拉米夫定抗乙肝病毒治疗YMDD变异研究

目的]探讨拉米夫定治疗后乙肝病毒发生YMDD变异情况，及未接受拉米夫定治疗的乙型肝炎患者中是否存在天然变异的情况。[方法]采用聚合酶链式反应（PCR）结合Taqman荧光技术对海南地区110例慢性乙肝患者进行HBVYMDD检测，一组80例接受拉米夫定治疗及保肝治疗，另一组30例为对照组只给予保肝治疗，治疗1年对患者HBV多聚酶基因YMDD基序定性检测，观察是否有突变。[结果]拉米夫定治疗组在用药1年后有31例发生YMDD突变，其中YIDD变异有15例，YVDD变异有7例，YIDD＋YVDD变异有9例，变异株中有19例伴HBVDNA、ALT水平高于正常水平；而对照组有11例发生YMDD突变，其中YIDD变异有2例，YVDD变异有1例，YIDD＋YVDD变异有8例。[结论]在未经抗病毒治疗的慢性乙肝患者中存在YMDD变异株，l临床上在应用拉米夫定对慢性乙型肝炎患者进行抗病毒治疗前，应对患者是否存在YMDD变异加以重视。     

泉州地区拉米夫定抗乙肝病毒治疗YMDD变异

目的 检测泉州地区乙肝病毒YMDD变异的类型,探讨拉米夫定治疗后及未接受拉米夫定治疗的乙型肝炎患者中乙肝病毒(HBV)发生YMDD变异情况.方法 采用聚合酶链反应(PCR)结合Taqman荧光技术对泉州地区114例慢性乙肝患者进行HBV YMDD检测,一组66例接受拉米夫定治疗及保肝治疗,另一组48例为对照组只给予保肝治疗,治疗1年对患者HBV多聚酶基因YMDD基序定性检测,观察是否有突变.结果 拉米夫定治疗组在用药1年后有24例发生YMDD突变.其中YVDD变异有15例,YIDD变异有6例,YIDD YVDD变异有3例,其中变异株中有15例,伴有HBV DNA、ALT高于正常水平;而对照组有17例发生YMDD突变.其中YVDD变异有9例,YIDD变异有4例,YIDD YVDD变异有4例.结论 泉州地区乙肝病毒变异株主要是YVDD型,在未经抗病毒治疗的慢性乙肝患者中存在YMDD变异株,临床上在应用拉米夫定对慢性乙型肝炎惠者进行抗病毒治疗前,应对患者是否存在YMDD变异加以重视.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎产生YMDD变异及其处理

拉米夫定(LAM)是一种核苷类抗病毒药物,主要用于慢性乙型肝炎的治疗。LA M对乙型肝炎病毒DNA(H BVDNA)的降低具有较好的效果,但长期使用易致H BV多聚酶结构域C的酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YM DD)基序发生变异,导致治疗失败。因此,如何对YM D D变异进行正确的诊断和处理,?..     

未经抗病毒治疗的乙型肝炎病人的乙肝病毒YMDD变异分析

目的探讨未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者中HBV多聚酶YMDD变异情况及与乙肝血清标志物等之间的相关性。方法在进行HBV-DNA定量检测基础上,根据HBV-DNA含量不同随机选取89例未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者,同时进行YMDD变异及乙肝三系检测。结果89例未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者YMDD变异率达13.5%,YM-DD变异株以YIDD为主,占12.4%,YVDD占1.1%,并且其变异主要发生在HBeAg阳性患者中,HBeAg阳性变异株占10.1%,HBeAb阳性占3.4%。结论未经抗病毒治疗的乙肝患者中仍存在较高的YMDD变异率,变异者中以YIDD变异株为主,且主要发生在HBeAg阳性患者当中。     

