灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸细胞凋亡及核转录因子NF—κB／P65表达的影响

目的观察灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸细胞凋亡及核转录因子NF-κB／P65表达的影响。方法Wistar雄性大鼠50只,随机分成3组（对照组、模型组、灵芝组）。TUNEL法检测睾丸细胞凋亡率,免疫组化法检测核因子-κB转录（NF—κB／P65）蛋白的表达。结果模型组细胞凋亡率和NF-κB／P65的表达均明显高于对照组和灵芝组（P〈0．05）。结论灵芝孢子粉对糖尿病大鼠睾丸组织具有保护作用,可抑制睾丸细胞凋亡,可能与其减轻氧化应激、减少糖尿病睾丸过度表达NF-κB／P65有关。     

枸杞多糖干预糖尿病大鼠颌下腺组织中核因子κB的表达

背景：核因子κB是一种广泛存在于体内多种细胞的核转录因子,能介导多种炎性递质转录表达,也参与细胞凋亡的调控。目的：观察枸杞多糖对糖尿病大鼠颌下腺组织中核因子κB表达的影响。方法：60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、补枸杞多糖组,后2组用四氧嘧啶诱发糖尿病大鼠模型。造模成功后补枸杞多糖组灌胃50%枸杞多糖水溶液,糖尿病组和对照组灌胃等容量生理盐水,连续灌胃8周。结果与结论：灌胃8周后糖尿病组和补枸杞多糖组体质量低于正常对照组（P〈0.05）,补枸杞多糖组体质量高于糖尿病组（P〈0.05）。灌胃8周后糖尿病组、补枸杞多糖组血糖高于正常对照组（P〈0.05）,补枸杞多糖组血糖低于糖尿病组（P〈0.05）。核因子κB在正常颌下腺中无表达或仅有少量表达;糖尿病时表达量明显增多,而补枸杞多糖组表达量则明显减少。结果可见枸杞多糖能够抑制核因子κB的活化与表达,对糖尿病大鼠颌下腺组织起到一定的保护作用。     

不同方式液体复苏对失血性休克大鼠外周血单个核细胞中核转录因子-κB活性的影响

目的观察失血性休克大鼠外周血单个核细胞（PBMC）中核转录因子-κB（NF—κB）活性的变化以及不同方式液体复苏对其的影响。方法将32只成功复制的失血性休克模型SD大鼠随机分为对照组、无液体复苏组、限制性液体复苏组和快速大量液体复苏组，每组8只；比较各组的救治疗效，并用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组PBMC中NF—κB活性的变化。结果限制性液体复苏组大鼠的存活时间较快速大量液体复苏组及无液体复苏组明显延长（P均〈0．05）；限制性液体复苏组大鼠72h存活率明显高于快速大量液体复苏组和无液体复苏组，但低于对照组（P均〈0．05）。除对照组外，其余各组创伤后60min和120min PBMC中NF—κB活性均较创伤前有明显升高，且120min较60min也明显升高（P均〈0．05）；限制性液体复苏组NF～κB活性明显低于快速大量液体复苏组和无液体复苏组（P均〈0．05）；死亡组创伤后60min和120min NF—κB活性明显高于存活组（P均〈0．05）。结论限制性液体复苏可显著降低失血性休克大鼠的72h死亡率；PBMC中NF—κB活性与预后密切相关，NF—κB活性高则提示预后不良，而限制性液体复苏时NF-κB活性明显降低，有助于改善预后。     

