肺癌患者外周血单个核细胞Th1/Th2反应状态及黄芪的调节作用

目的:探讨肺癌患者外周血单个核细胞（PBMC）Th1/Th2免疫反应状态,观察中药黄芪（AG）对其作用。方法:采集并分离肺癌患者和健康志愿者的PBMCs,各分为4组:其中1组即刻冻存待测,其余3组分别为不加药对照组、加 10％AG、20％AG组,培养48h,收集细胞。以IL-2、IFN-γ代表Th1型细胞因子,IL-4、IL-6、IL-10代表Th2型细胞因子,用RT-PCR方法检测肺癌患者PBMC中Th1/Th2型细胞因子mRNA的表达。结果:肺癌患者PBMC中,IL-4、IL-6和IL-10表达阳性率显著高于正常对照（P<0.05）,而IL-2无1例表达（0/23）,IFN-γ仅1例表达;经与黄芪培养后（2种浓度）,肺癌患者Th2型因子与未加AG培养组相比,IL-4、IL-6和IL-10的表达率下降（P<0.05）;而IL-2的表达率显著提高（P<0.05）。结论:肺癌患者外周血的免疫细胞呈现Th2型免疫反应优势状态;黄芪对于肺癌宿主PBMCs Th1/Th2的状态有良好的调节作用,可使肺癌患者PBMCs的Th2型优势免疫反应向Th1方向逆转。     

肝癌患者癌组织与外周血Th1/Th2细胞的监测及临床意义

目的 :为观察肝癌患者癌组织与外周血Th1 Th2细胞变化及临床意义。方法 :Th1 Th2细胞检测采用酶联免疫斑点法 (ELISPOT) ,细胞因子检测采用双抗体夹心ELISA法。结果 :肝癌患者癌组织与外周血Th1 Th2细胞比值明显降低 (P <0 0 5 ) ,其Th1型细胞表达IL 2、INF γ等细胞因子水平明显低于正常对照组 ;Th2型细胞表达IL 4、IL 10等细胞因子水平明显高于正常对照组。PHA和IL 12介导肝癌患者手术切除前和手术切除 3个月后外周血Th1型细胞表达IL 2、INF γ等细胞因子水平升高 ,Th2型细胞表达IL 4、IL 10等细胞因子水平明显下降。结论 :肝癌患者癌组织与外周血Th1 Th2细胞比值均明显降低 ,细胞因子表达失衡 ,肝癌患者存在免疫功能抑制 ,因此 ,在肝癌治疗过程中打破免疫抑制 ,纠正Th1 Th2细胞比例失衡是必要的     

Th1/Th2相关细胞因子基因检测方法的建立①

目的建立检测Th1/Th2相关细胞因子的方法。方法设计6对用于IL-2、IL-4、IL-10、IL-13、IFNγ和β-actin 基因扩增的引物，建立可用于Th1/Th2相关细胞因子检测的RT-PCR技术，同时用切口平移法制备6种细胞因子的cDNA探针，建立RNA斑点杂交技术。结果用RT-PCR和RNA斑点杂交技术检测20种肿瘤细胞株，发现11/20为Th2型细胞因子表达，8/20为Th0型，1/20未检测到细胞因子。结论RT-PCR技术和RNA斑点杂交技术是检测Th1/Th2相关细胞因子的有效方法。     

结核患者外周血单个核细胞培养液及外周血骨桥蛋白水平检测及其临床意义

国内外许多研究表明结核感染的发生与机体细胞免疫功能失衡有关,体内细胞因子及Th1/Th2应答平衡对结核病的进展、预后发挥重要影响作用.近年来国外研究发现一种与骨代谢密切相关的分泌型细胞外基质磷蛋白Ⅰ,又称骨桥蛋白Osteopontin,OPN)与结核病的发病有一定的关系[1].我们对44例结核患者外周血骨桥蛋白、IL-l8及IL-4水平进行检测,并与20例健康者进行对照,同时检测外周血单个核细胞经卡介苗刺激后培养上清液中OPN、IL-18、IL-4水平变化,以了解骨桥蛋白在结核发病中的作用.     

