干燥方法对铁皮石斛质量的影响研究

目的:探讨不同干燥方法对铁皮石斛质量的影响,优选铁皮石斛的干燥方法。方法:对经4种干燥方法(自然晒干、烘箱烘干、真空干燥、微波干燥,36 h)及烘箱烘干方法下不同温度(90、120、150、180、210℃,24 h)、90℃下烘箱烘干不同时间(36、48、60、72 h)处理后铁皮石斛中多糖、游离氨基酸和总氨基酸保留率及7种单糖组成的变化进行考察。结果:4种干燥方法中,多糖保留率分别为97.65%、93.68%、92.97%、85.91%,游离氨基酸保留率分别为85.99%、86.92%、85.33%、42.72%,总氨基酸保留率分别为89.84%、89.17%、90.22%、64.31%;随干燥温度的升高和时间的延长,3类成分的保留率均呈现逐渐下降的趋势;4种干燥方法对2种单糖即核糖、半乳糖醛酸的含量影响较大;随着温度的升高,甘露糖、鼠李糖、葡糖糖醛酸含量呈减少趋势,核糖、半乳糖醛酸、半乳糖含量呈增加趋势;随着加热时间的延长,甘露糖、半乳糖含量呈减少趋势,核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸含量呈增加趋势。结论:不同干燥方法对单糖组成变化与多糖含量有一定影响。综合考虑,铁皮石斛的较优干燥方法为90℃烘箱烘干24~36 h。     

不同干燥方法对醋制延胡索物性及成分溶出的影响

目的 考察不同干燥方法(烘干、晒干、真空干燥、真空冷冻干燥)对醋制延胡索物性以及成分溶出的影响，为醋制延胡索干燥方法筛选提供理论依据。方法 延胡索醋制后，分别进行烘干、晒干、真空干燥和真空冷冻干燥。比较复水率、折干率、硬度等物性参数，同时采用超高效液相色谱(UPLC)法测定醋制延胡索在不同时间段四氢非洲防己碱、原阿片碱、四氢黄连碱、非洲防己碱、延胡索乙素、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、去氢紫堇碱8种生物碱的溶出量，多指标结合化学计量学评价不同干燥方法对醋制延胡索饮片质量及成分溶出的影响。结果 醋延胡索烘干后表面收缩，形成相对致密的结构，成分溶出较慢。冷冻干燥后疏松多孔，质地较轻且含水量少，成分溶出快。结论 综合考虑成分含量、复水率、折干率、硬度等多指标，真空冷冻干燥醋制延胡索较其他干燥方法醋制延胡索有显著差异。真空冷冻干燥法处理的醋制延胡索饮片在加水回流提取20 min的成分溶出量明显高于另外3种干燥法处理的饮片，临床煎煮宜选用冷冻干燥法处理的醋制延胡索饮片。     

市售铁皮石斛多糖及甘露糖含量比较研究

目的 按照《中国药典》2015版方法,比较目前市售铁皮石斛药材的多糖及甘露糖含量.方法 从市场上随机采购铁皮石斛样品6批,采用硫酸-苯酚法检测铁皮石斛总多糖含量,柱前衍生HPLC法检测其甘露糖含量.结果 市售铁皮石斛多糖含量在34%~42%之间,甘露糖含量在19%~27%之间.结论 HT6K 市售铁皮石斛质量虽存在差异,但均符合药典标准.     

铁皮石斛中多糖和甘露糖含量测定方法的改进及与齿瓣石斛的比较研究

目的：改进铁皮石斛中多糖和甘露糖的含量测定方法并对铁皮石斛与齿瓣石斛中的多糖和甘露糖含量进行分析比较。方法：采用硫酸-苯酚法测定石斛中多糖的含量;采用高效液相色谱法测定石斛中甘露糖的含量。结果：多糖在2.54～12.87 mg· L-1范围线性关系良好（r＝0.9990）,平均回收率为99.02％,RSD为2.6％（n＝6）;甘露糖的平均回收率为101.5％,RSD为1.7％（n＝9）。6批铁皮石斛药材多糖平均含量为45.94％,甘露糖平均含量为32.33％;9批齿瓣石斛药材多糖平均含量为45.12％,甘露糖平均含量为37.88％。结论：所建方法操作比较简单,准确可靠,重现性好,可用于控制铁皮石斛的质量。铁皮石斛与齿瓣石斛多糖含量相当,齿瓣石斛甘露糖含量高于铁皮石斛。     

