糖尿病大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α的表达与超微结构研究

目的 研究糖尿病大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达与超微结构变化。方法 将132只SD大鼠随机分为对照组与糖尿病视网膜病变（DR）组，DR组采用链脲佐菌素（STZ）一次性腹腔注射建立糖尿病模型。应用免疫组织化学SP法和RT-PCR技术分别于1、3、6个月检测视网膜中HIF-1α蛋白及其mRNA的表达，透射电镜观察视网膜的超微结构。结果 免疫组织化学与RT-PCR检测结果均显示，HIF-1α蛋白及其mRNA在对照组视网膜中不表达，在DR组中呈进行性表达增强（P〈0．05）；透射电镜观察：正常对照组大鼠视网膜血管未见异常，DR组随着病程发展逐渐出现视网膜血管内皮细胞肿胀，基底膜厚薄不均。结论 DR中HIF-1α的异常表达和超微结构改变与视网膜缺氧关系密切，两者与DR的发生发展密切相关。     

葛根素抑制糖基化终产物诱导的人视网膜色素上皮细胞增殖及低氧诱导因子-1α的表达

目的:研究葛根素是否抑制糖基化终产物(AGEs)诱导的人视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。方法:应用MTT比色法检测不同浓度(0,0.01,0.1,1g/L)的葛根素对糖基化终产物(AGEs)诱导的人RPE细胞增殖的影响;应用免疫组织化学法和Western-blot分析法检测不同浓度(0,0.01,0.1,1g/L)葛根素对100mg/L的AGEs作用于人RPE细胞24h后HIF-1α的表达,并以计算机图像分析仪进行分析。结果:MTT比色法显示,不同浓度(0,0.01,0.1,1g/L)的葛根素对AGEs诱导的人RPE细胞增殖具有不同程度的抑制作用,抑制率分别为5.7%,24.1%,30.7%;不同浓度(0.01,0.1,1g/L)的葛根素与100mg/LAGEs共同作用于RPE细胞24h,免疫组织化学法检测显示,与AGEs组比较,0.01g/L以上浓度葛根素均能显著抑制AGEs诱导的RPE细胞HIF-1α的表达,0.01g/L葛根素使HIF-1α表达降低了10.2%,0.1g/L葛根素则降低了38.9%,1g/L葛根素则达到53.4%。Western-blot分析显示,与AGEs组比较,0.01g/L以上浓度葛根素均能显著抑制AGEs诱导的RPE细胞HIF-1α的表达,随着葛根素浓度的增加,HIF-1α免疫印迹带逐渐减弱,0.01g/L葛根素使HIF-1α表达降低了11.0%,0.1g/L葛根素则降低了40.3%,1g/L葛根素则达到54.4%。结论:葛根素可显著抑制AGEs诱导的人RPE细胞的增殖及HIF-1α的表达。     

缺氧对人视网膜色素上皮细胞表达缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子的影响

血管内皮生长因子（VEGF）在眼内新生血管形成中发挥着重要作用。研究发现，VEGF转录活化受缺氧诱导因子（HIF-1）调节。HIF-1是异源二聚体，由α亚基和β亚基组成。常氧状态时，HIF-1α经泛素-蛋白酶途径不断发生水解；缺氧状态下，HIF-1α稳定表达。HIF-1β属构建型表达，不受缺氧诱导，可稳定存在。因此，HIF-1的活性由HIF-1α决定。我们检测了缺氧不同时间培养的人视网膜色素上皮（RPE）细胞对HIF-1α及VEGF的表达，以分析RPE细胞内HIF-1与VEGF表达的关系。     

低氧诱导因子-1α在Rb中的表达及与肿瘤血管形成的关系

目的探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在视网膜母细胞瘤（Rb）中的表达及其与血管生成的关系。方法利用免疫组织化学方法检测60例Rb、10例正常视网膜组织中HIF-1α的表达，并用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞，计数Rb中微血管密度（MVD）。结果HIF-1α在正常视网膜组织中未见表达，主要表达于Rb细胞浆及胞核。HIF-1α在Rb组中阳性表达率为56．7％（34／60），明显高于正常对照组（P〈0．01）；Rb组中MVD平均为33．59±1．15，正常对照组为7．42±0．95（t=17．499，P〈0．01）。HIF-1α与MVD的表达呈显著正相关（r=0．439，P〈0．01）。结论HIF-1α在视网膜母细胞瘤中的表达与肿瘤的新生血管形成有关。提示HIF-1α的表达水平可用于预测Rb的生物学行为，可作为Rb治疗的新靶点。     

