痰嗜酸粒细胞在支气管哮喘气道炎症中作用的研究进展

支气管哮喘为常见特异性疾病之一,多伴有气喘、气短、胸闷、咳嗽等症状,部分患者会合并出现慢性阻塞性肺疾病,且两种疾病相互转换,随着病情加重及病程延长,患者会出现不可逆气流受限及气道重塑情况,因此需及早对疾病进行诊断,避免因漏诊及误诊错失最佳治疗时机。痰嗜酸粒细胞（EOS）为支气管哮喘的炎症效应细胞,其变化程度与患者气道炎症、气道重构密切相关,因此在支气管哮喘患者诊断、治疗、评估病情进展中有重要作用,但目前就其实际应用价值研究较少,为明确其在支气管哮喘气道炎症进展中的价值,本文就痰嗜酸粒细胞在支气管哮喘气道炎症中作用的研究进展进行论述,旨在为同行业工作者提供参考。     

阿托伐他汀对内皮细胞微粒诱导人脐静脉内皮细胞VCAM-1和ICAM-1表达的影响

目的:探讨阿托伐他汀对内皮细胞微粒(EMPs)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达血管细胞粘附分子(VCAM)-1和细胞间粘附分子(ICAM)-1的影响。方法:取生长良好的第4,5代人脐静脉内皮细胞,将细胞分为3大组:对照组、EMPs组、EMPs+阿托伐他汀组。对照组加入培养基,EMPs组以不同浓度的EMPs(0/mL,1×102/mL,1×103/mL,1×104/mL,1×105/mL)与HUVECs共同孵育24 h,EMPs+阿托伐他汀组以不同浓度的阿托伐他汀(0.05,0.1,1.0,10μmol.L-1)与HUVECs作用1 h后,加入105/mL EMPs共同孵育24 h。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹方法检测VCAM-1和ICAM-1 mRNA和蛋白的表达。结果:HUVECs受EMPs刺激后,VCAM-1和ICAM-1 mRNA及蛋白表达呈浓度依赖性增加,阿托伐他汀可不同程度上抑制EMPs的作用。结论:阿托伐他汀抗动脉粥样硬化作用可能部分与抑制EMPs诱导的内皮细胞VCAM-1和ICAM-1的表达有关。     

氨茶碱对哮喘豚鼠嗜酸细胞IL-3、IL-5及GM-CSF受体表达的影响

目的　观察氨茶碱(AM)对嗜酸细胞(Eos)上白介素 5受体α(IL 5Rα)、白介素 3受体α(IL 3Rα)、粒 巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM CSFRα)及共同β链(βcR)mRNA表达的影响,探讨茶碱促进哮喘Eos凋亡的机制。方法　 18只健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组、茶碱组,每组 6只,以卵蛋白致敏激发制作豚鼠哮喘模型,密度梯度分离法分离支气管灌洗液(BALF)中的低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos),以末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,原位杂交检测各受体mRNA表达,RT PCR法检测EosIL 5Rα、IL 3Rα相对含量。结果　哮喘组HEos及NEos凋亡 (4±2, 3±2)明显低于正常组(8±2, 7±2,P<0 01),而哮喘组细胞数 (75±13, 51±11 )明显高于正常组(5±2, 10±3,P<0 01)。用AM 24h后不同密度Eos数量 ( 36±14, 33±8 )均明显低于哮喘组 (P<0 01, 0 05),AM组Eos凋亡 ( 15±5, 14±4 )明显高于哮喘组(P<0 01);哮喘组Eos表达IL 5、IL 3及GM CSFα受体mRNA,明显低于正常组 (P<0 01, 0 05 ),AM组中低密度Eos表达各受体mRNA均明显高于哮喘组 (P<0 05 );而哮喘组βcR表达(41±6, 39±7)表达显著高于正常组 (28±5,26±5,P<0 01),AM组βcR表达与哮喘组比较差异无显著性(P>0 05)。HEos表达各受体与NEo     