乙型肝炎病毒YMDD变异的研究进展

近年来,拉米夫定成为临床上抗乙型肝炎病毒(HBV)最常用的药物,越来越多的报道显示长期应用拉米夫定可诱发HBV P区变异,从而形成拉米夫定耐药株,其主要表现形式为酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸基序(YMDD),这将使病人对拉米夫定产生耐药,甚至病人病情恶化[1].因此,HBV P区YMDD变异日益受到关注.本文根据近年来对HBV YMDD变异的研究报道,从对HBV YMDD的检测方法、其与HBV基因型的关系、以及与肝功能损伤程度的关系等方面对HBV YMDD变异研究做以综合性论述,相信对HBV YMDD变异的进一步研究起到积极作用,对防治HBV病毒也有着重要的意义.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎YMDD变异研究进展

慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B)是发病率高、病程长、难治愈、易反复的常见传染病之一。据世界卫生组织(WHO)报道[1]:全球估计约有20亿人已感染乙肝病毒,而3.5亿~4亿人患有慢性(长期)肝脏感染。其中每年大约有600万人死于急性或慢性乙型肝炎。我国流行病学调查显示[2]:从1992年始对新生儿普遍接种乙肝疫苗后,乙型肝炎病毒(HBV)携带者人群减少了约1/3,目前仍然大约     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎诱发YMDD变异相关因素分析

目的探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎(简称乙肝)诱发乙肝病毒(HBV)发生YMDD(酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸)变异的相关因素。方法采用PCR结合Taqman探针技术检测YIDD/YVDD变异,并对120例服用拉米夫定的慢性乙肝患者治疗前的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBVDNA水平进行分析。结果 120例患者经拉米夫定治疗72周,有34.17%(41/120)的慢性乙肝患者血中HBV发生YMDD病毒变异。拉米夫定联合干扰素治疗组YMDD变异率低于单用拉米夫定治疗组,HBV发生YMDD病毒变异与患者的治疗方案有关,差异有统计学意义(P0.01),与HBVDNA水平呈正相关;与ALT水平呈负相关。结论服用拉米夫定治疗前严格根据患者的HBVDNA载量和ALT水平选择最佳治疗方案和治疗时机,是减少耐药、提高疗效的关键。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎致病毒YMDD变异25例报告

我国是乙型肝炎高发国家，每年都有十几万人死于乙型肝炎、肝硬化和肝癌，严重影响人们的身体健康和生活质量。目前治疗慢性乙肝的主要目的是清除和永久性抑制病毒，这样可以降低HBV的致病作用或感染性，阻止或降低肝脏坏死及炎症变化，防止肝脏纤维化，预防肝硬化和肝癌的发生，延长生存期，提高生活质量。拉米夫定是目前抗病毒治疗中比较有效的药物，应用该药的绝大部分乙肝病人都会出现ALT的复常，临床症状的改善，部分病人出现HBeAg的血清转换，HBV—DNA的阴转，而且副作用小，应用方便且比较经济。但应用过程中，尤其疗程超过九个月的一部分病人会有YMDD变异株的出现，个别出现变异的病毒复制，个别转为重症肝炎。本文就100例拉米夫定患者9个月到18个月期间出现YMDD变异的25例进行分析，服用时间18个月的YMDD变异为25％，变异的个别病例病情加重，ALT、TBL升高，HBV—DNA恢复治疗前水平。     

