多药耐药P糖蛋白检测与急性白血病预后相关性研究

目的：探讨多药耐药（ＭＤＲ）Ｐ糖蛋白（Ｐ１７０）表达与急性白血病预后有关。方法：采用抗Ｐ１７０单克隆抗体ＪＳＢ－１及碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫细胞化学技术检测８６例（１０４例次）急性白血病骨髓细胞Ｐ１７０表达。结果：Ｐ１７０阳性率难治组为７６．９％（１０／１３），复发组４０．９％（９／２２），初治组２７％（１０／３７），完全缓解组１８．８％（６／３２）。初治组Ｐ１７０阴性病例首次诱导完全缓解（ＣＲ     

P-170蛋白过度表达与髓细胞性白血病预后的关系

为探讨髓细胞性白血病（ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ）患者Ｐ－１７０ 蛋白过度表达与预后的关系,用免疫组化ＬＳＡＢ法（ｌａｂｅｌｌｅｄ ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ ｂｉｏｔｉｎ ａｓｓａｙ）检测６６ 例急性髓细胞性白血病（ａｃｕｔｅ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ,ＡＭＬ）及２０ 例慢性髓细胞性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ, ＣＭＬ）患者外周血单个核细胞的Ｐ－１７０ 蛋白表达。结果表明,初治组ＡＭＬ患者Ｐ－１７０ 表达率为２６．５％ （９／３４）;难治／复发组为６８．４％ （１３／１９）,比初治组明显增高（Ｐ＜ ０．００５）;完全缓解组为２３．１％ （３／１３）,与初治组差异无显著性。诱导化疗Ｐ－１７０＋ 者完全缓解（ＣＲ）率为２２．２％ （７／９）,Ｐ－１７０－ 者为８０％ （２０／２５）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．００３６）。ＣＭＬ慢性或加速期８ 例患者无１ 例Ｐ－１７０ 表达,急变期患者Ｐ－１７０ 表达率为５０％ （６／１２）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．０４２）。提示Ｐ－１７０ 蛋白过度表达是髓细胞性白血病化疗耐药和不良预后的标志     

白血病bcl-2、P170、CD_(34)表达的临床意义和相关性

目的：探讨白血病ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４表达的临床意义和相关性,评估其临床预测价值。方法：用ＡＢＣ免疫细胞化学方法检测７７例急性白血病、２３例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４的表达。结果：复发／难治的急性白血病ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４的表达高于初治者。ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４高表达的急性白血病完全缓解率低,早期复发率高,预后差,ｂｃｌ ２与急性白血病预后的阳性符合率为９０９％,较Ｐ１７０、ＣＤ３４略高。ＣＤ３４在ＣＭＬ慢性期和加速期／急变期的表达有显著性差异。ｂｃｌ ２与Ｐ１７０的表达呈轻度正相关（ｒ＝０３８６,Ｐ＜０００１）。结论：ｂｃｌ ２、Ｐ１７０、ＣＤ３４为急性白血病疗效、预后的指标,ｂｃｌ ２的预测敏感性较高,三者联合检测的预测价值更高。ＣＤ３４为ＣＭＬ病程变化的标志。不同ＭＤＲ机制可能存在联系。     

ABCA3在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

目的 检测三磷酸腺苷结合盒转运体A3（ABCA3）基因在急性髓系白血病（AML）细胞中的表达,探讨ABCA3在AML耐药方面的作用及临床意义。 方法 ①应用半定量RT PCR检测33例初治、13例复发/难治成人AML患者及10例正常对照者骨髓单个核细胞ABCA3 mRNA的表达水平,并分析其在不同组间的表达规律;②将初治AML患者按化疗效果分为完全缓解组和未完全缓解组,比较两组间ABCA3的表达水平;③分析ABCA3与AML患者初诊白细胞数、免疫表型、FAB分型等临床特征之间的相关性。结果 ABCA3的表达水平：初治及复发/难治AML组均明显高于正常对照组（P均＜0.01）;复发/难治AML组高于初治组（P＜0.05）;完全缓解组低于未完全缓解组（P＜0.05）;慢性粒细胞白血病急变患者高于其他AML亚型（除M3外,P均＜0.05）。ABCA3的表达水平与AML患者初诊白细胞数、骨髓原始细胞百分数、免疫表型、性别及年龄无明显相关性。结论 ABCA3与AML患者的多药耐药及治疗、预后密切相关。     

