原发性膀胱癌多肿瘤抑制基因1改变及其意义

为探讨多肿瘤抑制基因１（ＭＴＳ１）在原发性膀胱癌发生发展中的作用，采用ＰＣＲＳＳＣＰ和ＤＮＡ直接测序方法，对１８例膀胱移行细胞癌进行ＭＴＳ１分析。结果１８例原发性膀胱癌中没有发现ＭＴＳ１纯合性缺失，但发现２例点突变。表明原发性膀胱癌的发生与ＭＴＳ１的失活相关     

膀胱癌组织中MTS1基因缺失及突变的研究

我们采用ＤＮＡ聚合酶链反应（ＰＣＲ）和单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）技术对４８例膀胱癌组织中多肿瘤抑制基因（ＭＴＳ１）第２外显子点突变及存在状态进行了研究,旨在探讨ＭＴＳ１基因改变与膀胱癌发生发展的关系。１．资料和方法：（１）标本：４８例原发性膀胱癌组织均取自我院病理存档的石蜡包埋标本,且病理证实均为移行上皮癌。其病理分级为：Ｇ１２０例,Ｇ２１４例,Ｇ３１４例。临床分期为：Ｔ１,２３２例,Ｔ３,４１６例。另选８例正常膀胱组织作为对照。（２）膀胱癌组织ＤＮＡ提取：按分子克隆方法进行。（３）ＰＣＲ：…     

MTS1基因在人BPH中突变缺失的初步研究

目的探讨ＭＴＳ１基因在人前列腺增生症（ＢＰＨ）发病机制中的作用和变异情况。方法用ＰＣＲ银染ＳＳＣＰ技术检测１８例正常前列腺和３８例ＢＰＨ中抑癌基因ＭＴＳ１各外显子的纯合性缺失和突变。结果１２例ＢＰＨ出现ＭＴＳ１基因缺失,总缺失率为３２％;正常前列腺组织中有１例出现ＭＴＳ１基因缺失,缺失率为６％,两者之间差异有显著性（Ｐ＜００５）;无１例有ＭＴＳ１基因的突变。结论ＢＰＨ的发病机制可能与ＭＴＳ１的纯合性缺失有关,未见有突变发生。应对ＭＴＳ１基因在人ＢＰＨ中的作用作更深入的研究     

原癌基因mdm2在膀胱癌中的表达

目的 探讨ｍｄｍ２在膀胱癌中的表达状况与组织学的关系。方法 用抗人ＭＤＭ２蛋白单抗ＳＭＰ１４对７０例膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）进行免疫组织化学技术研究。结果 ７０例移行细胞癌（ＴＣＣ）中３１例染色阳性，占４４．２９％。ＭＤＭ２阳性低分级分期Ｇ１ ５２％，Ｔａ－Ｔ１ ７０．９７％。结论 ｍｄｍ２基因的表达与膀胱癌早期生物学行为有关，可作为预后判定指标。     

MTS1失活与膀胱癌发生的关系研究进展

多肿瘤抑制基因１（ＭＴＳ１）位于９ｐ２１，编码一个１６ＫＤ的蛋白质（ｐ１６），ｐ１６蛋白是周期素依赖性激酶４（ＣＤＫ４）的抑制因子，能抑制细胞的生长和分裂。ＭＴＳ１主要通过缺失、点突变和５’ＣｐＧ岛异常甲基化而失活，已经证实该基因的失活与多种组织的肿瘤形成有关，其中包括膀胱癌。本文就有关ＭＴＳ１失活与膀胱癌发生的研究进展作一综述。     

MTS1失活与膀胱癌发生的关系研究进展

多肿瘤抑制基因１（ＭＴＳ１）位于９ｐ２１，编码一个１６ＫＤ的蛋白质（ｐ１６），ｐ１６蛋白是周期素依赖性激酶４（ＣＤＫ４）的抑制因子，能抑制细胞的生长和分裂。ＭＴＳ１主要通过缺失、点突变和５’ＣｐＧ岛异常甲基化而失活，已经证实该基因的失活与多种组织的肿瘤形成有关，其中包括膀胱癌。本文就有关ＭＴＳ１失活与膀胱癌发生的研究进展作一综述。     

多肿瘤抑制基因(MTS_1/P16/CDKN_2)与泌尿系肿瘤

多肿瘤抑制基因（ＭＴＳ１／Ｐ１６／ＣＤＫＮ２）是１９９４年发现的新型抑癌基因，定位于第九号染色体短臂２区１带，在多种肿瘤细胞系和原发性肿瘤中发生突变与缺失。所编码的Ｐ１６蛋白为细胞周期素依赖激酶４的抑制因子，也是直接控制细胞增殖周期的细胞固有蛋白，Ｐ１６蛋白失活与Ｐ１６基因突变、纯合缺失、５’－ＣＰＧ区甲基化有关。Ｐ１６与肾癌、膀胱癌的发生发展有关。Ｐ１６基因长度仅为Ｐ５３的１４，易于操作，在肿瘤基因治疗方面有应用前景。     

