NS-398对人卵巢癌细胞株SW626细胞Snail、MMP-2表达的影响

目的:研究选择性COX-2抑制剂NS-398对人卵巢癌细胞株SW626细胞Snail、MMP-2表达的影响,探讨选择性COX-2抑制剂NS-398对人卵巢癌细胞株SW626细胞侵袭力的影响机制。方法:以不同浓度的NS-398作用于人卵巢癌细胞,MTT法测定NS-398药物的浓度对SW626细胞的生长抑制作用,实时荧光定量PCR法分别检测NS-398作用于人卵巢癌细胞株SW626的Snail以及MMP-2的mRNA的表达水平,免疫细胞化学在蛋白水平定性检测Snail以及MMP-2的表达情况。结果:MTT法测定结果显示:NS-398对SW626细胞有明显的生长抑制作用,并呈剂量依赖性和时间依赖性;RT-PCR半定量结果显示:NS-398可使人卵巢癌细胞株SW626Snail蛋白和MMP-2的表达明显减弱,且呈剂量梯度下降,呈浓度依赖关系(P<0.05),各实验组相比较有统计学意义(P<0.05)。结论:选择性COX-2抑制剂NS-398能够抑制人卵巢癌细胞株SW626的Snail蛋白和MMP-2表达,使Snail以及MMP-2表达下调,这可能是其抑制人卵巢癌细胞株SW626肿瘤细胞侵袭力的机制之一。     

COX-2抑制剂对食管癌ECa-109细胞的放射增敏作用

目的：探讨选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS-398作用于食管癌细胞株ECa-109,观察其放射增敏作用,并对其可能增敏机制进行初步探讨。方法应用MTT法检测NS-398对细胞的生长抑制率;克隆形成实验分析放射增敏效应,流式细胞术（ FCM）定量检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因Bcl-2及BaxmRNA表达。结果 NS-398可显著增强ECa-109细胞的放射敏感性,对细胞的生长抑制作用呈时间与剂量依赖性;Ns-398显著增加放射诱导的细胞凋亡,上调BaxmRNA表达,而Bcl-2表达无明显变化（P＞0．05）。结论 NS-398可增强食管癌细胞 ECa-109的放射敏感性,其机制可能与上调Bax表达,上升Bax/Bcl-2比例,激活线粒体凋亡通路,诱导细胞凋亡相关。     

COX-2抑制剂NS-398对肝癌HepG2细胞凋亡蛋白Bcl-2和Caspase 3表达的影响

目的探讨选择性环氧合酶2(COX-2)抑制在肝癌HepG2细胞凋亡中的作用。方法用选择性COX-2抑制剂NS-398处理HepG2细胞,流式细胞术测定细胞凋亡和半胱氨酸酶3(Caspase3)活性变化;Western blotting法检测不同浓度NS-398处理后凋亡相关蛋白Bcl-2、Caspase3表达变化。结果流式细胞术显示NS-398(0、100、200、300、400μmol/L)作用HepG2细胞24h后,对照组未见凋亡峰,各试验组(100、200、300、400μmol/L)出现明显的凋亡峰,其凋亡率分别为(10.51±1.04)%、(27.79±2.40)%、(45.72±3.32)%、(60.22±2.03)%,呈明显剂量依赖性(P<0.01),不同浓度NS-398处理后Bcl-2表达下降,Caspase3表达增加,随着NS-398处理浓度的增加,表达活性Caspase3的细胞百分率分别为(2.67±0.22)%、(9.53±0.15)%、(21.28±0.43)%、(39.63±0.8)%、(63.40±0.69)%,呈明显剂量依赖性(P<0.01)。结论选择性COX-2抑制剂NS-398可能通过下调Bcl-2蛋白表达活化Caspase3,从而诱导肝癌细胞HepG2凋亡,COX-2抑制也许可作为新的肝癌的治疗方法。     