乙肝病毒YMDD区变异后不同抗病毒疗法效果的系统评价

目的系统评价与拉米夫定相关的乙型肝炎病毒YMDD区变异后不同抗病毒治疗方法的疗效和安全性.方法计算机检索MEDLINE (1989～2004.4)、EMBASE (1989～2004.4)和中国生物医学文献数据库(1989～2004.4);手工检索未发表的中文学术会议文献.收集与拉米夫定相关的乙型肝炎病毒YMDD区变异后不同抗病毒疗法的临床随机与半随机对照试验,由两名评价者独立评价和提取资料,并采用Cochrane协作网专用软件RevMan 4.2进行统计分析.结果共纳入5篇随机和半随机对照研究,包括6个试验组284例病人.Meta分析结果显示,拉米夫定 阿德福韦治疗对HBVDNA、HBeAg转阴率及ALT复常率的效果明显优于单独应用拉米夫定,其RR和95%CI分别为16.61(2.29,120.71),6.66(1.23,35.88)和6.26(2.29,17.12).氧化苦参碱 胸腺肽对HBVDNA、HBeAg转阴率明显优于单独应用拉米夫定,其RR和95%CI分别为2.96(1.26,6.93),2.51(1.05,5.98).试验组单独使用阿德福韦与拉米夫定比较,两者在HBVDNA及HBeAg转阴率方面差异无统计学意义[RR 11.00,95%CI(0.65,186.02);RR 7.00,95%CI(0.39,126.92)];干扰素 拉米夫定对HBVDNA转阴率、HBeAg转阴率、ALT复常率优于单独应用拉米夫定,其RR和95%CI分别为3.50(0.90,13.58),4.90(0.70,35.10)和2.80(0.91,8.12);拉米夫定 中药与拉米夫定比较,其HBVDNA转阴率的差异无统计学意义[RR 1.16,95%CI(0.89,1.51)].在治疗过程中出现的副作用主要有:干扰素组产生流感样症状,阿德福韦组有轻度肾脏损伤,拉米夫定组有少数病例出现一过性病情加重.结论乙肝病毒YMDD变异后,阿德福韦 拉米夫定、氧化苦参碱联合胸腺肽等疗法的抗病毒作用及生化指标改善均优于继续单独使用拉米夫定.但由于样本量偏少,随机对照试验的质量普遍较低,对此尚不能得出肯定性的结论,有待扩大样本进一步研究.     

Taqman MGB双探针方法检测慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的研究

目的:探讨Taqman MGB双探针方法检测慢性乙型肝炎病毒YMDD变异的可靠性。方法:采用荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量,Taqman MGB双探针方法和测序方法检测其YMDD变异,以测序方法为参考方法,评价Taqman MGB双探针方法的可靠性。结果:246例HBV DNA阳性患者血清标本中,TaqmanMGB双探针方法阳性检出率100%,100例正常对照全部为阴性;YMDD无突变106例,YMDD有突变(YIDD变异 YVDD变异)140例,与核酸测序方法比较,符合率100%。该方法经过敏感度实验,最低检出下限为1×103copies/ml。结论:Taqman MGB双探针方法能便捷、灵敏、特异地检测YMDD基序变异情况,适用于临床检测慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗的YMDD基序变异。     

拉米夫定耐药感染者HBV基因与YMDD变异的相关性探讨

目的探讨拉米夫定耐药感染者HBV基因型与YMDD变异的相关性。方法采用PCR扩增后测序的方法,对162例拉米夫定耐药感染者进HBV基因型的分析。实时荧光定量PCR法检测HBVYMDD变异及HBVDNA载量。率的比较采用Y2检验法,两组均数间的比较采用t检验法。结果162例拉米夫定耐药感染者中,B基因型102例（63．0％）,C基因型60例（37．0％）。YMDD变异111例（68．5％）,其中YIDD变异30例（18．5％）,YVDD变异32例（19．7％）,YIDD／YVDD混合型变异49例（30．3％）。统计结果显示,不同性别之间HBV基因型分布没有显著性差别（P〉0．05）。B型患者的年龄（29．7岁±10．2岁）显著低于C型患者的年龄（35．3岁±11．3岁）,差异有统计学意义（P〈0．05）。YMDD变异的发生率在B、C基因型之间差异无统计学意义（P〉0．05）。C基因型患者血清的HBVDNA含量（6．08±0．71）显著高于B基因型组（5．73±0．90）（P〈0．05）,而血清ALT水平没有显著性差别（P〉O．05）。结论拉米夫定耐药感染者YMDD变异与基因型无关。但C基因型患者平均年龄、病毒载量显著高于B基因型,可能是导致CHB患者对拉米夫定耐药的重要因素。     