膀胱癌组织中p53基因突变的研究

作者应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）和直接测序等分子生物学技术，分析检测了２１例膀胱移行上皮癌ｐ５３基因５～８外显子。结果，在１４例浅表性膀胱癌中，发现１例（Ｔ＿１期）ｐ５３基因突变；７例浸润性膀胱癌中，４例发现ｐ５３基因突变，其中Ｔ＿２期１例，Ｔ＿３期２例，Ｔ＿４期１例。４例Ｇ＿１级膀胱癌无一例检出ｐ５３突变，５例Ｇ＿２级膀胱癌１例检出ｐ５３突变，１２例Ｇ＿３级肿瘤４例发现ｐ５３基因突变。结果表明：ｐ５３基因突变在膀胱癌的发生发展中起着重要作用。     

野生型MTS1基因导入对人膀胱癌细胞系生长抑制作用的研究

通过逆转录病毒载体将外源野生型ＭＴＳ１基因导入该基因功能丧失的人膀胱癌细胞系Ｔ２４中，结果发现，转染ＭＴＳ１基因的膀胱癌细胞的生长速率减低，流式细胞仪检测显示Ｓ期指数及增殖指数明显降低，电镜观察显示超微结构出现生长抑制特征，接种裸鼠无致瘤性。     

高复发及浸润性膀胱癌的分子生物学基础

目的　探讨膀胱癌多发,复发和浸润的分子生物学基础。　方法　采用分子生物学方法对膀胱癌实体肿瘤 Ｔ Ｇ Ｆα, Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ,ｐ１６ 和ｐ５３ 基因表达、缺失及生物学意义进行了研究。　结果　３４ 例膀胱癌中８５ ％ （２９／３４） Ｔ Ｇ Ｆαｍ Ｒ Ｎ Ａ 阳性表达,肿瘤的表达量是癌旁正常对照的２ ～５ 倍, Ｐ＜０ ．０１ 。膀胱癌 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达率为４４ ％ （４／９） 。５０ 例膀胱癌ｐ５３ 蛋白免疫组化阳性核染率４２ ％（２１／５０ ） ,其中 Ｐ Ｔ３ ８２ ％ （９／１１） , Ｇ３ ７２ ％ （１３／１７） , Ｐ Ｔ２ ４０ ％ （１２／３０） , Ｇ２ ３２ ％ （８／２５） , Ｐ Ｔ１ 和 Ｇ１ 级肿瘤未见阳性核染。随访２５ 例,ｐ５３ 阳性核染者中７６ ％ （１０／１３） 有复发转移。２０ ％ （２／１０） 实体膀胱癌有ｐ１６ 基因的丢失。结论　 Ｔ Ｇ Ｆαｍ Ｒ Ｎ Ａ 高表达可能是膀胱癌发生的早期事件。 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ 和ｐ５３ 基因异常表达可能与膀胱癌的分化和恶性度相关。     

人非小细胞肺癌P16基因突变研究

目的探讨ｐ１６基因缺失和突变与人非小细胞肺癌发生、发展的关系。方法应用多重ＰＣＲ、ＳＳＣＰ分析及ＤＮＡ序列分析技术，对４５例人非小细胞肺癌组织中ｐ１６基因外显子１和外显子２进行基因缺失和突变分析。结果４５例肺癌样品中共检出１９例ｐ１６基因缺失，总的缺失率为４２．２％（１９／４５）。其中纯合型缺失８例（１７．８％），半合型缺失１１例（２４．４％）；外显子１缺失７例（１５．６％），外显子２缺失１２例（２６．７％）；ｐ１６基因外显子２的突变检出率为３１．１％（１４／４５）；ＤＮＡ序列分析显示ｐ１６基因７２位密码子无义突变７例，７５位密码子错义突变７例。结论ｐ１６基因的缺失和突变可能与人非小细胞肺癌的发生、发展有关。     