胰岛素对人视网膜色素上皮细胞表达低氧诱导因子-1а的影响

目的研究胰岛素诱导人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)低氧诱导因子-а(hypoxia-inducible factor -а,HIF-а)的表达,及川芎嗪对其影响. 方法应用免疫组化法检测不同浓度胰岛素作用下RPE中HIF-а的表达、同一浓度胰岛素作用于RPE不同时间HIF -а的表达、不同浓度川芎嗪对胰岛素作用下RPE中HIF-а的表达和影响结果胰岛素作用4 h,随着胰岛素浓度的增加,RPE中HIF-а的表达逐渐增加,以8×106U·L-1最为明显;8×106U·L-1胰岛素作用不同时间,以4 h时RPE中HIF-а的表达较高;不同浓度的川芎嗪对胰岛素作用下的RPE中HIF-а的表达无影响.结论胰岛素可诱导RPE中HIF-а的表达,川芎嗪对胰岛素诱导的RPE中HIF-а的表达无影响.     

低氧诱导因子-1α干扰RNA对血管内皮生长因子mRNA表达的抑制作用

目的 探讨低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α．HIF-1α）特异性小片段干扰RNA表达载体pSUPER^H1-SiHIF1α对低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor．VEGF）mRNA表达的抑制作用。方法 构建HIF-1α特异性小片段干扰RNA表达载体pSUPER^H1-SiHIF1α通过脂质体Lipofectamine2000分别介导pSUPER^H1-SiHIF1α转染低氧状态下培养的人低分化鼻咽鳞癌细胞（nasopharyngeal carcinoma cell line，CNE2），对照组转染pSUPER空载体．采用半定量RT—PCR方法检测HIF-1αmRNA和VEGF mRNA的表达。结果 转染DSUPER^H1-SiHIF1α的CNE2细胞中HIF-1α mRNA和VEGF mRNA的表达较对照组分别降低79．4％和65．7％。结论 HIF-1α特异性小片段干扰RNA表达载体pSUPER^H1-SiHIF1α能明显抑制HIF-1α mRNA和VEGF mRNA的表达。     

糖尿病大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的研究

目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病大鼠视网膜中的表达,探讨其在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中的作用。方法:SD大鼠120只随机分为对照组与DR组,DR组采用链脲佐菌素(STZ)一次性建立糖尿病模型。应用免疫组化SP法和RT-PCR技术分别于1,3,6mo检测视网膜中HIF-1α与VEGF蛋白及其mRNA的表达变化。结果:HIF-1α与VEGF蛋白及其mRNA在对照组视网膜中不表达,在DR组中呈进行性表达增强(P<0.05);DR组中HIF-1α与VEGF的表达呈正相关(r=0.605,P<0.05)。结论:DR视网膜中HIF-1α与VEGF表达增强,与DR的发生发展密切相关。     

shRNA抑制缺氧条件下人视网膜色素上皮细胞低氧诱导因子-1α基因对血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨缺氧条件下人视网膜色素上皮（hRPE）细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）对血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法利用体外转录法合成针对HIF—1α mRNA序列的靶点之一的小发卡环RNA（shRNA）,以化学低氧诱导剂CoCl2模拟RPE细胞缺氧环境,对缺氧培养条件下hRPE细胞的HIF-1α进行RNA干扰,通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测HIF-1α和VEGF mRNA的表达,免疫印迹法检测HIF—1α和VEGF蛋白水平,以正常组、缺氧组及阴性转染组作为对照,观察其对HIF-1α基因的沉默效果及对VEGF表达的抑制作用。结果转染HIF-1α mRNA的特异性shRNA后,RT-PCR检测结果显示缺氧条件下hRPE细胞HIF-1α基因沉默效果为77．1％,VEGF mRNA的表达水平下降了27．8％;免疫印迹法检测结果显示HIF—1α和VEGF蛋白水平显著降低。结论针对HIF-1α mRNA的shRNA能有效地使HIF-1α基因沉默,进而抑制缺氧对VEGF的上调作用。（中华眼科杂志．2007。43：1022—1027）     

