CD44与胚泡植入

植入是生殖过程中的重要环节,是妊娠的关键。植入包括胚泡在子宫内膜上的定位、黏附和侵入,以及随后子宫内膜的修复。植入需要有接受态的内膜和功能正常的胚泡,以及二者之间的相互识别。胚泡植入的调控机制十分复杂,研究表明,这一过程是由子宫局部激素-免疫-细胞因子及黏附分子网络系统相互协同或拮抗的结果。CD44是黏附因子家族中的一员,是介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质间黏附作用的膜表面糖蛋白,参与细胞的增殖、分化、黏附、迁移等过程。在近年的生殖学研究领域中,人们开始逐渐认识到胚泡植入和肿瘤的浸润具有类似的生物学行为。     

盐酸异丙嗪对小鼠胚泡植入的影响

目的 :研究盐酸异丙嗪对小鼠胚植入的影响。方法 :取孕 3～ 7d小鼠 ,每天上午 10时腹腔注射盐酸异丙嗪溶液 ;另取孕 4d小鼠 ,于上午 10时子宫角注入盐酸异丙嗪溶液 ,对照组同时用同法注射生理盐水 0 .2ml。于孕 8d检查胚胎植入数 ,同时 ,取子宫观察内膜的组织学及免疫组织化学变化。结果 :腹腔 2mg药物注射组抗植入率达 10 0 % ,腹腔 1mg药物组的抗植入率为 75 % ,子宫角药物注入组抗植入率达 75 % ,均明显少于对照组。组织学及免疫组化结果表明 ,盐酸异丙嗪可引起蜕膜细胞退化、解体 ,使蜕膜细胞不能正常形成纤维粘连蛋白 (FN)和层粘连蛋白 (LN)。结论 :盐酸异丙嗪对小鼠有明显的抗植入作用     

与胚泡着床密切相关的一类特殊细胞的研究

与胚泡着床密切相关的一类特殊细胞的研究首都医学院生殖医学研究中心史小林，诸定寿，王兴翠，翁静，路欣本实验室研究的主要方向之一是对胚泡着床的机理进行探讨。我们将研究重点放在着床机理的探讨上。胚泡在植入子宫内膜的过程中，存在着胚泡通过怎样的自我变化进入子...     

大鼠胚泡着床障碍动物模型的建立

目的 建立大鼠胚泡着床障碍动物模型.方法 将与雄性大鼠交配后的成年雌性SD大鼠随机分为正常组、小剂量组(5 mg/kg)、中剂量组(6 mg/kg)、大剂量组(8 mg/kg),小剂量组、中剂量组、大剂量组于妊娠第3天皮下一次性注射不同剂量的米非司酮,于妊娠第8天观察大鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数,筛选最佳造模剂量.结果 与正常组相比,小剂量组和中剂量组着床率和平均着床胚泡数均显著降低(P＜0.01).中剂量组的着床率和平均着床胚泡数低于小剂量组组,差异无统计学意义(P＞0.05).当剂量达到8 mg/kg时,胚泡着床被完全抑制.结论 于妊娠第3天皮下注射5 mg/kg的米非司酮,可建立稳定可靠的大鼠胚泡着床障碍模型.     

降钙素对小鼠胚泡发育及植入的影响

目的:探讨降钙素对小鼠胚泡发育及植入的影响。方法:将孕4d小鼠胚泡随机接种到添加不同浓度降钙素的培养液内培养,观察记录胚泡的孵化、粘附及扩展等生长情况。于孕4d给小鼠子宫角注射降钙素抗体,孕8d检查胚胎植入数并进行组织学观察。结果:培养液内加入10nmol/L降钙素后,胚泡的孵化、粘附及扩展率均明显提高(P<0.01),注射降钙素抗体的小鼠,其胚胎植入数明显减少(P<0.001),镜下可见胚胎组织蜕化坏死,蜕膜细胞空泡变性。结论:降钙素可促进小鼠胚泡的孵化、粘附及扩展和促进胚泡植入。     

