下呼吸道感染铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性及机制探讨

目的探讨下呼吸道感染铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性及机制。方法取下呼吸道标本临床分离的铜绿假单胞菌80株,经纸片扩散法（K-B法）检测耐药性。采用双纸片增效法检测金属β-内酰胺酶,采用标准纸片扩散法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,采用酶提取物三维试验法检测头胞菌素酶（AmpC酶）,采用氰氯苯腙对主动外排泵出表型特征的影响检测细胞内主动外排泵出机制。结果80株临床分离菌株中48株对亚胺培南耐药,32株对亚胺培南敏感。48株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中检出产β-金属酶6株,检出率12.5%;检出产ESBLs11株,AmpC酶8株,其中同时产AmpC酶和ESBLs共4株,检出率分别为22.9%、16.7%和8.3%;检出9株（18.8%）菌株存在细胞内主动外排泵出的耐药机制。结论产生金属β-内酰胺酶、ESBLs和AmpC酶以及存在细胞内主动外排泵出机制是我院下呼吸道感染患者铜绿假单胞菌对亚胺培南抗生素耐药的主要原因。     

铜绿假单胞菌耐亚胺培南机制研究

目的研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制。方法取临床分离的铜绿假单胞菌35株(对亚胺培南耐药21株,对亚胺培南敏感14株)。采用外膜蛋白图谱,对其外膜蛋白OprD2进行SDS PAGE分析。同时进行超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶检测。结果铜绿假单胞菌耐药组OprD2相对含量明显低于敏感组(P＜0.01),且检出产ESBLs 9株,AmpC酶5株,同时产AmpC酶和ESBLs共2株。结论OprD2减少及产生ESBLs和AmpC酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

铜绿假单胞菌多重耐药株β-内酰胺酶的检测与分析

目的了解临床铜绿假单胞菌对14种抗生素的耐药情况,对多重耐药铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶检测,为临床合理使用抗生素提供参考。方法 236株铜绿假单胞菌采用K-B法进行药敏实验,筛选多重耐药铜绿假单胞菌后,再进行改良三维实验对多重耐药菌所产β-内酰胺酶进行分析。结果在体外药敏实验中,铜绿假单胞菌对临床常用14种抗假单胞菌药物均存在不同程度耐药现象,氨基糖苷类及喹诺酮类抗生素显示出较高的敏感性,分别为环丙沙星（60.6%）、加替沙星（58.1%）、阿米卡星（43.6%）、左氧氟沙星（53.4%）;其次是亚胺培南（56.4%）、头孢他啶（49.2%）、头孢哌酮/舒巴坦（40.7%）。三维实验结果显示,产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌8株（25.0%）,产头孢菌素酶（AmpC酶）菌7株（21.8%）,同时产ESBLs＋AmpC酶菌4株（12.5%）。乙二胺四乙酸（EDTA）协同实验检测产金属酶菌5株（15.6%）。结论产ESBLs、高产AmpCβ2内酰胺酶和（或）碳青酶烯酶是本院多重耐药铜绿假单菌主要耐药机制。     

小儿铜绿假单胞菌感染对亚胺培南耐药性分析及机制探讨

目的 探讨患儿铜绿假单胞菌感染对亚胺培南的耐药性及可能的作用机制.方法 取临床分离的铜绿假单胞菌亚胺培南耐药11株.采用改良三维试验方法 检测ESBLs和AmpC酶.采用外膜蛋白图谱,紫外吸收法测定OprD2含量.采用Etest试验观察氰氯苯腙对亚胺培南最低抑菌浓度(MIC)的影响,以研究细胞内主动外排泵出机制.结果 11株铜绿假单胞菌耐药株中检出单产ESBLs 4株,单产AmpC酶3株,其中同时产AmpC酶和ESBLs共1株.耐药株OprD2相对含量明显低于敏感组(P＜0.01).有27.3%菌株存在主动外排泵出机制.结论 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶的产生、OprD2的减少及存在主动外排泵出机制是我院住院患儿铜绿假单胞菌对亚胺培南抗生素耐药的主要原因.     

下呼吸道标本铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性分析及机制探讨

铜绿假单胞菌是引起医院内感染的主要病原菌。亚胺培南作为革兰阴性菌的最有效的抗生素，随着青霉烯类抗生素的广泛应用，铜绿假单胞菌的耐药菌株逐渐增多，给临床治疗带来困难。因此，研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制显得尤为重要。为了解我院临床送检的下呼吸道标本铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药情况及机制。我们通过检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶的产生状况以及细胞内主动外排泵出机制两个方面来探讨其耐药机制，现报道如下。     