早期糖尿病鼠视网膜HIF1α及VEGF表达的意义

目的 探讨缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在早期糖尿病大鼠视网膜上的表达及意义.方法 用链尿佐菌素（streptozotocin,STZ）腹腔注射制作大鼠早期糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）模型.于模型建立后1个月处死大鼠,取眼球做石蜡切片及视网膜铺片.用免疫组化法检测HIF-1α及VEGF在视网膜的表达.用胰酶消化视网膜并行PAS视网膜血管染色,观察管视网膜血管形态变化.结果 早期糖尿病大鼠视网膜的HIF-1α可能由高浓度血糖诱导,从而上调VEGF的表达.结论 HIF1α和VEGF在糖尿病视网膜新生血管的发生过程中可能起着重要的作用.     

胰岛素对人视网膜色素上皮细胞表达低氧诱导因子-1α的影响

目的研究胰岛素诱导人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF 1α)的表达,及川芎嗪对其影响。方法应用免疫组化法检测不同浓度胰岛素作用下RPE中HIF1α的表达、同一浓度胰岛素作用于RPE不同时间HIF1α的表达、不同浓度川芎嗪对胰岛素作用下RPE中HIF1α的表达的影响。结果胰岛素作用4h,随着胰岛素浓度的增加,RPE中HIF1α的表达逐渐增加,以8×106U·L-1最为明显;8×106U·L-1胰岛素作用不同时间,以4h时RPE中HIF1α的表达较高;不同浓度的川芎嗪对胰岛素作用下的RPE中HIF1α的表达无影响。结论胰岛素可诱导RPE中HIF1α的表达,川芎嗪对胰岛素诱导的RPE中HIF1α的表达无影响。     

大鼠视网膜胚胎发育过程中低氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子的表达

背景研究发现低氧诱导因子-1（HIF-1）与机体缺氧的生理反应有关,并在胚胎发育过程中发挥作用。此外人视网膜胚胎发育过程中血管内皮生长因子（VEGF）呈高表达。但二者在胚胎期缺氧环境中的作用及相互关系仍有待研究。目的观察大鼠视网膜胚胎发育过程中HIF-1α和VEGF的表达变化,探讨HIF-1α和VEGF在视网膜胚胎发育过程中的作用和相互关系。方法30只清洁级SD孕鼠剖腹取出胚胎10、12、14、16、20d鼠,每组取5只孕鼠,每只孕鼠随机选取2只胎鼠进行观察。摘除胎鼠一侧眼球,分离视网膜并制备切片,用免疫组织化学法检测视网膜组织中HIF-1α、VEGF蛋白的阳性表达,采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法分别检测不同胎龄大鼠及成年大鼠视网膜组织中HIF-1α mRNA及VEGF mRNA的表达。结果免疫组织化学染色表明,在大鼠视网膜胚胎早期（10～12d）即可检测到HIF-1α和VEGF蛋白均呈高表达,二者的表达强度均随胎龄的增加而减弱（F=56．70,P〈0．01;F=60．78,P〈0．01）,各胎龄组视网膜中HIF-1α和VEGF蛋白的表达量均明显高于成年鼠,差异均有统计学意义（P〈0．01）,随胎龄的增加HIF-1α蛋白在视网膜中的表达变化与VEGF蛋白表达呈正相关（r=0．96,P=0．00）。RT—PCR检测结果表明,大鼠胚胎早期（10～12d）即可检测到HIF-1α mRNA和VEGF mRNA在视网膜中均呈高表达,二者的表达均随胎龄的增加而减弱（F：68．84,P〈0．01;F=96．49,P〈0．01）,各胎龄组视网膜中HIF-1α和VEGF蛋白的表达量均明显高于成年鼠,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论大鼠视网膜胚胎发育过程中HIF-1α及VEGF的表达随着胎龄的增加均呈先高后低的动态变化趋势,提示HIF-1α／VEGF通路参与大鼠视网膜的胚胎发育过程。     

