逍遥散加减对高泌乳素血症模型大鼠中枢多巴胺受体ERK信号转导通路的影响

目的:以疏肝健脾为核心,运用逍遥散加减治疗高泌乳素血症(HPRL)模型大鼠,探讨逍遥散加减对HPRL大鼠模型中枢多巴胺受体细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路的作用机制。方法:96只SD雌性大鼠,随机分为正常组,模型组,溴隐亭组(0. 001 g·kg~(-1)),逍遥散加减高、中、低剂量组(60,30,15 g·kg~(-1)),多巴胺第一受体(D1R)拮抗剂组(SCH23390组,SCH23390+逍遥散加减中剂量组,SCH23390+溴隐亭组),多巴胺第二受体(D2R)拮抗剂组(氟哌啶醇组,氟哌啶醇组+逍遥散加减中剂量组,氟哌啶醇组+溴隐亭组)。采用垂体移植法制作HPRL大鼠模型,给药30 d后,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠下丘脑癌蛋白Ras,Raf蛋白的表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠下丘脑丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激酶1/2(MEK1/2) mRNA,细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2) mRNA的表达;采用电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构。结果:与正常组比较,模型组Ras,Raf蛋白,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达显著降低(P 0. 01);运用SCH23390拮抗DIR后,与模型组比较,SCH23390组Ras,Raf蛋白,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达有升高趋势,运用氟哌啶醇拮抗D2R后,与模型组比较,氟哌啶醇组Ras,Raf蛋白表达有下降趋势,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达显著下降(P 0. 01);运用逍遥散加减治疗后,能显著提高Ras,Raf蛋白,MEK1/2,ERK1/2 mRNA表达(P 0. 01),且逍遥散加减高、中剂量组表达增加最明显(P 0. 01),效果优于溴隐亭组。电镜下模型组卵巢颗粒细胞形态及线粒体数量、结构异常,运用逍遥散加减治疗后,颗粒细胞形态和线粒体结构趋于正常。结论:逍遥散加减通过激动D2R,抑制D1R,调节ERK/MAPK信号通路,并有效改善卵巢颗粒细胞线粒体功能,促进卵泡发育,说明逍遥散加减治疗HPRL是多靶点的作用机制。     

基于Raf/MEK/ERK通路探讨平胃胶囊含药血清对MNNG诱导的人胃黏膜上皮细胞炎癌转化的影响

目的 从快速加速纤维肉瘤/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶（Raf/MEK/ERK通路探讨平胃胶囊治疗慢性萎缩性胃炎的可能作用机制。方法 15只SD大鼠随机分为空白组5只、平胃胶囊组10只,空白组大鼠给予1 ml/100 g的生理盐水灌胃,平胃胶囊组大鼠给予平胃胶囊混悬液0.63 g/（kg·d）灌胃,连续3天后采集血清。采用N-甲基-N-硝基-亚硝基胍（MNNG）诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1建立癌前病变细胞模型。将造模成功细胞分为对照组（10%胎牛血清）、空白血清组（10%胎牛血清+10%空白血清）、含药血清组（平胃胶囊含药血清）,采用CCK-8法筛选平胃胶囊含药血清干预体积分数及时间。将人胃黏膜上皮细胞GES-1分为正常组、模型组、空白血清组、含药血清组、U0126组、联合组,每组3个复孔。除空白组外其余各组细胞造模成功后,正常组和模型组加入等体积的胎牛血清,空白血清组加入等体积的空白血清,含药血清组加入筛选确认的体积分数的平胃胶囊含药血清,U0126组给予10μmol/L的丝裂原活化的细胞外信号调节激酶1 (MEK1)抑制剂U0126,联合组给予等体积的平胃胶...     