铜绿假单胞菌多重耐药株β-内酰胺酶的检测与分析

目的 了解临床铜绿假单胞菌对14种抗生素的耐药情况,对多重耐药铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶检测,为临床合理使用抗生素提供参考.方法 236株铜绿假单胞菌采用K-B法进行药敏实验,筛选多重耐药铜绿假单胞菌后,再进行改良三维实验对多重耐药菌所产β-内酰胺酶进行分析.结果 在体外药敏实验中,铜绿假单胞菌对临床常用14种抗假单胞菌药物均存在不同程度耐药现象,氨基糖苷类及喹诺酮类抗生素显示出较高的敏感性,分别为环丙沙星(60.6%)、加替沙星(58.1%)、阿米卡星(43.6%)、左氧氟沙星(53.4%);其次是亚胺培南(56.4%)、头孢他啶(49.2%)、头孢哌酮/舒巴坦(40.7%).三维实验结果显示,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌8株(25.0%),产头孢菌素酶(AmpC酶)菌7株(21.8%),同时产ESBLs+AmpC酶菌4株(12.5%).乙二胺四乙酸(EDTA)协同实验检测产金属酶菌5株(15.6%).结论 产ESBLs、高产AmpCβ2内酰胺酶和(或)碳青酶烯酶是本院多重耐药铜绿假单菌主要耐药机制.     

铜绿假单胞菌感染耐药性及与β内酰胺酶的关系

目的研究本地区老年患者铜绿假单胞菌感染的分布特点及其耐药状况以及与产β-内酰胺酶的关系。方法采用K-B法测定亚胺培南等11种抗菌药物对182株铜绿假单胞菌及38株产β-内酰胺酶的铜绿单胞菌的体外抗菌活性。结果在临床分离的182株铜绿假单胞菌中,亚胺培南敏感性最高为85.71%,依次为头胞他啶(80.77%)、氨曲南(80.22%)、丁胺卡那(70.88%);在99株下呼吸道感染的铜绿假单胞菌中,亚胺培南的耐药率为24.24%,头孢他啶的耐药率为28.28%,明显高于其它部位;而在38株产β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌中,耐药率最高的为哌拉西林(100%),其次为头孢唑啉(97.37%)和头孢噻肟(94.74%),明显高于非产酶株。结论铜绿假单胞菌感染中产β-内酰胺酶较为常见。产酶株铜绿假单胞菌的耐药性明显高于非产酶株铜绿假单胞菌的耐药性。其产生的β-内酰胺酶,是造成临床上铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因。     

铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性分析及机制探讨

目的:研究铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性及其机制。方法:取痰液中培养分离的铜绿假单胞菌55株,经K-B法检测耐药性。采用外膜蛋白图谱,对其外膜蛋白OprD2进行SDS-PAGE分析,双纸片增效法检测金属β-内酰胺酶。结果:根据耐药性分为铜绿假单胞菌亚胺培南菌耐药36株和敏感19株。铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株不同程度OprD2减少,耐药组OprD2相对含量明显低于敏感组(P<0.01);产金属β-内酰胺酶6株,检出率10.9%。结论:OprD2的减少和产金属β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。     

多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性及耐药基因检测

目的:了解铜绿假单胞菌耐药性及β-内酰胺酶基因类型,指导临床合理用药。方法:琼脂稀释法测定12种抗生素对临床分离70株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度;筛选出20株多重耐药菌,三维试验检测产ESBLs和AmpC酶的情况;用聚合酶链反应(PCR)法检测β-内酰胺酶基因并进行测序分析。结果:铜绿假单胞菌对亚胺培南、阿米卡星和环丙沙星的敏感率较高;6株菌产AmpC酶,2株菌产ESBLs;PCR检测出4株菌产TEM酶,经测序2株产TEM-1型,一株产TEM-29型,另一株产酶与TEM-29比较有1处氨基酸的改变,命名为TEM-147;未检出SHV、OXA、PER和VEB型β-内酰胺酶基因。结论:必须重视铜绿假单胞菌ESBLs的检测,对于该菌引起的感染采用碳青霉烯类、阿米卡星或环丙沙星治疗是较好的选择。     

耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶类型的研究

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌对其它抗菌药物的耐药性及其产金属β-内酰胺酶的类型。方法收集同济医院2004年1月-9月耐亚胺培南铜绿假单胞菌29株，琼脂稀释法测定最低抑菌浓度（MIC）；通过改良Hodge试验、双纸片协同试验（DDST）、聚合酶链反应（PCR）、序列分析等方法分析金属β-内酰胺酶类型，紫外分光光度法测定金属β-内酰胺酶的活性。结果29株细菌均为多重耐药株。11种常用抗菌药物中，仅对哌拉西林／三唑巴坦和阿米卡星敏感率较高，分别为69．7％和60．6％。29株菌中有2株产VIM-2金属β内酰胺酶（6．9％）。结论本院耐亚胺培南铜绿假单胞菌流行主要为医院感染所致，且里多重耐药，有2株发现产VIM-2型金属β-内酰胺酶．     

