酸、芳香族氨基酸等特殊代谢及三羧酸循环,发挥肝保护作用。     

265例非酒精性单纯性脂肪肝中医证候因子分析

目的用因子分析的方法探讨非酒精性单纯性脂肪肝的证候规律。方法收集265例非酒精性单纯性脂肪肝患者的症状、舌、脉等临床资料,运用因子分析法,对37个症状和舌脉指标进行因子分析。结果得出7个证候,即肝郁化火、脾虚证,脾虚痰湿蕴结证,肝肾阴虚证,肝气郁滞血瘀证,肝郁脾虚证,脾虚证,血瘀证。结论一些不能直接观测到的证候规律通过分析间接反映出来,为临床提供一些较为客观的诊断和治疗依据。     

慢性萎缩性胃炎证病结合模型的复制

目的：复制大鼠CAG肝郁证、脾虚证、湿热证的证病结合模型，为CAG的辨证论治研究提供可靠的动物模型。方法：在单纯CAG疾病造模的基础上，采用苦寒泻下法加饥饱失常法建立脾虚证候模型，采用夹尾加肾上腺素注射法建立肝郁证候模型，采用高脂高糖饮食＋人工气候模拟建立湿热证候模型。观察大鼠饲养过程中的一般状况及体重，镜下观察各组大鼠胃黏膜炎症程度和萎缩程度。结果：各模型组大鼠一般情况变化符合中医脾虚证、肝郁证、湿热证表现。各模型组大鼠胃黏膜出现慢性炎症，各证候模型组中以脾虚CAG组大鼠胃黏膜炎症最重，各模型组大鼠胃黏膜厚度较正常对照组均有明显变薄，以脾虚CAG组大鼠胃黏膜厚度最薄，药物干预后，各证候模型组大鼠胃黏膜炎症明显减轻，厚度较药物干预前都有明显增加。结论：大鼠CAG肝郁证、脾虚证、湿热证的证病结合模型复制成功。脾虚证CAG大鼠胃黏膜炎症和萎缩程度最重。     

肝纤维化病证结合模型的研制

目的:制备客观、公认的肝纤维化病证结合模型.方法:分别设立正常对照组、单纯肝纤维化组、肝纤维化肝郁脾虚证组和气虚血瘀证组,各模型组先用CCl4注射法复制肝硬化疾病模型,然后肝郁脾虚证组附加夹尾和大黄灌胃法、气虚血瘀证组附加游泳疲劳法,并以相应药物干预以反证模型制备的成功.对各组大鼠进行一般情况和肝组织病理观察.结果:各模型组均出现一般情况较差;病理检查示不同程度肝纤维化表现;肝郁脾虚证组和气虚血瘀证组均出现相应的中医证候表现.结论:按本实验方法复制的肝纤维化病证结合模型既符合肝纤维化病理特征,又能体现中医不同证候特点.     

方剂反证在构建病证结合动物模型中的作用以逍遥散反证抑郁症肝郁脾虚证为例

目的 通过方剂反证寻找病证结合动物模型的证候稳定时间窗,并验证证候的稳定可靠性。方法 采用慢性不可预知温和应激（CUMS）法并通过体质量测量、糖水消耗实验、行为学实验、脑组织5-羟色胺（5-HT）检测建立大鼠抑郁症模型,通过人类临床症状等效转化为大鼠宏观表征等方法来进行大鼠的肝郁脾虚证的证候判别,基于宏观表征动态采集量表用逍遥散反证抑郁症肝郁脾虚证病证结合动物模型的稳定可靠性。结果 大鼠16周龄时,CUMS组（应激8周）大鼠糖水消耗量、旷场实验穿格次数和活动总距离均明显低于正常组（P<0.05）;免疫组化结果显示,CUMS组大鼠脑组织海马CA2区5-HT含量也明显低于正常组（P<0.05）,说明抑郁症疾病的模型制作成功。CUMS组大鼠肝郁脾虚证出现于14周龄（应激后6周）,16周龄（应激后8周）时数量达到最大值占比约70%,往后数量逐渐下降。方剂反证CUMS组14,16,18,20,22周龄大鼠证候积分分别减少66.6%,70.7%,54.8%,50.4%,44.8%,证候疗效分别为有效、显效、有效、有效、有效。结论 CUMS组大鼠14~16周龄即CUMS 6~8周是抑郁症肝郁脾虚证稳定可靠的时间窗。     