急性髓系白血病中乳腺癌耐药蛋白基因表达与临床意义

目的  研究急性髓细胞白血病（AML）患者乳腺癌耐药蛋白（BCRP）基因的表达以及在预后判断中的意义。方法  构建实时定量PCR检测BCRP基因表达的技术，定量检测20例初治组AML患者、20例完全缓解组AML患者及20例难治复发组AML患者BCRP基因的表达水平，分析其在AML患者和非血液系统恶性肿瘤患者中的差异及与临床疗效的关系。结果  急性髓系白血病患者中BCRP的表达高于对照组（P <0.01），初治组、完全缓解组、难治复发组的BCRP表达均存在差异（P <0.01），其中难治复发组表达最高，初治组次之，完全缓解组最低。结论  BCRP基因在急性髓系白血病患者中表达增高，BCRP的表达水平可能是疾病进展的重要标志，可能是AML的独立危险因素。

     

环孢霉素A逆转复发难治性白血病多药耐药的临床研究

环孢霉素Ａ逆转复发难治性白血病多药耐药的临床研究李晓明，吴谨绪，张连生等。华西医科大学附属第一医院血液科中华血液学杂志１９９７；１８（２）∶７３为探讨环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）逆转复发难治性急性白血病的临床意义及推广价值。采用免疫组织化学ＡＢＣ法，ｐ１７０...     

急性髓性白血病多药耐药基因的表达及其临床意义

目的 探讨急性髓性白血病（AML）多药耐药基因mdrl表达与临床耐药和化疗疗效的关系。方法 应用反转录－聚合酶链反应（RT－PCR），检测30例AML患者骨髓和10名正常人外周血单个核细胞中mdrl基因的表达。结果 正常对照组均为阴性表达。AML初治组mdrl阳性率为26.32%，而复发难治组mdrl阳性率为81.82%，两组之间存在明显差异（P＜0.01)。初治组中mdrl阳性患者的首次完全缓解率（20.00%)明显低于mdrl阴性患者的首次完全缓解率（85.71%)（P＜0.01)。结论 AML的mdrl基因过度表达与临床耐药密切相关，是判断疗效及预后的一个重要指标。     

多药耐药基因在淋巴—浆细胞系统恶性肿瘤中的表达及临床意义

本文应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）技术检测急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）２０例，慢性淋巴细胞白血病（ＣＬＬ）８例，多发性骨髓瘤（ＭＭ）１７例等肿瘤细胞多药耐药（ＭＤＲ１）基因的表达，其中初治２８例，难治复发６例，完全缓解（ＣＲ）１１例。发现ＭＤＲ１基因在ＡＬＬ、ＣＬＬ及ＭＭ中表达阳性率分别为３５．７％，８３．３％及９％。难治复发组明显高于初治及ＣＲ组，三者比较差异显著（Ｐ＜０．０１）。初治ＭＤＲ１基因阴性表达组ＣＲ率（９４．４％）显著低于ＭＤＲ１基因阳性表达组（３０％）（Ｐ＜０．０１）。其结果表明：①淋巴—浆细胞系统恶性肿瘤细胞中ＭＤＲ１发生有原发性和继发性两种形式，其中ＭＭ发生率较低。②淋巴—浆细胞系统恶性肿瘤患者ＭＤＲ１基因表达与肿瘤细胞多药耐药性密切相关，可为临床合理制定化疗方案提供有用的依据。     

骨髓移植后的免疫治疗

目的：研究免疫治疗用于治疗及预防骨髓移植（ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ,ＢＭＴ） 后的白血病复发。方法：Ａ组为异基因骨髓移植（ＡｌｌｏＢＭＴ） 后白血病复发患者１０ 例,接受供者白细胞治疗。Ｂ组为自身外周血干细胞移植（ａｕｔｏｇｅｎｏｕｓｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ,ＡＰＢＳＣＴ）或ＢＭＴ后共１０ 例患者输注免疫杀伤细胞（ｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄ ｋｉｌｌｅｒ,ＣＩＫ）细胞治疗。结果：Ａ 组患者中血液学复发的６ 例,１ 例Ｐｈ１ 染色体１００％ 转阴,无病存活至今已超过１８ 个月,４ 例达暂时缓解;１ 例未缓解;微小残留及中枢神经系统复发共４ 例,均完全缓解,其中Ｐｈ１ 染色体全部转阴。Ｂ组１０ 例中１ 例患者带有的白血病融合基因转阴。结论：（１） 供者白细胞的输注能使某些ＢＭＴ后慢性粒细胞性白血病遗传学及血液学复发患者完全缓解。（２）ＣＩＫ 细胞输注是安全的,对某些白血病复发患者的治疗是有效的。     

