B细胞成熟抗原在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞的表达

目的检测B细胞成熟抗原（BCMA）mRNA在系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）的表达水平,探讨BCMA在SLE发病中的意义。方法纳入2006年1-11月收治的36例SLE患者,同期17例健康志愿者作为对照组,采用半定量RT-PCR法检测外周血单个核细胞中BCMA mRNA的表达,并与SLE疾病活动指数（SLEDAI）进行相关性分析。结果 SLE患者组BCMA mRNA表达水平（0.598±0.230）均明显高于正常对照组（0.411±0.309）（P〈0.05）。SLE患者BCMA mRNA表达水平与SLEDAI评分无相关性（P=0.590）。结论 SLE患者BCMA mRNA表达水平的增高,可能在SLE的发病机制中具有一定的作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中Foxp3的表达及意义

摘要 目的：探讨转录因子Foxp3在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)患者外周血单个核细胞中的表达水平及其在SLE发病中的作用及意义。方法：选择SLE活动性、SLE非活动性患者和正常对照，运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot技术检测SLE患者和正常对照组外周血单个核细胞中Foxp3mRNA和蛋白的表达水平。结果：活动期SLE组Foxp3mRNA和蛋白的表达水平明显低于SLE非活动性患者和正常对照（P<0.05），SLE非活动性患者Foxp3mRNA和蛋白的表达水平明显低于正常对照（P<0.05）。结论：SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3mRNA和蛋白的表达水平显著低于正常对照，随着SLE患者病情的好转，Foxp3mRNA和蛋白的表达水平逐渐增高。提示Foxp3与SLE疾病的活动性呈一定的线性相关关系。     

人纤维介素在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及意义

我们用免疫组化方法检测了32例系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMNC)中人纤维介素(hfg12)蛋白表达情况，探讨hfg12在SLE发病中的作用及其与SLE疾病的关系。     

系统性红斑狼疮外周血单个核细胞蛋白组学的初步研究

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）外周血单个核细胞（PBMC）蛋白质组的变化。方法分别提取14例SLE患者及9例健康献血者的PBMC，采用双向电泳技术分离全蛋白质组，对部分差异的蛋白质点进行离子阱高效液相色谱／质谱分析，测定其肽质量指纹图谱，与互联网蛋白质数据库的数据进行比对。结果获得了较好的双向电泳图像，图像分析显示：1例SLE患者、4例健康献血者PBMC蛋白匹配点为1084个，其中SLE患者高表达及特异表达蛋白点为71个及17个，健康献血者高表达及特异表达蛋白点为45个及20个，与所有实验2-DE图谱逐个比对后，对表达差异重复性高的30个蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析，经数据库检索后，鉴定出2个胞浆蛋白质酪氨酸转运核糖核酸合成酶（tyrosyl—tRNA synthetase）和斑联蛋白（zyxin）在SLE患者的PBMC中低表达。结论SLE患者PBMC蛋白组学研究可能为深入研究其发病机制、建立新的诊断指标提供一个良好的平台。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞CD23,CD25,CD19检测的临床应用

目的 :了解系统性红斑狼疮 ( SL E)疾病中 T、B细胞的变化和两者之间的相互关系。方法 :采用 ABC免疫组化法检测了 3 0例 SL E患者治疗前、后外周血单个核细胞 ( PBMC)分化群 CD2 3、 CD2 5、 CD19的表达 ,并与 2 3名正常健康人作对照。结果 :SL E患者 PBMC CD2 3 、CD2 5 表达分别为 ( 7.9± 1.5 ) % ,( 2 7.2± 6.4 ) % ,均较正常组的 ( 1.6± 1.1) % ,( 4 .4± 1.7) %显著增高 ( P<0 .0 1)。经治疗病情稳定后 CD2 3 ( 2 .0± 1.2 ) % ,与正常组比较无显著性差异 ( P>0 .0 5 ) ;而 CD2 5 虽有下降 ( 10 .2± 6.7) % ,但仍较正常组显著增高 ( P<0 .0 1)。PBMCCD19 表达与正常组比较 ,无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。活动性 SL E患者 CD2 3 与 CD2 5 表达呈正相关 ( r=0 .4 0 0 8,P<0 .0 5 )。结论 :在 SL E活动期 T、B细胞均被激活 ,共同参与了 SL E免疫调节。B细胞活化与 T细胞激活有关且主要表现为质的异常 ,而 T细胞异常更难以纠正。     

