出生后大鼠耳蜗不同发育阶段connexin26蛋白的表达

目的:研究缝隙连接蛋白26(cx26)在出生后大鼠耳蜗不同发育阶段的分布.方法:采用免疫组织化学SP法检测cx26在36只大鼠(1周龄组、3周龄组和9周龄组各12只)耳蜗的表达.结果:cx26在3组均有较强的表达,阳性表达主要分布于耳蜗外侧壁血管纹和螺旋韧带,Corti氏器中的支持细胞间以及毛细胞和支持细胞间,螺旋缘以及螺旋神经节细胞.cx26在大鼠耳蜗外侧壁、Corti氏器与螺旋神经节的阳性细胞平均积分光密度3组间两两比较,差异均无统计学意义(P均>0.05).结论:大鼠耳蜗发育过程中cx26的表达趋于稳定,没有随着听力的发展而变化.     

前列地尔联合针刺对噪音性耳聋大鼠耳蜗毛细胞血管内皮生长因子、Bcl-2及Bax表达的影响

目的:观察针刺联合前列地尔对噪音性耳聋大鼠耳蜗毛细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、Bax及Bcl_2表达的影响.方法: 32只雄性Wistar大鼠按照随机数字法分为4 组:空白对照组、模型组、前列地尔治疗组和针刺联合前列地尔治疗组.除对照组外,其余3组制备噪音性耳聋大鼠模型.对各组大鼠进行听觉脑干诱发电位( au-ditory brainstem response,ABR)听力阈值测试.联合治疗组的针刺治疗穴位选取三焦经腧穴翳风(双)、外关(双).对各组大鼠进行耳蜗VEGF、Bax及Bcl-2表达检查.结果: 造模结束后,各组大鼠ABR听力阈值显著高于对照组;模型组VEGF水平较空白对照组低,耳蜗Bcl-2 mRNA表达减弱, Bax mRNA表达增强,差异有统计学意义(P＜0. 05);联合治疗组与模型组相比,大鼠耳蜗基底膜毛细胞VEGF水平显著恢复,耳蜗Bcl-2 mRNA表达增强, Bax mRNA表达减弱,差异有统计学意义( P＜0. 01).结论: 针刺联合前列地尔治疗能改善噪声导致的听力损害,其改善听力、保护耳蜗结构是通过调节耳蜗基底膜毛细胞VEGF、耳蜗相关凋亡因子Bcl-2、BaxmRNA的表达而达到的.     

冲击波作用下豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞PARP的表达

目的观察气体冲击致豚鼠耳蜗损伤后耳蜗螺旋神经节细胞PARP的表达。方法20只豚鼠随机分为2组,实验组用YBD-2000型冲击波发生器对豚鼠耳蜗致伤,实验前后测试听力,12h后处死动物制作耳蜗标本,免疫组化法测定耳蜗螺旋神经节细胞PARP的表达。结果ABR:实验组听性脑干反应阈值(ABR阈值为50.94±5.98)较正常对照组(ABR阈值为5.60±1.78)明显上升(P<0.01),听力下降明显。免疫组化显示:实验组耳蜗螺旋神经节细胞PARP表达阳性,对照组无阳性表达,愈近底回愈多,愈近顶回则愈少。结论PARP在气体冲击致豚鼠耳蜗螺旋神经节细胞损伤后呈阳性表达,提示耳蜗螺旋神经节细胞凋亡在冲击波致聋的发病机制中起重要作用。     

急性缺氧后早期豚鼠耳蜗糖皮质激素受体表达的变化

目的观察缺氧后早期豚鼠耳蜗糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）的变化特点。方法利用低氧舱使动物缺氧,应用免疫组化SP法结合图像分析技术检测缺氧后豚鼠耳蜗GR的表达。结果缺氧后GR在豚鼠耳蜗各回均有不同程度的染色,主要阳性部位是螺旋韧带、血管纹、螺旋器和螺旋神经节。与正常组相比缺氧后早期GR在耳蜗各阳性部位的表达均明显减弱,其中在螺旋韧带和血管纹的表达减弱最明显,有统计学意义（P〈0．01）。结论缺氧可使GR在豚鼠耳蜗中的表达减弱。缺氧对耳蜗的损伤可能和GR表达的减弱有关。     