低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达

目的　检测低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）在年龄相关性白内障（age-related cataract，ARC）晶状体上皮细胞（lens epithelial cells，LECs）中的表达情况，并探讨HIF-1α在ARC发生和发展中的作用。方法　建立氧化应激诱导LECs（SRA01/04）凋亡的细胞模型，H₂O₂浓度为200 μmol·L^-1，并设立正常细胞作为对照组，用Western blot方法检测HIF-1α的表达差异；建立自然衰老的白内障小鼠模型（约为18个月龄），并设立青年小鼠作为正常对照组（约8个月龄），用免疫组织化学方法检测小鼠LECs中HIF-1α的表达差异。收集离体的人的前囊膜，术中分离出ARC患者的前囊膜，用免疫组织化学方法检测LECs中HIF-1α表达差异。结果　氧化应激条件下，SRA01/04细胞系HIF-1α蛋白表达降低。随后在体实验验证，与青年小鼠相比，白内障组小鼠LECs中HIF-1α蛋白表达降低。同样的实验结果在ARC患者LECs中得到证实。结论　HIF-1α与ARC相关，HIF-1α的降低可能参与ARC的发生发展。     

shRNA抑制人RPE细胞HIF-1 α基因表达对VEGF及PEDF表达的影响

目的利用小发卡环RNA（shRNA）使缺氧培养条件下的人视网膜色素上皮（RPE）细胞缺氧诱导因子1α（HIF-1α）基因沉默，观察对血管内皮生长因子（VEGF）及色素上皮衍生因子（PEDF）的影响。方法体外转录法合成对HIF-1αmRNA序列的两个靶点的shRNA，对缺氧（150μmol／LCoCl2模拟）培养条件下人RPE细胞的HIF-1α进行干扰，使用RT—PCR检测HIF-1α、VEGF和PEDFmRNA的表达及Western印迹分析检测HIF-1α、VEGF和PEDF蛋白水平。结果HIF-1αmRNA的两种shRNA均能有效地抑制RPE细胞在缺氧条件下HIF-1α的表达，同时也有效地抑制VEGFmRNA和蛋白表达，并促进PEDF蛋白表达，但对PEDFmRNA的表达无影响。结论HIF-1αmRNA的shRNA能有效地使缺氧条件下RPE细胞HIF-1α基因沉默，进而有效地抑制缺氧对VEGF的上调作用，同时也促进PEDF表达。揭示了HIF-1与缺氧条件下PEDF翻译后的下调机制有关，是促进视网膜新生血管形成最为关键的细胞因子之一。     

缺氧诱导因子1α对糖尿病大鼠中性粒细胞CD18表达和视网膜白细胞黏附的影响

目的观察缺氧诱导因子1α（HIF-1α）对早期糖尿病视网膜病变（DR）大鼠外周血中性粒细胞表面CD18表达以及视网膜白细胞和血管内皮细胞黏附的影响。方法雄性Sprague-Dawley大鼠，链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型。2个月后，取18只糖尿病模型大鼠随机分为糖尿病组（B组）、糖尿病＋HIF-1α反义寡核苷酸组（ASODN）（C组）、糖尿病＋HIF-1α正义寡核苷酸组（SODN）（D组），每组各为6只大鼠。年龄匹配的正常大鼠6只作为正常对照组（A组）。A、B组注射等量5%葡萄糖溶液，C、D组分别通过鼠尾静脉注射ASODN和SODN（025 mg/kg）。分别以流式细胞仪和丫啶橙白细胞造影观察外周血中性粒细胞CD18水平及视网膜白细胞黏附量。结果外周血中性粒细胞CD18的阳性细胞比例，B组为（44.93±3.60）%， A组为（18.66±1.52）%，C组为（31.66±4.72）%，D组为（51.00±5.66）%；各组之间比较，差异有统计学意义（F=42.46, P<0.001）。丫啶橙视网膜白细胞染色阳性细胞数，A组为（46.16±10.68）个，B组为（133.83±20.43）个，C组为（99.83±9.28）个，D组为（121.33±10.23）个。B组阳性染色细胞数较A组提高约2.89倍；C、D组与B组比较，差异无统计学意义（P=0.12，95%可信区间为-3.69~28.69）。结论在体内实验条件下，HIF-1α蛋白能够下调糖尿病动物外周血中性粒细胞表达CD18及视网膜白细胞聚集。HIF-1α有可能成为早期DR药物治疗的靶点。 （中华眼底病杂志，2008，24：268-271）     

低氧诱导因子-1与糖尿病视网膜病变

低氧诱导因子(HIF)是乏氧应答中起重要作用的转录因子,由α亚基和β亚基组成,α亚基包括HIF-1α、HIF-2α和HIF-3α,其中α亚基因诱导条件不同通过选择性剪接产生不同变体.β亚基包括ARNT、ARNT2和ARNT3.α与β亚基在乏氧等应激反应时形成二聚体HIF,启动靶基因转录表达,参与多种细胞生物学功能的调控.目前,HIF-1在糖尿病视网膜病变中有着较广泛深入的研究.本文简述HIF-1在糖尿病视网膜病变中的表达、调控、作用及其意义.     