地塞米松对哮喘豚鼠气道白介素-5、白介素-10mRNA表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的：检测地塞米松对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白介素-5（IL-5）mRNA及IL-10 mRNA表达水平及嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡率。方法：健康雄性Hartley系豚鼠随机分为地塞米松组、哮喘组和正常对照组。采用原位细胞凋亡（TUNEL）、RTPCR技术检测BALF中EOS凋亡、IL-5 mRNA及IL-10 mRNA表达水平。结果：地塞米松组BALF中的EOS较哮喘组明显下降，EOS凋亡明显上升（P〈0．01）；IL-5 mRNA水平较哮喘组明显下降，IL-10 mRNA水平较哮喘组明显升高（P〈0.05）。结论：地塞米松可以通过减少IL-5 mRNA的表达，增加IL-10 mRNA的表达有效抑制哮喘豚鼠气道EOS的上升，增加EOS的凋亡。     

化合物EXP-2528对Ang II诱导大鼠脑微血管内皮细胞表达E-selectin和VCAM-1的影响

本研究利用体外培养大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells，BMEC)模型，探讨了血管紧张素(Ang)II对大鼠脑微血管内皮细胞表达E-selectin和VCAM-1的影响及其机制，并评价了新型AT₁受体拮抗剂化合物EXP-2528对其的影响。采用RT-PCR和Western blotting分别检测大鼠脑微血管内皮细胞E-选择素(E-selectin)和血管细粘黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1)的mRNA及蛋白的表达。结果显示1×10^-7 mol·L^-1 Ang II分别孵育4 h和18 h可显著促进BMEC E-selectin及VCAM-1的mRNA及蛋白的表达，应用氯沙坦和新型选择性AT₁受体拮抗剂化合物EXP-2528选择性阻断AT₁受体对此有明显抑制作用。同时阻断AT₁受体和AT₂受体也可明显抑制Ang II诱导的E-selectin及VCAM-1表达的增加，但是与单独阻断AT₁受体相比无明显差异。而选择性阻断AT₂受体对Ang II诱导的E-selectin及VCAM-1的表达无明显影响。以上实验结果提示，Ang II可通过激动AT₁受体上调BMEC E-selectin和VCAM-1的表达，参与脑血管疾病的发生发展。     

棕榈酸通过抑制IRS-1表达诱导大鼠骨骼肌细胞胰岛素抵抗

摘 要 目的：建立L6细胞胰岛素抵抗模型,筛选出最佳诱导条件,并探讨其作用机制。 方法: 用MTT法确定棕榈酸、胰岛素对L6细胞增殖的影响;用葡萄糖检测试剂盒检测葡萄糖含量,确定不同浓度的棕榈酸、胰岛素对L6细胞葡萄糖消耗的影响;通过Western Blot法检测IRS-1、PI3K、P-AKT、AKT、GLUT4的蛋白表达。结果: 0.4 mmol·L^-1棕榈酸诱导12 h、5×10^-7 mol·L^-1胰岛素诱导24 h以上,对L6细胞生长无影响且出现明显胰岛素抵抗,移除刺激后24 h内能够抑制胰岛素刺激状态下的糖转运;棕榈酸降低了IRS-1、PI3K、P-AKT、GLUT4在L6细胞上的表达。结论:高浓度棕榈酸能够通过抑制IRS-1等靶蛋白表达诱导L6细胞产生胰岛素抵抗。     

速激肽NK-1受体拮抗剂SR-140333对抗原引起致敏大鼠气道高反应性的影响

为观察速激肽ＮＫ１受体拮抗剂ＳＲ１４０３３３对抗原攻击引起的致敏大鼠气道高反应性的影响，测定了致敏大鼠在抗原攻击前后的基础呼吸频率，对ＭＣｈ的反应性及支气管肺泡灌洗液中的白细胞数量。实验结果显示，致敏大鼠吸入ＯＡ后６ｈ基础呼吸频率增加，并显著增加乙酰甲胆碱（ＭＣｈ）的反应性、ＭＣｈ的－ｌｏｇＰＣ３０值和支气管肺泡灌洗液中的白细胞数量。ｉｐ速激肽ＮＫ１受体拮抗剂ＳＲ１４０３３３（０１ｍｇ·ｋｇ－１）或地塞米松（０５ｍｇ·ｋｇ－１），可明显抑制上述反应，小剂量ＳＲ１４０３３３（００１ｍｇ·ｋｇ－１）仅有部分抑制作用。结果提示抗原攻击可引起致敏大鼠气道高反应性和气道炎症，速激肽ＮＫ１受体拮抗剂可抑制这些反应     