X射线辐射诱导HepG2细胞的凋亡及对核因子κB的激活作用

目的：探讨核因子κB在X射线电离辐射诱导HepG2细胞凋亡中的作用。 方法：实验于2004—02／2005—03在南方医科大学南方医院完成。将HepG2细胞分3组：对照组不加任何处理因素；辐射组单纯X射线电离辐射6Gy；核转录因子κB抑制剂组是指在照射前30min用20μmol／L的lactacystin预处理细胞，然后按照同样的辐射条件进行X射线照射。流式细胞仪检测细胞凋亡率，免疫电泳迁移率改变分析法检测细胞内核因子κB的激活，应用SPSS10．0软件包行多组均数间方差分析。 结果：对照组、辐射组、核转录因子κB抑制剂组的细胞凋亡率分别是1．73％，20．90％，35．23％。对照组的核因子κB微弱激活，辐射组明显激活。核转录因子κB抑制剂组的活性较辐射组减弱，与对照组相似。 结论：辐射可以引起HepG2细胞凋亡，并诱导了核因子κB的激活，且可能在X射线辐射诱导HepG2细胞凋亡中发挥抗凋亡作用。     

核转录因子κB在炎性相关癌症中的作用

核转录因子κB（nuclear factor—kappa B,NF—κB）是一种重要的转录因子蛋白,广泛存在于机体各种组织细胞中,对细胞因子、化学因子、生长因子、细胞黏附分子、抗凋亡蛋白基因等多种因子的表达上调起关键作用,并且在多种疾病尤其是癌症的发病机制中发挥重要的作用。     

核转录因子-κB与肾脏疾病研究进展

核转录因子-κB（nuclearfactor—kappa B,NF-κB）是1986年SEN等首先从B淋巴细胞核提取的一种核蛋白。后来研究发现NF—κB广泛存在于真核细胞内,能促进多种细胞转录和表达,与炎症反应、免疫应答及细胞增生、转化和凋亡等重要的生理病理过程密切相关。近年来发现NF—κB在肾脏疾病的发生、发展过程中起着重要的作用。因此,本文就NF-κB与肾脏疾病研究进展作一综述。     

X射线辐射诱导HepG2细胞的凋亡及对核因子κB的激活作用

目的:探讨核因子κB在X射线电离辐射诱导HepG2细胞凋亡中的作用。方法:实验于2004-02/2005-03在南方医科大学南方医院完成。将HepG2细胞分3组:对照组不加任何处理因素;辐射组单纯X射线电离辐射6Gy;核转录因子κB抑制剂组是指在照射前30min用20μmol/L的lactacystin预处理细胞,然后按照同样的辐射条件进行X射线照射。流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫电泳迁移率改变分析法检测细胞内核因子κB的激活,应用SPSS10.0软件包行多组均数间方差分析。结果:对照组、辐射组、核转录因子κB抑制剂组的细胞凋亡率分别是1.73%,20.90%,35.23%。对照组的核因子κB微弱激活,辐射组明显激活,核转录因子κB抑制剂组的活性较辐射组减弱,与对照组相似。结论:辐射可以引起HepG2细胞凋亡,并诱导了核因子κB的激活,且可能在X射线辐射诱导HepG2细胞凋亡中发挥抗凋亡作用。     

缬沙坦对糖尿病大鼠视网膜组织NF-κB表达影响

目的探讨缬沙坦对糖尿病大鼠视网膜组织核因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法将20只Wistar大鼠随机分为正常对照组、高糖诱导视网膜病变模型组、缬沙坦处理组和缓冲液处理组,每组5只大鼠。正常对照组和模型组不做处理,缬沙坦组给予缬沙坦40 mg/kg灌胃,缓冲液组给予相同体积缓冲液灌胃,用免疫组织化学法检测视网膜组织中NF-κB的表达水平。结果正常对照组大鼠视网膜组织NF-κB无阳性表达,模型组、缬沙坦组、缓冲液组NF-κB表达水平均明显高于正常对照组（F=262.00,q=18.06~34.59,P〈0.01）;缬沙坦组NFκ-B表达水平较模型组明显降低（q=15.29,P〈0.01）。结论缬沙坦能降低大鼠视网膜组织中NF-κB表达水平,对糖尿病大鼠视网膜病变具有保护作用。     