miRNA-155、miRNA-181a在SLE患者治疗前后外周血单个核细胞中的变化及意义

目的探讨miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a与SLE治疗的相关性。方法采集17例健康对照者和22例治疗前、后SLE患者外周血,分离单个核细胞(PBMC),用real-time PCR检测各组PBMC中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达情况。结果 SLE患者PBMC中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达均低于健康对照者,差异有统计学意义(P0.05);治疗前SLE患者组miRNA-155、miRNA-181a的表达低于治疗后SLE患者组,差异有统计学意义(P0.05);治疗前SLE患者组miRNA-146a、miRNA-31的表达与治疗后SLE组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a在SLE患者PBMC中表达普遍降低,治疗后患者PBMC中miRNA-155、miRNA-181a的表达明显高于治疗前,提示上述miRNA有望成为SLE患者治疗监测指标。     

B淋巴细胞刺激因子及其受体BAFF-R在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的 探讨B淋巴细胞刺激因子(Blys)及其受体BAFF-R在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达情况及临床意义.方法 应用流式细胞仪技术,检测90例SLE患者PB-MCs中Blys及其受体BAFF-R的表达,并与45例健康志愿者检测结果 进行比较.分析Blys及BAFF-R的表达与SLE病情活动、其他实验指标及自身抗体的关系.结果 ①SEE患者PBMCs中Blys及BAFF-R的表述百分率比健康对照组高(均P<0.001).其中,活动期和稳定期SLE患者Blys和BAFF-R的表达率均高于健康对照组(P<0.001或0.01);活动期和稳定期比较,Blys的表达较高(P<0.05),而BAFF-R的表达无统计学差异.②SLE患者PBMCs中Blys的表达水平与SLE疾病活动指数评分呈正相关(r=0.728,P<0.001),与免疫球蛋白IgG、IgM里正相关(r=0.691,P<0.001和r=0.453,P<0.01),与补体C3、C4呈负相关(r=-0.510,P<0.001和r=-0.312,P<0.05).③抗dsDNA抗体(+)组患者PBMCs中Blys的表达较 dsDNA抗体(-)组高(P<0.01).Clq抗体(+)组患者PBMCs中的表达也较C1q抗体(-)组高(P<0.01).结论 Blys及BAFF-R在SLE外周血单个核细胞中的表达率升高.Blys的表达在一定程度上反映病情的活动,并与自身抗体的产生相关.Blys及其特异性受体BAFF-R可能参与SLE的发病.     

SLE患者外周血单个核细胞中miR-132和miR-212的表达及临床意义

目的分析SLE患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miR)-132和miR-212的表达水平及临床意义。方法提取PBMC中的总RNA,运用茎环逆转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测24例健康人及48例SLE患者PBMC中miR-132和miR-212的相对表达水平,分析其与临床检验指标的相关性。结果 SLE患者中miR-132相对表达量为1.72±0.071,与健康人对照组0.99±0.037比较,差异有统计学意义(t=-6.881,P=0.000)。健康人和SLE患者miR-212相对表达水平分别是0.99±0.020和1.03(0.982,1.048),差异未见统计学意义(Z=1.302,P=0.197)。相关性分析结果显示,SLE患者中miR-132的表达量与抗双链DNA(dsDNA)抗体以及SLE患者疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关(r分别为0.740和0.526,P均0.05);而miR-212的表达量与抗dsDNA抗体(r=0.106,P=0.474)和SLEDAI(r=0.005,P=0.973)等临床指标无相关性。结论 miR-132在SLE患者PBMC中的表达水平升高,可能参与SLE的致病过程。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中Toll样受体9和Foxp3的表达及二者相关性