参归仁合剂对产后抑郁大鼠行为学及雌激素介导下ERK1/2通路中MEK1的影响

目的:探讨参归仁合剂对产后抑郁模型大鼠行为学的影响,及测其海马、额叶、下丘脑神经元内胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路上丝裂原活化细胞外调节激酶1(MEK1)蛋白表达量。方法:150只雌性大鼠分为正常组,模型组,参归仁高、中、低剂量组(7,3.6,1.8 g·kg-1·d-1),阳性药组(舍曲林4.5 mg·kg-1·d-1和苯甲酸雌二醇0.01 mg·kg-1·d-1),除正常组外,其余各组ih苯甲酸雌二醇和黄体酮造成抑郁模型。观察其行为学指标变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测其额叶、海马、下丘脑中p-MEK1,MEK1的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组体重、食欲、活动能力、兴趣等明显降低,额叶、海马、下丘脑细胞内的p-MEK1蛋白表达显著升高(P0.01);参归仁合剂能改善抑郁模型组体重、食欲、活动能力、兴趣等行为学指标,抑郁模型组额叶、海马、下丘脑细胞内的p-MEK1,MEK1蛋白表达量明显下降,参归仁高、中、低组额叶、海马、下丘脑细胞内的p-MEK1,MEK1蛋白表达量显著增加,尤其以参归仁中、低组增加较为明显(P0.01)。结论:参归仁合剂能改善产后抑郁大鼠的行为学指标,在一定程度上调ERK1/2信号通路p-MEK1,MEK1的蛋白表达量,且中、低组效果显著,提示该药作用机制为调控ERK1/2通路并改善抑郁症状。     

中药抗肿瘤血管生成的信号通路研究

血管生成是肿瘤发生和转移的基本条件。调控肿瘤血管生成相关的信号通路包括PI3K/Akt/mTOR、Ras/Raf/MEK/ERK、Notch转导通路等。中药抗肿瘤血管生成的信号通路研究越来越受关注。调控PI3K/Akt/mTOR通路的中药多集中于抑制Akt的磷酸化,且清热药居多。调控Ras/Raf/MEK/ERK通路的中药多集中于抑制ERK的磷酸化,且活血化瘀药居多。调控Notch转导通路的中药多集中于抑制Notch1的表达,对配体的表达不一。对中药抗肿瘤血管生成的信号通路进行综述,旨在寻求新的血管生成抑制剂,阐明作用靶点,为肿瘤研究提供方向。     

中药对细胞外信号调节激酶信号转导通路的调节

目的归纳总结中药复方及单味中药有效成分对细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号转导通路的调节作用。方法通过查阅近5年的相关文献,探究细胞外信号调节激酶信号转导通路的中药调节作用。结果细胞外信号调节激酶通路参与细胞生长、增殖、凋亡、分化、迁移以及细胞恶性转化等多种生理、病理过程,许多炎症、增生性、免疫性疾病与ERK信号通路的异常调控密切相关。结论单味中药及其提取物和中药复方不仅可以通过激活或抑制ERK信号通路而改善细胞的增殖、分化和凋亡等,从而改变细胞命运,而且还可以通过上调或下调信号通路中关键信号分子的磷酸化过程,从而调控靶基因的转录、表达及相应的生物学效应。     

ERK1/2信号通路参与美洲大蠊提取物诱导肝癌细胞凋亡的研究

目的:观察美洲大蠊提取物抗肝癌细胞的凋亡作用是否与胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)介导的凋亡通路有关。方法:以人肝癌SMMC-7721细胞株为研究对象,MTT法检测肿瘤细胞抑制率; Annexin V-FITC/PI染色观察细胞凋亡情况; JC-1染色观察线粒体膜电位情况;蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞核内凋亡诱导因子(AIF)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、大鼠肉瘤蛋白(Ras)、快速反应肉瘤蛋白(Raf)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达。结果:与阴性对照组相比,40、80μg/ml的美洲大蠊提取物可不同程度地抑制SMMC-7721细胞的增殖,诱导其凋亡,降低线粒体膜电位。Western Blot结果显示,与阴性对照组相比美洲大蠊提取物可使核AIF、caspase-3表达增多,而ERK1/2通路的Ras、Raf、p-ERK蛋白表达均有不同程度降低。ERK1/2抑制剂PD98059在抑制ERK1/2信号通路的同时,抑制了SMMC-7721增殖,诱导其凋亡。结论:美洲大蠊提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡,抑制其增殖,机制可能与下调Ras/Raf/ERK1/2信号通路有关。     

细胞外信号调节激酶1/2在谷氨酸引起的星形胶质细胞炎症反应中的作用

目的观察谷氨酸诱导星形胶质细胞激活炎症细胞因子表达及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的表达情况,探讨ERK1/2在星形胶质细胞激活炎症细胞因子中的作用。方法传代体外培养的大鼠星形胶质细胞,分别用终浓度为20μmol/L和50μmol/L的谷氨酸作用30 min。应用ERK上游激酶MEK特异性阻断剂PD98059(10μmol/L)阻断ERK信号转导通路,Western blot观察阻断前后星形胶质细胞磷酸化ERK1/2、白细胞介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达水平的改变。结果谷氨酸使体外培养星形胶质细胞磷酸化ERK1/2蛋白表达明显增加,同时,使iNOS、COX-2I、L-1β表达明显增加;PD98059可完全阻断谷氨酸引起的ERK1/2表达增加,也可抑制谷氨酸引起的iNOS、COX-2、IL-1β蛋白表达增加。结论ERK1/2信号转导通路参与谷氨酸引起体外培养星形胶质细胞炎症反应的作用。     

