杜仲叶绿原酸分离纯化工艺比较及其抗氧化性研究

目的:优化杜仲叶中绿原酸的分离纯化工艺,并探讨其抗氧化活性。方法:以绿原酸提取率为指标,比较铅沉淀、石灰乳沉淀、溶剂萃取、壳聚糖絮凝除杂对粗提物的分离效率,并考察7种大孔树脂对绿原酸的吸附性能,还研究了杜仲叶绿原酸提取物的抗氧化活性。结果:最佳分离除杂方法为壳聚糖絮凝除杂法,最佳树脂为NKA-9型大孔树脂,上柱前粗提物绿原酸含量为2.54%,经大孔树脂纯化后产品中绿原酸含量达到42.43%,提高了16倍。结论:壳聚糖絮凝除杂法能很好分离除杂,NKA-9型大孔树脂对杜仲叶绿原酸有较好纯化效果。杜仲叶绿原酸提取物抗氧化活性强于绿原酸标准品。     

杜仲叶提取物对结肠癌细胞侵袭与迁移的影响

目的:研究杜仲叶提取物以及其活性成分绿原酸对体外结肠癌侵袭与迁移的影响。方法:采用HPLC法检测了杜仲叶提取物中绿原酸的含量;采用了Transwell小室法检测了杜仲叶提取物及绿原酸对结肠癌细胞株HCT116、LOVO侵袭迁移能力的影响。结果:杜仲叶提取物处理过的HCT116细胞相对于空白样品侵袭减少49.72%;绿原酸处理过的HCT116细胞相对于空白样品侵袭相对减少66.32%。杜仲叶提取物处理过的LOVO细胞相对于空白样品侵袭相对减少37.16%;绿原酸处理过的LOVO细胞相对于空白样品侵袭相对减少50.11%。迁移实验也遵循同样的规律。结论:杜仲叶提取物具有抑制结肠癌细胞侵袭和迁移的能力,绿原酸的效果更为显著。绿原酸可能是杜仲叶这种生物活性的关键成分。     

罐组动态逆流提取中药杜仲叶中总黄酮和绿原酸的研究

目的:研究杜仲叶中有效成分总黄酮和绿原酸的提取工艺.方法:采用罐组动态逆流提取与传统单罐提取两种提取工艺提取杜仲叶中的总黄酮和绿原酸.所得滤液浓缩、喷雾干燥得到干粉,对干粉进行总黄酮和绿原酸含量测定.结果:罐组动态逆流提取所得干粉量、干粉中总黄酮和绿原酸的含量、总黄酮和绿原酸的提取率分别是传统单罐提取的1.70倍、1.11倍、1.35倍、1.56倍和2.30倍.结论:罐组动态逆流提取技术能更完全的提取出杜仲叶的有效成分,所得产品有效成分含量高.     

杜仲不同炮制品化学成分研究

根据2010年版《中国药典》制备生杜仲、盐杜仲、杜仲炭3个规格炮制品,按照2010年版《中国药典》标准对各炮制品进行各项指标检测,均符合药典要求。运用HPLC-DAD对生杜仲、盐杜仲、杜仲炭及杜仲叶中化学成分进行比较分析,结果显示:1杜仲皮主要含有木脂素类化合物松脂醇二葡萄糖及环烯醚萜类化合物京尼平、京尼平苷、京尼平苷酸,而杜仲叶主要含有黄酮类化合物槲皮素和酚酸类化合物绿原酸;2杜仲皮中松脂醇二葡萄糖含量约是杜仲叶中含量的18倍,盐炙和炒炭后松脂醇二葡萄糖质量分数约分别下降30%,85%;3杜仲皮中京尼平、京尼平苷和京尼平甘酸含量约为杜仲叶中京尼平、京尼平苷和京尼平甘酸含量的3,23,28倍,盐炙后京尼平、京尼平苷和京尼平甘酸质量分数分别降低25%,40%,40%,炒炭后京尼平、京尼平苷和京尼平甘酸质量分数分别降低98%,70%,70%;4杜仲皮中咖啡酸含量约是杜仲叶中咖啡酸含量的3倍,盐炙后咖啡酸质量分数约下降50%,炒炭后咖啡酸质量分数下降约75%;杜仲皮中绿原酸含量约为杜仲叶中绿原酸含量的1/6,盐炙和炒炭后绿原酸质量分数分别下降40%,75%;杜仲皮中槲皮素含量仅为杜仲叶中1/40,盐炙和炒炭后槲皮素质量分数分别降低60%,50%。     