类风湿性关节炎患者关节中Th1／Th2型细胞因子的模式及？…

目的 分析类风湿关节炎（ＲＡ）患者滑膜液及外周血中Ｔｈ１／Ｔｈ２型细胞因子网络的偏移及其在疾病过程中的意义。方法 用酶联免疫斑点法（ｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｐｒｏｔ ａｓｓａｙ,ＥＬＩＳＰＯＴ）,检测ＲＡ患者滑膜液单细胞（ＳＦＭＣ）和外周血单个核细胞（吕的Ｔｈ１、Ｔｈ２细胞,并分析Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞的比值血沉（ＥＳＲ）和Ｃ－反应蛋白（ＣＲＰ）的相关性。结果 与ＰＢＭＣ相比较,ＲＡ     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞中IL—18表达水平

目的探讨白细胞介素 18(IL- 18)在乙型肝炎病毒感染中的作用。方法应用流式细胞免疫学方法 ,对 30例慢性乙型肝炎活动期、缓解期 ,15例 HBS Ag阳性无症状携带者 ,10例正常对照外周血单个核细胞 (PBMC) IL- 18的表达进行检测。结果无症状携带者表达最低 ,慢性乙型肝炎缓解期低于正常对照 (P<0 .0 1) ,活动期与正常对照无显著差异 (P=0 .2 5 )。活动期 IL- 18的表达与肝组织炎症活动度有关 (P<0 .0 1) ,与血清 AL T水平呈正相关 (r=0 .6 3,P<0 .0 1)。结论 IL- 18与慢性乙型肝炎病情的活动相关 ,与肝组织炎症程度相关     

鼻咽癌患者外周血Th1细胞的变化及其与病程的关系

利用细胞因子诱生及ＥＬＩＳＡ等技术，研究了３８例不同分期的鼻咽癌（ＮＰＣ）患者、２３例正常人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）分泌的细胞因子模式，较系统地研究了ＣＤ４＾＋Ｔ淋巴细胞亚群Ｔｈ１和Ｔｈ２所分泌的代表性的细胞因子类型ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ，ＩＬ－４，ＩＬ－６，ＩＬ－１０等的变化，同时检测了ＮＰＣ患者血清中ＩＬ－２和ＩＬ－４水平。发现ＮＰＣ患者ＰＢＭＣ体外分泌ＩＬ－２的水平下降，ＩＬ－４的水平增高     

早孕妇女外周血Th1／Th2细胞亚群的测定

目前 ,大量研究表明 :Th1/ Th2细胞亚群与自身免疫病、AIDS、肿瘤及妊娠等许多病理和生理过程有关。我们以往的工作曾证明人绒毛膜促性腺激素 (human chorionic go-nadotropin,h CG)在一定剂量范围内可抑制 Th1、Th2细胞分泌各自独特的细胞因子 [1 ] 。鉴于妊娠期间 ,尤其是早期妊娠期间 ,孕妇体内产生大量的 h CG,同时结合最近 L in[2 ] 等报道 ,孕妇外周血 T细胞可表达 h CG受体的研究 ,本文试图对早孕妇女外周血中的 Th1/ Th2细胞亚群进行分析 ,旨在从一个崭新的角度阐明维持早孕有关的部分机理 ,并为理解某些临床现象提供理论基…     

三种类型肺癌患者外周血Th1/Th2相关细胞因子的临床分析

目的：了解不同病理类型肺癌患者辅助性T细胞亚群（Th1/Th2）的反应状态,探讨肺癌发生发展的免疫机制。方法：收集三种不同病理类型肺癌患者47例（鳞癌23例,腺癌15例,小细胞肺癌9例）、健康志愿者31例的血清,分成肺癌组、正常对照组,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组外周血中Th1型细胞因子、白细胞介素2（IL-2）、γ-干扰素（IFN-γ）和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的浓度。结果：三种不同病理类型肺癌患者外周血中IL-2、IFN-γ浓度均显著低于正常人组,IL-4、IL-10浓度显著高于正常人组（P〈0.05）。结论：腺癌、鳞癌、小细胞非分化癌三种不同病理类型的肺癌患者外周血中的免疫细胞均呈现Th2型免疫反应优势状态,呈现Th1/Th2的漂移状态。     

