简易菌落斑点杂交法快速检测志贺氏菌ipaH基因的实验研究

采用ＰＣＲ扩增技术，制备了Ｄｉｇ标记志贺氏菌多拷贝的ｉｐａＨ基因探针。用该探针通过菌落斑点杂交试验，探索快速、特异、敏感、简单检测志贺氏菌的方法。本法检测灵敏度达５－１０ｐｇＤＶＡ／μｌ。含菌量为３×１０６ＣＦＵ／ｍｌ的粪便上清液直接抽滤点膜２５μｌ杂交结果为阳性。与经ＰＣＲ扩增测定的５０株细菌（其中ｉｐｔａＨ基因阳性菌２５株，阴性菌２５株）进行比较，菌落斑点杂文结果与ＰＣＲ扩增结果完全一致。全部实验可在２０ｈ内完成。     

福氏志贺氏菌2a型耐药性分析

目的：了解我院肠道福氏志贺氏菌的常见耐药谱，指导临床医生合理使用抗生素。方法：用K－B纸片法检测26株福氏志贺氏菌对24种抗生素药物敏感试验。结果：26株福氏志贺氏菌中，2a型25株（96.15%),3a型1株（3.85%)，福氏志贺氏菌对氨苄西林耐药率最高（96.15%)，对氟嗪酸和头孢哌酮最低（分别为3.85%、0％）。结论：福氏志贺氏菌对抗生素多重耐药逐年上升，临床应加强对福氏志贺氏菌耐药性监控。     

志贺氏菌属的菌群分布及药物敏感试验

为调查志贺氏菌的血清型和耐药性，对5年来临床分离的志贺氏菌181株进行血清学分型、药敏试验。结果：1996－2000年间B群占绝对优势，在B群中，1996－1999年以福氏志贺氏菌Ⅱ型为主，2000年以福氏志贺氏菌I型为主。药敏试验结果，头孢哌酮敏感率最高，超过80％。提示福氏志贺氏菌Ⅱ型和I型是主要的血清型，对多种抗菌药物耐药率呈逐年上升趋势。     

33株志贺氏菌的分型及耐药性调查

对我院肠道门诊１９９６年８月～１０月期间１０３例具有痢疾症候群的急性腹泻患者进行大便培养，从中分离出３３株痢疾杆菌，经生化、血清学鉴定，并测定药敏、及β－内酰胺酶分析。菌型分布３个群，其中福氏、志贺氏菌占优势２７／３３，宋内氏、史密斯志贺氏菌各３株。药敏结果显示全部菌株对氟喹诺酮类、氨基糖甙类和第二、三代头孢菌素药物具有很好的敏感率，无交叉耐药株。对氨苄西林的耐药率高达９７％。产青霉素酶和头孢菌素酶共有６株，占１８．１８％。     

62株志贺氏菌耐药性分析

目的 :了解我院肠道志贺氏菌的耐药情况 ,指导临床医生合理使用抗生素 ,避免抗生素的滥用。方法 :对我院 6 2株志贺氏菌 ,采用 K- B法检测其对 7种抗生素的药物敏感试验。结果 :6 2株志贺氏菌中 ,福氏志贺氏菌 38株 (占6 1.0 % ) ,宋内氏志贺氏菌 2 4株 (占 39.0 % )。志贺氏菌对复方新诺明耐药最高达 83.5 % ,其次为氨苄西林 (6 5 .0 % ) ,对头孢曲松和氧氟沙星耐药率最低。结论 :志贺氏菌对临床常用抗生素的耐药率有所上升 ,临床上应加强对志贺氏耐药性的监测     

志贺氏菌属90株的鉴定与耐药性分析

志贺氏菌属９０株的鉴定与耐药性分析孙爱华胡秀梅黄宝玉潘建忠＊张玉芳＊郭德云＊（齐鲁石化中心医院检验科＊传染科，淄博市２５５４００）关键词志贺氏菌；耐药性；菌型鉴定志贺氏菌属是肠杆菌中一群常见的病原菌，常引起细菌性痢疾。１９９６年６月至１０月，为了解志...     