当归补血汤对耳蜗干细胞鼓阶内移植治疗药物性感音神经性耳聋大鼠增效作用研究

目的:观察当归补血汤对耳蜗干细胞移植治疗感音神经性耳聋大鼠增效作用.方法:感音神经性耳聋大鼠分为耳蜗干细胞移植组、当归补血汤组和空白对照组3组.体外培养耳蜗干细胞进行内耳移植,耳蜗干细胞移植组将耳蜗干细胞悬液移植入内耳耳蜗结构,当归补血汤组将含有当归补血汤的耳蜗干细胞悬液移植入内耳耳蜗结构,空白对照组移植生理盐水.分别于术后1、3、6和12个月采用听觉脑干诱发电位方法检测模型大鼠的听力恢复情况,处死大鼠,通过免疫荧光染色方法观察移植的耳蜗干细胞在内耳存活、分化和迁移情况.结果:从E14大鼠耳蜗分离的组织,经原代和传代培养后,可获得大量未分化悬浮生长的Nestin阳性细胞团, Brdu表达阳性,说明是具有自我更新和增殖潜能的干细胞.免疫荧光检测发现在耳蜗干细胞移植组、当归补血汤组在移植针道两侧可见移植的干细胞,有些还迁移到基底膜区.存活的细胞部分呈 Myosin Ⅶ A阳性染色.与耳蜗干细胞移植组比较,当归补血汤组 Myosin Ⅶ A阳性染色细胞数量较多,差异有统计学意义(P<0.05).听觉脑干诱发电位结果显示当归补血汤组的感音神经性耳聋模型大鼠听力恢复情况较耳蜗干细胞移植组和对照组好,差异有统计学意义(P<0.05).结论:经体外培养的耳蜗干细胞移植入内耳鼓阶后能够存活和迁移,并分化为内耳毛细胞;当归补血汤可以提高耳蜗干细胞分化为内耳毛细胞的比例,并促进感音神经性耳聋模型大鼠听力恢复.     

荧光定量PCR测定水杨酸钠作用后大鼠耳蜗基因的表达

目的了解HSP27基因在大剂量水杨酸钠作用后大鼠耳蜗中表达水平，并探讨其在水杨酸钠耳毒性中的意义。方法将Wistar大鼠各15只分成水杨酸钠作用组和正常对照组，应用SYBR GREEN I实时监测的逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR），检测大鼠耳蜗中HSP27基因在长期大剂量水杨酸钠作用后和正常对照组中的表达，并用管家基因β-actin作为内参。结果水杨酸钠作用后大鼠耳蜗中HSP27基因的表达水平高于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论SYBR GREEN I定量PCR法可以作为一种良好的方法对来源珍贵的微量组织的基因表达进行检测，水杨酸钠能够明显诱导HSP27基因在大鼠耳蜗中的表达。     

电离辐射对大鼠耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达影响的实验研究

目的 探讨电离辐射下大鼠耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的改变及意义.方法 建立大鼠耳放射损伤模型,检测其听力复合动作电位(CAP)阈值及畸变产物耳声发射(DPOAEs)幅值,验证其电离辐射晚期感音神经性耳聋(SNHL)的发生.提取大鼠耳蜗组织mRNA及蛋白,荧光实时定量PCR检测耳蜗Prestin蛋白mRNA水平的...     

艾灸预处理对佐剂性关节炎大鼠下丘脑HSP70的影响及保护机制研究

目的以往研究证实艾灸预处理对随后佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠具有一定的阻抑保护作用.本研究进一步从下丘脑HSP70角度,探询艾灸预处理保护作用的可能机制.方法应用免疫组织化学的方法,用AA大鼠模型,观察艾灸预处理在大鼠造模前、造模后早期及继发期下丘脑HSP70的变化,并应用图像分析技术进行综合分析.结果正常组大鼠下丘脑有少量HSP70的阳性表达.与正常组相比,AA各组大鼠早期和继发期下丘脑HSP70呈强阳性表达.但随疾病进程呈缓降的趋势,与同期AA组相比,经过艾灸预处理各组可使AA大鼠HSP70异常高表达的状况得到缓解,无论早期还是继发期均较明显.艾灸预处理还可使正常大鼠下丘脑HSP70的表达增强.结论艾灸预处理对随后AA大鼠的保护作用可能与其适度提高正常大鼠的下丘脑HSP70的阳性表达,以及明显减弱随后AA大鼠下丘脑HSP70的异常高表达有关.下丘脑中HSP70可能是艾灸预处理产生防病减病、保健强壮的重要分子之一.     