不明原因习惯性流产患者Th1/Th2型细胞因子的检测

目的 :了解不明原因习惯性流产 (UHA)患者对滋养细胞抗原刺激产生Th1、Th2型细胞因子的水平 ,探讨其在UHA发病中的作用。方法 :选取 5 4例UHA患者 ,35例为未妊娠者 ,为UHA未孕组 ,19例为有UHA病史 ,现在确定妊娠并难免流产者 ,为UHA难免流产组。分别选取 15例正常未孕妇女及正常妊娠者作为对照组。应用酶联免疫吸附法检测未孕各组经滋养细胞抗原刺激的外周血单个核细胞 (PBMC)及妊娠各组PBMC与蜕膜单个核细胞 (DMC)培养上清液中IL 2、IFN γ、IL 4、IL 10的水平。结果 :①在最佳诱导时间下 ,UHA未孕组PBMC产生IL 2、IFN γ的水平明显高于正常未孕组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平明显低于正常未孕组 (P均 <0 0 5 )。②UHA难免流产组PBMC及DMC产生的IL 2、IFN γ水平均明显高于正常妊娠组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平则明显低于正常妊娠组 ,差异均有显著性 (P均 <0 0 5 )。两组PBMC产生的各细胞因子水平均低于同组DMC ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :UHA患者对滋养细胞抗原产生以Th1型反应为主的免疫应答 ,产生大量Th1型细胞因子 ,导致妊娠丢失。     

红细胞促进外周血单个核细胞对PHA增殖反应的实验观察

<正>本文就红细胞对外周血单个核细胞(PBMC)对植物血凝素(PHA)的增殖促进作用进行实验研究。 1 材料和方法 1.1 PBMC及健康人和肿瘤病人红细胞 新鲜无菌正常人肝素抗凝血,用淋巴细胞分离液(上海试剂二厂产品,批号931022)分离淋巴细胞。献血员及临床确诊肿瘤病人的新鲜无菌肝素抗凝血,以淋巴细胞分离液分离后,取底层红细胞,以无菌生理盐水洗涤3次,用生理盐水配成适当浓度。     

结核菌素纯蛋白衍生物对哮喘儿童外周血单个核细胞IL-12、IFN-γ/IL-4表达的影响

哮喘涉及的免疫机制复杂,主要表现为Th1/Th2细胞功能失衡,即Th1细胞功能下降和Th2细胞功能亢进。儿童结核菌素反应阳性提示哮喘和变应性发生率降低;随后的研究认为卡介苗及其产物有Th1类免疫调节作用。本文通过观察结核菌素纯蛋白衍化物（PPD）对哮喘患儿外周血单个核细胞（PBMC）产生Th1类细胞因子IL-12和IFN-γ、Th2类细胞因子IL-4的影响,并与植物血凝素（PHA-m）刺激的结果比较,探讨PPD在哮喘发病中的作用及价值。     

在单个细胞水平上分析抗原特异性Th1/Th2细胞因子产生的关联性

目的　在单个细胞水平上 ,观察抗原特异性Th1和Th2细胞因子产生的关联性 ,为进一步阐明CD4 T细胞的分化 ,细胞因子产生的相互关系及其特征提供理论依据。方法　从OVA TCR转基因小鼠的脾和淋巴结中分离CD4 T细胞 ,在体外在抗原提呈细胞存在下 ,用卵白蛋白 (OVA)抗原多肽刺激 3d后 ,再以同样的培养条件刺激 5～ 6h ,固定细胞 ,然后进行细胞表面和细胞内细胞因子染色 ,最后利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析Th1和Th2细胞因子产生的关联性。结果　抗原特异性CD4 T细胞经抗原再一次刺激后 ,分泌Th1(IFN γ和IL 2 )和Th2 (IL 4、IL 5和IL 10 )细胞因子。IL 12促进IFN γ的表达 ,控制Th2细胞的分化。此外 ,大多数抗原特异性CD4 T细胞只产生 1种细胞因子 ,1个细胞同时产生 2种细胞因子极少见。结论　在单个细胞水平上的研究结果表明 ,经抗原短暂刺激后 (3d) ,不同的CD4 T细胞亚群只产生 1种Th1和 或Th2细胞因子 ,同时产生两种以上者占有很低的比率     