糖皮质激素对哮喘大鼠气道上皮细胞NF-κB、ICAM-1表达的影响

目的探讨糖皮质激素（布地奈德混悬液）对核因子-κB（NF-κB）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）在哮喘大鼠气道上皮细胞表达的影响。方法将30只大鼠随机分为对照组、哮喘组、布地奈德治疗组，应用免疫组化技术结合计算机病理图像分析系统测定大鼠气道上皮胶原的沉积和气道上皮细胞NF—κB、ICAM-1的相对含量。结果哮喘组NF—κB、ICAM-1的表达水平、气道上皮胶原的沉积明显高于对照组及布地奈德治疗组（均P〈0．01），气道上皮细胞NF—κB与ICAM-1表达呈正相关（r-0．61，P〈0．01），ICAM的表达水平与气道上皮胶原含量呈正相关（r=0．47，P〈0．01）。结论NK-κB、ICMA-1在哮喘气道重构的发生机制中发挥重要作用，早期应用布地奈德可能通过下调NF-κB、ICAM-1的表达，干预气道重构。     

溃疡性结肠炎大鼠肠组织NF—κB P^65表达的意义

目的探讨溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,uc）大鼠结肠组织核因子-κB（NF-κB） P^65的表达的意义。方法雌性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组,每组7只。模型组用三硝基苯磺酸（TNBS）／乙醇溶液灌肠复制UC模型。评价2组实验大鼠大体及组织病理学改变、采用蛋白质印迹杂交法检测结肠组织核因子（NF）-κB P^65蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠结肠大体形态评分、组织学评分明显升高（0．00±0．00）Vs（5．43±1．27）,（1．29±0．49）Vs（6．71±0．95）,P〈0．01）;与正常组比较,模型组结肠组织NF—κB蛋白区带加宽。结论NF—κB与UC发病关系密切。     

K562/A02耐药细胞NF-κB活性测定及葛根素部分逆转耐药效应的初步研究

白血病细胞的多药耐药（MDR）的产生是导致化疗失败的主要原因。目前发现MDR的产生机制是多因素的，且有不同的耐药表型。核转录因子KappaB（NF—κB）在细胞增殖和凋亡中起关键调控作用。为明确NF—κB是否与细胞MDR产生有关及葛根素是否通过抑制NF—κB活性而逆转耐药，我们观察了慢性粒细胞白血病急变细胞株K562及其耐药细胞株K562／A02的NF—κB活性，P糖蛋白（P—gP）、耐药相关蛋白（MRP）表达情况，以及葛根素干预前后NF—κB活性，P—gP、MRP表达的变化，为揭示白血病细胞耐药机制，寻求有效的逆转耐药药物提供实验依据。     

核因子-κB对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1与细胞间黏附分子-1表达的影响

目的：探讨核因子-κB（NF．κB）对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响，以及抑制其表达对肾脏的保护作用。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病模型组（DM组）、NF-κB抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯干预组（DP组），用链脲佐茵素诱导糖尿病大鼠模型。于8周末检测血糖、糖化血红蛋白、肾重指数及尿白蛋白排泄率。应用免疫组织化学染色技术检测肾组织NF-κB、MCP-1以及ICAM-1的表达。结果：（1）与NC组相比，DM组大鼠肾重指数、尿白蛋白排泄率显著增高。DP组也有增高但显著低于DM组（均P〈0.01）；（2）DM组大鼠肾组织NF-κB、MCP-1以及ICAM-1的表达显著高于NC组，DP组的表达显著低于DM组而高于NC组（均P〈0．01）；（3）NF．κB的表达与MCP-1、ICAM-1、尿白蛋白排泄率、肾重指数呈明显正相关（r=0．885，P〈0，01；r=0．861，P〈0．01；r=0．796。P〈0．01；r=0．457。P〈0．01）。结论：糖尿病大鼠肾组织中NF-κB表达明显增加，抑制其活性可减少MCP-1、ICAM-1的表达，减轻单核／巨噬细胞的浸润。延缓糖尿病肾病的发展。     