铁皮石斛无菌纳米粉抗慢性肝损伤及对肝组织超微结构的影响

目的探讨铁皮石斛无菌纳米粉(DON)的保肝作用及其相关机制。方法建立四氯化碳(CCl4)慢性肝损伤小鼠模型,同时以受试药物灌胃干预,持续8周。昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、DON组以及铁皮石斛普通粉(DOP)组。检测各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和过氧化氢酶(CAT)活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-6的表达;免疫组织化学法染色检测IL-1β的表达分布情况;苏木精-伊红(HE)染色行小鼠肝脏病理组织学观察;透射电镜观察肝组织超微结构变化。结果与模型对照组比较,DON和DOP干预后,血清ALT、AST、LDH水平均显著下降,CAT活性增强,TNF-α和IL-6的表达下调;免疫组化法显示,肝脏IL-1β的表达被显著抑制;肝脏病理组织学及肝细胞超微结构均有不同程度改善。与DOP组比较,DON组各项指标改善作用更显著。结论DON对慢性肝损伤具有更明显的保肝作用,其机制可能是DOP经过粒径改造后,更易促进机体抗氧化活性,抑制CCl4诱导的氧化应激,并具有抗炎作用。     

铁皮石斛胚状体对大鼠抗疲劳能力的影响

目的 研究铁皮石斛胚状体对大鼠抗疲劳能力的影响。 方法 大鼠随机分为低、中、高剂量组(铁皮石斛胚状体0.2、0.4、0.8 g/kg) ,空白对照组、跑步对照组及铁皮枫斗组(铁皮枫斗1.2 g/kg),进行大鼠跑台实验。观察大鼠运动前、运动后0 min及运动后30 min血糖含量、全血乳酸含量变化并检测运动后肝糖元、肌糖元及血尿素氮的含量。 结果 与跑步对照组相比,铁皮石斛胚状体各剂量组可以在跑步30 min后提高血糖含量并降低全血乳酸含量,中、高剂量组可以降低运动后肝糖元及肌糖元的消耗,各剂量组均能明显降低血尿素氮的含量。 结论 铁皮石斛胚状体具有提高大鼠抗疲劳能力的作用。     

铁皮石斛多糖对人脐静脉内皮细胞基因表达谱的影响研究

目的:探讨铁皮石斛多糖对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)基因表达谱的影响。方法:以HUVEC为对象,采用MTS法检测不同剂量铁皮石斛多糖(50、100、200、400、800μg/mL)对HUVEC细胞增殖活性的影响,并计算30%细胞生长抑制浓度(IC30)以筛选后续试验剂量;采用基因表达谱芯片技术检测铁皮石斛多糖作用24 h后HUVEC细胞基因表达谱的变化情况,筛选差异表达基因;利用DAVID生物信息学资源数据库对差异表达前5位的基因进行GO富集分析和KEGG通路富集分析;以免疫相关差异表达基因为对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应法(qRT-PCR)对芯片检测结果进行验证。结果:经100、200、400、800μg/mL铁皮石斛多糖作用后,HUVEC细胞的存活率均显著降低(P<0.05或P<0.01);IC30值为408μg/mL。经400μg/mL(据IC30值确定)铁皮石斛多糖作用后,HUVEC细胞中共有差异表达基因91个,其中表达上调的有84个、表达下调的有7个。上、下调表达差异前5位的基因分别为SELE、CCL2、CXCL6、IL8、ICAM1以及VWCE、CPT1A、CLU、CCL14、CINS4,主要与免疫调节、炎症反应等有关。HUVEC细胞中的差异表达基因主要分布于胞外区域,富集于细胞因子的产生及反应、刺激反应等生物学过程,发挥趋化因子及其受体活性等分子功能;其中上调表达基因SELE、ICAM1、CXCL2等主要富集于肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、甲型H1N1流感、单纯疱疹病毒感染等通路,下调表达基因CCL14主要富集于趋化因子信号通路。qRT-PCR验证结果显示,ICAM1基因的相对表达量显著升高,CCL14基因的相对表达量显著降低(P<0.05),与芯片检测结果一致。结论:经铁皮石斛多糖处理后,HUVEC细胞共有91个基因表达差异明显,且以表达上调为主。表达差异基因可能通过TNF信号通路、甲型H1N1流感、单纯疱疹病毒感染等通路参与机体免疫调节。     