NS-398对肝癌细胞系HepG2环氧合酶-2表达的影响

目的 研究环氧合酶-2(COX-2)抑制剂氮-2,环己氧-4,硝基苯-甲基磺胺(NS-398)对肝癌细胞株HepG2细胞体外抗肿瘤作用,探讨其抗癌作用的分子机理.方法 分别用100、200、300、400μmol/L NS-398处理HepG2细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定肿瘤细胞增殖抑制率,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期的改变及凋亡百分比的变化,用Westen blotting检测COX-2蛋白的表达,用放射免疫测定法检测NS-398对HepG2细胞前列腺素E2(PGE2)释放水平.结果 NS-398呈剂量依赖性的方式抑制HepG2细胞增殖,并诱导其凋亡,细胞周期分析表明,随着浓度增大,S期细胞明显减少,有G1期细胞累积现象,24 h时半数有效剂量(IC50)为300μmo/L.NS-398明显抑制COX-2的活性和表达.随着浓度的增加,其COX-2蛋白表达逐渐降低,100、200、300、400μmol/L NS-398组灰度值分别为1515.1±127.2、1023.5±108.4、691±94.3和493.6±86.6,与对照组1822±157.4相比差异有统计学意义(t值分别为3.736、1.623、1.810、2.587,P<0.01).NS-398可明显抑制HepG细胞PGE2释放水平,其吸光度值(A值)分别为0.70±0.02、0.48±0.02、0.29±0.01和0.18±0.01,与对照组比较0.03±0.01差异有统计学意义.结论 NS-398对肝癌细胞增殖有抑制作用并诱导其凋亡,可能与细胞G1期阻滞以及通过抑制COX-2活性,抑制COX-2下游产物PGE2表达有关.     

Nimesulide诱导胰腺癌细胞凋亡机制的研究

目的：探讨选择性COX-2抑制剂Nimesulide对人胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响及其可能分子机制。方法：应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察不同浓度Nimesulide对PANC-1细胞增殖的影响;流式细胞术（FACS）及DNA梯状电泳（DNA ladder）检测PANC-1细胞凋亡的改变;Western blotting法检测Nimesulide不同浓度作用下PANC-1细胞COX-2蛋白水平的改变,RT-PCR法检测COX-2 mRNA水平的变化。结果：MTT、流式细胞术及DNA ladder显示Nimesulide呈剂量依赖性地抑制PANC-1细胞的增殖,并诱导其凋亡;Western blotting和RT-PCR法显示随着药物浓度的增加,COX-2蛋白及mRNA表达降低。结论：Nimesulide可能通过对COX-2表达的下调而诱导凋亡,从而抑制人胰腺癌PANC-1细胞生长。     

COX-2及凋亡基因表达在二十二碳六烯酸抑制人胰腺癌细胞体外增殖中的变化

目的研究COX-2和凋亡相关基因Bcl-2、Bax在二十二碳六烯酸(DHA)抑制人胰腺癌细胞体外增殖中表达的变化,探讨DHA抑制肿瘤细胞的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验、流式细胞技术对细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期以及肿瘤相关蛋白COX-2和凋亡基因Bcl-2、Bax进行分析。结果DHA能以时间-剂量依赖关系抑制人胰腺癌细胞增殖,同时诱导细胞凋亡。DHA对正常人成纤维细胞的增殖无明显影响。流式细胞仪检测显示:G0-G1期细胞比例增高,S期细胞比例下降。DHA作用24h后,胰腺癌细胞的COX-2、Bcl-2、Bax蛋白表达下降。结论DHA下凋COX-2、Bcl-2、Bax的表达可能是其抑制胰腺癌细胞增殖的作用机制之一。     

番茄红素对前列腺癌细胞PC-3增殖和细胞周期的影响

目的研究番茄红素对体外培养的雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3的抑制作用及其可能的作用机制。方法采用MTT法和H3-TdR掺入法观察番茄红素对癌细胞增殖的影响,流式细胞仪观察同步化的细胞经番茄红素作用后细胞周期及凋亡的变化,RT-PCR检测cyclin D1、bcl-2、bax的mRNA的表达的变化。结果番茄红素抑制PC-3细胞的增殖和DNA合成、诱导其凋亡、改变细胞周期分布(使G0/G1期细胞增多、而S期和G2/M期细胞减少)。RT-PCR结果显示,cyclin D1和bcl-2的mRNA表达水平下调,而bax的mRNA表达水平上调。上述作用呈剂量效应关系。结论番茄红素可诱导PC-3细胞凋亡、改变细胞周期分布、影响cyclin D1、bcl-2、bax的mRNA的表达,从而抑制肿瘤细胞增殖。     