速激肽NK-1受体拮抗剂SR-140333对抗原引起致敏大鼠气道高反应性的影响

为观察速激肽NK-1受体拮抗剂SR-140333对抗原攻击引起的致敏大鼠气道高反应性的影响,测定了致敏大鼠在抗原攻击前后的基础呼吸频率,对MCh的反应性及支气管-肺泡灌洗液中的白细胞数量。实验结果显示,致敏大鼠吸入OA后6h基础呼吸频率增加,并显著增加乙酰甲胆碱(MCh)的反应性、MCh的-logPC₃₀值和支气管-肺泡灌洗液中的白细胞数量。ip速激肽NK-1受体拮抗剂SR-140333(0.1mg·kg^-1)或地塞米松(0.5mg·kg^-1),可明显抑制上述反应,小剂量SR-140333(0.01mg·kg^-1)仅有部分抑制作用。结果提示抗原攻击可引起致敏大鼠气道高反应性和气道炎症,速激肽NK-1受体拮抗剂可抑制这些反应。     

酸敏感离子通道-1a在急性肺损伤大鼠肺组织中的表达及作用初探

目的探讨酸敏感离子通道-1a(ASIC1a)在急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺组织中的表达及可能的作用。方法 SPF级♂SD大鼠32只,随机分为正常组、ALI组、阿米洛利组和阳性药物组。对动脉血进行血气分析,观察肺组织病理学,肺组织称重后计算湿干重比,ELISA检测血清中TNF-α的表达,q PCR和Western blot检测肺组织中ASIC1a的表达。结果与正常组相比,模型组肺组织损伤明显;肺组织湿干重比明显升高; TNF-α的表达水平明显升高(P <0. 01)。阿米洛利组及阳性药物组肺组织损伤明显减轻;肺组织湿干重比较模型组明显下降,TNF-α的表达水平明显降低(P <0. 01)。免疫组化、q PCR和Western blot结果显示,与正常组相比,模型组ASIC1a的表达量明显升高(P <0. 01),阿米洛利组与模型组相比,ASIC1a的表达量明显减少(P <0. 01)。结论在脂多糖诱导的ALI大鼠肺组织中ASIC1a的表达增加,其可能参与ALI的发生、发展。     

ICAM-1、VCAM-1在脑缺血损伤炎症机制中的作用及调控

细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在脑缺血损伤炎症过程中起着重要作用。脑缺血后ICAM-1和VCAM-1表达增加;ICAM-1、VCAM-1介导循环中的白细胞与内皮细胞黏附,进而浸润到血管外脑实质,导致缺血后炎症;抑制ICAM-1、VCAM-1表达及作用可减轻脑缺血损伤。     

VCAM-1表达与乳腺癌血管生成及临床病理的关系

目的　研究乳腺癌瘤体中血管细胞粘附分子 (VCAM 1)及外周血清中可溶性血管细胞粘附分子 (sVCAM 1)的表达对乳腺癌血管生长及转移的影响。方法　对 5 2例乳癌瘤体、瘤旁 (2cm)及正常乳腺组织标本 ,2 0例良性乳房纤维瘤标本进行了VCAM 1、CD34免疫组化染色 ,图像分析 ,了解VCAM 1表达、CD34的表达情况 ,并分析VCAM 1的表达与微血管密度 (MVD)的相关性 ,同时用酶联免疫吸附试验对 2 5例正常人 ,30例乳腺癌术前、术后一周外周血进行检测 ,分析瘤体及外周血清中VCAM 1的表达与乳腺癌病理参数的关系。结果　VCAM 1不仅在乳腺癌血管内皮细胞上高表达 ,在乳腺癌细胞膜上也有表达 ,而且VCAM 1的表达强度、表达率与乳腺癌的血管的生成和转移相关。乳腺癌组病人外周血清中sVCAM 1的浓度比正常对照组高 (P <0 0 0 1) ,并且术后乳腺癌病人血清中sVCAM 1的浓度下降 (P <0 0 1)。结论　VCAM 1在乳腺癌的血管生成、癌细胞转移中可能起到重要作用 ,sVCAM 1有望成为乳腺癌的早期诊断及判断复发的指标。     