急性白血病多药耐药基因表达的临床研究

通过综合研究不同病期急性白血病、慢粒急变及骨髓增生异常综合征－原始细胞过多性难治性贫血（ＭＤＳ－ＲＡＥＢ）患者ｍｄｒｌ表达,研究发现其与预后的关系,以指导临床诊断及治疗。采用ＲＴ－ＰＣＲ术,并设置β２微球蛋白作内标研究且病例ｍｄｒｌ基因表达情况。急性白血病、慢粒急变及ＭＤＳＲＡＥＢ患者ｍｄｒｌ基因表达阳性率 明显增高,急性白血病难治／复发组ｍｄｒｌ基因阳性表达率明显高于急性白血病初治组与完全缓解组     

急性白血病多药耐药相关蛋白及P糖蛋白表达与临床耐药的关系

目的 :研究急性白血病患者多药耐药相关蛋白 (MRP)及P 糖蛋白 (P 170 )的表达与临床耐药的关系。方法 :采用免疫组织化学方法检测 72例急性白血病患者骨髓单个核细胞MRP和P 170的表达。结果 :72例化疗后急性白血病患者中 ,MRP阳性表达 39例 ,阴性表达 33例 ,MRP阳性表达者疗效显著差于阴性表达者 (P <0 .0 1) ;P 170阳性表达 4 6例 ,阴性表达 2 6例 ,P 170阳性表达者疗效显著差于阴性表达者 (P <0 .0 1) ;MRP与P 170表达有一定的一致性 (Kappa系数 =0 .4 2 7,P<0 .0 1) ,两者同时检测对耐药患者的灵敏度为 97 5 % ,高于P 170检测的灵敏度 (90 % )和MRP检测的灵敏度 (77 5 % )。结论 :P 170和MRP表达与临床化疗耐药密切相关 ,P 170和 或MRP阳性表达者临床疗效显著差于阴性表达者。MRP与P 170两者同时检测可提高对耐药白血病患者的判断及预后估计     

急性白血病多药耐药性与临床疗效关系的探讨

目的：探讨白血病细胞的多药耐药性与临床疗效及预后的关系。方法：采用逆转录聚合酶链法（RT－PCR）检测65例急性白血病（AL）患者的多药耐药基因（MDR1mRNA)表达。同时采用MTT法对35例患者做体外药物敏感试验。结果：初治组MDR1mRNA阳性表达率为31．1％,复发难治组性表达率为75．0％;MDR1mRNA阳性表达组完全缓解率和总缓解率均低于MDR1mRNA阴性表达组（P＜0．01）。药敏试验与化疗疗效相关,总临床符合率为80．0％。结论：MDR1mRNA表达及体外药敏检测与AL的化疗效果及预后密切相关,可作为判断疗放与预后的重要指标。     

甲氧基异丁基异腈显像在预测恶性淋巴瘤患者耐药中的临床意义

目的 预测恶性淋巴瘤（ML）患者的治疗反应,并判断根据甲氧基异丁基异腈（99^Tc^m-MIBI）显像参数,能否对多药耐药基因（MDR1）及多药耐药相关蛋白（MRP）基因的表达准确进行功能性评估。方法23例经淋巴结活检病理证实的ML患者,在化疗前均进行99^Tc^m-MIBI显像,分别计算早时像（10min）和晚时像（1h）的靶本（T／B）比值以及99^Tc^m-MIBI显影剂的洗脱率（WR％）;采用逆转录（RT）-PCR方法,检测病变淋巴结活体组织标本多药耐药基因MDR-1及MRP mRNA表达水平;在经过6—8个疗程的联合化疗（加或不加局部放疗）后,通过临床和放射学方法对淋巴瘤患者的治疗反应进行评价。结果 MDR1、MRP mRNA同时表达阴性患者组的WR％（16±6）明显低于两者同时阳性表达组（33±5）和两者其一阳性表达组（28±6,均P〈0．01）;两者同时阳性表达组与两者其一阳性表达组之间差异无统计学意义（P=0.26）。MDR1阳性组早时像T／B值、晚时像T／B值和WR％分别为3．0±1．1,2．5±0．8,17±7,MDR1阴性组三值分别为3．4±1．0,2．3±0．7,32±6,MDR1阳性组与阴性组相比,在早时像T／B、晚时像T／B差异均无统计学意义（均P〉0．05）,但WR％比较差异有统计学意义（P〈0．01）;MRP阳性组三值分别为3．1±1．2,2．5±0．8,19±8,MRP阴性组分别为3．3±1．0,2．3±0．7,31±6,MRP阳性与阴性组比较,也仅WR％差异有统计学意义（P=0．003）,而在早时像T／B、晚时像T／B差异均无统计学意义（均P〉0．01）。MDR1表达水平、WR％与治疗反应均有显著相关性（均P〈0．01）;MRP表达水平与治疗反应则无明显相关性（P=0．052）。结论 99^Tc^m-MIBI作为一种无创性影像学检查手段,能够准确反映MDR1、MRP的表达水平和功能状态,并可以预测ML患者的化疗疗效,针对性的采取个体化治疗策略,有益于患者的治疗。     