喘可治注射液对人外周血单个核细胞Th1/Th2细胞因子谱的影响

目的：通过研究喘可治注射液对人外周血单个核细胞（PBMCs）Th1／Th2细胞因子谱的影响，探讨喘可治注射液的免疫调节作用机制。方法：以流式微球分析（CBA）法检测不同处理情况下，人外周血单个核细胞分泌Th1（IFN-γTNF-α、IL-2）和Th2（IL4、IL-6、IL-10）细胞因子水平。结果：健康人PBMCs体外培养12小时后，上清中细胞因子主要为TNF-α和IL-6，喘可治使Th1和Th2细胞因子全面升高；喘可治对PDB加离子霉素诱导的PBMCs分泌Th1和Th2细胞因子具有抑制作用，并能抑制流感病人异常升高的INF-γ、TNF-α、IL-6和IL-10分泌。结论：喘可治注射液上调健康人PBMCs分泌TH1和Th2细胞因子，对异常活化的PBMCs分泌的Th1和Th2细胞因子则具有下调作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中急性期蛋白反应因子的表达

目的　探讨系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血单个核细胞 (PBMC)中急性期蛋白反应因子 (APRF)的活性水平 ,以及IL 6和IL 10对APRF表达的影响。方法　采用凝胶阻滞电泳 (EMSA)的方法检测 4 0例SLE患者及 2 0例正常对照组PBMC中DNA结合蛋白APRF的表达水平。结果　所有活动期SLE患者均出现APRF电泳条带 ,17例非活动期SLE患者中有 10例出现APRF条带 ,而正常人对照组无 1例出现。 7例未出现APRF电泳条带的非活动期SLE患者PBMC加IL 10处理后均出现不同程度的APRF表达 ,而加IL 6处理时仍未出现APRF电泳条带。结论　SLE患者存在APRF的异常表达。在SLE中 ,IL 10信号转导途径中的某些调控机制 (如蛋白激酶 )可能发生改变 ,从而使得核内的APRF激活转录 ,提示IL 10很可能是通过APRF在SLE的发病机制中起作用 ,相反IL 6在SLE发病的作用机制很可能与APRF无关。     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞凋亡的检测及意义

目的研究激活诱导细胞死亡 (AICD)现象在乙型肝炎慢性化和重型化机制中的意义。方法分离 2 0例慢性 /慢性重型乙型肝炎病人与 10例健康献血员外周血单个核细胞 (PBMC) ,在 PHA的刺激下培养 72 h后收集细胞 ,经流式细胞仪检测凋亡。结果 PBMC凋亡率乙型肝炎组明显高于正常对照组 [(2 5 .48± 14.0 7) % vs(11.45± 5 .2 7) % ,P<0 .0 1];慢性乙型肝炎组 [(30 .5 7± 13.43) % ]明显高于正常对照组 [(11.45± 5 .2 7) % ,P<0 .0 1]和慢性重型乙型肝炎组 [(13.5 9± 6 .44 ) % ,P<0 .0 1];PBMC凋亡率乙型肝炎 HBe Ag(+ )组明显高于正常对照组 [(2 9.5 0± 12 .5 4) % vs(11.45± 5 .2 7) % ,P<0 .0 1]。结论 AICD可能是形成 HBV慢性感染免疫耐受的一个重要机制。     

自身免疫性溶血性贫血患者外周血Th1／Th2、Th3／Tr1细胞的检测及意义

目的探讨自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血Th1／Th2、Th3／Tr1细胞状态,分析它们在AIHA发病机制中的作用。方法收集AIHA患者及健康者外周抗凝静脉血,分离纯化淋巴细胞。运用FITC-CD3单抗,Cy5-CD4单抗,PE—CRTH2单抗,以CD3／CD4设门作三色流式细胞术检测Th1／Th2细胞,ELISA法检测血清中Th3细胞相关的细胞因子TGF-β1的含量和Tr1细胞的相关因子IL-10的含量。结果与正常对照相比．AIHA患者外周血CD3^＋CD4^＋CRTH2-T细胞（Th1）百分率、CD3^＋CD4^＋CRTH2^＋T细胞（Th2）百分率均下降（P〈0．05）,而CD4^＋CRTH2^-T／CD4^＋CRTH2^＋T比例（Th1／Th2）均明显升高（P〈0．01）,Th3／Tr1细胞分泌的相关细胞因子TGF-β1和IL-10的含量均降低（P〈0．05）。结论AIHA患者外周血存在细胞免疫功能失调,T细胞亚群极化状态发生改变,呈Th1型细胞优势,Th3／Tr1细胞因子含量下降,可能与AIHA的免疫学发病机制有关。     