丹皮酚抑制大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织细胞间黏附分子-1和血管细胞黏附分子-1的表达

目的观察丹皮酚对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,以探讨其脑保护的作用机制。方法线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,大鼠脑缺血2 h再灌注24 h,采用Western blot及RT-PCR法观察大鼠脑组织ICAM-1、VCAM-1的蛋白及mRNA表达。结果丹皮酚明显降低缺血区脑组织ICAM-1、VCAM-1的蛋白及mRNA的表达。结论丹皮酚可能通过降低缺血区脑组织黏附分子表达发挥脑保护作用。     

Effect of hyperlipidemia on endothelial VCAM-1 expression and the protective role of fenofibrate

The effect of hyperlipidemia and inflammation on endothelial functions was studied. The enrolled included control (basic chow), hyperlipidemia and fenofibrate-treated groups (high fat diet). The hyperlipidemia model was set up by four-week atherogenic diet, followed by a 16-week treatment in the fenofibrate-treated group (fenofibrate 40 mg/kg every day) and without treatment in the hyperlipidemia group, respectively. In the 20th week, serum lipid level and NO levels were measured, and the expression of vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) and cell adhesiveness in aortic endothelia observed by computer-aided system. Compared with the control group, hyperlipidemia rats showed lower levels of NO and increases in leukocyte accumulation on the endothelial surface, also stronger and more extensive endothelial expression of VCAM-1. In fenofibrate-treated group, the expression of VCAM-1 and leukocyte accumulation on the endothelial surface was decreased, while serum levels of NO were increased as compared with hyperlipidemia group. Hyperlipidemia can inhibit the NO activity and promote the damage of VACA-1 to aortic endothelia. Fenofibrate can effectively prevent the pathogenesis of atherosclerosis by restoring NO levels and down-regulating the VCAM-1 expression. __________ Translated from Guangdong Medical Journal, 2007, 28(3): 339–341 [译自: 广东医学]     

儿童原发性肾病综合征VCAM-1、hs-CRP水平及与脂代谢的关系

目的　通过检测血管细胞黏附分子1（VCAM-1）及超敏C反应蛋白（hs-CRP）了解儿童原发性肾病综合征（PNS）脂代谢紊乱对血管内皮细胞功能、微炎症状态及凝血功能的影响。方法　选取符合PNS标准的患儿65例为病例组,选取性别、年龄与之匹配的健康体检儿童45例为对照组。分别应用酶联免疫吸附测定（ELISA）法及免疫比浊法测定病例组治疗前后及对照组血清中VCAM-1和hs-CRP的水平,应用特种蛋白分析仪测定2组24 h尿蛋白定量,并检测血浆白蛋白（ALB）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白（Apo）A1、ApoB、脂蛋白a［LP（a）］、纤维蛋白原（Fb）及D二聚体水平。采用Pearson法分析上述指标与VCAM-1、hs-CRP的相关性。结果　病例组治疗前VCAM-1和hs-CRP水平明显高于对照组,治疗后VCAM-1和hs-CRP水平明显低于治疗前;血浆VCAM-1、hs-CRP与尿蛋白定量、血TG、TC、LDL-C、ApoB、LP（a）、Fb、D二聚体水平呈正相关,而与血清ALB、HDL-C呈负相关（P＜0.05）。结论　PNS患儿急性期VCAM-1、hs-CRP水平明显增高,监测血浆VCAM-1和hs-CRP水平可对PNS微炎症状态、内皮细胞损伤、高凝状态及血栓形成进行预测及评估。     

厄贝沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨厄贝沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能机制.方法 Wismr健康大鼠24只,随机分为对照组、模型组、药物组,每组8只.链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,8周后抽血测血糖(BG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、尿索氮(BUN)和肌酐(SCr),计算尿白蛋白分泌率(UAER).用免疫组化检测大鼠肾脏细胞间黏附分子1(ICAM-1),Western blot检测血管细胞黏附分子1(VCAM-1)蛋白表达水平.结果 模型组与药物组的BG、HbAlc、BUN、SCr都高于对照组(P＜0.05).模型组UAER高于对照组.而药物组则低于模型组(P＜0.05).药物组ICAM-l与VCAM-l蛋白表达量低于模型组(P＜0.05).结论 厄贝沙坦对实验性糖尿病大鼠的肾脏有保护作用,可能与抑制ICAM-l与VCAM-l在肾脏的表达有关.     