杜仲叶中绿原酸的提取研究

目的 研究以丙酮为溶剂提取杜仲叶绿原酸的最佳工艺条件.方法 通过单因素实验研究各因素对提取率的影响,应用正交实验优化工艺条件.结果 丙酮提取杜仲叶绿原酸最佳工艺条件为:丙酮浓度40%,提取温度65℃,料液比1:13,提取时间2 h,提取两次.结论 在最佳条件下,绿原酸提取率和得率分别为2.25%,17.15%,纯度达到13.12%.     

杜仲叶中绿原酸的提取纯化研究

目的研究杜仲叶中绿原酸的提取纯化方法。方法采用水提、絮凝脱色、树脂吸附、重结晶工艺提取纯化。结果杜仲叶的水浸提液浓缩后用1%壳聚糖絮凝去杂、活性碳脱色得到进样液,进样液用NKA-9树脂吸附,50%乙醇解吸,洗脱液浓缩后的粗品经甲醇重结晶得到纯度≥97%的绿原酸,提取率≥65%。结论优化完善了杜仲叶中绿原酸的提取纯化方法,为杜仲资源的充分综合利用和产业化开发提供了参考。     

金银花提取物的质量分析方法评价

目的:探索金银花提取物质量控制的专属性方法,为相关制剂的质量控制提供参考。方法:采用HPLC,流动相乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~15 min,5%~20%A;15~30 min,20%~30%A;30~40 min,30%A),检测波长327 nm。比较金银花提取物与山银花、杜仲叶原药材及其提取物中绿原酸含量和特征图谱,分析银黄制剂中金银花提取物的质量。结果:原药材、提取物中均是山银花所含的绿原酸含量最高,质量分数分别为3.56%~5.09%,4.62%~6.12%;金银花提取物与杜仲叶提取物无明显差异,绿原酸质量分数约4%;金银花、山银花、杜仲叶提取物酸化后绿原酸含量均提高,分别为6.90%,7.35%,6.47%。山银花、杜仲叶提取物及其酸化提取物的特征谱图与金银花提取物标准图谱相同,部分银黄制剂中检测出了杜仲叶的主要成分京尼平苷酸和山银花的主要成分灰毡毛忍冬皂苷乙。结论:金银花提取物中可能存在添加山银花和杜仲叶的情况,需加强质量控制,为金银花提取物质量标准的提高及检测方法的选择提供了重要依据。     

高效液相色谱法测定杜仲叶中绿原酸含量方法学研究

杜仲叶为杜仲科植物杜仲的叶,具有补肝肾、强筋骨、降血压的功效。绿原酸为其主要有效成分。本文参照《中国药典》2005年版一部杜仲叶项下的[含量测定]方法测定杜仲叶中绿原酸的含量,并进行了方法学研究,其结果表明,本方法稳定,重复性好,现介绍如下。     

杜仲皮与叶化学成分初步研究

以成分预试法检查了杜仲皮与叶,证明二者成分基本相似。做了杜仲皮与叶的水溶性、醇溶性成分及二者所含的生物硷、桃叶珊瑚甙、绿原酸和糖类的急性降压实验,结果证明均有降压作用。用分光光度法测定了杜仲皮与杜仲叶中桃叶瑚珊甙及绿原酸的含量。本文为杜仲叶代杜仲皮提供了参考依据。     

杜仲叶中有效成分的闪式提取工艺优选

目的:优选杜仲叶中有效成分的闪式提取工艺。方法:采用HPLC测定绿原酸和京尼平苷酸含量,流动相甲醇-水-冰乙酸(15∶85∶1),流速1.0 mL·min-1,检测波长237 nm。以绿原酸和京尼平苷酸提取率为评价指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察乙醇体积分数、提取次数、提取时间、料液比对杜仲叶闪式提取工艺的影响。结果:最佳提取工艺条件为加25倍量70%乙醇提取3次,每次6 min;绿原酸、京尼平苷酸提取率分别为1.82%,0.47%。结论:优选的提取工艺稳定可行,为杜仲叶的资源开发提供参考。     