铁皮石斛胚状体对大鼠抗疲劳能力的影响

目的研究铁皮石斛胚状体对大鼠抗疲劳能力的影响。方法大鼠随机分为低、中、高剂量组（铁皮石斛胚状体0．2、0．4、0．8g／kg）,空白对照组、跑步对照组及铁皮枫斗组（铁皮枫斗1．2g／kg）,进行大鼠跑台实验。观察大鼠运动前、运动后0min及运动后30min血糖含量、全血乳酸含量变化并检测运动后肝糖元、肌糖元及血尿素氮的含量。结果与跑步对照组相比,铁皮石斛胚状体各剂量组可以在跑步30min后提高血糖含量并降低全血乳酸含量,中、高剂量组可以降低运动后肝糖元及肌糖元的消耗,各剂量组均能明显降低血尿素氮的含量。结论铁皮石斛胚状体具有提高大鼠抗疲劳能力的作用。     

铁皮石斛对慢性肝炎患者免疫与抗氧化状态的调节作用研究

目的研究与观察铁皮石斛对慢性肝炎患者免疫与抗氧化状态的调节作用。方法选取2016年9月~2017年5月期间本院诊治的82例慢性肝炎患者为研究对象,将82例患者随机分为对照组(常规慢性肝炎治疗组)41例和观察组(常规治疗加铁皮石斛组)41例。检测与比较两组患者治疗前与治疗后2周及4周的外周血T淋巴细胞亚群与抗氧化指标。结果治疗前两组患者的外周血T淋巴细胞亚群与抗氧化指标比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2周及4周两组的外周血T淋巴细胞亚群与抗氧化指标均显著改善,且观察组均显著好于对照组,差异无统计学意义(P<0.05)。结论铁皮石斛对慢性肝炎患者免疫与抗氧化状态的调节作用较好,因此在慢性肝炎患者中的应用价值较高。     

鲜铁皮石斛对自发性高血压大鼠的降压作用及机制研究

目的 观察鲜铁皮石斛对自发性高血压（spontaneously hypertensive,SH）大鼠的降压作用及可能机制。方法 将24只SH大鼠随机分为3组,鲜铁皮石斛组（生药量0.8 g·kg^-1）、络活喜组（0.5 mg·kg^-1）和模型组,另设正常对照组。经口每日等容量给药,给药前测量3次血压,给药后每周测量1次2 h血压。治疗8周后测量血浆中血管紧张素Ⅰ（angiotensinⅠ,AngⅠ）、血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）、肾素活性（renin activity,RA）、醛固酮（aldosterone,ALD）,并用RT-qPCR法检测肾组织中血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensin Ⅱ receptor type 1,AT1R）、内皮素-1 mRNA表达水平。结果 与模型组相比,鲜铁皮石斛和络活喜2组在每个给药时点后收缩压和舒张压均显著降低（P<0.05）;鲜铁皮石斛组和络活喜组相比,仅在给药1周收缩压和舒张压有显著性差异（P<0.05）,其余时点血压无显著差异。与模型组相比,鲜铁皮石斛组和络活喜组AT1R mRNA水平显著降低,差异具有显著性（P<0.05）;两治疗组相比,无显著差异。鲜铁皮石斛组和络活喜组对AngⅠ、AngⅡ、RA及ALD激素水平没有显著改变。结论 鲜铁皮石斛能够显著降低SH大鼠血压水平,降压效果与西药络活喜接近,可能通过降低AT1R mRNA水平起作用。     