肺癌患者Th1/Th2状态及川芎嗪的调节作用

本研究采用RT PCR方法 ,以IFN γ和IL 2代表Th1型细胞因子 ,IL 4、IL 6、IL 10代表Th2型细胞因子 ,分别检测 3种肺癌细胞株 (鳞、腺、小细胞肺癌 )以及荷瘤机体外周血单个核细胞 (PBMC )Th1/Th2状态 ,并观察中药川芎嗪 (Tetram ethlpyrazine ,TTMP )的作用。结果显示 3种肺癌细胞株IFN γ和IL 2均无表达 ,而IL 4、IL 6、IL 10均表达 ;经川芎嗪培育后 ,3种肺癌细胞株均出现IFN γ的表达 ,而IL 4、IL 6的表达被抑制 ,小细胞肺癌株同时表达IL 2。肺癌患者PBMC中IL 4、IL 6和IL 10表达阳性率明显高于正常人 ,而IL 2无 1例表达 (0 / 2 3) ,IFN γ仅 1例表达 (1/ 2 3) ;与川芎嗪培养后 (两种浓度 ) ,肺癌患者IL 2 ,IFN γ的表达率明显提高 ;Th2型因子表达的优势状态较未加药组出现明显逆转。表明川芎嗪可促进肺癌细胞株和肺癌患者PBMC的Th2优势状态向Th1方向逆转     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞IL-17表达的初步观察

目前ＩＬ 17的研究已发现 ,其在一些自身免疫性疾病如移植肾排斥反应、类风湿性关节炎、多发性硬化、支气管哮喘等存在表达、分泌的异常 ,但在系统性红斑狼疮 (ＳＬＥ)患者中 ,其表达、分泌是否存在异常 ,目前国内、外尚未见研究报告〔1〕。本研究通过测定ＳＬＥ患者血清、无刺激或加不同刺激培养外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)上清液ＩＬ 17蛋白水平和其ＰＢＭＣ内ＩＬ 17ｍＲＮＡ水平的表达量 ,以了解ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ表达、分泌ＩＬ 17有无异常及其与ＳＬＥ疾病活动性的关系。材料与方法病例选择 :30例患者 ,全部符合美国风湿病协会1982…     

肾怡对狼疮小鼠免疫器官内Th1/Th2细胞比例的调节作用

目的：探讨复方中药肾怡对MRL/lpr小鼠免疫器官内Th1/Th2细胞比例的调节作用。方法：将MRL/lpr狼疮小鼠随机分成对照组和中药治疗组，从12周观察到28周后于实验终点处死小鼠。通过流式细胞术分别检测胸腺和脾脏中CD4^ CD30^-(Th1)、CD4^ CD30^ (Th2)淋巴细胞所占百分比，进一步对脾细胞进行CD^ T淋巴细胞分选，并于体外利用PHA—P进行刺激后，通过RT—PCR方法检测IL-4(Th2细胞因子)和IFN—γ(Th1细胞因子)的表达丰度，比较二者的比值在对照组和中药治疗组之间的差别。结果：胸腺中几乎检测不到CD4^ CD30^ T淋巴细胞；脾脏中虽可检测到CD4^ CD30^ T淋巴细胞，但在未加入PHA-P的条件下，CD4^ CD30^ T淋巴细胞在对照组和中药治疗组中所占的比例没有显著差异；经PHAP刺激后对照组和治疗组脾细胞中CD4^ CD30^ T淋巴细胞所占百分比均明显增加，但治疗组中CD4^ CD30^ T淋巴细胞所占百分比的增加程度明显低于对照组；将脾细胞中CD4^ T淋巴细胞分选出来后进行RT-PCR检测，结果显示中药治疗组CD^ T淋巴细胞所表达IL-4／IFN—γ(Th2／Th1)比值明显低于对照组。结论：复方中药肾怡能够纠正MRL/lpr狼疮小鼠脾脏中CD^ T淋巴细胞在PHA-P刺激的条件下朝向Th2过度分化的倾向性。