防止耳局部滥用氨基甙类抗生素

据国内统计资料药物中毒性耳聋已居感音神经性耳聋病因的首位,氨基甙类抗生素为最主要的一类耳聋性药物.该类抗生素主要包括:链霉素、卡那霉素、庆大霉素、新霉素等,有者的损伤平衡器官--前庭为主,出现头晕,平衡失调;有者以损伤听器--耳蜗为主,出现耳聋.……     

ATP对细菌内毒素引起的大鼠耳蜗iNOS表达的影响

目的:探讨三磷酸腺苷(ATP)对细菌内毒素(LPS)引起的大鼠耳蜗诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响及其对耳蜗损伤的保护作用.方法:通过向大鼠鼓室内注射LPS造成急性中耳炎的动物模型,应用免疫组化方法,结合听性脑干反应(ABR)阚值检测,研究ATP对LPS引起的大鼠耳蜗iNOS活性的影响.结果:ATP对LPS引起的大鼠耳蜗iNOS表达和ABR阈移有明显的抑制作用.结论:ATP对LPS引起的大鼠耳蜗损伤有保护作用,这种保护作用可能与降低耳蜗iNOS活性有关.     

热休克蛋白在喉癌中的表达及其意义

目的 :应用免疫组化方法研究喉癌标本中 4种热休克蛋白 (HSP90、HSP70、HSP60、HSP2 7)的表达 ,探讨其与喉癌转移及其恶性度的相关性。方法 :通过 4种 HSP单克隆抗体检测喉癌中 4种 HSP的表达应用免疫组化 sp法进行检测 ,常规 DAB染色观察 4种 HSP的表达特点。结果 :喉癌中几种 HSP均有不同程度表达 ,其中以 HSP60最强 ;转移性喉癌中除 HSP60外 ,均为阴性或弱阳性表达。结论 :HSP2 7、HSP70、HSP90表达减弱和喉癌转移可能有一定关系     

慢性问歇性低压低氧对发育大鼠心肌热休克蛋白表达的影响

目的观察慢性间歇性低压低氧（chronic intermittent hypobaric hypoxia,CIHH）处理对发育大鼠HSP27、HSP70和HSP90蛋白表达的影响,探讨心肌热休克蛋白在发育大鼠CIHH心脏保护中的作用。方法新生雄性Sprague—Dawley（SD）大鼠20只,随机分为2组,CIHH处理组（CIHH）和对照组（CON）。CIHH发育大鼠（连同母鼠）置于低压氧舱中,接受56d相当于海拔3000m的低压低氧处理（5h／d）。股动脉插管记录动脉血压,左心室插管描记左心室功能,包括左室峰压（left ventrieular systolic pressure,LVSP）、左室压力最大变化速率（left ventricular pressure,±LVdp／dtmax）。应用Western blot技术定量分析各组发育大鼠心肌热休克蛋白27（heat shock protein 27,HSP27）、热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）和热休克蛋白90（heat shock protein 90,HSP90）表达。并观察急性低氧／复氧对左心室功能、动脉血压和热休克蛋白（heat shock protein,HSPs）表达的影响。结果基础状态下,CIHH组与CON组发育大鼠的LVSP、±LVdp／dtmax及平均动脉压（mean artery blood pressure,MABP）差异无统计学意义（P〉0．05）,但CIHH组发育大鼠心肌HSP27、HSP70和HSP90蛋白表达显著高于CON组发育大鼠;急性低氧／复氧导致发育大鼠LVSP、±LVdp／dtmax及MABP降低,表达增加,而CIHH组发育大鼠心功能参数及MABP降低幅度明显小于CON组发育大鼠,且3种HSPs蛋白表达明显高于CON组发育大鼠（P〈0．05）。结论CIHH可通过增强发育大鼠心肌HSPs蛋白表达发挥心脏保护作用。     

Expression of Heat Shock Protein 70 and 27 in Non-small Cell Lung Cancer and Its Clinical Significance