痰热清注射液对ANIT诱导大鼠急性肝损伤的防护作用

目的 探讨痰热清注射液对ANIT诱导大鼠急性肝损伤的影响.方法 采用α-异硫氰酸萘酯(ANIT)灌胃诱导大鼠急性肝损伤,检测大鼠血清ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL和IBIL水平,HE染色观察肝组织病理变化.结果 痰热清注射液各剂量组均可明显降低ALT、AST、TBIL、DBIL和IBIL水平;痰热清注射液中、低剂鼍组均可明显降低TBA水平;痰热清注射液各剂量组能明显改善肝细胞组织坏死损伤.结论 痰热清注射液对ANIT诱导的大鼠急性肝损伤具有保护作用.     

葫芦茶苷对肝损伤大鼠肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响及保肝作用研究

目的:研究葫芦茶苷对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤大鼠的保护作用及对肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组,肝损伤模型组,阳性对照组(水飞蓟宾胶囊),葫芦茶苷低中高剂量组(3、6、12 mg·kg-1),每日灌胃给药1次,连续给药14 d,正常组与模型组每天灌服等体积的生理盐水,末次灌胃给药1 h后,除空白对照组外,皮下注射CCl4原液建立急性肝损伤大鼠模型,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和γ-氨基酰转肽酶(γ-GT)、胆碱酯酶(CHE)、总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL);检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和肝微粒体一氧化氮(NO)的含量,并检测肝组织Caspase-3,Caspase-8活性。结果:与模型组比较,葫芦茶苷能降低血清ALT,AST,LDH,γ-GT活性及TBA和TBIL含量(P<0.05或P<0.01),升高血清CHE含量;降低肝微粒体NO含量和MDA含量,增加肝组织SOD,GSH-PX活性和GSH含量,并降低肝组织Caspase-3,Caspase-8的活性(P<0.05或P<0.01)。结论:葫芦茶苷对四氯化碳致急性肝损伤大鼠具有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用以及下调Caspase-3和Caspase-8的活性有关。     

芍药苷对大鼠慢性肝损伤及肝纤维化的保护作用

目的观察芍药苷(PF)对四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝损伤及纤维化的治疗作用。方法将大鼠随机分为6组,利用高脂低蛋白饲料和CCl4制作大鼠肝损伤模型,并同时给予相应药物灌胃,9周后取材送检。血液生化检测肝功能指标:丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil);放射免疫法测定肝纤维化指标:透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ);制备肝干粉,分光光度计检测羟脯氨酸(Hyp)。结果模型组大鼠血清ALT、AST、HA、CⅣ和肝组织中Hyp明显高于正常组(P<0.05或0.01);与模型组比较,芍药苷3个剂量组可明显降低肝纤维化大鼠血清中ALT、AST;芍药苷408,0 mg/kg剂量组可明显降低肝纤维化大鼠血清中HA含量及根据肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量计算的胶原蛋白量(P<0.05和0.01)。结论芍药苷对慢性肝损伤及纤维化有保护作用。     

慢性乙型病毒性肝炎中医辨证分型与肝功能指标相关性研究

目的:探讨慢性乙型病毒性肝炎其中医辨证分型与西医肝功能检测指标间的相关性。方法:随机抽选235例慢性乙肝患者,根据其临床征象辩证为肝郁脾虚(74例)、湿热中阻(80例)、脾肾阳虚(20例)、肝肾阴虚(25例)以及瘀血阻络(36例)5组,比较5种证型肝功能(ALT、AST、ALT/AST、TBIL、DBIL)等指标的检测差异。结果:湿热中阻、肝郁脾虚两型中ALT(235.77±113.31、197.34±83.39)μ/L、AST(184.53±73.85、135.61±62.17)μ/L指标明显高于其他三型(P<0.05);湿热中阻型患者TBIL(45.77±43.31)μmol/L、DBIL(34.53±33.85)μmol/L显著高于其他4组(P<0.05),其他证型TBIL、DBIL均处于正常范围。结论:不同中医辨证分型,其患者部分肝功能指标亦存在不同程度的差异性,中医证型与肝功能指标二者具有相关性。     