人口腔粘膜鳞癌中Ha—ras癌基因第12位密码子G→T突变的研究

采用聚合酶链反应和寡核苷酸探针杂交技术，检测２１例口腔粘膜鳞癌组织中的Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子Ｇ－Ｔ突变，结果有６例存在这种点突变，而１０例正常口腔粘膜组织无１例发生这种突变。提示：Ｈ     

人乳头瘤病毒与呼吸道肿瘤关系的研究：Ⅰ.HPV与喉癌的关系

应用α－３２Ｐ－ｄＣＴＰ标记ＨＰＶ－１１及ＨＰＶ－１６ＤＮＡ为探针，以Ｓｌｏｔｂｌｏｔ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ两种核酸杂交技术，检测了取自青岛及北京两个地区的３７例喉鳞癌组织ＤＮＡ中ＨＰＶ－１１及ＨＰＶ－１６ＤＮＡ相关序列。结果表明，Ｓｌｏｔｂｌｏｔ杂交中，与ＨＰＶ－１１探针杂交阳性者占８６％（３２／３７），与ＨＰＶ－１６探针杂交阳性者占８１％（３０／３７）。在同一癌组织中，与两型探针同时呈现阳性者占８１％（３０／３７）。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交中，与所用探针ＤＮＡ的内切酶ＰｓｔⅠ酶切图谱比较，有４６％（１３／２８）与ＨＰＶ－１６ＤＮＡ的酶切图谱相同，可定为ＨＰＶ－１６型。当用ＨＰＶ－１１探针时无一例出现与ＨＰＶ－１１相同的图谱。提示喉癌的发生与ＨＰＶ－１６有关。     

104株福氏志贺氏菌分离鉴定及药敏结果分析

为了解福氏志贺氏菌的耐药趋势，本对1991～1996年临床检出的104株福氏志贺氏菌进行药敏试验，现报告如下：     

小儿福氏、志贺氏菌83株药敏试验结果分析

近１０多年来,国内不断有耐药志贺氏菌的报道,其中耐氨苄青霉素、复方新诺明的报道最多。我院１９９６～１９９８年收治的痢疾病人中,共有８３例儿童粪便培养出福氏、志贺氏菌。现将这些菌株的药物敏感试验结果进行分析,以了解福氏、志贺氏菌的耐药情况,希望对指导临床合理使用抗生素有所帮助。１　材料与方法１．１　菌株来源　８３株福氏、志贺氏菌菌株来源于我院门诊及儿科住院痢疾病人,其中男５２例,女３１例,年龄为６个月～１３岁。１．２　抗菌药物　庆大霉素、氯霉素、氨苄青霉素、丁胺卡那霉素、氟哌酸、头孢唑啉、氧哌嗪青…     

200株痢疾杆菌的药敏实验报告

<正> 痢疾是全年都可发病的常见肠道传染病, 是由痢疾杆菌引起的。其致病菌分四个群,分别 为宋内志贺氏痢疾杆菌,福氏志贺氏痢疾杆菌, 痢疾志贺氏杆菌,鲍氏志贺氏痢疾杆菌。近年 来,从我院接收的患者大便中检测情况看,太原 地区流行的痢疾较多的是福氏志贺氏痢疾杆 菌,但从今年1至8月份便培养检出的菌种看, 致病菌呈多样性,痢疾志贺氏杆菌40株福氏次 之25株,小肠结肠耶尔森菌5株,肠球菌5株。     

人体结直肠癌Ki—ras基因点突变检测

采用ＰＣＲ和寡核苷酸探针杂交技术检测了３５例结直肠癌和５例息肉活检组织Ｋｉ－ｒａｓ基因第１２位密码子的点突变，发现１０例结直肠癌具有点突变，其中ＧＧＴ－ＧＴＴ（Ｇｌｙ－Ｖａｌ）突变３例，ＧＧＴ－ＧＡＴ突变７例；１例从有突变（ＧＧＴ－ＧＴＴ）。     

黔西县一起私立中学细菌性痢疾暴发的流行病学调查

2007年6月25日黔西县一私立寄宿制中学发生细菌性痢疾暴发,共发病65例,其主要症状为发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻、水样稀便及个别有粘液便。经采样检测,检出4株福氏志贺氏菌及一株福氏志贺氏菌。     

甘肃省宋内氏志贺氏菌的监测分析

目的 了解志贺氏菌属在甘肃省的流行、变迁及耐药状况,给防治工作提供依据.方法 2005年5月～2007年10月对分离的宋内氏志贺氏菌株,依据细菌性痢疾、阿米巴痢疾诊断标准及处理原则进行血清学鉴定、生化试验及药敏试验.结果 共检测宋内氏志贺氏菌140株,分离菌株为多重耐药,耐药种类达8种.结论 甘肃省2007年宋内氏志贺氏菌成为优势,耐药率逐年增加.     

