乙酰异羟肟酸的舒张血管作用及其机制

目的研究乙酰异羟肟酸(AHA)降血压和舒张胸主动脉血管的作用及其机制。方法 (1)动物实验:8周龄SD雄性大鼠,ip给予AHA 50和100 mg·kg-1,每5 d给药1次,共5次。分别在给药前1 d、给药第13天和给药第26天测收缩压(SBP)和舒张压(DBP);HE染色观察大鼠胸主动脉血管组织形态变化。(2)离体实验:①累积浓度AHA(0.1,1,3,10,30和100μmol·L^-1)处理大鼠离体胸主动脉内皮完整血管环,检测血管环张力。②大鼠离体胸主动脉内皮完整和去内皮血管环用去甲肾上腺素(NE,1μmol·L^-1)和KCl(60 mmol·L^-1)预收缩,稳定后每10 min累积加入AHA(0.1,1,3,10,30和100μmol·L^-1),计算血管舒张百分比。③内皮完整血管环分为AHA组、AHA+左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组和AHA+吲哚美辛(Indo)组。L-NAME(0.1 mmol·L^-1)或Indo(0.01 mmol·L^-1...     

红景天苷通过AKT/mTOR信号通路对结肠癌细胞SW480增殖、凋亡和裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探究红景天苷(salidroside, SAL)对结肠癌细胞SW480增殖、凋亡和裸鼠移植瘤生长的影响。方法 采用0、25、50、100μmol·L^-1剂量红景天苷处理SW480细胞,将细胞随机分为4组：SAL 0μmol·L^-1组、SAL 25μmol·L^-1组、SAL 50μmol·L^-1组和SAL 100μmol·L^-1组。克隆形成实验检测细胞克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测Ki67、PCNA、Caspase-3、Caspase-9、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平。建立结肠癌裸鼠移植瘤模型,裸鼠随机分为2组：Control组和Salidroside 50 mg·kg^-1组,检测裸鼠肿瘤重量,TUNEL染色检测裸鼠肿瘤细胞凋亡率,免疫组化染色检测Ki67、Caspase-3阳性细胞数。结果 体外实验中,与SAL 0μmol·L^-1组相比较,SAL...     

连翘苷通过调控miR-483-3p对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的影响

目的:探讨连翘苷(PHN)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症损伤的影响及分子机制。方法:人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)随机分为对照组、oxLDL组(50 mg·ml^-1)、oxLDL(50 mg·ml^-1)+PHN低(1μmol·L^-1)、中(10μmol·L^-1)、高(100μmol·L^-1)剂量组、oxLDL(50 mg·ml^-1)+anti-miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml^-1)+anti-miR-NC组、oxLDL(50 mg·ml^-1)+PHN(100μmol·L^-1)+miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml^-1)+PHN(100μmol·L^-1)+miR-NC组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot法检测活化的半胱胺酸蛋白酶(Cleaved-Caspa...     

加校正因子的主成分自身对照法测定维生素B6片中有关物质

目的 建立高效液相色谱-加校正因子的主成分自身对照法测定维生素B₆片中杂质A、杂质B、未知最大单杂及杂质总量。方法 采用Inertsil ODS-SP(4.6×250 mm,5μm)色谱柱,以0.04%戊烷磺酸钠溶液(冰醋酸调p H至3.0)-甲醇(92∶8)为流动相,流速为1.0 m L·min^-1,检测波长为291 nm。结果 维生素B₆杂质A和杂质B的校正因子分别为1.4、1.3。维生素B₆对照品、杂质A和杂质B分别在(0.4988～24.94)μg·m L^-1、(0.5005～5.005)μg·m L^-1、(0.5025～5.025)μg·m L^-1质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系(r均为1.000)。杂质A和杂质B检测限分别为0.069μg·m L^-1、0.0739μg·m L^-1。杂质A、杂质B平均回收率分别为99.98%(RSD=0.56%)、100.02%(RSD=0....     