抑郁症肝郁脾虚证的中医药研究概况

肝郁脾虚证是抑郁症的核心证候,文章从流行病学研究、诊断研究、治疗研究、机制研究4个方面对肝郁脾虚抑郁症进行了简要综述,指出:抑郁症肝郁脾虚证"以肝为主"论治的各项研究较为丰富,但是疗效的进一步提高依然遇到了瓶颈,"以脾为主"论治肝郁脾虚型抑郁症可能新的方向,希望可启发读者对抑郁症肝郁脾虚证在病理机制研究及临床治疗等方面的新思路。     

肝肾阴虚与肝郁脾虚型原发性胆汁性肝硬化生化及免疫学指标比较

目的比较肝肾阴虚型与肝郁脾虚型原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者生化及免疫球蛋白,探寻PBC的中医病机演变规律。方法选取解放军第三零二医院2006～2010年确诊PBC患者81例,包括肝肾阴虚型39例,脾胃气虚型42例,采用日本7080全自动生化仪检测血清ALT、AST、TBIL、DBIL、ALP、GGT、TBA、ALB、GLO、TC、TG,免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM),血常规。采用间接免疫荧光法检测ANA、AMA;采用免疫印记法(EUROLINE)检测抗线粒体抗体M2亚型(M2)、抗早幼粒细胞白血病蛋白抗体(PML)、抗核点型靶抗原蛋白100KDa(SP100)、抗重组M2融合蛋白抗体(BPO)、抗52KD核颗粒蛋白抗体(52KD);采用酶联免疫吸附试验(ELIAS)检测抗HAVIgM、HBsAg、抗-HBs、抗-HBe、HBeAg、抗-HBe、、抗-HCV、抗-HDV、抗HEVIgM、抗EB病毒IgM和抗巨细胞病毒IgM、IgG。结果肝肾阴虚型PBC患者病情发展到失代偿期肝硬化患者比例明显高于肝郁脾虚,肝肾阴虚型PBC患者较肝郁脾虚型PBC患者TBIL、DBIL水平明显偏高、PT明显偏长、PA明显偏低、IgM明显偏高(P<0.05)。     

解郁醒脾方治疗肝郁脾虚型抑郁症临床观察

目的:探讨解郁醒脾方对肝郁脾虚型抑郁症的临床治疗效果。方法:将60例抑郁症肝郁脾虚型患者随机分为实验组与对照组,每组30例,分别给予解郁醒脾方及氟西汀治疗,用药疗程均为6周。在治疗前和治疗后,对两组的汉密顿(HAMD)量表评分和中医证候疗效进行对比观察。结果:治疗前两组的HAMD量表总评分经t检验,无明显统计差异;两组治疗前后组内比较其P值均小于0.05;两组治疗后比较P=0.434>0.05,无明显的统计学差异。中医症状总体疗效为:治疗组与对照组总体疗效经Ridit检验,U=0.608,P=0.543>0.05,两组无明显统计学差异。结论:解郁醒脾方对肝郁脾虚型抑郁症有很好的临床疗效。     

