细胞因子对瘢痕成纤维细胞影响的研究进展

瘢痕组织是创伤修复的必然产物，由于某些异常因素的调控，导致成纤维细胞过度增殖，同时过度分泌胶原形成瘢痕。最新研究表明，细胞因子介导的免疫应答对瘢痕形成起到了调控作用，这标志着创伤修复的研究已进入了一个全新的阶段。     

TNF-α对瘢痕成纤维细胞影响的实验研究

[摘要] 目的 探讨细胞因子TNF-α对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响、病理改变及其对瘢痕的作用机制,为临床预防和治疗瘢痕提供分子水平的理论依据。 方法 对瘢痕及正常皮肤成纤维细胞进行体外培养,采用倒置显微镜、MTT测定、流式细胞术等方法进行观察、分析,以研究细胞因子TNF-α对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响。 结果 体外培养瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞倒置显微镜、流式细胞术以及MTT测定结果显示,与相应的对照组相比,加入细胞因子TNF-α后,显示对细胞起明显的促增殖作用。 结论 细胞因子TNF-α对成纤维细胞的生长趋势与增殖活性有明显的促进作用,刺激了胶原纤维的合成、增生和沉积。但本实验中高浓度时对成纤维细胞的抑制作用表现得并不明显,而促进作用更为明显。     

rhIFN-α对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构影响的实验研究

目的 研究细胞因子rhIFN-α对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响，以探讨细胞因子对增生性瘢痕的作用机理．方法 对增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养，采用透射电子显微镜观察、分析，以研究细胞因子rhIFN-α对增生性瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响以及病理改变．结果 加入rhIFN-α后细胞表现为生长趋势及增殖活性被明显抑制，部分细胞见空泡样及残体样结构，线粒体肿胀，嵴溶解，并出现细胞凋亡现象、结论 细胞因子rhIFN-α对成纤维细胞的生长趋势及增殖活性有明显抑制作用，促进成纤维细胞凋亡,提示rhIFN-α是成纤维细胞负性调节因子，在增生性瘢痕的治疗中有一定的应用价值.     

神经生长因子对成纤维细胞游离细胞核的促转录作用

据Ｇｒｅｎｆｅｌｌ法提取和纯化了小鼠正常成纤维细胞及其恶性转化细胞的细胞核。通过电镜观察和标志酶的测定，表明此法纯化的细胞核不存在胞膜和细胞浆成分的污染。然后我们用ＮＧＦ刺激纯化的细胞核，发现ＮＧＦ能提高细胞核的体外转录活性。正常细胞比转化细胞更敏感，并且随ＮＧＦ的浓度的升高，作用更为明显。     

瘢痕成纤维细胞收缩功能研究

瘢痕增生并继发挛缩畸形的发生、发展机制至今尚不清楚,临床上也无确切可靠的治疗方法。本实验利用胶原胶结缔组织收缩模型,观察体外培养的瘢痕及正常皮肤成纤维细胞促胶原胶收缩情况,了解瘢痕成纤维细胞收缩能力,探讨瘢痕挛缩的发生、发展机制。１　材料和方法１．１　胶原制备［１］　用０．１％醋酸溶液提取鼠尾胶原粗制液,加氯化钠至５％终质量浓度,胶原絮状沉淀,离心收集,透析去除盐成分后,４℃储存。１．２　成纤维细胞培养　将手术切除的增生性瘢痕（８例）及正常皮肤组织（６例）剪成细小碎块后进行组织块培养,培养液为１…     

TNF-α对瘢痕成纤维细胞影响的研究

目的探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响、病理改变及其对瘢痕的作用机制,为临床预防和治疗瘢痕提供分子水平的理论依据。方法对瘢痕及正常皮肤成纤维细胞进行体外培养,采用倒置显微镜、MTT测定、流式细胞术等方法进行观察、分析,以研究细胞因子TNF-α对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响。结果体外培养瘢痕成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞倒置显微镜、流式细胞术以及MTT测定结果显示,与相应的对照组相比,加入细胞因子TNF-α后,显示对细胞起明显的促增殖作用。结论细胞因子TNF-α对成纤维细胞的生长趋势与增殖活性有明显的促进作用,刺激了胶原纤维的合成、增生和沉积。但本实验中高浓度时对成纤维细胞的抑制作用表现得并不明显,而促进作用更为明显。     

Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞的作用研究

目的研究Echistatin对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响。方法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,设Echistatin处理组和对照组,MTT法、流式技术及RT-PCR法检测人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结果Echistatin可明显抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖,促进凋亡,降低Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结论Echistatin可作为防治增生性瘢痕的筛选药物。     

rhIFN-a对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构影响的实验研究

目的研究细胞因子rhIFN-a对增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响,以探讨细胞因子对增生性瘢痕的作用机理.方法对增生性瘢痕成纤维细胞进行体外培养,采用透射电子显微镜观察、分析,以研究细胞因子rhIFN-a对增生性瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响以及病理改变.结果加入rhIFN-a后细胞表现为生长趋势及增殖活性被明显抑制,部分细胞见空泡样及残体样结构,线粒体肿胀,嵴溶解,并出现细胞凋亡现象.结论细胞因子rhIFN-a对成纤维细胞的生长趋势及增殖活性有明显抑制作用,促进成纤维细胞凋亡.提示rhIFN-a是成纤维细胞负性调节因子,在增生性瘢痕的治疗中有一定的应用价值.     

异常瘢痕成纤维细胞凋亡研究

目的：明确异常瘢痕成纤维细胞的凋亡特性及激素的机理。方法：以瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤（各６例）为材料,在体外对低血清和氟美松对不同成纤维细胞的细胞凋亡及怀凋亡有关的蛋白Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２的表达的影响进行了研究;同时,对６例增生性瘢痕局部注射康宁克通后３ｄ和７ｄ的细胞凋亡和相关基因ｃ－ｍｙｃ的表达进行了在体研究。结果：在低血清中发生细胞凋亡正常皮肤成纤维细胞多于增生性瘢痕,增生性瘢痕多于瘢痕疙     

丹参对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨丹参对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响，揭示其对瘢痕的作用及机制，方法对瘢痕成纤维细胞进行体外培养，采用倒置显微镜、MTT测定、流式细胞术等方法进行观察、分析，以研究丹参对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响．结果体外培养瘢痕成纤维细胞倒置显微镜、MTT测定、流式细胞术等方法观察和测定结果显示：与相应对照组相比，加入丹参组细胞生长及增殖均受到明显抑制，丹参各浓度组间细胞受抑制程度存在显著性差异（P〈0．05）．结论丹参对瘢痕成纤维细胞的生长、增殖有抑制作用，不同浓度其作用效果有差别．     

抗氧化剂对人皮肤瘢痕成纤维细胞及其中的吡啶连接链形成的影响

目的：应用人皮肤瘢痕 组织的成纤维细胞培养物测试抗氧化剂对吡啶连接链形成的抑制作用,从而筛选出有效而且不损害细胞的抗氧化剂,以应用于增生瘢痕的临床治疗。方法：用烧伤病人皮肤瘢痕组织培养成纤维细胞,在第8代传代培养物中加入自由基生成系统及不同的抗氧化剂：超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶、谷胱甘肽、去铁铵,而对照组不加任何作用物。在37℃作用4h后,显微镜下观察细胞 的形态变化并测定细胞其上清液的吡啶连接链含量。结果：从各实验组成纤维细胞中测出的吡啶连接的含量均低于对照组,尤其以过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和去铁按为显著（P＜0．05）,而其中只有在加入过氧化氢酶的细胞培养物能保持正常的细胞形态,其余的抗氧化剂则出现明显的细胞损害,表现在细胞破坏、细胞溶解。结论：过氧化氢酶等5种抗氧化剂都能有效地抑制吡啶连接链的形成,在临床应用上首选过氧化氢酶,因其既能有效地清除自由其从而抑制吡啶连接链的形成,而且不损害细胞形态结构。     