二十二碳六烯酸对人胰腺癌细胞增殖的抑制

目的探讨二十二碳六烯酸（DHA）对人胰腺癌细胞株Patu8988和SW1990生长的作用。方法采用MTT法检测DHA作用后Patu8988和SW1990细胞的增殖,流式细胞术检测DHA作用后Patu8988和SWl990细胞的凋亡、细胞周期和肿瘤相关蛋白环氧合酶2（COX-2）的表达量。结果DHA作用人胰腺癌细胞株24、48、72h后,细胞的增殖受到明显抑制（P〈0．01）,同时DHA能诱导细胞凋亡,随着作用时间延长和作用剂量增加,效果越明显。50μg／ml DHA作用24h后,胰腺癌细胞的COX-2表达量下降（P〈0．05）。结论DHA能有效地抑制胰腺癌细胞增殖,同时诱导细胞凋亡,可能与COX-2在胰腺癌细胞中的表达下调有关。     

环氧合酶-2抑制剂NS398对人卵巢癌细胞系CAOV3细胞增殖的影响

目的:探讨环氧合酶-2抑制剂NS398对人卵巢癌细胞系CAOV3细胞增殖的影响。方法:采用MTT法观察NS398对CAOV3的增殖抑制情况;流式细胞仪测定NS398对CAOV3细胞周期的影响;放射免疫方法检测NS398作用前后PGE2量的变化。结果:NS398对CAOV3细胞的增殖具有抑制作用,并显示出明显的时间和剂量的依赖性;NS398使CAOV3细胞发生细胞周期的G1期阻滞,并抑制CAOV3细胞分泌PGE2。结论:NS398抑制PGE2的分泌,抑制CAOV3细胞增殖,使细胞增殖停留在G1期。     

三氧化二砷诱导人横纹肌肉瘤RD细胞株凋亡的实验研究

[目的]研究三氧化二砷(As2O3)体外抑制人胚胎型横纹肌肉瘤细胞株RD(RD细胞株)增殖及诱导凋亡的作用. [方法]以不同浓度的As2O3处理RD细胞株,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞的DNA含量及凋亡率. [结果]4～8 μmol/L hs2O3能以时间剂量依赖的方式抑制RD细胞株的增殖,并诱导其凋亡,在流式细胞仪DNA线条图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”,细胞周期阻滞于G0/G1期,S期和G2/M期细胞减少;低浓度As2O3(＜2μmol/L)则有轻微促增殖作用,细胞周期向S期和G2/M期集中,G0/G1期细胞减少. [结论]As2O3浓度≥4μmol/L时,可明显抑制RD细胞株的生长并促进细胞凋亡,其临床应用还需进一步研究.     

塞来昔布抑制PI3K-Akt信号转导通路及COX-2表达的作用研究

目的:观察塞来昔布降调节COX-2的表达,诱导宫颈癌HeLa细胞的凋亡作用及阻止PI3K-Akt信号转导的可能机制。方法:采用MTT法检测塞来昔布对HeLa细胞的增殖抑制作用,应用流式细胞术检测塞来昔布对HeLa细胞增殖周期和凋亡的影响,并用免疫组化SP法和RT-PCR法检测塞来昔布对细胞PI3K-Akt信号转导通路的影响。结果:塞来昔布抑制HeLa细胞增殖和诱导HeLa细胞的凋亡作用均呈剂量和时间依赖性,经不同浓度的塞来昔布处理24 h后,HeLa细胞周期的G1期、G2/M期细胞比例明显增多,S期细胞比例明显下降,细胞被阻滞于G2/M期。塞来昔布能阻止PI3K-Akt的信号转导,并呈浓度和时间依赖性。结论:塞来昔布在体外能下调COX-2的表达,抑制HeLa细胞的增殖,并诱导其凋亡,其作用机制与阻滞细胞周期于G2/M期及阻止PI3K-Akt信号转导通路有关。     