核因子-κB在阿霉素致大鼠心肌细胞损伤中的意义

目的:研究核因子-κB在阿霉素致新生大鼠心肌细胞损伤中的意义。方法:培养的新生大鼠心肌细胞分为三组:对照组、阿霉素组和阿霉素 抗氧化剂组。MTT法检测新生大鼠心肌细胞的存活率;RT-PCR法测定新生大鼠心肌细胞中p53 mRNA的表达;Western blot法测定新生大鼠心肌细胞中研究核因子-κB蛋白的表达;凝胶阻滞分析法测定新生大鼠心肌细胞中研究核因子-κB的结合活性。结果:与对照组比较,阿霉素组新生大鼠心肌细胞存活率降低、p53mRNA表达增加、研究核因子-κB p50蛋白表达增加、细胞胞核中研究核因子-κB的结合活性增加;而阿霉素 抗氧化剂组新生大鼠心肌细胞存活率、p53 mRNA、研究核因子-κB p50蛋白表达、研究核因子-κB的结合活性均无明显变化。结论:在阿霉素致大鼠心肌细胞损伤过程中研究核因子-κB的活性增加,研究核因子-κB在阿霉素致大鼠心肌细胞损伤过程中起促进细胞凋亡,可能与调节凋亡相关基因p53的表达有关。     

多肽eSN50通过核质转运受体Importinα抑制HepG2细胞核因子-κB及其下游因子的表达

目的研究乙醇、内毒素是否通过核转录因子NF—kappaB即IKB—NF-κB-importina途径引起细胞炎症、凋亡和诱导下游基因TNF-α、Caspase-3的表达;cSN50作为一种穿膜多肽通过阻断NF-κB与importinct结合,从而抑制NF—KB核转位及其下游基因的表达,起到保护细胞的作用。方法应用流式细胞仪观察HepG2经不同浓度乙醇、内毒素刺激后的细胞凋亡率;分光光度计法测Caspase-3活性;ELISA法检测细胞培养上清TNF-α;Westernblot法检测NF-KBpso、importina3、IKBa,间接免疫荧光法测p50、IKBα、importinα3的活化水平。结果乙醇、内毒素刺激后TNF-α、Caspase-3的值量效上与空白对照组比差异均有统计学意义（P均〈0．05）,细胞核内p50显著增加（P〈0．05）,胞浆IKBa下降（P〈0．05）,cSN50（100μmol／L）能部分阻断P50的核转位及其下游因子的表达（P〈0．05）。结论急性酒精肝损伤中,NF-κB的核转位在此损伤中起重要作用,cSN50能部分抑制被刺激后的HepG2细胞核中NF-κB活性及其下游基因的表达。     

抑制核转录因子-κB活性对糖尿病大鼠肾组织血管内皮生长因子表达的影响

目的：观察链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾组织核转录因子-κB（NF-κB）和血管内皮生长因子（VEGF）的变化，以及抑制NF-κB活性对糖尿病大鼠肾组织VEGF表达的影响。方法：60只雄性SPF级Wistar大鼠随机分为3组，正常对照组（NC组）、糖尿病未干预组（DM组）、吡咯烷二硫基甲酸酯（NF-κB活性抑制剂，PDTC）干预组（DP组），每组20只。每组再分为2批，分别为4周批、8周批。以链脲佐菌素造糖尿病模型。分别于第4、8周处死大鼠，测肾重指数、24h尿蛋白排泄率、血肌酐、尿素氮、血脂、糖化血红蛋白等指标，用免疫组化方法测肾组织VEGF及NF-κB的表达。结果：DM组与NC组比较，大鼠肾组织中NF-κB和VEGF的表达均明显增强（P〈O．01），DP组大鼠肾组织中NF-κB和VEGF的表达较DM组明显下降（P〈0．01），但仍高于NC组（P〈0．01）。相关分析表明，肾组织中VEGF表达量与NFκB成正相关。结论：抑制NF-κB的表达可降低VEGF的产生。对NF-κB和VEGF的深入研究将有助于防治糖尿病的发生和发展。     