几丁糖作用后不同来源成纤维细胞分泌功能的变化

目的 :探讨几丁糖对异常瘢痕成纤维细胞生物学活性的作用。　方法 :以瘢痕疙瘩及增生性瘢痕成纤维细胞为研究对象 ,正常皮肤成纤维细胞为对照 ,用组织块法进行不同标本成纤维细胞体外培养。分别用 3 H 脯氨酸掺入法检测几丁糖对不同来源成纤维细胞合成及分泌胶原功能的影响 ,定量酶联检测试剂盒测定转化生长因子 β1(TGF β1 )、成纤维细胞生长因子 AB(FGF AB)、白细胞介素 8(IL 8)等。　结果 :几丁糖对不同来源成纤维细胞分泌胶原、TGF β1 、FGF AB等的功能均呈剂量依赖性抑制 ,对IL 8则增加 ,且对各组的影响无显著差异 (P >0 .0 5 )。　结论 :几丁糖可以抑制瘢痕疙瘩和增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成及分泌功能 ,有望在异常瘢痕的防治中发挥重要作用     

神经生长因子治疗脑缺血性疾病的研究

神经生长因子及其受体(TrKA受体、p75NTR受体)在神经系统中起着重要的作用。在脑缺血性疾病中,神经生长因子通过促进干细胞分化为神经、细胞抗凋亡维持神经细胞存活和增殖、促进损伤区域血管的生成等方面治疗脑损伤。已经成为神经系统疾病的研究热点。     

bFGF、NGF对高温影响神经细胞存活的保护作用

目的 :研究高温对原代培养神经细胞存活的影响以及bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活的保护作用。方法 :应用神经细胞原代培养、MTT、NSE ELISA测定技术。结果 :①高温处理后神经细胞活性明显降低 ;②外源性bFGF、NGF均不同程度地增加了神经细胞活性 ,其抗体均不同程度地使神经细胞活性降低 ,但二者联合应用神经细胞活性增加不明显 ;③NSE ELISA检测结果与MTT检测结果一致 ,但特异性和敏感性更高。结论 :外源性bFGF和NGF对高温处理后神经细胞存活具有保护作用。     

神经生长因子在胶质瘤中的表达与意义

目的：探讨神经生长因子（nerve growth factor,NGF）在胶质瘤中的表达及其临床意义。方法：用免疫组化Envision法检测胶质瘤中NGF的表达,以10例瘤周正常脑组织为对照。结果：①NGF在各级别胶质瘤中均呈阳性表达,在正常脑组织中低表达,两组间的差异有统计学意义（x^2=14．729,P〈0．001）;②NGF在各级别胶质瘤中的表达有统计学意义（F=20．49,P〈0．001）,且其表达强度随病理级别的增加而增加（r=0．6977,P〈0．0001）;③NGF的表达与患者年龄、性别及肿瘤大小无关,脑室肿瘤表达较其它部位低（x^2=8．336,P=0．015〈0．05）。结论：NGF在胶质瘤细胞中的含量变化与胶质瘤的发生发展密切相关,可能成为判断胶质瘤生物学行为、预测病人预后的重要指标,进一步深入研究其调节机制可能为胶质瘤的治疗开辟新的有用的方法。     

神经生长因子与糖尿病神经病变的研究进展

糖尿病神经病变是糖尿病常见并发症之一。神经生长因子(NGF)在糖尿病神经病变的发生和发展中发挥重要作用。NGF是一种信号分子,其生物活性受酪氨酸激酶受体A和p75神经营养因子受体的调节。NGF能调节中枢神经和外周神经的生存和生长,并且NGF能选择性地营养小神经纤维感觉神经元和交感神经元。在动物模型和临床研究中,均有证据表明NGF与糖尿病神经病变关系密切。研究NGF与糖尿病神经病变的关系将有助于为糖尿病神经病变的防治提供新的研究思路。     