MitcaFx制剂对卵巢癌细胞抑制作用的研究

目的初步探讨MitcaFx制剂对体外SKOV-3人卵巢癌细胞株模型的生长抑制作用。方法本实验采用MTT法、划痕实验、流式细胞术(FCM)实验方法,分析MitcaFx对SKOV-3细胞株迁徙能力、增殖能力和细胞周期的影响。结果 MTT、划痕实验结果显示,MitcaFx制剂能显著抑制卵巢癌细胞的增殖和迁徙能力;流式细胞术分析结果表明,实验组细胞周期被阻滞于细胞分裂DNA合成后期(S期),侧向角散射光信号(SSC)值明显下降,但前向角散射光信号(FSC)值仍然恒定,同时未出现细胞凋亡峰。结论本研究表明,MitcaFx制剂能干扰细胞DNA分裂周期,并在体外具有抑制卵巢癌细胞增殖和迁徙的能力的作用。     

羟苯维胺脂对卵巢癌细胞SKOV3的体外影响

目的探讨羟苯维胺脂(4-HPR)对卵巢癌细胞株SKOV3体外生长的影响.方法通过细胞生长曲线和MTT法观察4-HPR对卵巢癌细胞株SKOV3的生长抑制作用,通过流式细胞观察4-HPR对细胞周期的影响和诱导凋亡作用.结果5和10 μmol/L的4-HPR可显著抑制卵巢癌细胞株SKOV3的生长和增殖,MTT显示IC50为3.2μmol/L.流式细胞检测显示4-HPR可使S期和G2期的比例增加,可诱发卵巢癌细胞株SKOV3的凋亡,其诱导凋亡的作用呈时间和剂量依赖性.结论4-HPR可抑制卵巢癌细胞的增殖,促进细胞的凋亡,在卵巢癌的治疗上有临床应用前景.     

枸杞多糖对人前列腺癌细胞生长影响

目的 观察枸杞多糖对体外培养的雄激素非依赖型人前列腺癌PC-3细胞存活率、细胞周期及其凋亡的影响。方法 用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测枸杞多糖对PC-3细胞作用的时间效应和剂量效应，并计算细胞生长抑制率；流式细胞仪观察枸杞多糖处理PC-3细胞后细胞周期以及细胞凋亡的改变。结果 枸杞多糖对PC-3细胞的增殖有明显的抑制作用，抑制率可达87．84％，且呈剂量-效应和时间-效应关系；流式细胞仪分析显示。枸杞多糖可影响该细胞周期并引起细胞凋亡，凋亡率高达40％。结论 枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞的生长有明显抑制作用，其机制可能是通过诱导人前列腺癌细胞凋亡和影响其生长周期而实现。     

尼美舒利和扑热息痛对人卵巢癌细胞株SKOV3的作用研究

目的研究选择性环氧合酶（cyclooxygenase，COX）-2抑制剂尼美舒利和非COX抑制剂扑热息痛，对人卵巢癌细胞系SKOV3生长作用的影响。方法利用免疫组化法检测SKOV3细胞系中COX-2表达，以及两种药物对Ki-67在SKOV3细胞中表达的影响；透射电镜观察两种药物作用后，细胞形态变化及凋亡情况；流式细胞术检测两种药物作用后，对SKOV3细胞周期的影响。结果COX-2在SKOV3细胞中表达呈阳性，尼美舒利作用后的SKOV3细胞中，可发现Ki-67表达明显减少，扑热息痛对Ki-67表达无影响；透射电镜观察到细胞中凋亡小体的形成；流式细胞术发现，尼美舒利使SKOV3细胞停滞在G0／G1期，扑热息痛对细胞周期改变无影响。结论选择性COX-2抑制剂尼美舒利，可以作为卵巢癌的预防及治疗应用于临床。     