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞中转录因子Toll样受体9(TLR9)和Foxp3在的表达,并探讨其意义以及二者的相关性,明确TLR9和Foxp3在SLE中的作用和意义。方法选择泰安市中心医院和山东大学齐鲁医院2012年10月至2014年6月门诊或住院SLE活动性患者33例、SLE非活动性患者30例,查体中心健康查体者23例作为正常对照,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常对照组和SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3和TLR9m RNA的表达水平。结果活动性SLE患者外周血单个核细胞中TLR9 m RNA的表达水平明显高于SLE非活动性患者和正常对照(P<0.05),非活动性SLE患者TLR9 m RNA的表达水平高于正常对照(P<0.05)。TLR9 m RNA水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关(r=0.702,P<0.05)。活动性SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3 m RNA的表达水平明显低于SLE非活动性患者和正常对照(P<0.05),非活动性SLE患者Foxp3 m RNA的表达水平低于正常对照(P<0.05)。Foxp3 m RNA水平与SLEDAI呈负相关(r=-0.681,P<0.05)。在SLE患者外周血单个核细胞中TLR9和Foxp3的表达呈负相关。结论 SLE患者TLR9的表达与疾病活动性呈正相关,而Foxp3的表达与疾病活动性呈负相关。TLR9和Foxp3之间可能存在相互调节的作用,共同导致SLE的发生和发展。     

介绍一种外周血单个核细胞RNA提取方法

分子生物学实验中RNA提取纯化影响因素较多 ,由于RNA核糖残基 2 / 和 3/ 位上的羟基存在 ,使其更易受自然界中广泛存在的RNA酶降解。目前常用的RNA提取方法有酸性酚 硫氰酸胍 氯仿提取法、oligo 纤维素层析法等[1] 。组织和细胞单相裂解液也有商品化供应 ,如Trizol、Isogen、RN     

干扰素治疗前丙肝患者血清及外周血单个核细胞中HCV—RNA的检测

本文采用ＲＴ－ＰＣＲ方法对２６例干扰素治疗前丙肝患者血清ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测,并对１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性的标本进行外周血单个核细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测,发现２６例血清标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率为２６．９％,而１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性标本,其ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ有３例阳性,阳性率为２１．１％。因此,ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ是丙肝病毒血症的又一个诊断指标,是否可作为干扰素疗效判断的     

G-CsF和GM-CsF对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞TNF-αmRNA和CD69表达及IgG分泌的影响

为了解造血干细胞动员剂G-CSF和GM-CSF对系统性红斑狼疮（SLE）患狼疮活动性的影响。用RT-PCR法测定不同浓度G-CSF和GM-CSF对SLE患外周血单个核细胞（PBMNC）的TNF-αmRNA表达的作用。用流式细胞术测定CD69表达和用酶联免疫吸附法测定10μg/ml和G-CSF和GM-CSF对PBMNC分泌IgG的影响。结果发现：0.1-2.0μg/ml和G-CSF对活动期和静止期SLE患的PBMNC的TNF-αmRNA的表达，2μg/ml的GM-CSF可增加活动期SLE患PBMNC的TNF-αmRNA的表达。0.1-2.0μg/ml的G-CSF和GM-CSF对静止期SLE患PBMNC的CD69表达均无影响。浓度在0.1-2.0μg/ml的G-CSF和0.1-0.4μg/ml的GM-CSF对静止期和活动期SLE患的CD69表达无明显但GM-CSF的浓度达到或超过0.8μg/ml时可增加活动期SLE患单个核细胞CD69的表达，10μg/ml的G-CSF对活动期和静止期SLE患PBMNC的IgG分泌无明显影响，而相同浓度的GM-CSF对活动期SLE患PBMNC的IgG分泌有促进作用，结论：用G-CSF作自体干细胞移植的动员剂对于SLE患可能是安全的，但GM-CSF可增强与狼疮活动有关的三项指标，因此可能对活动期SLE患产生不良影响，临床上应予以注意。     

肝癌患者外周血单个核细胞HLA-G表达研究

目的了解肝细胞癌（HCC）患者外周血单个核细胞（PBMC）人类白细胞抗原G（HLA—G）的表达水平。方法收集38例HCC患者、25例肝硬化患者和40名健康查体者的PBMC,分别用逆转录一聚合酶链反应（PCR）和流式细胞术（FCM）检测其HLA—GmRNA和HLA—G蛋白表达水平。结果HCC组、肝硬化组和健康对照组PBMCHLA—GmRNA表达率分别为94．7％、84．0％和87．5％,差异无统计学意义（P=0．359）;HCC组HLA—G蛋白表达率高于肝硬化组和健康对照组,差异有统计学意义（P=0．002）。HCC组PBMCHLA—G蛋白主要表达于CD4^＋细胞上。结论HCC患者PBMCHLA—G蛋白表达率升高,其机制与临床意义尚待进一步研究。     