铁皮石斛药材含量和检查项方法优化及不同产地品质的比较

目的 优化药典中甘露糖含量测定及甘露糖与葡萄糖面积比的色谱条件,同时比较浙江省不同产地铁皮石斛药材质量,为铁皮石斛适宜产地的选择提供依据。方法 以中国药典2010年版中铁皮石斛甘露糖含量测定方法为基础,对色谱条件进行优化,并用优化后的方法对不同产地铁皮石斛药材质量进行分析比较。结果 优化后的色谱条件：Diamonsil C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈(A)-0.02 mol·L^-1的乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~60 min,14%A;60~61 min,14%→25%A;61~69 min,25%;69~70 min,25%→14%A;70→80 min,14%A),流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为250?nm,柱温为30 ℃,进样量为10 μL。优化后的方法实现了PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)与甘露糖,PMP与样品杂质,盐酸氨基葡萄糖与样品杂质的基线分离。浙江省不同产地铁皮石斛药材在甘露糖含量及检查项比值上有一定的差异,其中富阳铁皮石斛的甘露糖含量最高,为40.8%,萧山铁皮石斛甘露糖与葡萄糖比值最高,为3.9。结论 该方法重复性好,结果准确可靠,可以用于铁皮石斛药材的质量控制。浙江省内不同产地的铁皮石斛质量存在一定的差异,其中建德最适宜人工栽培。     

铁皮石斛不同温度的提取物对自发性高血压大鼠降压作用研究

目的 观察不同提取温度条件下的铁皮石斛水提取物对自发性高血压大鼠（spontaneous hypertension rat,SHR）的降压作用及其可能机制。方法 将♀♂各半,48只SHR大鼠随机分为铁皮石斛60℃水提组（0.8 g·kg^-1·d^-1）、100℃水提组（0.8 g·kg^-1·d^-1）、121℃水提组（0.8 g·kg^-1·d^-1）、60℃-100℃-121℃梯度温度水提组（0.8 g·kg^-1·d^-1）和阳性药组（0.5 mg·kg^-1·d^-1苯磺酸氨氯地平片）及模型组;另设8只Wistar大鼠为正常组。每周测量1次给药后2,24 h的血压。治疗8周后,用化学发光法检测血浆肾素活性（plasma renin activity,PRA）和血浆醛固酮（aldosterone,ALD）、血管紧张素Ⅰ（angiotensin Ⅰ,Ang Ⅰ）、血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ）的含量;用RT-qPCR法检测肺组织血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）、肝组织血管紧张素原（angiotensinogen,AGT）、肾组织醛固酮合成酶（CYP11B2）、Ang Ⅱ 1型受体（angiotensinⅡ type 1 receptor,AT1R）、内皮素1（endothelin-1,ET-1）的mRNA表达。结果 治疗8周,各治疗组给药后2 h的收缩压、舒张压均显著低于模型组（P<0.01）,其中铁皮石斛各不同温度水提组降压幅度与阳性药组接近,各组间降压作用差异不大;治疗7~8周、停药3 d,各治疗组24 h后的收缩压显著低于模型组（P<0.05或P<0.01）;治疗7周、停药3 d,各治疗组24 h后的舒张压显著低于模型组（P<0.05或P<0.01）;铁皮石斛各不同温度提取组给药后24 h的降压幅度与阳性药组接近,且治疗8周以来各组间降压作用差异不大;正常组与模型组以及各治疗组大鼠血浆中Ang Ⅰ、Ang Ⅱ、PRA和ALD的激素含量无显著差异;模型组AT1R的mRNA水平高于正常组,100℃水提组、121℃水提组和阳性药组AT1R的mRNA水平与模型组比较显著降低（P<0.05）。结论 铁皮石斛不同温度水提取,多糖含量有一定差异,均能够显著降低SHR大鼠血压,其降压作用可能与下调AT1R有关,不同温度水提取降压效果相似,降压作用与西药降压药苯磺酸氨氯地平片接近,铁皮石斛降压疗效与多糖含量可能没有直接关联。     