下呼吸道标本肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的检测及耐药分析

目的探讨下呼吸道标本肺炎克雷伯菌产头抱菌素酶（Ampc酶）和超广谱6-内酰胺酶（ESBLs）的情况及耐药分析。方法采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验方法检测AmpC酶。并检测肺炎克雷伯菌对15种抗生素的耐药率。结果120株肺炎克雷伯菌中检出产酶菌株69株。检出率57．5％,其中单产ESBLs38株,单产AmpC酶17株．同时产ESBLs和AmpC酶14株,检出率分别为31．7％、14．2％和11．7％。肺炎克雷伯菌产酶菌株对15种抗生素的耐药率均高于平均水平（除亚胺培南）。结论我院下呼吸道标本肺炎克雷伯菌对抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素。     

大肠埃希菌ESBLs、AmpC酶的检测及耐药特性

目的 分析大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、头孢菌素（AmpC）酶的情况及耐药特性,指导临床合理用药.方法 收集2011年1月至2012年6月我院临床分离的大肠埃希菌287株.用双纸片确诊法检测ESBLs,三维试验检测AmpC酶,KB法进行药敏试验.结果 287株大肠埃希菌中,产ESBLs 119株（41.5％）,产AmpC酶47株（16.4％）,同时检出产ESBLs和AmpC酶16株（5.6％）.单一产ESBLs或AmpC酶的菌株有较高的耐药性,同时检出ESBLs和AmpC酶的菌株对多种抗菌药耐药,所有菌株对亚胺培南均敏感.结论 大肠埃希菌ESBLs和AmpC酶的分离率及耐药率都较高,同时检出ESBLs和AmpC酶的菌株具多重耐药性;亚胺培南具有良好的抗菌活性.临床应加强ESBLs和AmpC酶的检测及耐药监测,采取有效措施防止耐药菌株产生.     

胆道感染大肠埃希菌的耐药性分析及产超广谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶检测

目的探讨胆道感染大肠埃希菌的耐药性分析及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC酶）检测。方法采用标准纸片扩散法检测ESBLs和改良三维试验检测AmpC酶,并采用K-B琼脂扩散法检测大肠埃希菌对18种抗生素的耐药率。结果从130株分离的大肠埃希菌中检出单产ESBLs35株,单产AmpC酶10株,同时产AmpC酶和ESBLs共6株,检出率分别为26.9%、7.7%和4.6%。产酶菌株对18种抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株（除亚胺培南）。结论胆道感染大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生ES-BLs和AmpC酶,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素。     

多重耐药铜绿假单胞菌产酶状况及药物敏感性研究

目的了解本地区多重耐药铜绿假单胞菌产酶情况及耐药性,为临床治疗及感染控制提供依据。方法采用手工法及法国生物梅里埃鉴定系统对菌种进行鉴定,采用K-B琼脂扩散法进行药敏实验检测,改良三维试验、协同法分别对细菌ESBLs酶、AmpC酶、金属酶进行检测,根据CLSI标准进行判读。结果临床标本主要以痰标本为主,分离率为71.1%,其次是伤口分泌物和脓汁,97株铜绿假单胞菌中产AmpC酶47株(48.5%),单产ESBLs酶菌株21株(21.6%),同时产ESBLs酶和AmpC酶菌株16株(16.4%),产金属酶的菌株9株(9.28%),产AmpC酶菌株检出率最高。讨论多重耐药铜绿假单胞菌以产AmpC酶为主,对亚胺培南、阿米卡星、环丙沙星敏感率较高,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,减少耐药菌株产生和控制医院感染。     

双纸片增效试验筛查金属β-内酰胺酶

目的：建立简便的双纸片增效试验,筛查产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌.方法：3组不同底物的双纸片增效试验检测金属β-内酰胺酶,比较其结果.结果：75株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌分别应用亚胺培南、头孢他啶、氨曲南和其EDTA复合纸片检出金属β-内酰胺酶阳性株分别为13,11,10株,阳性率分别为17.3%,14.7%和13.3%;联合应用3组底物,检出阳性株18株,阳性率为24.0%.结论：双纸片增效试验可作为金属β-内酰胺酶的初筛试验.     