妊娠小鼠子宫GMG细胞中活性蛋白与胚泡植入关系的研究

取孕 1 3～ 1 4d小鼠的子宫腺细胞区 ,经细胞分离和蛋白提取获得颗粒子宫腺细胞 (GMG细胞 )中的活性蛋白。将注入活性蛋白的 1 0只孕 3d小鼠作为实验组 ;对照组 1 0只小鼠给予PBS。注射后 5d取子宫观察胚胎着床情况并计算孕胚数。结果 :实验组有 9只可见胚胎 ,胚胎数为 1 1 2个 ;对照组有 7只可见胚胎 ,胚胎数为 87个。提示 :GMG细胞中的活性蛋白对胚泡着床可能有一定促进作用     

p38MAPK特异性抑制剂对小鼠胚泡植入的影响

目的观察p38MAPK特异性抑制剂SB220025对小鼠胚泡植入的影响。方法取E4 d小鼠,由子宫角注射不同浓度的SB220025,于E8 d检查胚胎植入数,观察蜕膜的组织学变化。结果①实验组小鼠胚胎植入数明显少于对照组(P<0.01)。②镜下可见,实验组胚胎组织呈退化坏死状态,胚胎周围蜕膜细胞呈明显的空泡样变性,并且蜕膜及胚胎中均见大量血细胞浸润。结论p38MAPK特异性抑制剂SB220025可抑制小鼠胚泡植入并抑制植入后胚胎和蜕膜细胞的发育。     

骨桥蛋白(OPN)在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的 检测骨桥蛋白在围植入期小鼠子宫内膜中的表达,明确OPN表达规律.方法 将清洁级性成熟期昆明小鼠44只,雌性24只,雄性20只,雌性小鼠阴道涂片检查为动情前期,在此期注射PMSG和HCG,4只雌鼠不合笼(孕D0,对照组),用颈椎脱臼法处死,剪取子宫组织,直接液氮保存和福尔马林固定保存,其余的雌:雄小鼠1∶1合笼,次日检查阴栓,发现阴栓计为妊娠第1天.分别于妊娠第4、5、6、7和8天用颈椎脱臼法处死,迅速剖腹,剪取子宫组织予以保存(实验组),采用免疫组化方法和Western-blotting技术分析围植入期小鼠子宫内膜中的骨桥蛋白表达规律,采用RT-PCR技术半定量分析围植入期小鼠子宫内膜骨桥蛋白mRNA表达特征.结果 小鼠整个围植入期子宫内膜中均有OPN表达,但表达的高峰在着床窗口期,即孕D5.孕D0(非孕)子宫内膜的OPN表达较弱,孕D4时表达增强,孕D5时表达最强,孕D6时表达突然回落,孕D7、孕D8时表达减弱,降至非孕水平.结论 骨桥蛋白在围植入期小鼠子宫内膜中的表达随着孕龄的增加逐渐增强,但表达的高峰在孕D5,与植入窗的开放相吻合,是子宫内膜接受性的客观标志,提示骨桥蛋白在胚泡着床过程中起重要作用,该研究为阐明胚泡着床机制提供了实验依据.     

In vitro fertilization-embryo transfer in patients with unexplained recurrent pregnancy loss

Background:Empiric therapy for patients with unexplained recurrent pregnancy loss (URPL) is not precise. Some patients will ask for assisted reproductive technology due to secondary infertility or advanced maternal age. The clinical outcomes of URPL patients who have undergone in vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET) require elucidation. The IVF outcome and influencing factors of URPL patients need further study.Methods:A retrospective cohort study was designed, and 312 infertile patients with URPL who had been treated during January 2012 to December 2015 in the Reproduction Center of Peking University Third Hospital were included. By comparing clinical outcomes between these patients and those with tubal factor infertility (TFI), the factors affecting the clinical outcomes of URPL patients were analyzed.Results:The clinical pregnancy rate (35.18% vs. 34.52% in fresh ET cycles, P = 0.877; 34.48% vs. 40.27% in frozen-thawed ET cycles, P = 0.283) and live birth rate (LBR) in fresh ET cycles (27.67% vs. 26.59%, P = 0.785) were not significantly different between URPL group and TFI group. URPL group had lower LBR in frozen-thawed ET cycles than that of TFI group (23.56% vs. 33.56%, P = 0.047), but the cumulative LBRs (34.69% vs. 38.26%, P = 0.368) were not significantly different between the two groups. The increased endometrial thickness (EMT) on the human chorionic gonadotropin day (odds ratio [OR]: 0.848, 95% confidence interval [CI]: 0.748–0.962, P = 0.010) and the increased number of eggs retrieved (OR: 0.928, 95% CI: 0.887–0.970, P = 0.001) were protective factors for clinical pregnancy in stimulated cycles. The increased number of eggs retrieved (OR: 0.875, 95% CI: 0.846–0.906, P < 0.001), the increased two-pronucleus rate (OR: 0.151, 95% CI: 0.052–0.437, P < 0.001), and increased EMT (OR: 0.876, 95% CI: 0.770–0.997, P = 0.045) in ET day were protective factors for the cumulative live birth outcome.Conclusion:After matching ages, no significant differences in clinical outcomes were found between the patients with URPL and the patients with TFI. A thicker endometrium and more retrieved oocytes increase the probability of pregnancy in fresh transfer cycles, but a better normal fertilization potential will increase the possibility of a live birth.     

ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF EARLY PREGNANCY FACTOR

Early pregnancy factor(EPF)was purified from the pooled sera of 210 pregnant women at 3-8weeks of gestation.Sera from healthy nonpegnant women used as control.The samples (G-Ⅱ,G-Ⅲ and G-Ⅳ） ob-tained from pregnant women had EPF activity but no HCG activity.Polyacrylamide gel electrophopesis showed that the amjor bands in pregnant G-Ⅲ and G-Ⅳ were at similar positions in tube gels.The results of SDS-PAGE showed 3 bands in pregnant G-Ⅳ:57.0 kD,38.0 kD and 19.0 kD.The basic active form of EPF may be a small peptide of 19.0 kD. The isoelectric points of pregnant G-Ⅳ were 6.45 and 8.20.     

抗磷脂抗体致病机理的研究进展

本文对抗磷脂抗体导致妊娠丢失的相关机理的研究进展加以综述,并结合近年来对抗心磷脂抗体的研究,阐述了抗磷脂抗体的免疫特性及其导致妊娠丢失等疾病的致病机理。     

异位妊娠发病因素十年变迁

目的探讨不同时期异位妊娠发病因素的差异,以探索切实可行的干预措施。方法对首都医科大学附属北京妇产医院1997年10月～1998年9月期间(前期组)186例和2007年10月～2008年9月期间(后期组)382例异位妊娠患者发病的相关因素进行回顾性分析,包括年龄、婚姻状况、孕产史、职业分布、既往病史和治疗情况等。结果 2组患者平均年龄差异无统计学意义,后期组20岁以下构成比由10年前的1.1%上升至4.5%(P=0.006);未婚女性由1997年的21.5%上升至2007年的41.4%(P=0.000);未育女性由1997年的45.7%上升至2007年的66.8%(P=0.000);2组间孕、产次差异无统计学意义,但后期组流(引)产次数明显高于前期组(P=0.030);职业分布:工人、农民的构成比明显下降,干部、职员和学生、其他职业的构成比逐年上升(P=0.000);前期组患者宫内节育器病史明显多于后期组(P=0.000),而生殖道感染史和其他腹部手术史明显少于后期组(P=0.002,P=0.044)。后期组中阴道灌洗史、宫颈治疗史及吸烟史均较前期组明显增高(P=0.000,P=0.009,P=0.002)。结论 10年来异位妊娠发病相关因素发生了变化,应采取相应的措施,以降低异位妊娠的发生。     

人工授精者血中EPF活性的研究

采用玫瑰花结抑制试验对２３例人工授精者３１个月经周期排卵后２～７天内的血清进行了早孕因子（Ｅａｒｌｙｐｒｅｇｎａｎｃｙｆａｃｔｏｒ，ＥＰＦ）活性的研究。结果：１５例测出ＥＰＦ活性，随访后５例妇女妊娠至分娩，５例妇女妊娠后早期流产，５例妇女测出ＥＰＦ活性但随访未妊娠推测为胚泡丢失；另外８例妇女未测出ＥＰＦ活性，随访无１例妊娠。研究还发现：人工授精妇女的受精率为６５．２％，ＡＩＨ组与ＡＩＤ组妇女受精率的差别无显著性（Ｐ＞０．０５）。     