原发性肝细胞癌P170的表达及意义

目的 研究原发性肝细胞癌P170的表达及临床意义。方法 采用免疫组化SABC法，用小鼠抗人P170单克隆抗体JSB1，对随机选择的46例原发性肝细胞癌手术后石蜡包埋标本进行染色，同时设立阳性及阴性对照组。结果 原发性肝细胞癌的P170阳性表达率为60．7％，化疗后达88．9％，P170阳性表达组原发性肝癌的生存时间低于阴性表达组。结论 肝脏是原发性耐药器官，化疗可以诱发耐药的产生，P170的表达是原发性肝细胞癌的一个预后指标。     

HL-60/ADM细胞系耐药性检测

目的　检测 HL- 6 0 / ADM细胞化疗药物敏感性及 MRP表达。方法　以 HL- 6 0 / ADM细胞为实验对象 ,对化疗敏感的 HL - 6 0细胞为对照 ,MTT法检测药物敏感性 ,免疫细胞化学法检测 MRP蛋白的表达 ,PT- PCR法检测MRP m RNA表达。结果　两种细胞生长周期基本一致 ;HL - 6 0 / ADM细胞对 ADM、MTZ、VCR、H四种化疗药物 IC50 显著高于 HL- 6 0细胞 (P<0 .0 1) ,RF均在 2 0倍以上 ;HL- 6 0 / ADM表达 MRP m RNA,细胞膜表面 MRP阳性。结论　 HL-6 0 / ADM细胞系适合体外 MDR研究。     

三氧化二砷对人肺腺癌细胞A549/DDP裸鼠体内的多药耐药逆转作用

目的研究三氧化二砷（As_2O_3）对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/顺铂（DDP）裸鼠移植瘤的耐药逆转作用。方法建立人肺腺癌裸鼠移植瘤模型,观察As_2O_3、DDP及联合用药对体内移植瘤生长状况的影响;采用流式细胞术（FCM）测定不同用药对肿瘤细胞凋亡率变化和耐药细胞A549/DDP P-糖蛋白（P-gp）表达;采用RT-PCR检测不同用药对A549/DDP移植瘤组织MRP1-mRNA和LRP-mRNA表达的变化。结果体内裸鼠抑瘤实验显示As_2O_3有一定抑瘤作用,联合应用DDP可显著抑制肿瘤生长。FCM结果显示应用As_2O_3后肿瘤细胞平均凋亡率,明显高于对照组（P〈0.05）[（17.204±3.091）%vs（3.436±0.537）%],低浓度As_2O_3联合DDP后肿瘤细胞的凋亡率,明显高于DDP组（P〈0.05）[（14.472±3.891）%vs（5.612±1.167）%]。FCM对P-gp表达检测提示As_2O_3对移植瘤Pgp水平无影响。RT-PCR检测结果示含As_2O_3组MRP1表达明显低于不含As_2O_3组（P〈0.05）,肺癌耐药相关蛋白（LRP）在转录水平呈现相对低表达,含As_2O_3组同不含As_2O_3组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 As_2O_3能在体内逆转A549/DDP细胞的耐药性,其机制可能是As_2O_3可通过下调MRP1基因表达,提高A549/DDP细胞对DDP敏感性逆转其耐药,并可能通过诱导肿瘤细胞凋亡来起作用。     

化疗药物对甲状腺未分化癌耐药基因表达的影响

目的:评价阿霉素和顺铂化疗药物对甲状腺未分化癌耐药相关基因MDR1和MRP1表达的影响?方法:分别用阿霉素和顺铂诱导人甲状腺未分化癌耐药细胞HTh74/DOX和HTh74/DDP?利用荧光定量RT-PCR检测耐药细胞中MDR1和MRP1的表达情况,并观察MDR1和MRP1抑制剂联合阿霉素或顺铂对耐药细胞进行干预的疗效?结果:HTh74/DOX细胞与亲代相比高表达MDR1而MRP1基因上调不明显;HTh74/DDP细胞与亲代相比高表达MRP1基因而MDR1基因上调不明显,且HTh74/DOX对顺铂缺乏交叉耐药,HTh74/DDP对阿霉素缺乏交叉耐药?MDR1和MRP1抑制剂分别能部分恢复HTh74/DOX和HTh74/DDP对阿霉素和顺铂的敏感性?结论:不同化疗药物可能上调不同ABC跨膜转运蛋白耐药相关基因而导致甲状腺未分化癌细胞耐药性增强?临床可能通过检测各种ABC跨膜转运蛋白或基因的表达量来预测不同化疗药物的疗效,并选用适当ABC跨膜转运蛋白抑制剂联合化疗药物进行个体化治疗方案的制定?     