黄芪对高糖诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究黄芪在高糖诱导的血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和迁移中的作用及其机制。方法 取VSMCs随机分为对照组（普通培养）、高糖组(25mmol·L^-1葡萄糖)、实验组(25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·m L^-1黄芪)、第1转染组(转染阴性对照寡核苷酸+25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·ml^-1黄芪)、第2转染组(转染miR-18a-5p模拟物+25 mmol·L^-1葡萄糖+40μg·m L^-1黄芪)。以细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞的存活率;以划痕实验检测细胞迁移情况;以实时定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测miR-18a-5p的表达;以蛋白质印迹法检测线粒体融合蛋白2 （MFN2）蛋白的表达。结果 对照组、高糖组和实验组VSMCs存活率分别为（100.00±10.00）%,（188.24±18.17）%和（123.52±12.66）%;VSMCs迁移率分别为（15.16±1.64）%,（53...     

UHPLC-MS/MS法测定盐酸二甲双胍制剂中2种亚硝胺类基因毒性杂质

目的 建立超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)法同时测定盐酸二甲双胍制剂中2种基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺(N-nitrosodimethylaminen, NDMA)和N-亚硝基二乙胺(N-nitrosodiethylamine, NDEA)的含量的方法。方法 采用多反应监测(MRM)模式检测，离子源为APCI(+),色谱柱为ACE Excel 3 C₁₈-AR柱(100 mm×4.6 mm, 3μm),以体积分数0.1%甲酸水溶液(A)-质量分数0.1%甲酸甲醇溶液(B)为流动相梯度洗脱，流速0.5 mL·min^-1,进样体积5μL。结果 NDMA和NDEA的线性范围分别为0.99～99μg·L^-1(r>0.999 9)和0.53～53μg·L^-1(r>0.999 9),平均回收率为90.9%～98.9%,定量限分别为0.99和0.53μg·L^-1,检测限分别为0.3和0.2μg·L^-1。用建立的方法测定不同剂型的6批样品，2批...     

心脉隆对离体人脐动脉血管张力的影响及其机制

目的：探讨心脉隆对离体人脐动脉血管张力的影响,并分析其机制。方法：运用离体血管张力测定实验方法,累积加入不同浓度的心脉隆,观察其对静息人脐动脉的张力影响;加入60 mmol·L^-1 KCl、1 μmol·L^-1苯肾上腺素（PE）使血管收缩、张力平稳后,观察不同浓度心脉隆对预收缩的人脐动脉张力的影响;同时观察细胞外Ca²⁺浓度、L-型钙通道阻滞剂维拉帕米（VEP）对心脉隆血管效应的影响。结果：心脉隆能浓度依赖性收缩静息状态下内皮完整的离体人脐动脉,对KCl、PE预收缩的离体人脐动脉有进一步增加张力的作用,在无钙灌流液中诱发的血管收缩效应明显减弱,随着细胞外Ca²⁺浓度增加其致血管收缩张力增加,维拉帕米能显著抑制心脉隆对人脐动脉的收缩反应。结论：心脉隆可促进细胞外Ca²⁺内流和细胞内Ca²⁺释放,从而具有浓度依赖性地收缩离体人脐动脉的作用。     

利拉鲁肽抗CXC趋化因子配体16诱导的人足细胞脂质沉积作用及机制

目的 探讨利拉鲁肽(liraglutide)抗CXC趋化因子配体16(CXCL16)诱导的人足细胞脂质沉积的作用及机制。方法 (1)葡萄糖40 mmol·L^-1刺激人足细胞24 h，棕榈酸250μmol·L^-1刺激人足细胞6 h,Western印迹法检测足细胞CXCL16蛋白表达水平。(2)重组CXCL16 100μg·L^-1刺激足细胞0,6,12和24 h,Western印迹法检测足细胞裂隙素蛋白表达水平。(3)足细胞分为细胞对照组、CXCL16 100μg·L^-1组、CXCL16+利拉鲁肽10,50和100 nmol·L^-1组及CXCL16+辛伐他汀100 nmol·L^-1组，加药2 h后加重组CXCL16 100μg·L^-1继续培养24 h，油红O染色检测足细胞脂滴面积。(4)足细胞分为细胞对照组、CXCL16100μg·L^-1组、CXCL16+利拉鲁肽100 nmol·L^-1组和CX...     