不同剂量蛋白酶体抑制剂MG-132在诱导K562细胞株凋亡中的作用

本研究探讨不同剂量蛋白酶体抑制剂MG．132对人慢性粒细胞白血病急性红白血病细胞株K562的干预作用。应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测不同剂量（0、2、4、8、16、32μmol／L）的MG-132作用48小时对K562细胞株增殖的影响;应用免疫细胞组织化学法检测相同条件下MG-132对K562细胞株中的核因子-κB（NF—κB）及糖皮质激素受体（glucocorticoidreceptor,GR）表达的影响;采用流式细胞术检测相同条件下MG-132对K562细胞株凋亡的影响。结果表明：不同剂量的MG-132作用48小时后K562细胞株的抑制率呈剂量依赖性,实验组的抑制率明显高于对照组,以32μmol／L剂量组的抑制率最高,为（45．24±4．12）％;K562细胞株中的NF—KB、GR的表达水平均表现出对MG-132剂量的依赖性,NF—κB的表达水平实验组明显低于对照组,以32μmol/L剂量组表达最低,为63．60±2．95。GR在16μmol／L剂量组表达最高,为75．62±2．70。K562细胞株的凋亡率亦表现出对MG-132剂量的依赖性,而且在实验组明显高于对照组,以32μmol／L剂量组的凋亡率最高,为（21．37±2．02）％。结论：MG-132可能是通过下调NF—κB、上调GR的表达诱导了K562细胞的凋亡和抑制,其效应表现为剂量的依赖性。     

灯盏花素对脑复苏后大鼠海马回中核转录因子-κB的影响

目的 探讨灯盏花素干预治疗大鼠全脑缺血-再灌注后大脑海马回中核转录因子-κB p65的表达,阐明其在脑复苏后的保护作用.方法 72只健康SD大鼠,雌雄不分,随机分为假手术组(SO组,24只)、全脑缺血-再灌注组(I-R组,24只)、灯盏花素治疗组(Br组,24只).采用简化的Pulsinelli等的四血管阻塞法建立全脑缺血-再灌注损伤及灯盏花素对全脑缺血-再灌注损伤作用的模型;用HE染色检测海马CA1区存活神经元数目;用TUNEL原位末端标记法检测神经元凋亡率;用免疫组织化学SABC法检测海马CA1区锥体细胞中核转录因子-κB p65的表达.结果 Br组核转录因子-κB p65的表达在3 h未见明显降低(P>0.05),其余各相应时间点灯盏花素可明显降低核转录因子-κB p65的表达(P均<0.01),增加存活神经元数目(P均<0.05),减少细胞凋亡的发生(P均<0.01).结论 全脑缺血-再灌注后,灯盏花素通过抑制核转录因子-κB p65的表达,抗细胞凋亡,增加存活神经元的数目而起到脑保护作用.     

2型糖尿病大鼠睾丸的IL-1 β、TNF-α损伤与灵芝孢子粉的干预

目的观察灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠睾丸IL-1 β、TNF-α的影响。方法Wistar雄性大鼠50只,随机分成3组（正常组、模型组、灵芝组）。采用放免法检测睾丸IL-1 β、TNF-α的含量。结果糖尿病组与正常对照组比较,IL-1 β、TNF-α含量明显高于对照组（P〈0．05）。而灵芝组与糖尿病组比较,IL-1 β、TNF-α含量明显低于糖尿病组（P〈0．05）。结论灵芝孢子粉能有效降低IL-1 β、TNF-α对糖尿病大鼠生殖系统的毒性损害,对糖尿病大鼠生殖系统的细胞凋亡有明显抑制,从而是对睾丸细胞起保护作用的机制之一。灵芝孢子粉作为一种治疗糖尿病的辅助用药,在临床应用上具有广阔前景。