The heat shock proteins （HSPs） 70 and HSP 27 expression in patients with non-small cell lung cancer （NSCLC） was studied and the relation.ship between HSP 70 and HSP 27 with the clinicopathological features of NSCLC was investigated. The expression of HSP 70 and HSP 27 was detected in tumor tissues from 60 patients with NSCLC by S-P immunohistochemistry. The findings were analyzed in combination with the histological types, histopathological differentiation, lymph node metastasis, patients＇ clinical stages, smoking history and gender. The results showed that of the 60 NSCLC tissue specimens studied, the immunoreactivity of HSP 70 and HSP 27 was detected in 47 （78.3 %） and 43 （71.7 %） specimens, respectively. A positive correlation was found between the overexpression of HSP 70 and HSP 27. The histopathological differentiation, lymph node metastasis, clinical stages and smoking history were correlated to the expression of HSP 70, but not to the expression of HSP 27. No statistical significance was observed in histological types and gender with respect to both HSP 70 and HSP 27 expression. It is suggested that the HSP 70 expression is a powerful and significant prognostic indicator and is related to histopathological differentiation, lymph node metastasis, patients＇ clinical stages, smoking history, whereas HSP 27 expression is not.     

热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜热休克蛋白60、70及iNOS表达的影响

目的 观察热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜热休克蛋白(heat shock protein ,HSP)(HSP60、HSP70)和诱生型一氧化氮合酶(induced nitric oxidase synthase,iNOS)表达的影响,探讨热休克预处理对严重烫伤大鼠胃黏膜的保护作用机制.方法 将Wistar大鼠分为烫伤组及热休克预处理后烫伤组2个大组,观察不同处理组大鼠胃黏膜损伤指数(ulcer index,UI)变化.同时应用RT-PCR技术检测各组大鼠胃黏膜HSP70 mRNA表达,免疫组化染色分析胃黏膜组织中HSP60 、HSP70、iNOS表达变化.结果 正常大鼠严重烫伤后iNOS表达显著增强,胃黏膜损害明显,热休克预处理能显著减轻大鼠严重烫伤后急性胃黏膜损害;与烫伤组比较,经热休克预处理后再烫伤大鼠胃黏膜HSP60 和HSP70基因表达水平升高(P＜0.05),尤以HSP70为甚(P＜0.01),而iNOS表达受抑(P＜0.01).结论 热休克预处理对大鼠严重烫伤后急性胃黏膜损害具有保护作用,其保护机制可能与HSP60、70诱导表达增强及iNOS表达受抑等机制有关.     

采用反义寡核苷酸探讨HSP70对活性氧所致心肌细胞损伤的影响

目的探讨HSP70对活性氧所致心肌细胞急性损伤的保护作用.方法用热休克预处理诱导新生大鼠心肌细胞中HSP70的表达,采用HSP70反义寡核苷酸阻断HSP70的表达,乳酸脱氢酶释放率和细胞总蛋白质合成能力来反映H2O2 0.5 mM所致心肌细胞损伤程度.结果H2O2引起心肌细胞乳酸脱氢酶释放率明显升高,而细胞总蛋白质的合成降低.热休克预处理导致心肌细胞中HSP70表达明显增加,并使H2O:所致心肌细胞LDH释放率显著降低,细胞总蛋白质的合成基本恢复正常水平.HSP70反义寡核苷酸很大程度上阻断了HSP70的表达及热休克预处理的心肌细胞保护作用.结论在热休克预处理减轻过氧化氢所致乳鼠心肌细胞急性损伤的作用中,HSP70发挥了最主要的作用.     

The Combined Effects of High Temperature and Carbon Monoxide on Heat Stress Response

ＴｈｅＣｏｍｂｉｎｅｄＥｆｆｅｃｔｓｏｆＨｉｇｈＴｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄＣａｒｂｏｎ　ＭｏｎｏｘｉｄｅｏｎＨｅａｔＳｔｒｅｓｓＲｅｓｐｏｎｓｅＷＵＴａｎｇ－ｃｈｕｎ（邬堂春）；ＨＥＨａｎ－ｚｈｅｎ（贺涵贞）；Ｔａｎｇｕａｙ；ＲｏｂｅｒｔＭ．；ＷＵ...     

热休克蛋白在沙鼠脑缺血后表达的研究进展

脑缺血耐受的实验研究发现,诱导HSPs的表达增加可能是内源性脑保护机制之一。HSP家族包括HSP90、HSP70、HSP60、HSP32、HSP27及泛素家族等。本文就这几种蛋白在沙鼠脑缺血中的研究进展作一综述。