小剂量氯胺酮联用丁基苯酞的抗抑郁作用及其机制

目的 研究小剂量氯胺酮(Ket)联用丁基苯酞(NBP)的抗抑郁作用及其机制。方法 建立皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的体外抑郁模型,PC12细胞分成6组：空白对照组、模型对照组(CORT 400μmol·L^-1)、对照A组(CORT 400μmol·L^-1+NBP 1μmol·L^-1)、对照B组(CORT 400μmol·L^-1+Ket 0.01μmol·L^-1)、阳性对照组(CORT 400μmol·L^-1+Ket 0.1μmol·L^-1)、联合组(CORT 400μmol·L^-1+Ket 0.01μmol·L^-1+NBP 1μmol·L^-1)。CCK-8法检测细胞存活率,荧光显微镜观察细胞神经元形态变化,蛋白免疫印迹法评价联合用药对损伤细胞p-ERK/ERK、脑源性神经营养因子(BDNF)、synapsin蛋白表达变化。将ICR小鼠随机分为模型对照组、NBP...     

注射用紫杉醇(白蛋白结合型)致下肢膝盖酸胀1例

<正>1病例资料患者,男,67岁,身高160 cm,体质量54 kg,体表面积1.55 m²。2021年2月19日,患者因肺恶性肿瘤、非角化型鳞状细胞癌,COVID-19核酸检测阴性入住六安市中医院肿瘤科。生化检查示：总胆红素9.34μmol·L^-1、直接胆红素2.71μmol·L^-1、间接胆红素6.63μmol·L^-1、白蛋白66.66 g·L^-1,电解质均在正常范围内。血常规：白细胞5.99×10⁹·L^-1、中性粒细胞绝对值3.66×10⁹·L^-1、红细胞3.64×10⁹·L^-1、血小板257.00×10⁹·L^-1、血红蛋白117.00 g·L^-1。肿瘤指标示：癌胚抗原8.76 ng·mL^-1、糖类抗原125 276.50 U·mL^-1...     

口疮穴位贴主要成分的鉴别与含量测定

目的：建立口疮穴位贴主要成分的鉴别与含量测定方法。方法：以薄层色谱法(TLC)对穴位贴中吴茱萸和大黄进行鉴别;以高效液相色谱法(HPLC)对穴位贴中吴茱萸碱、吴茱萸次碱以及大黄素进行定量分析。结果：在TLC中,特征斑点清晰无干扰;在HPLC测定中,吴茱萸碱在3.3～167.3μg·m L^-1(r=0.9998)、吴茱萸次碱在1.9～92.5μg·m L^-1(r=0.9998)、大黄素在1.2～118.6μg·m L^-1(r=0.9999)范围内与色谱峰面积呈较好的线性关系,平均回收率分别为98.13%(RSD=1.98%)、99.58%(RSD=1.37%)、97.77%(RSD=1.63%)。结论：该方法可靠、准确、专属性强,可作为口疮穴位贴质量控制的参考依据。     

贝达喹啉治疗药物浓度监测方法的建立与应用

目的：建立贝达喹啉人体血药浓度的测定方法并应用。方法：血浆样本以舍曲林为内标经甲醇沉淀蛋白后,采用C₁₈色谱柱甲醇^-10 mmol·L^-1甲酸铵溶液梯度洗脱分离,电喷雾正离化,多反应监测模式(MRM)定量测定贝达喹啉和舍曲林的离子反应分别为m/z 555.2→229.0和m/z 306.2→159.0。结果：贝达喹啉检测质量浓度的线性范围为0.010～3.0μg·mL^-1(r=0.9995),定量下限为0.010μg·mL^-1;方法经验证符合生物样本分析要求。用于6例耐多药结核病(MDR-TB)患者贝达喹啉治疗血药浓度监测,患者在治疗第7天血浆中贝达喹啉血药峰浓度C_max为(3.48±0.70)μg·mL^-1,峰时间t_max为(5.33±1.03)h,半衰期t_1/2为(18.73±6.39)h;血药浓度曲线下面积AUC_last为(50.16±9.74)μg·h·mL     