373例乙肝肝硬化失代偿期患者证候与客观指标的相关性研究

目的:通过对乙肝肝硬化失代偿期患者进行回顾性研究,探索乙肝肝硬化失代偿期的证候特征与客观指标的相关性,为探索乙肝肝硬化失偿期的证候规律提供有力的证据。方法:运用回顾性研究,对373例2002年10月—2010年4月在广东省中医院肝病科、消化科的乙肝肝硬化失代偿期患者的资料,分析患者的中医证型与肝功能、HBV DNA定量、血常规等常见客观指标的相关性。结果:湿热蕴结型中ALT、AST、TBIL值明显高于其他各组,ALB值肝肾阴虚型明显低于肝郁脾虚证型,而GLB值肝肾阴虚型明显高于肝郁脾虚证型,HBV-DNA、AFP、血脂血糖、凝血、血常规进行了分析未发现之间的明显规律性。结论:肝功能是判断疾病变化发展的重要指标之一,对于协助中医辨证判断疾病的阶段及预后评估可起到一定的作用。     

从肝脾论治成年女性特应性皮炎

目的:特应性皮炎的发病及治疗存在很大的异质性,在治疗方面特别强调个体化治疗,本文主要总结成年女性特应性皮炎的治疗思路和方法。方法:基于肝脾两脏的生理、病理及成年女性特应性皮炎的临床表现,深入分析其病因病机及治疗方法。结果:女性成年特应性皮炎患者常肝脾同病,肝郁脾虚湿蕴和肝郁脾虚血弱是成年女性特应性皮炎的常见证型,临床可采用疏肝健脾祛湿法和疏肝健脾养血法进行治疗。典型病例中采用肝脾同调法不但可以改善患者的皮疹,也可有效缓解瘙痒和不良情绪。结论:肝脾同调法是治疗成年女性特应性皮炎的有效方法。     

肝硬化不同证型对 AST ALT 及 AST/ALT 比值的影响

本文对８９例６种证型肝硬化患者血清ＡＳＴ、ＡＬＴ检测及ＡＳＴ／ＡＬＴ比值分析显示：ＡＳＴ、ＡＬＴ及ＡＳＴ／ＡＬＴ比值均高于正常，其升高幅度以肝郁脾虚型为最低，以肝肾阴虚型（ＡＳＴ、ＡＳＴ／ＡＬＴ）和气滞血瘀型（ＡＬＴ）为最高，除肝郁脾虚型ＡＳＴ、ＡＬＴ及湿热蕴结型ＡＬＴ与正常人无显著差异外（Ｐ＞０．０５），其余各证型的各项指标与正常人比较均有显著性差异（Ｐ＜０．０５和０．０１）。研究表明，肝硬化证型不同，肝损害程度不一，随着中医病理发展和证型的变化，ＡＳＴ、ＡＬＴ及ＡＳＴ／ＡＬＴ比值逐渐升高，仍呈由代偿期的肝郁脾虚型逐渐向失代偿期水湿内停、脾肾阳虚和肝肾阴虚型递增趋势，但ＡＬＴ在证型中呈台阶式渐升，似乎无规律。因此，可考虑将ＡＳＴ及ＡＳＴ／ＡＬＴ比值作为肝硬化辨证分型诊断的客观指标之一。     

P2X2受体在肝郁脾虚证小鼠模型前额皮质中的表达

目的:研究胞外ATP特异性P2X2受体的表达与肝郁脾虚证发生之间的关系,为深入了解胞外ATP的释放现象与肝郁脾虚证的发生机制之间的关系奠定基础。方法:48只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、逍遥散组和氟西汀组,除正常组外其余各组小鼠均接受复合应激21 d,建立肝郁脾虚证小鼠模型。采用免疫组化、western blot和实时荧光定量PCR方法检测各组小鼠前额皮质P2X2受体蛋白和基因的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠前额皮质P2X2受体蛋白表达显著下降(P0.05),而P2X2受体mRNA表达差异无统计学意义,但存在一定的下降趋势(P0.05);与模型组比较,逍遥散组和氟西汀组小鼠前额皮质P2X2受体蛋白表达显著升高(P0.05),氟西汀组小鼠前额皮质P2X2受体mRNA表达显著升高(P0.05)。结论:本研究结果表明基于复合应激的肝郁脾虚证小鼠前额皮质P2X2受体的表达存在减少的趋势,其可能是诱导肝郁脾虚证发生的一个重要原因。