脂质体介导的PRX-2转染对人成纤维细胞增殖特性的影响

目的 探讨PRX-2转染对人成纤维细胞增殖特性的影响.方法 取烧伤整形外科手术中所取的全厚皮片的剩余皮片,男5例,女3例.年龄6 ～41岁,平均24岁,均取自腹部.细胞培养采用组织块法,实验用第4代细胞.皮肤组织进行成纤维细胞的培养、传代,利用脂质体介导的基因转染技术,将PRX-2基因转染至人成纤维细胞中,形成稳定表达,利用MTT法、流式细胞仪等方法,观察转染前后人皮肤成纤维细胞增殖特性的变化情况.结果 PRX-2转染后成纤维细胞形态与正常成纤维细胞类似,增殖能力明显增强,G0-G1期细胞比例减少,而S期和G2-M期细胞比例增多.PRX-2基因成功转染到了人成纤维细胞中;细胞增殖指数增高.结论 脂质体介导的同源异形框基因PRX-2转染可以增强人成纤维细胞的增殖能力,PRX-2和人皮肤创面愈合有密切的关系.     

脂多糖对正常人皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA表达的调控及意义

目的研究细菌脂多糖（LPS）对增生性瘢痕患者正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA表达的影响,以了解LPS在增生性瘢痕形成中的生物学作用。方法体外培养增生性瘢痕患者瘢痕组织及正常皮肤成纤维细胞,应用不同浓度（0．005—1．0μg／m1）的大肠杆菌LPS（E．coli055：B5）对正常皮肤成纤维细胞进行刺激,并对刺激后细胞传代至表型稳定（第8代）,采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测LPS对正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA的表达的调控作用,观察剂量一效应关系。分别以同一个体相同代数的瘢痕组织成纤维细胞和未经LPS刺激的正常皮肤成纤维细胞做阳性对照和阴性对照。结果LPS刺激浓度在0．005．0．5μg／ml范围内促进正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,抑制胶原酶mRNA表达（均P〈0．01）,均在0．1μg／ml浓度点作用达高峰;当LPS刺激浓度到达1．0μg／ml时,抑制正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,促进胶原酶mRNA表达,且均显著低于阴性对照组（均P〈0．01）。当LPS刺激浓度为0．1μg／ml时,正常皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原酶mRNA表达量与阳性对照组近似（均P〉0．05）。结论在一定浓度范围内LPS促进成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达、抑制胶原酶mRNA表达。LPS可能是增生性瘢痕形成的原始诱导因素之一。     

NGF促再生神经功能恢复的实验研究

目的　运用电生理、类霍乱毒 -辣根过氧化物酶 (CB-HRP)逆行追踪的方法 ,研究神经生长因子 (nerve growth factorNGF)对再生神经功能恢复的影响。方法　 Wistar大白鼠 2 0只 ,切断两侧位于股骨中段的坐骨神经 ,硅胶管桥接形成神经再生小室 ,断端相距 6 mm。右侧再生小室内注入 NGF,左侧注入等量的生理盐水 ,分笼饲养 3个月。结果　NGF侧电生理数值 :L AT:(2 .0 8±0 .42 ) ms,CV:(35 .9± 8.6 7) m/s,AMP:(6 .18± 2 .90 ) mv± 0 .48) mv,各项指标两组数值标本均数的 t检验 P<0 .0 1。CB-HRP逆行追踪 ,被 CB-HRP标记的运动细胞数 NFG侧 :(4.2± 0 .974) ,NS侧 :(2 .3± 0 .483) ,两组数值样本均数的 t检验 P<0 .0 1。结论　通过电生理及 CB-HRP逆行追踪证实 ,NGF有促进再生神经功能恢复的作用     

神经生长因子对骨折愈合的影响

骨折的愈合是一个十分复杂的过程,在愈合过程中,需要多种生长因子参与协调作用。在正常骨组织和骨折、骨痂中有神经生长因子(NGF)及其受体的表达,且NGF对中枢和外周神经系统的生物效应是维持、促进交感神经和来自神经嵴的感觉神经细胞的存活、分化、成熟,是参与损伤神经再生和功能修复的重要因素。并可诱导神经纤维进入骨组织,促进骨折部位神经再生和修复骨组织,从而促进骨愈合。