直肠癌癌旁移行粘膜MTS1基因产物表达的意义

目的 探讨直肠癌癌旁移行粘膜（ＴＭ）的性质及多种种瘤抑制基因（ＭＴＳ１）基因缺失的临床意义。方法 应用粘液组化方法观察了直肠癌旁ＴＭ的范围,免疫组化方法观察了ＭＴＳ１基因产物表达情况,并与正常粘膜及癌组织进行对照 结果 ＭＴＳ１基因产物在正常直肠膜阳性表达率最高,在癌旁ＴＭ、癌组织表达逐渐减少,三者差异有显著意义（Ｐ〈０．０５）;ＭＴＳ１阴性的直肠癌病例,癌旁ＴＭ的明显高于ＭＴＳ１阳性的病例（Ｐ〉     

抗癌基因Rb在肾癌在膀胱癌中的表达及其与组织病理的关系

对正常肾和肾细胞癌组织，正常膀胱粘膜和膀胱移行细胞癌组织以及肾癌细胞和膀胱癌细胞株ＢＩＵ－８７和Ｅ－Ｊ中的抗癌基因Ｒｂ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析，肾和膀胱癌细胞都表达正常的Ｒｂ ｍＲＮＡ。１／３例肾癌组织和２／８例膀胱癌组织中发现Ｒｂ基因缺失。此２例Ｒｂ缺失的膀胱癌均为低分化肿瘤，在分化较高的膀胱癌中未发现Ｒｂ基因缺失。结果表明，Ｒｂ苈在缺失与膀胱癌的关系密切。同时与肿瘤的分化程度有关。结     

精子获能前后运动轨迹变化与MTATP_8、MTCYB基因缺失

目的：为探讨精子ＭＴＡＴＰ８ 、ＴＭＣＹＢ基因缺失与精子获能障碍导致男性不育的关系。　方法：６０ 例男性不育者（其中３０ 例精子活动力正常，３０ 例精子活动力异常）和３０ 例生育男性精子获能前后运动轨迹变化，以及用ＰＣＲ技术检测其线粒体脱氧核糖核酸（ｍ ｔＤＮＡ）基因缺失情况。　结果：男性不育组获能后轨迹没有变化的共检出１６ 例，其中活动力异常组检出１０例，活动力正常组检出６ 例；生育组获能前后运动轨迹均有变化。不育组活动力异常的３０ 例标本中检出ＭＴＡＴＰ８ 基因缺失２ 例，检出ＭＴＣＹＢ基因缺失４ 例；不育组活动力正常的３０ 例标本中检出ＭＴＡＴＰ８ 基因缺失２ 例，检出ＭＴＣＹＢ基因缺失３ 例，经统计两组差异不显著（Ｐ＞ ０．０５）。生育组３０ 例标本未检出ＭＴＡＴＰ８、ＭＴＣＹＢ基因缺失，与男性不育组差异显著（Ｐ＜ ０．０５）。不育组ＭＴＡＴＰ８ 基因、ＭＴＣＹＢ基因缺失率分别为７％ 、１２％ 。　结论：ＭＴＡＴＰ８ 、ＭＴＣＹＢ基因缺失影响精子获能，可能导致男性不育。     

逆转录病毒载体介导的HyTK基因在人膀胱癌细胞株EJ中的表达

为探索ＨＳＶ１ＴＫ基因对人膀胱癌的治疗作用，作者用一种与潮霉素磷酸转移酶（ｈｐｔ）基因相融和的Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶（ＨＳＶ１ＴＫ）基因（简称ＨｙＴＫ基因）作目的基因，用逆转录病毒载体将ＨｙＴＫ基因导入人膀胱癌细胞株ＥＪ细胞中表达。含ＨｙＴＫ基因的逆转录病毒载体ＬＨｙＴＫＮ，经包装细胞ＰＡ３１７包装后，获得重组逆转录病毒；病毒感染人膀胱癌细胞株ＥＪ细胞，经潮霉素Ｂ筛选培养，获得潮霉素Ｂ的抗性克隆；ＰＣＲ扩增证实：病毒感染的ＥＪ细胞中导入了ＨＳＶ１ＴＫ基因，为开展ＨｙＴＫ基因治疗膀胱癌打下了基础。     

抗癌基因Rb在肾癌和膀胱癌中的表达及其与组织病理的关系

对正常肾和肾细胞癌组织，正常膀胱粘膜和膀胱移行细胞癌组织以及肾癌细胞和膀胱癌细胞株ＢＩＵ－８７和Ｅ－Ｊ中的抗癌基因Ｒｂ进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析。肾和膀胱癌细胞都表达正常的ＲｂｍＲＮＡ。１／１３例肾癌组织和２／８例膀胱癌组织中发现Ｒｂ基因缺失。此２例Ｒｂ缺失的膀胱癌均为低分化肿瘤，在分化较高的膀胱癌中未发现Ｒｂ基因缺失。结果表明，Ｒｂ基因缺失与膀胱癌的关系密切，同时与肿瘤的分化程度有关。结合文献对Ｒｂ抗癌基因与泌尿系肿瘤的关系及其在肿瘤发生中的作用进行讨论。     