特异性环氧合酶-2抑制剂SC236诱导肾癌细胞RCC-949生物学行为变化的实验研究

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）抑制剂SC236对肾癌细胞RCC-949生物学行为的影响。方法体外培养RCC-949细胞,不同浓度的SC236与之作用24、487、2 h,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞的生长状况;50、150μmol/L SC236作用RCC-949细胞48 h,RT-PCR法检测COX-2 mRNA的表达;50、100μmol/L SC236作用RCC-949细胞24 h,ELISA法检测SC236细胞上清前列腺素（PGE2）的生成情况;100μmol/L SC236作用RCC-949细胞24 h后流式细胞仪检测细胞周期与凋亡情况。结果 SC236呈时间-剂量依赖性抑制RCC-949细胞的增殖;RT-PCR结果显示SC236能降低RCC-949细胞COX-2 mRNA的表达;不同浓度的SC236均能下调PEG2的释放,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;流式细胞术结果表明不同浓度的SC236均能诱导RCC-949细胞发生凋亡,凋亡率同对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论特异性COX-2抑制剂SC236能通过COX-2依赖途径抑制肾癌细胞RCC-949增殖,能下调PEG2的释放,诱导了其发生凋亡。     

舒林酸抑制结肠癌细胞株增殖及其转移机制的研究

目的 研究非选择性COX抑制荆舒林酸对结肠癌细胞株HT-29生长的影响及其参与引起细胞死亡的可能机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测舒林酸对结肠癌细胞增殖的抑制,激光共聚焦显微镜(LSM)及荧光显微镜观察细胞凋亡,流式细胞仪(FCM)分析其对细胞凋亡及细胞周期的影响.结果 MTT显示舒林酸能呈剂量和浓度依赖性抑制HT-29的增殖.TUNEL染色荧光显微镜下观察凋亡细胞呈棕褐色,AnnexinV/PI染色后LSM观察凋亡细胞胞膜绿染,胞核红染或呈桔黄色,FCM显示此药促进细胞的凋亡,使处于G0/G1期的细胞比例显著降低.结论 舒林酸可抑制结肠癌细胞株HT-29生长,促进其凋亡,其机制可能与其阻止细胞周期的进展有关.     

黑米皮提取物对PC-3细胞增殖的抑制作用

目的观察黑米皮提取物对人前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用并探讨其机制。方法用不同浓度的黑米皮提取物(20,150和300μg/ml)处理PC-3细胞,通过MTT法、流式细胞仪、western blot法研究提取物对细胞的影响。结果处理组的细胞增殖率随着提取物作用浓度和时间的增加而降低(P<0.05);与对照组相比,处理组细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期中,G1期细胞百分比显著增多,S、G2-M期细胞显著减少,细胞被阻滞在G1-S期。与对照组相比,处理组细胞的p-p38、p-JNK的蛋白表达则随着提取物浓度的增加而增强。结论黑米皮提取物能够抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖,改变细胞周期的分布,激活JNK、p38通路,诱导细胞凋亡。     

体外培养人卵巢癌细胞株SKOV-3、SKOV-3/DDP并探讨卵巢癌顺铂耐药机制

目的:通过对人卵巢癌细胞株SKOV-3、SKOV-3/DDP体外培养,探讨卵巢癌顺铂耐药机制。方法:用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪测定SKOV-3、SKOV-3/DDP细胞顺铂耐药指数及细胞周期变化,并分析细胞内Bcl-2蛋白及细胞膜上Fas、Fas-L表达情况。结果:相对于SKOV-3细胞;SKOV-3/DDP细胞顺铂耐药指数约为4倍,其细胞周期主要分布于G0/G1期、S期,细胞内Bcl-2蛋白表达及细胞膜Fas、Fas-L水平明显升高。结论:细胞主要分布于潜伏期、细胞内凋亡抑制蛋白Bcl-2水平升高及细胞膜Fas、Fas-L表达增加,可能是卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV-3/DDP顺铂耐药的部分机理。     

大蒜素影响子宫颈癌Hela细胞增殖的实验研究

目的探讨大蒜素对宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法不同浓度的大蒜素作用于体外培养的Hela细胞,倒置显微镜下观察Hela细胞的形态学变化,采用MTT法检测大蒜素对Hela细胞增殖抑制能力,流式细胞术分析大蒜素对Hela细胞凋亡的影响。结果 MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性;流式细胞术测定结果显示50μg/ml浓度大蒜素可明显诱导Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期。结论大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖有抑制作用,其抑制作用与诱导Hela细胞凋亡和阻抑细胞周期有关。