多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞p170和CD38的表达及意义

我们检测了17例多发性骨髓瘤(MM)患者外周血单个核细胞p170和CD(38)的表达,以期探讨二者表达的相关性及其意义。材料和方法1 研究对象1.1 实验组:17例MM住院患者,根据Durie和Salm-on标准诊断,无急性感染,形态学未发现外周血中有浆细胞,其中男性14例,女性3例,初治9例,复发8例,年龄40～73岁,平均年龄60岁,Ⅱ期5例,Ⅲ期12例。1.2 对照组:11名健康献血员,男性9名,女性2名,年龄31～48岁,平均年龄39岁。1.3 化疗方案:检测患者p170和CD_(38)后,无论初治和     

丙肝患者外周血单个核细胞分离方法的改进

据陈良标等报道 ,丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)可感染慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞并在其中复制。但从外周血中提取单个核细胞 (ＰＢＭＣ)进行免疫组化染色时 ,常有血小板的干扰 ,影响观察结果 ;另外 ,在检测ＨＣＶ抗原 (ＨＣＶ Ａｇ)过程中 ,还存在血浆中ＨＣＶ对ＰＢＭＣ的污染问题。为此 ,我们对分离方法进行了改进取得了满意的效果 ,现介绍如下。1　材料与方法1 1　材料　选抗 ＨＣＶ抗体和ＨＣＶ ＲＮＡ均阳性的丙肝患者血清共 96例 ,均来自本院肝病研究所门诊及住院患者。肝素由山东省莱阳生物化学制药厂生产 ,12 5Ｕ/支 ;淋巴细胞分…     

SOCS-3在脓毒症患者外周血单个核细胞中表达的研究

目的探讨细胞因子信号转导抑制因子-3（SOCS-3）在脓毒症发病机制中的作用。方法选择36例脓毒症患者,30例健康志愿者为对照组,应用RT-PCR方法测定SOCS-3在外周血单个核细胞中的表达,并和患者APACHEⅡ评分进行相关分析。结果SOCS-3在脓毒症组和对照组的外周血单个核细胞中均有表达,脓毒症组较对照组表达显著增加（P〈0．001）,SOCS-3 mRNA的表达和脓毒症A—PACHEⅡ评分呈负相关,相关系数（r）为-0．746（P〈0．01）。结论SOCS-3参与了脓毒症的发病过程,SOCS-3的表达在脓毒症患者中可能起着保护作用。     

γδT细胞对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞凋亡和CD69表达的影响

目的:研究γδT细胞对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞凋亡和CD69表达的影响,探索其在SLE发病中的调控作用。方法:采用单克隆抗体固相法,对8例正常人外周血γδT细胞进行体外扩增建系,并进行细胞纯度和表型鉴定;利用不同数量比的γδT细胞与15例SLE患者外周血单个核细胞进行体外共同培养3d,流式细胞仪检测单个核细胞凋亡和CD69表达的情况。结果:建立了正常人外周血γδT细胞系,其平均纯度为(80.3±9.2)%,细胞表型以γδ2[(86.1±8.0)%]和γγ9[(83.3±6.3)%]为主;SLE患者外周血单个核细胞的凋亡率在1∶100组[(2.48±3.86)%]和1∶50组[(1.17±1.38)%]均低于对照组[(3.77±3.96)%](P<0.05、P<0.01);γδT细胞对活动组和稳定组SLE患者外周血单个核细胞的凋亡均有明显的抑制作用(均P<0.05),但对两组之间的抑制强度无明显差异(P>0.05);CD69阳性率对照组、1∶100组和1∶50组之间差异无统计学意义(P<0.05)。结论:γδT细胞体外能够抑制SLE患者外周血单个核细胞的凋亡,且这种抑制作用与狼疮的活动性无关,与外周血细胞的活化无关。