不同采收期杜仲叶和果实中总黄酮和多糖含量比较

目的:明确杜仲叶和果实中的总黄酮和总多糖的含量,为杜仲叶和果实的最佳采收期的确定以及开发提供科学的依据。方法:不同采收期杜仲叶和果实,分别用70%乙醇加热回流提取3次,紫外分光光度法(506 nm)对其总黄酮的含量进行测定,进行系统的分析统计,得出总黄酮含量最高的月份。不同采收期杜仲叶和果实,分别用水加热回流提取3次,用苯酚-硫酸显色,用紫外分光光度法(481 nm)对其总多糖的含量进行测定,进行系统的分析统计,得出总多糖含量最高的月份。结果:紫外分光度法测得不同季节的杜仲叶和果实中总黄酮和总多糖的含量有显著差异,叶和果实中总黄酮含量以4月份为最高。叶和果实中总多糖含量均以3月份为最高,但是果实中总多糖的含量在6月份会达到最低,7月份又有显著回升;而叶的这个过程不明显,5月份后总多糖含量一直缓慢下降。结论:杜仲叶和果实中的总黄酮和总多糖的含量均比较高,其最佳采收期均为4月份。     

不同产地杜仲叶中5种主要有效成分的含量比较

目的:比较17个不同产地杜仲叶中5种主要有效成分的含量差异。方法:利用高效液相色谱法(HPLC)测定桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸、绿原酸、儿茶素、芦丁的含量,流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~45 min,5%~15%A;45~85 min,15%~24%A),检测波长208 nm。考察不同产地杜仲叶中5种有效成分的含量差异。结果:不同产地杜仲叶中5种主要有效成分总量及各有效成分含量之间均存在显著差异,其中采自陕西省黄陵县的杜仲叶中5种有效成分总质量分数高达14.15%,而采自四川省渠县的杜仲叶仅1.37%,两者相差10倍。结论:杜仲叶中主要有效成分含量存在一定的地域性差异,其中陕西、河南等地样品中含量明显高于西南地区(如四川、重庆、贵州等)。杜仲叶应尽可能采取低温快速干燥。     

杜仲颗粒质量标准研究

目的：建立杜仲颗粒的质量标准。方法：采用TLC对杜仲叶进行定性鉴别,用HPLC测定制杜仲、杜仲叶中绿原酸的含量。结果：薄层色谱中,供试品溶液色谱在与对照药材色谱相应位置上出现相同颜色的斑点,阴性无干扰;HPLC中,绿原酸在0μg-0.7936μg范围内线性关系良好（r=0.9996）,平均回收率为99.9%。结论：薄层色谱法呈现斑点清晰、特异性强,可用于杜仲颗粒的鉴别;高效液相色谱法简便快速、精密度高、准确度好,可用于该药的质量控制。     

杜仲叶绿原酸的微波提取工艺研究

目的研究杜仲叶绿原酸的微波提取工艺,优选最佳提取条件。方法以绿原酸提取率为指标,考察了提取溶剂、溶剂倍量、辐照时间对微波提取工艺的影响。结果杜仲叶绿原酸的最佳微波提取条件为∶水为提取溶剂,溶剂倍量9∶1,辐照时间120 s。结论在此条件下,绿原酸提取率为2.98%。     

杜仲叶活性成分对结肠癌细胞增殖与凋亡的影响

为了揭示杜仲叶中对结肠癌细胞增殖与凋亡的有效成分,首先对杜仲叶提取物进行了成分分析,然后取其中两种主要成分京尼平苷酸与绿原酸分别对结肠癌细胞株HCT116与LOVO细胞进行了增殖与凋亡的影响实验。结果显示:当绿原酸浓度达1.610 6μg/L时,作用于LOVO细胞的抑制率达94.96%,超过阳性对照药顺铂的抑制效果。而京尼平苷酸抑制效果不显著。绿原酸作用于HCT-116和LOVO细胞的凋亡率分别为24.08%,33.80%,均高于空白对照组的5.83%,13.71%。实验结果证实杜仲叶提取物中绿原酸对结肠癌细胞的增殖与凋亡都有显著影响,是杜仲叶中抑制结肠癌细胞增殖、促进其凋亡的主要成分之一。     