高龄不孕症患者冻融胚胎移植胚胎数目和质量与早期妊娠丢失率的关系

目的 分析高龄不孕患者接受辅助生殖技术（ART）行冻融胚胎移植（FET）周期的胚胎数目和质量与早期妊娠丢失率的关系。方法 选择2015年1月~2018年12月于南方医科大学南方医院接受ART并行FET的≥36岁的不孕症患者共2622例,对妊娠的976例患者根据后续妊娠情况分为早期妊娠丢失组和持续妊娠组,分析早期妊娠丢失率与年龄、移植胚胎数、胚胎质量等的关系;根据患者年龄分为：36~37岁组、38~39岁组、40岁组、41岁组、42岁组、43岁组、44岁组和45~48岁组,进一步分析不同年龄段早期妊娠丢失率与胚胎移植数及胚胎质量的关系。结果 本研究共纳入2622例FET周期,其中临床妊娠976例,临床妊娠率37.2%（976/2622）,活产663例,活产率25.3%。临床妊娠患者中早期妊娠丢失241例,继续妊娠735例,早期妊娠丢失率24.7%（241/976）。各组患者临床妊娠率及活产率随年龄增长而降低,早期妊娠丢失率随年龄增长而显著升高（P<0.001）;早期妊娠丢失组患者FET年龄及取卵年龄均高于持续妊娠组,移植D3胚胎数高于持续妊娠组（0.97 vs 0.81,P=0.030）,着床胚胎数低于持续妊娠组（1.09 vs 1.25,P<0.001）;各年龄组早期妊娠丢失率与移植胚胎数和胚胎质量没有显著关系（P>0.05）。结论 高龄不孕女性患者冻融移植胚胎周期的早期妊娠丢失率随年龄增长而升高,年龄是导致早期妊娠丢失的无法补救的危险因素,故应对高龄不孕女性尽早实施ART助孕治疗。为降低早期胚胎丢失率,同时权衡多胎妊娠的风险,根据胚胎质量谨慎决定胚胎移植数。     

McAb－ELISA检测早孕因子抗原的研究

应用早孕因子单克隆抗体（ＥＤＦ－ＭｃＡｂ），建立早孕因子新的免疫学检测方法，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）。本文初步确立了用ＥＬＩＳＡ检测ＥＰＦ抗原的实验条件，并与Ｅａ一活性玫瑰花结抑制试验（Ｅａ－ＲＩＴ）进行了比较。结果表明，因ＥＬＩＳＡ检测ＥＰＦ抗原具有特异性好、敏感性高，判断结果客观的特点。     

冻融周期囊胚移植的临床价值

目的：探讨冻融囊胚移植、冻融卵裂期胚胎复苏后行囊胚移植的临床价值。方法回顾性分析2012年9月至2013年8月在该院生殖医学中心接受冻融胚胎移植治疗患者共518个周期的临床资料,按移植冻融胚胎类型分为3组。A组：冻融囊胚移植,共129个周期;B组：卵裂期胚胎复苏后行囊胚培养后移植,共123个周期;C组（对照）：冻融卵裂胚移植,共266个周期。比较各组的临床结局及 A、B两组间新鲜周期胚胎和冻融周期的囊胚形成率和取消率。结果 A、B组的生化妊娠率、临床妊娠率和胚胎种植率（70．5％、61．2％、42．3％;67．5％、58．2％、40．2％）显著高于 C组（53．0％、42．5％、23．1％）（P＜0．05）;3组间流产率、异位妊娠率、多胎妊娠率差异无统计学意义（P＞0．05）。新鲜周期第3天优质胚胎与冻融胚胎复苏后的囊胚形成率（62．5％vs．57．7％）差异无统计学意义（P＞0．05）,均显著高于新鲜周期第3天非优质胚胎的囊胚形成率（20．3％）（P＜0．05）。结论冻融周期行囊胚移植可以获得较满意的临床结局;冻融卵裂期胚胎行囊胚培养后可获得较高的囊胚形成率和临床结局。     

白血病抑制因子在米非司酮流产妇女蜕膜组织中的表达研究

目的 探讨白血病抑制因子在药物（米非司酮）流产妇女蜕膜组织与早孕妇女蜕膜组织中的表达及差异．方法 用免疫组织化学方法对两组LIF的表达进行检测，同时用JPEG彩图系统采图和用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告分析系统测量程序检测和计算LIF表达灰度值．结果 蜕膜组织LIF在腺体表达高于间质组织（P〈0．01），在药物（米非司酮）流产妇女蜕膜组织与早孕妇女蜕膜组织腺上皮、间质之间灰度值差异均无统计学意义（P〉0．05）．LIF在蜕膜组织细胞的胞核和胞浆内多有表达．结论 LIF在蜕膜组织的表达存在部位差异．米非司酮导致流产的机制需要进一步研究．     

前列腺素合并应用丹那唑终止早孕的临床研究

15-甲基前列腺素F_(2α)合并丹那唑或丙酸睾丸酮抗早孕(≤49天)共105例,其中前者66例,完全流产率93.94%而后者39例作为对照,完全流产率为82.05%,两者有显著差异(P<0.05)。丹那唑是阴道给药,无副反应,对肝、肾与心脏无影响。因此,用此药合并前列腺素抗早孕值得进一步探索。