缺氧诱导因子1α在碱烧伤后兔角膜新生血管形成中的作用

目的 观察碱烧伤后兔角膜新生血管形成的不同时期缺氧诱导因子1α（HIF-1α）在角膜内的表达,探讨HIF-1α对角膜新生血管形成的影响.方法 实验研究.取30只健康家兔,采用随机数字表法分成5组,每组各6只兔,右眼采用1 mol/L氢氧化钠溶液建立角膜碱烧伤模型,左眼作为自身对照.分别于碱烧伤前和碱烧伤后1、3、5、7、14 d,在裂隙灯显微镜下观察家兔角膜新生血管增生情况,HE染色观察角膜组织病理学特征,并采用免疫组织化学法检验角膜组织中HIF-1α的表达,计算炎性细胞（多形核白细胞和淋巴细胞）和HIF-1α阳性细胞核数,对其结果行单因素方差分析及相关分析.结果 角膜碱烧伤后,HIF-1α主要表达在角膜基质中的炎性细胞、血管内皮细胞的细胞核中.随着时间的增加,炎性细胞表达增强,HIF-1α表达量也相应增加,并于碱烧伤后5 d达到高峰,以后逐渐减少.碱烧伤后1、3、5、7、14 d,角膜组织中炎性细胞和HIF-1α表达水平的差异均有统计学意义（F=422.086,437.555;P均＜0.05）,且HIF-1α的表达与新生血管的形成在时空上一致.经相关分析,角膜中炎性细胞和HIF-1α阳性细胞表达呈正相关（r=0.860,P＜0.05）.结论 碱烧伤后炎症反应能诱导HIF-1α的表达,而HIF-1α能促进角膜新生血管的形成.     

RNA干扰技术体外抑制低氧诱导因子-1α及血管内皮细胞生长因子表达的研究

目的研究正常氧及低氧环境下,pSUPER^h1-siHIF-1α。真核表达载体对低氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的抑制效果及由此引起的血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的差异。方法构建pSUPER^h1-siHIF-1α真核表达载体,并建立pSUPER^h1-siHIF-1α稳定转染细胞系。采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法,筛选HIF-1α mRNA抑制效率最高的细胞系。然后将其与对照细胞在正常氧（20％O2）及低氧环境（1％O2）下培养,采用半定量RT-PCR、免疫印迹法及ELISA技术检测正常氧及低氧环境下pSUPER^h1-siHIF-1α对HIF-1α及VEGF表达的抑制效果。结果低氧环境下,pSUPER^h1-siHIF-1α可明显抑制HIF-1α和VEGFmRNA及蛋白质的表达。而正常氧环境下,pSUPER^h1-siHIF-1α虽可明显下调HIF-1αmRNA表达水平,但对VEGF mRNA和分泌型蛋白表达水平无明显抑制效果。结论低氧环境下,pSUPER^h1-siHIF-1α能显著抑制HIF-1α的表达,且下调其下游基因VEGF的表达。因此,pSUPER^h1-siHIF-1α可能为视网膜新生血管的基因治疗提供新的途径。（中华眼科杂志,2007,43：1028-1035）     

HIF-1α、VEGF在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）在视网膜母细胞瘤（RB）组织中表达情况及其在肿瘤血管形成、浸润及转移等生物学行为中作用。方法应用免疫组织化学方法检测RB组织中HIF-1α蛋白、VEGF蛋白的表达情况,并探讨其表达与肿瘤的分级的相关性及HIF-1α和VEGF两者的相关性。结果HIF-1α、VEGF蛋白在RB中呈高表达,HIF-1α阳性细胞为肿瘤细胞核染色、部分胞浆染色,VEGF阳性细胞为肿瘤细胞胞浆染色,HIF-1α、VEGF表达在不同临床分期间差异有统计学意义（P〈0.05）,且其表达和临床分期密切相关（P〈0.05）;HIF-1α、VEGF二者表达存在正相关（rs=0.946,P〈0.01）。结论HIF-1α及VEGF的高表达与RB的临床分期呈正相关,在RB新生血管形成、肿瘤的浸润、转移中可能发挥重要作用。     