不同干燥加工与贮藏方法对杜仲叶药材质量变化的研究

目的 研究不同干燥加工与贮藏方法对杜仲叶中主要成分量的影响.方法 采用HPLC法测定不同干燥方式、贮藏条件下杜仲叶中绿原酸、京尼平苷酸、京尼平苷的量.结果 新鲜杜仲叶采用烘干和微波杀青后阴干处理的杜仲叶药材京尼平苷酸和京尼平苷的量较高,阴干和微波杀青后阴干处理的杜仲叶药材绿原酸的量较高.低温避光贮存的杜仲叶药材各成分的量下降较慢.结论 杜仲叶在最佳采收期进行采收后,经微波加热杀青、干燥处理后,对杜仲叶进行密封,低温并避光存放,存放时间在1年内其主要成分量均不会发生较大变化.     

杜仲愈伤组织中绿原酸的含量

杜仲愈伤组织中绿原酸的含量王俊丽陈丕铃(河北大学生物技术研究中心保定071002)李会肖(河北省辛集市林业局辛集052360)杜仲EucommiaulmoidesOliv.是我国名贵的药用植物,具有补肝肾、强筋骨、降血压等功效。目前已有从杜仲叶片中提取绿原酸纯品的报道[1],本文对离体培养愈伤组织中绿原酸含量进行了分析测定,以便为高纯度绿原酸的分离提取提供参考。1材料和方法1.1材料:所用材料为本研究室培养的杜种愈伤组织。1.2愈伤组织的培....     

重庆市不同产地杜仲叶中绿原酸量的研究

目的 探讨重庆产杜仲叶的质量及产地差异,为杜仲叶的药用提供科学依据。方法 采用PLATISIL ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.2%磷酸(30∶70)为流动相,327 nm为检测波长,测定并比较杜仲叶、皮中绿原酸的量。结果 (1)重庆市6区县杜仲叶绿原酸量差异非常显著(P＜0.01),平均质量分数为(8.95±0.499) mg/g,其中,南川、城口两地杜仲叶绿原酸的量极显著高于万州、荣昌、武隆、长寿产(P＜0.01),武隆与长寿间差异不显著(P＞0.01);(2)重庆市不同产地同树龄同树株杜仲叶绿原酸的量极显著高于杜仲皮,叶绿原酸的量高达(10.150±0.260) mg/g;(3)杜仲叶绿原酸的量与树龄呈负相关。结论 杜仲叶绿原酸量因产地、树龄差异极大,杜仲叶可代替杜仲皮入药,其经济效益显著,杜仲叶值得开发利用。     

杜仲叶提取物所含四种主要成分体外抗非酒精性脂肪肝活性研究＊

目的 研究杜仲叶所含4种主要成分体外抗非酒精性脂肪肝（Non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）活性。方法 首先用UPLC-MS检测杜仲叶提取物中绿原酸、杜仲苷、京尼平苷酸、车叶草苷含量；以HepG2细胞为载体，建立NAFLD细胞模型，设正常组、模型组、绿原酸组、杜仲苷组、京尼平苷酸组、车叶草苷组；油红O染色检测细胞内脂质；微量法检测细胞内甘油三酯（Triglyceride，TG）、胆固醇（Total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白（High-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）含量；微量法检测细胞培养液中谷草转氨酶（Aspartate aminotransferase，AST）、谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase，ALT）含量。结果 杜仲叶提取物主要含绿原酸、杜仲苷、京尼平苷酸和车叶草苷，其中京尼平苷酸的含量最高；杜仲叶提取物所含四种主要成分可明显降低细胞内TG、TC、LDL-C含量，其中京尼平苷酸效果最为显著；绿原酸、杜仲苷，京尼平苷酸可显著降低细胞培养液中AST、ALT含量，其中京尼平苷酸效果最好。结论 杜仲叶提取物所含四种主要成分可不同程度降低HepG2细胞内脂质含量，其中京尼平苷酸效果较好。     

超滤膜技术分离杜仲叶绿原酸的研究

目的：研究超滤膜技术应用于杜仲叶绿原酸的分离纯化。方法：以绿原酸转移率为指标,考察料液温度、超滤压力、超滤时间、膜截留分子量对绿原酸转移率的影响。结果：膜截留分子量200000,超滤温度40℃、超滤压力0.36MPa、超滤时间20min、加水量24L时,绿原酸转移率为99.38%。结论：超滤膜技术分离纯化杜仲叶绿原酸效果较好,可应用于产业化。