脊索瘤细胞系CM-319中放化疗抵抗相关基因的表达及临床意义

[目的]探讨多药耐药相关基因如缺氧诱导因子1d（HIF-1α）、多药耐药基因（MDR1）及多药耐药相关蛋白（MRP1）在脊索瘤细胞系CM－319中的表达及临床意义。[方法]用RT—PCR检测HIF－1α、MDR1、MRP1基因表达,间接免疫荧光及免疫细胞化学Envision法检测HIF－1α、MRPl蛋白在CM－319中的表达情况,并分析其与放化疗抵抗的关系。[结果]常氧条件下,在脊索瘤细胞系中能检测到HIF～1α及MRP1 mRNA的表达,但未检测到MDR1 mRNA的表达（P〈0．01）,间接免疫荧光及免疫细胞化学可以检测到HIF-1α表达在细胞浆及核中,而MRP1主要表达在细胞浆中。[结论]HIF-1α与MRP1的过度表达在脊索瘤的放化疗抵抗中可能具有重要作用,而MDR1表达未被检测到,提示脊索瘤的放化疗抵抗主要与HIF－1α和MRP1相关。     

Expression of multidrug resistance-related markers in primary neuroblastoma

Background Multidrug resistance is associated with a poor prognosis in various human cancers. However, the clinical significance of the expression of multidrug resistance-related markers in neuroblastoma is still on debate. In this study, the effect of the expression of p-glycoprotein (P-gp), multidrug resistance-associated protein (MRP), and lung resistance protein (LRP) in neuroblastoma was evaluated. Methods The streptavidin-biotin immunoperoxidase (SP) technique was used to evaluate the expression of P-gp, MRP, and LRP in 70 cases of untreated primary neuroblastoma. Results The frequencies of the expression of P-gp, MRP, and LRP were 61.4%, 38.6%, and 24.3%, respectively. A significant positive correlation was observed between P-gp and MRP expression (P=0.001), as well as between LRP and MRP expression (P=0.01). The rates of expression of P-gp and MRP were higher in tumors from patients aged greater than one year old than in tumors from patients aged less than 1 year old at time of diagnosis (P=0.01 and 0.018,respectively). MRP expression in tumors that had metastasized was significantly more frequent than in tumors that had not metastasized (P=0.015). The expression of all tested proteins showed a significant relationship with whether or not the tumor had differentiated ( P=0.006, 0.000 or 0.001, respectively). MRP expression was significantly associated with a reduction in both median survival time and 2-year cumulative survival (P=0.02). By contrast, P-gp and MRP expression did not correlate with survival. According to Cox regression analysis, only the co-expression of P-gp and MRP had significant prognostic value (relative hazard, 3.513, P=0.033). Conclusions The intrinsic, multidrug resistance of neuroblastoma involves the combined effects of P-gp, MRP, and LRP. MRP expression may be an important factor determining prognosis in neuroblastoma.     

bcl-2,MDR1基因及编码蛋白在儿童急性白血病骨髓单个核细胞中表达的研究

目的:探讨bcl-2,MDR1基因及编码蛋白p26,p170表达与多药耐药的关系.方法:RT-PCR技术、S-P免疫组化方法检测36例白血病患儿及10例血小板减少性紫癜患儿骨髓单个核细胞bcl-2,MDR1基因及蛋白表达.结果:bcl-2基因的表达初治组、完全缓解组低于复发组(P<0.05);MDR1基因的表达复发组高于对照组(P<0.05),p26,p170阳性率初治组、完全缓解组、对照组低于复发组(P<0.05).p170阳性率初治组高于对照组(P<0.05).化疗后p170阳性率明显高于化疗前(P<0.01).bcl-2,MDR1基因的表达与临床生物学特征无相关性.bcl-2与MDR1基因之间、p170和p26蛋白之间均无相关性.结论:bcl-2和MDR1基因、蛋白通过不同的机制与白血病的耐药有关.