鲜铁皮石斛对肺腺癌裸鼠移植瘤中自噬及抑癌基因表达的影响

目的 探究鲜铁皮石斛对肺腺癌移植瘤的抑制情况及其机制.方法 将30只裸鼠随机分为6组,空白对照组、模型对照组、环磷酰胺组、铁皮石斛大、中、小剂量组,每组5只.除空白对照组外,其他组建立肺腺癌裸鼠移植瘤模型.环磷酰胺组腹腔注射环磷酰胺0.025 g·kg-1,每隔1d给药,共13次;铁皮石斛小、中、大剂量组分别灌胃给予0...     

溶出介质中气体对利福平胶囊溶出度的影响

以广东某制药有限公司生产的利福平胶囊为模型药物,按照<中国药典>(2005年版)的检测方法 ,测定了不同条件下的药物溶出度.结果 表明,溶出介质脱气处理的程度对利福平胶囊的溶出度测定有显著影响.     

介质对硝苯地平缓释制剂溶出行为的影响

研究硝苯地平的两种国产普通片、一种进口缓释片和自制缓释微球在不同介质中的溶出行为。结果发现，介质对硝苯地平制剂的溶出速度有很大影响。以２０％乙醇水溶液或０．５％十二烷基硫酸钠水溶液为介质，缓释片和缓释微球的溶出太快，且不能区别各制剂的溶出度差异。在０．１ｍｏｌ／Ｌ盐酸或ｐＨ６．８磷酸盐缓冲液中加入０．０２％或０．１％吐温－８０，分别作为介质，能较好评价制剂的溶出行为。在含０．０２％吐温－８０的０．１ｍｏｌ／Ｌ盐酸溶液中投入微球２、５和１０ｍｇ对溶出度无显著影响。     

不同的溶出液处理方式对药物溶出度测定结果的影响

目的研究不同的溶出液处理方式对溶出度测定结果的影响,从而提高溶出度测定的准确性和客观性。方法取8批不同品种和剂型的药物溶出液,分别采用不同方式处理溶出液后测定,对测定结果进行分析。结果 8种药品中有2种用不同的方式处理后差异有统计学意义。结论不同的溶出液处理方式对某些药物溶出度有一定的影响。     

美、日溶出曲线数据库对比研究及我国溶出曲线数据库建设进展

目的:比较各国溶出曲线数据库,介绍我国溶出曲线数据库建设进展.方法:文献分析法,对比溶出度与溶出曲线差异,介绍美国和日本溶出曲线数据库的建立过程和经验,详细阐述溶出曲线的价值、意义和特点以及其在药品研发领域的作用.结果与结论:建议药品监管部门将溶出曲线作为已上市化学口服固体制剂日常监管中的一种重要技术手段,并通过相关数...     

铁皮石斛对2型糖尿病大鼠胰岛组织JNK、AKT蛋白磷酸化表达的影响

目的:研究铁皮石斛有效部位对2型糖尿病大鼠胰岛组织JNK蛋白、AKT蛋白磷酸化表达的影响。方法:采用正常大鼠、高脂高糖-链脲佐菌素致糖尿病(STZ-T2DM)模型,研究铁皮石斛降糖机制,Western blot法检测JNK、ph JNK、AKT、ph AKT在大鼠胰岛组织中的表达。结果:与正常对照组相比较,模型组大鼠胰岛组织JNK蛋白磷酸化程度显著增加(P<0.01),Aktser473磷酸化减弱(P<0.01)。与模型组相比较,铁皮石斛TP、TF、TE显著降低大鼠胰岛组织JNK(Thr183/Tyr185)磷酸化,增加Aktser473磷酸化水平。结论:铁皮石斛有效部位具有抑制T2DM大鼠胰岛组织JNK Thr183/Tyr185磷酸化水平,增加AKT ser473磷酸化水平的作用。