3种检测乙型肝炎病毒YMDD变异方法的比较

目的通过多种方法比较分析找到一种高灵敏的检测乙型肝炎病毒(HBV)YMDD变异的方法。方法收集抗病毒治疗1年的慢性乙肝患者样本166例(116例采用拉米夫定治疗、50例采用替比夫定治疗),比较高温连接酶检测反应(LDR)、实时荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)和测序3种方法检测HBV YMDD变异灵敏性。结果 LDR、Real-time PCR、测序的阳性率分别为23.49%、21.68%、19.27%。3种方法的特异性均为100%。采用拉米夫定治疗的患者中有38例变异,其中YIDD12例、YVDD26例;替比夫定只有1例YIDD变异。结论 LDR方法检测YMDD变异是非常适合临床应用的方案。YVDD变异较YIDD变异更为普遍。     

HBV基因组C1913A／G变异在不同疾病进程患者间的表现及对病毒复制力的影响

目的评价HBV基因组核苷酸C1913 A/G变异对乙型肝炎患者疾病进程及体外病毒复制力的影响。方法385例研究对象包括116例慢性乙型肝炎轻中度（ CHB-M）患者,123例慢性乙型肝炎重度（ CHB-S）患者和146例慢加急性肝衰竭（ ACLF）患者。从患者血清中提取HBV DNA,PCR扩增HBV DNA全长,统计分析G1896A,A1762T＋G1764A和C1913A/G变异的发生率,C1913A/G变异引起核心蛋白第5位氨基酸残基由脯氨酸变为苏氨酸或丙氨酸。统计各组变异与不同疾病进程患者间的单因素与多因素分析。挑选代表性C1913A/G变异株通过定点突变回复为野生型对照。用BspQⅠ/ScaⅠ双酶切HBV基因组,转染HepG2细胞,检测病毒复制力和HBsAg表达水平。结果 CHB-M、CHB-S和ACLF三组患者G1896A,A1762T＋G1764 A和C1913 A/G 变异检出率分别为17.45％、27.43％和51.63％（ P ＜0.01）,21.32％、32.64％和78.61％（ P＜0.01）,15.52％、33.33％和35.62％（ P＜0.01）, CHB 与 ACLF 患者年龄校正以后两组比较C1913 A/G检出率分别为26.34％和31.13％（ P＜0.01）。 C1913 A变异株的复制力和HBsAg水平较野生株分别降低了32.6％和9.7％,C1913 G分别降低了50.7％和9.2％。结论 C1913 A/G变异发生率随疾病程度加重依次增高且有统计学意义;C1913 A/G变异降低HBV病毒复制力并进而降低HBsAg表达水平,可能与核心蛋白结构发生改变有关,结果提示该变异可能与慢性乙型肝炎重症化发生机制相关。     

不同基因型乙型肝炎病毒患者拉米夫定治疗期间YMDD突变株的变化分析

目的研究不同基因型乙型肝炎病毒（HBV）患者拉米夫定治疗期间酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸（YMDD）突变株的变化。方法采用实时荧光聚合酶链反应（PCR）技术和基因测序法分别对115例接受拉米夫定治疗的乙型肝炎患者血清进行乙型肝炎病毒基因（HBV DNA）水平、YMDD突变株及基因型检测。结果拉米夫定治疗时间〈12个月、12~24个月及〉24个月患者的HBV DNA阳性率分别为75%、35%、16%,YMDD变异率分别为22%、54%、100%。对115例乙型肝炎患者进行HBV基因分型发现,B型占17%,C型占75%,B、C混合型占8%;其中,B型、C型患者中YMDD变异率分别为21%、19.5%,B、C混合型患者中未发现YMDD变异。HBV DNA与HBV的YMDD变异率无明显相关性（P〉0.05）。结论拉米夫定治疗期间,HBV的YMDD变异不受病毒基因型的影响。     