一起鲍氏志贺氏菌食物中毒的实验室检验及其要点

鲍氏志贺氏菌引起的食物中毒不时发生。在实验室血清凝集试验中,痢疾志贺氏菌属4种多价血清,内只含痢疾志贺氏(1、2型)、宋内氏志贺氏菌定型及福氏志贺氏菌1-6型抗血清,而不含鲍氏志贺氏群各型抗血清。这一点在实际工作中往往被误解。2001年9月,张掖市某幼儿园发生一起鲍氏志贺氏菌污染食物和餐具引起的食物中毒,在检验中就出现这种误解。为总结经验,以利今后工作,现将这次实验室检验要点报告如下。1材料与方法1.1材料:剩余食物(面条、炒猪肉片、熟猪皮)3份,加工工具(砧板洗液)1份,腹泻物8份,呕吐物1份,肛试4份。1.2试剂。1.2.1志贺氏菌属诊…     

应用核酸探针检测痢疾杆菌侵袭力的初步报告

采用菌落原位杂交法,用福氏5型痢疾杆菌大质粒上17Kb 基因片段,以32p 标记制备成探针,对80例痢疾志贺氏菌的侵袭力进行检测,结果带菌者菌株中侵袭力的阳性率92.8%,90.9%,病人菌株中袭力的阳性率侵P>0.05,两组菌的侵袭力差异无显著性。通过不同菌群侵袭力的分析,福氏痢疾杆菌侵袭力的阳性率似高于其他菌群,该探针特异、敏感、快速、经济,为硷测痢疾菌侵袭力的理想方法。     

病原微生物盲样鉴定结果分析

目的通过盲样考核活动,评价本实验室检测微生物的技术水平和能力,确保日常检测结果的准确、可靠。方法按照GB/T4789-4、5-94和2003进行检测。结果盲样检出:1#沙门氏菌属O4群;2#志贺氏菌;3#肠炎沙门氏菌;4#福氏志贺氏菌2a;5#宋内氏1相;6#鼠伤寒沙门氏菌;7#福氏志贺氏菌1a;8#鲍氏志贺氏菌1-5型;9#嗜水气单胞菌。结论参加盲样考核可提升该实验室检测微生物能力,促进实验室管理体系进一步完善。     

126株志贺氏菌菌群分布及药敏结果分析

目的：报告山西省2005年至2007年126株志贺氏菌的分型和耐药性测定结果。方法：志贺氏菌的鉴定和血清分型按痢疾防治手册（2006）进行;耐药性测定参照K—B法进行。结果：126株志贺氏菌中福氏志贺氏茵占83．33％,宋内志贺氏菌占16．67％,未检出痢疾志贺氏菌和鲍氏志贺氏菌;126株福氏志贺氏茵可分为5个亚型,F4c为优势菌;对9种抗菌素均有不同程度的耐药,耐药率超过88％的有奈啶酸、四环素、氨苄西林、复方新诺明。结论：2005年至2007年志贺氏菌以F4e为优势菌群,其耐药性有所增加,提示临床应合理用药。     

两类肠道致病菌决定Sereny反应的毒力基因比较

采用分子生物学方法制备两种与Ｓｅｒｅｎｙ试验相关的毒力基因探针，痢疾杆菌的１．４ｋｂｖｉｒＧＤＮＡ，小肠结肠炎耶氏菌（Ｙｅ菌）毒力质粒的２．８ｋｂＤＮＡ两者均以半抗原－Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ进行标记，用１．４ｋｂｖｉｒＧＤＮＡ探针检测耶氏菌属细菌ＤＮＡ同源性，２．８ｋｂＤＮＡ探针检测痢疾杆菌和ＥＩＥＣＤＮＡ同源性，杂交结果均为阴性，表明痢疾杆菌与耶氏菌决定Ｓｅｒｅｎｙ反应的基因不同。     

DNA芯片检测乙型肝炎病毒基因多态性

目的：建立DNA芯片检测乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus，HBV）基因多态性的研究方法井对实验条件进行优化。方法：设计多条寡核苷酸探针，在硅烷化芯片的特定位置上，用点样仪将探针固定，并与PCR扩增的HBV基因相应区段杂交，杂交结果影印至硝酸纤维素膜，经BCIP／NBT避光显色，用放大镜观察杂交信号呈暗紫色圆点，根据特定位置上杂交信号的有无和与之相应的探针序列来判定基因突变的类型。结果：通过1次杂交反应可检测HBV前C／C区（nt1896／1814）、BCP区（nt1762／1764）和P区（nt528／552）等多个位点的变异，与测序分析结果完全一致，具有较好的检测灵敏度和重复性。结论：DNA芯片检测HBV基因常见突变位点多态性，操作简便易行，技术要求不高，具有临床推广应用价值，而且可以方便地通过向寡核苷酸探针阵列中添加相应探针，扩大基因芯片的检测应用范围，为临床检测提供了新的方法。