复方血栓通胶囊对糖尿病大鼠视网膜抗缺氧及抗氧化能力的影响

目的探讨复方血栓通胶囊对糖尿病大鼠视网膜组织抗缺氧及抗氧化能力的干预作用．并研究其作用机制。方法实验研究。雄性SPF级SD大鼠110只,适应性饲养7d后随机取30只作为正常组。余80只以链脲佐菌素（STZ）诱导制作糖尿病大鼠模型,造模成功66只,取其中60只,随机分成两组：30只大鼠不予处理,作为对照组;其余30只作为治疗组,给予复方血栓通胶囊按900mg／kg／d的剂量进行治疗。在第4、第12、第20周到达实验终点时,采用免疫组织化学、分光光度法和1α-PCR方法分别检测各组视网膜组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和铜锌超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）的阳性细胞数及mRNA水平表达量,以及视网膜组织中超氧化物歧化酶（SOD）的活力。对相关数据行随机区组设计的方差分析。结果①实验第4、第12和第20周,对照组糖尿病大鼠视网膜节细胞层及内核层均可见大量HIF-α阳性细胞表达,而治疗组HIF-1α阳性细胞数较同时间点的对照组少（P〈0．051：在各时间点,治疗组HIF-10αmRNA的表达也较对照组低,差异均有统计学意义（P〈O．05）。②第4、第12和第20周时,治疗组CuZn-SOD阳性细胞数较对照组多,CuZn．SODmRNA的表达也较对照组高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。③第4周和第12周时,治疗组的总超氧化物歧化酶（T-SOD）和CuZn-SOD活力较对照组有显著提高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论复方血栓通胶囊可能是通过改善组织缺血缺氧状态,降低HIF-1α表达,提高SOD活力和CuZn-SOD蛋白表达水平,从而来提高早期糖尿病大鼠视网膜组织抗缺氧及抗氧化能力。     

杞菊地黄汤对糖尿病视网膜病变模型大鼠视网膜新生血管的作用

目的　观察杞菊地黄汤对糖尿病视网膜病变（DR）模型大鼠视网膜新生血管的作用及其机制。方法　采用STZ（40 mg·kg^-1）诱导糖尿病大鼠模型,继续以高脂饲料饲养4周,眼底荧光素血管造影（FFA）观察大鼠视网膜病变情况确定DR模型是否成功。将DR大鼠（48只）分为模型组、羟苯磺酸钙组（5.4 mg·kg^-1）、杞菊地黄汤高剂量组（16.74 g·kg^-1)、低剂量组（8.37 g·kg^-1）,以正常大鼠为对照组（10只）。连续给药4周后,检测大鼠空腹血糖（FBG）和视网膜新生血管情况。ELISA法检测血清中血管生成素-1（Ang-1）和血管内皮生长因子（VEGF）的含量。Western-blot检测视网膜中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）的蛋白表达。RT-PCR法检测视网膜中Ang-1和VEGF mRNA的表达。结果　与对照组比较,模型组大鼠FBG显著升高（P<0.01）,微血管数量增加、眼底荧光素渗漏,血清及视网膜中Ang-1、VEGF含量均升高（均为P<0.05）,视网膜中HIF-1α和VEGFR2蛋白表达均显著升高（均为P<0.01）;与模型组比较,杞菊地黄汤高剂量组大鼠FBG下降（P<0.05）,视网膜新生血管数量下降、荧光素渗漏面积显著减少,视网膜中Ang-1、VEGF、HIF-1α和VEGFR2水平均显著下降（均为P<0.05）;杞菊地黄汤低剂量组视网膜中HIF-1α、Ang-1、VEGF表达均下降（均为P<0.05）。结论　杞菊地黄汤能抑制DR模型大鼠新生血管,缓解视网膜病理损伤状况,其作用机制与调控HIF-1α/VEGF/VEGFR2信号有关。