益气消癥法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠子宫组织MEK2、p-ERK蛋白表达的影响

目的 研究益气消癥法对雌激素诱导子宫肌瘤模型豚鼠子宫组织细胞外信号调节激酶2（extracellular signal regulated kinase 2,MEK2）、磷酸化激活丝裂原激活蛋白激酶的激酶（phosphorylation extracellular signal regulated kinase,p ERK）蛋白表达的影响。方法 将去势豚鼠随机分为正常组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组及西药组,并以正常组作对照。通过去势加皮下注射雌二醇（estradiol,E2）建立子宫肌瘤模型,通过免疫组化法检测6组子宫组织MEK2、p ERK蛋白表达。结果 模型组豚鼠子宫肌组织MEK2、p ERK蛋白表达显著高于正常组（P<0.01）,中药高、中、低剂量组均有不同程度的降低,其中中药高剂量组豚鼠子宫组织MEK2、p ERK蛋白表达显著低于模型组及西药组（P<0.01）。结论 益气消癥法可能是通过干预MAPK/ERK细胞反应信号通路抑制肌瘤细胞增殖,从而达到治疗子宫肌瘤的目的。     

艾灸“肾俞”“足三里”穴对类风湿关节炎大鼠滑膜组织中Ras-MAPK信号通路的影响(英文)

目的:观察艾灸对类风湿关节炎(RA)模型大鼠滑膜组织中Ras、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)和Raf蛋白表达的影响,探讨艾灸治疗类风湿性关节炎的分子作用机制。方法:选取30只Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组10只。采用风、寒、湿环境因素+生物因子(弗氏完全佐剂)复合造模。造模后第3天进行治疗,艾灸组取双侧 "肾俞""足三里"穴悬灸,20 min/次,1次/d,连续治疗15 d。于造模前、造模后及治疗第15天分别测量各组大鼠右后足趾容积。Western blot法检测滑膜组织中Ras蛋白、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(phosphor-ERK1/2,p-ERK1/2)及Raf蛋白的相对表达量。结果:造模后大鼠右后足趾容积较正常组明显增大(P<0.01);经过15 d治疗,艾灸组大鼠的跖围小于模型组(P<0.01)。模型组Ras、Raf、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达较其他各组增加(均P<0.01);艾灸组Ras、Raf、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达明显低于模型组(均P<0.01)。结论:艾灸能降低类风湿性关节炎模型大鼠滑膜组织中Ras、Raf及ERK1/2的过度表达,进而抑制Ras-MAPK信号通路的异常活化,推断这可能是艾灸减轻滑膜炎性反应的分子机制之一。     

中药调控p38 MAPK、ERK1/2、JNK等治疗骨质疏松症的研究进展

随着我国人口老龄化的加剧，骨质疏松症逐渐成为危害我国老年人群体健康的主要疾病之一，其危害性不容忽视。基于此，对骨质疏松症的研究也日益成为热点。目前，中药对于骨质疏松症的治疗正日益凸显其疗效，因此，就此展开的研究亦日益深入，尤其是通过分子生物学层面探讨其机制方面。该文拟就中药通过丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路探讨骨质疏松症防治机制进行综述，以期为中药治疗骨质疏松症的作用机制及推广临床应用提供理论依据。MAPK信号通路主要包括p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）、细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、细胞外信号调节激酶5（ERK5）等各具体蛋白，大量的研究表明MAPK信号通路中的各蛋白在骨质疏松症的疾病进展中发挥重要作用，可以起到调控细胞的增殖、分化、凋亡等作用。中药作为中国特色医疗手段，其疗效毋庸置疑，并且具有安全性高、不良反应少等优势，基于此，有专家学者进行了相关实验证明了中药提取物或中药复方可以通过调控MAPK信号通路的各个蛋白显著改善骨质疏松症的病况，故而以各蛋白为出发点对此进行综述。