老年人下呼吸道革兰阴性杆菌感染耐药机制研究

目的研究本院老年人下呼吸道感染革兰阴性杆菌产灭活酶耐药机制。包括超广谱β内酰胺酶(ESBLs)、高产头孢菌素酶(AmpC)和金属酶。通过对临床常见致病菌大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单孢菌、不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌等的检测结果分析,掌握本院老年患者下呼吸道感染主要病原菌的耐药规律及主要基因型,为临床经验治疗提供参考依据。方法单纸片扩散初试产ESBL菌株,用双纸片增效确认试验或自动细菌鉴定和药敏系统(VITEK)确定ESBL 菌株;用改良三维法检测去阻遏头孢菌素酶;Etest金属酶试条测定铜绿假单孢菌产金属酶的情况。用等电聚胶和测序方法对ESBL阳性株作分子基因分型。结果 80株肺炎克雷伯菌及143株大肠埃希菌产ESBL(超广谱β内酰胺酶)频率分别为27.5％和28.7％,CTX-M基因型分别占48％和56％。124株阴沟肠杆菌中有21.8％单独高产AmpC酶,8.1％单独产ESBL,3.2％即产ESBL又高产AmpC酶。71株耐亚胺培南的绿脓假单胞菌中有18.3％产金属β内酰胺酶。结论产ESBL、高产AmpC酶和金属β内酰胺酶是住院老年患者下呼吸道感染难以治愈的重要因素。CTX-M基因型是我院ESBLs流行的主要基因型。     

骨科感染创面铜绿假单胞菌耐亚胺培南临床分析

目的：探讨骨科感染创面铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因和可能机制。方法：检测37株骨科感染创面铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD2及金属β-内酰胺酶的表达情况,分析铜绿假单胞菌感染患者临床情况。结果：37株实验菌株中,15株对亚胺培南敏感,22株对亚胺培南耐药,其中有17例与ICU或呼吸内科住院有关,耐药株患者中APACHEⅡ评分达12以上占45．5％,平均住院时间（26．9±7．5）d,2周内有亚胺培南或美罗培南使用史者45．5％（10／22）;敏感株患者中APACHEⅡ评分〉12者6．7％,平均住院时间（13．5±6．6）d,2周内有亚胺培南或美罗培南使用史者0％（0／15）。OprD2相对含量耐亚胺培南菌株组为（2．65±0．54）％,明显低于亚胺培南敏感菌株组的（5．38±0．81）％（P〈0．01）。37株实验菌株中产金属β-内酰胺酶5株（13．5％）,并均在耐亚胺培南菌株组中。结论：他科输入、病情危重免疫力低下、住院时间长、碳青霉烯类抗生素使用是骨科感染创面铜绿假单胞菌对亚胺培能耐药的主要原因,而OprD2的含量减少和产金属β-内酰胺酶是骨科感染创面铜绿假单胞菌对亚胺培能耐药的重要机制。     

116株铜绿假单胞菌的耐药性分析

［摘要］目的 分析铜绿假单胞菌耐药机制及现状,指导临床合理应用抗菌药物.方法 用K－B纸片扩散法对116株铜绿假单胞菌做13种抗菌药物的敏感试验,并对70铜绿假单胞菌进行了超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）的测定. 结果 对13种抗菌药物的敏感试验显示,铜绿假单胞菌对β－内酰胺类抗生素显示较高耐药,对氨基苷类、喹诺酮类等也有不同程度的耐药,而碳青霉烯类有很高的抗菌活性. 结论 铜绿假单胞菌对临床常用的抗菌药物呈高耐和多重耐药,其耐药机制为β－内酰胺酶的产生（ESBLs、AmpC酶）,环丙沙星、左氧氟沙星、头孢吡肟等可作为治疗其感染的首选用药,亚胺培南可作为二线用药,治疗其混合感染及其高耐菌株.     

耐亚胺培南铜绿假单胞细菌临床分离株金属酶检测的研究

目的了解昆明地区临床分离的铜绿假单胞菌(PA)亚胺培南耐药株产金属酶β-内酰胺酶的情况。方法以头孢他啶、亚胺培南、美洛培南为底物,乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)为酶抑制剂,应用复合纸片法检测159株临床分离的PA亚胺培南耐药株产金属β-内酰胺酶。结果159株受试菌株中有35株复合纸片试验阳性,表示受试菌株产金属β-内酰胺酶。结论产金属酶是PA对碳青酶烯类抗菌药物耐药的机制之一,实验室重视对金属酶的检测可帮助临床合理选用抗菌药物并减少细菌耐药性的传播。     

尿路感染大肠埃希菌耐药性及产酶检测

目的：分析探讨尿路感染大肠埃希菌的耐药性及产头孢菌素酶（AmpC酶）和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况。方法：采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验法检测AmpC酶。并检测60株大肠埃希菌对18种抗菌药的耐药率。结果：60株大肠埃希菌中检出产酶菌株38株（63．3％）,其中单产ESBLs27株（45．0％）,单产AmpC酶8株（13．3％）,同时产AmpC酶和ESBLs3株（5．0％）。大肠埃希菌产酶菌株对18种抗菌药的耐药率均高于平均水平（除亚胺培南）。结论：我院尿路感染中段尿标本中分离的大肠埃希菌对抗菌药耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株重症感染临床经验用药首选碳青霉烯娄抗生素．