不同基因型乙型肝炎病毒患者拉米夫定治疗期间YMDD突变株的变化分析

目的研究不同基因型乙型肝炎病毒(HBV)患者拉米夫定治疗期间酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸(YMDD)突变株的变化。方法采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术和基因测序法分别对115例接受拉米夫定治疗的乙型肝炎患者血清进行乙型肝炎病毒基因(HBV DNA)水平、YMDD突变株及基因型检测。结果拉米夫定治疗时间<12个月、12~24个月及>24个月患者的HBV DNA阳性率分别为75%、35%、16%,YMDD变异率分别为22%、54%、100%。对115例乙型肝炎患者进行HBV基因分型发现,B型占17%,C型占75%,B、C混合型占8%;其中,B型、C型患者中YMDD变异率分别为21%、19.5%,B、C混合型患者中未发现YMDD变异。HBV DNA与HBV的YMDD变异率无明显相关性(P>0.05)。结论拉米夫定治疗期间,HBV的YMDD变异不受病毒基因型的影响。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒YMDD变异的研究

目的探讨拉米夫定治疗1年后慢性乙型肝炎（CHB）患者发生YMDD基序变异的状况及其检测方法。方法采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA含量，荧光PCR法和变性高效液相色谱法检测HBV YMDD基序变异。结果61例CHB患者经过拉米夫定治疗1年后，40例（65．6％）HBV DNA阴转；在21例HBV DNA阳性患者中，10例为YMDD野生型，11例出现YMDD基序变异，变异率达18．0％（11／61）。在11例基序变异中，完全变异7例（63．6％），部分变异4例（36．4％）。在完全变异型中，YIDD变异型5例，YVDD变异型2例；在部分变异型中，YIDD变异型3例，YVDD变异型1例。结论CHB患者拉米夫定治疗1年后，出现较高的YMDD基序变异率。利用荧光PCR法结合变性高效液相色谱法检测基序变异，经济便捷，可作为CHB患者YMDD基序变异的常规监测。     

乙型肝炎病毒前S基因突变研究进展

乙型肝炎病毒感染已成为世界范围内的严重公共卫生事件,可以引起急性、慢性病毒性肝炎,且与肝硬化及细胞性肝癌的发生高度相关。HBV基因的变异与病毒感染所致临床症状密切相关。本文对HBV前S基因的突变,以及该突变与细胞性肝癌的发生、乙型肝炎疫苗免疫失败、抗乙型肝炎药物治疗等的研究进展做一综述。     

用套式基因扩增技术检测乙型肝炎病毒P基因区YMDD变异

目的　了解套式基因扩增 (nestedPCR)技术在检测HBVP基因区酪氨酸 -蛋氨酸 -天冬氨酸 -天冬氨酸 (YMDD)变异中的敏感性和特异性。方法　用套式基因扩增技术对 3组共 85例慢性乙型肝炎患者血清进行YMDD变异检测 ,检测结果经琼脂糖凝胶电泳判断。第 1组 :4 0例未经拉米夫定治疗 ,HBVDNA >5× 10 5拷贝 /ml;第 2组 :2 4例经拉米夫定治疗 6～ 18个月 ,HBVDNA≤ 5× 10 5拷贝 /ml;第 3组 :2 1例经拉米夫定治疗 6～ 18个月 ,HBVDNA >5× 10 5拷贝 /ml。结果　第 1组检出YVDD 2例、YVDD YIDD 1例 ,检出率为 7.5 % ;第 2组检出YVDD、YIDD各 1例 ,检出率为 8.3% ;第 3组检出YVDD 4例、YIDD 2例、YVDD YIDD 3例 ,检出率为 4 2 .9%。结论　套式基因扩增技术检测YMDD变异具有较高的敏感性和特异性 ,适合变异株快速检测 ,尤其适合检测处于弱势的YMDD变异株