单克隆抗体检测膀胱移行细胞癌相关抗原与肿瘤病理分级关系的探讨

为探讨膀胱移行细胞癌相关抗原与肿瘤病理分级及之间的关系，作者应用膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）１９Ａ２１１和Ｍ３４４，对５１例（１０２个）膀胱ＴＣＣ组织切片进行免疫组化染色。５１例中包括膀胱ＴＣＣ１级１７例、２级１８例、３级１６例。结果１９Ａ２１１抗原表达阳性率在１级是８２．４％（１１／１７），２级是７７．７％（１４／１８），３级是３７．５％（６／１６）。１级阳性表达率与３级相比，Ｐ＜０．０１。２级阳性表达率与３级相比，Ｐ＜０．０５。Ｍ３４４抗原表达阳性率在１级是８８．２％（１５／１７），２级是８３．３％（１５／１８），３级是３７．５％（６／１６）。１级阳性表达率与３级相比，Ｐ＜０．０１。２级阳性表达率与３级相比，Ｐ＜０．０５。１９Ａ２１１和Ｍ３４４联合应用对５１例膀胱ＴＣＣ进行检测，抗原表达阳性率１级是１００％（１７／１７），２级是８８．８％（１６／１８），３级是６８．８％（１１／１６）。结果表明，ＭｃＡｂ１９Ａ２１１、Ｍ３４４适用于膀胱ＴＣＣ的诊断，特别是有利于１、２级表浅性膀胱ＴＣＣ。联合应用２种ＭｃＡｂ可明显提高检测１、２表浅性膀胱ＴＣＣ的阳性率。     

膀胱移行细胞癌的微卫星不稳定性研究

目的了解膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）组织中微卫星不稳定（ＭＳＩ）的情况及其与膀胱癌生物学行为的关系。方法选择４个阳性率较高的微卫星位点，应用ＰＣＲＭＩＡ分析２３例ＴＣＣ病人的ＭＳＩ及其与临床分期和病理分级的关系。结果ＭＳＩ在ＴＣＣ患者中以扩增表达为主，２３例ＴＣＣ病人中有９例出现ＭＳＩ，占３９％，其中３例同时有２个位点出现ＭＳＩ。病理分级和临床分期较高者，ＭＳＩ的阳性率明显增高（Ｐ＜００２５及Ｐ＜０００５）。结论ＴＣＣ患者的肿瘤组织中存在ＭＳＩ，且ＭＳＩ预示着ＴＣＣ的恶性程度较高。     

膀胱癌转化生长因子α和P53基因表达及生物学意义

通过现代分子生物学方法，对膀胱癌实体肿瘤的ＴＧＦα和Ｐ５３表达及生物学意义进行了探讨。３４例膀胱癌中２９例ＴＧＦαｍＲＮＡ表达，表达率为８５．３％（２９／３４）；１３例癌旁对照组织中，６例无表达，６例低表达，１例高于自身肿瘤表达。肿瘤的表达量是癌旁正常对照的２～５倍，统计学分析，Ｐ＜０．０１。１４例膀胱癌４例（２８．５％）Ｐ５３高表达，２例低表达，２例正常和８例癌组织未见表达。膀胱癌ＴＧＦα基因的高表达可能是膀胱癌发生发展的早期信号，Ｐ５３基因的变异表达可能主要参与癌细胞的分化，它可能与膀胱癌恶性表行相关。     

p16基因在膀胱癌和尿生殖癌细胞株中的丢失

为了解新型抗癌基因ｐ１６在膀胱癌和尿生殖系癌细胞株中的变异情况，作者通过引物合成、ＰＣＲ扩增和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交等分子生物学方法，对膀胱移行上皮癌细胞株ＢＩＵ－８７、ＥＪ、肾癌细胞株ＧＲＣ、前列腺癌细胞株ＰＣ－３Ｍ和膀胱癌组织进行了研究。结果显示：１０例正常组织和８例癌组织显示６．６和４．４Ｋｂ两条杂交带；２例癌出现杂交带的丢失（Ｔ４和Ｔ７）（纯合子丢失）；尿生殖系癌细胞株ＢＩＵ－８７、ＥＪ和ＰＣ－３Ｍ出现杂交带的丢失（纯合子丢失）；Ｔ９和Ｔ１０为杂合子丢失。本组ｐ１６基因的研究结果提供了膀胱癌第九号染色体基因变异的依据，为认识膀胱癌的形成和发展提供了新视角。