吡格列酮对高脂饮食兔主动脉血管内皮细胞黏附分子-1表达的影响

目的探讨吡格列酮对高脂饮食下兔主动脉血管内皮细胞黏附分子(VCAM)-1表达的影响。方法设立正常饮食、高脂饮食及高脂饮食加吡格列酮干预3组,通过比较主动脉病理形态学改变、血脂的变化、VCAM-1分子的表达进行研究,采用苏木素-伊红染色用于主动脉病理形态学观察,采用免疫组织化学检测兔主动脉上VCAM-1的表达。结果吡格列酮能减轻高脂饮食所致的内膜增厚和平滑肌增生。吡格列酮还能明显升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL),对总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、甘油三酯(TG)无明显影响。高脂饮食刺激兔主动脉VCAM-1的表达增加,吡格列酮能显著减轻这种作用(0.78±0.16vs0.42±0.11,P<0.01)。结论吡格列酮能减轻高脂饮食兔主动脉VCAM-1的表达,其作用的机制可能与其干扰核转录因子有关。     

Activation of aryl hydrocarbon receptor by benzo[a]pyrene increases interleukin 33 expression and eosinophil infiltration in a mouse model of allergic airway inflammation

We recently demonstrated that benzo[a]pyrene (BaP), the aryl hydrocarbon receptor (AhR) ligand, directly contributes to aggravation of cutaneous allergy in a mouse model of allergic dermatitis. The present study aimed to determine whether BaP-induced AhR activation results in development of airway inflammation. Initially, the potential for a direct relationship between BaP-induced AhR activation and airway inflammation was investigated in vivo, using a mouse model of type 2 helper T cell (Th2) hapten toluene-2,4-diisocyanate (TDI)-induced airway inflammation. Mice were orally administered BaP at 48, 24, and 4 h before the final allergen challenge. Oral administration of BaP showed a significant increase in lung inflammation and eosinophil infiltration. While expression of Th2 cytokines such as interleukin 4 (IL-4) and IL-13 was not affected by exposure to BaP, AhR activation significantly increased IL-33 expression. To confirm the in vivo results, in vitro experiments were performed using the human eosinophilic leukemia cell line (EOL-1), human bronchial epithelial cell line (BEAS-2B), and human lung adenocarcinoma epithelial cell line (A549). Results indicated that pre-treatment with BaP increased expression of IL-8 in house dust mite-activated EOL-1, BEAS-2B, and A549 cells. In addition, IL-33 levels in BEAS-2B cells were significantly increased after BaP exposure. Our findings indicated that BaP-induced AhR activation is involved in the pro-inflammatory response in respiratory allergy, and that this effect may be mediated by increased IL-33 expression and eosinophil infiltration.     

血管细胞黏附分子-1和P-选择素对急性冠脉综合征的预测价值

目的研究血清可溶性血管细胞黏附分子-1、P-选择素水平在急性冠状动脉综合征中的特点，探讨其对急性冠脉综合征的预测价值。方法用酶联免疫吸附法检测21例急性心肌梗死（AMI），23例不稳定型心绞痛，22例稳定型心绞痛（SAP）和20例健康对照者血清sVCAM-1、sP-选择素水平。结果ACS患者血清（UAP）sVCAM-1、sP-选择素水平均高于非ACS患者，AMI患者血清sVCAM-1浓度及sP-选择素水平较UAP患者升高（均P〈0．05）。以x±2s为临界值联合检测ACS的灵敏度为73．4％，特异度为84．2％。结论ACS患者血清VCAM-1、P-选择素水平升高，提示与ACS的发生有关，是动脉粥样硬化斑块不稳定的标志，可以作为ACS的预测指标。