新绿原酸抑制血管生成的研究

目的 考察新绿原酸(5-caffeoylquinic acid, 5-CQA)对血管生成的影响。方法 应用人脐内皮细胞(HUVEC)、大鼠动脉环模型和转基因血管荧光斑马鱼模型考察5-CQA对血管生成的抑制作用。同时建立肿瘤细胞斑马鱼移植瘤模型，考察5-CQA对肠下静脉(subintestinal vein, SIV)生成的作用。结果 5-CQA在320μmol·L^-1及以下浓度对HUVEC的增殖无明显影响，5-CQA能够抑制HUVEC体外迁移及细胞中VEGF、bFGF mRNA的表达；与对照组比较，56和112μmol·L^-1的5-CQA具有显著抑制大鼠动脉环微血管生成的作用(P<0.05);在斑马鱼血管荧光模型中56和112μmol·L^-1的5-CQA具有显著抑制24 h斑马鱼节间血管(intersegmental vessel, ISV)生成的作用；同时5-CQA对斑马鱼移植瘤的肠下静脉生成具有明显抑制作用(P<0.05)。结论 5-CQA具有抑制血管生成的作用，其作用机制与抑制VEGFR2受体的表达有关...     

ICP-MS测定国家集采药品蒙脱石散中14种微量元素的含量

目的 建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法快速测定国家集采药品蒙脱石散中14种微量元素的含量(锂Li、镁Mg、钙Ca、钒V、锰Mn、铁Fe、钴Co、铜Cu、锌Zn、砷As、硒Se、锶Sr、铅Pb、汞Hg)。方法 采用超声提取的方法,样品用2%的硝酸溶液稀释后超声提取,经ICP-MS检测,通过在线内标的方式校正基体干扰和漂移。结果 蒙脱石散中14种微量元素的定量限为Li:0.1802 mmol·L^-1、Mg:0.0005 mmol·L^-1、Ca:0.0010 mmol·L^-1、V:0.0377μg·L^-1、Mn:0.0087 mmol·L^-1、Fe:0.0210 mmol·L^-1、Co:0.0312μg·L^-1、Cu:0.0099 mmol·L^-1、Zn:0.2045 mmol·L^-1、As:0.3251μg·L^-1、Se:0.7657 mmol·L^-1<...     

基于HPLC研究柏子仁中黄曲霉毒素的污染状况与风险分析

目的 基于HPLC研究柏子仁中4种黄曲霉毒素的污染情况,并进行风险分析,评估柏子仁的用药安全。方法 采用Agilent Eclipse Plus C₁₈(4.6×250 mm 5μm)为色谱柱,柱后光化学衍生法检测,以甲醇∶乙腈∶水(35∶10∶55)为流动相,流速1.0 mL·min^-1;柱温：40℃;荧光检测器检测。结果 黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂分别在0.35～20.8μg·L^-1、0.13～7.6μg·L^-1、0.36～21.6μg·L^-1、0.13～7.6μg·L^-1范围内呈良好的线性关系,黄曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂平均回收率分别为90.6%、83.46%、87.84%、86.58%,相对偏差分别为2.9%、3.6%、3.6%、4.7%。23批柏子仁中有14批检...     

复方氟尿嘧啶口服溶液中氟尿嘧啶含量测定方法的改进

目的：改进复方氟尿嘧啶口服溶液中氟尿嘧啶含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent 5 TC-C₁₈(2)(4.6×250 mm,5μm),流动相为6.8 g·L^-1的磷酸二氢钾溶液(用5 mol·L^-1氢氧化钾溶液调节pH值至5.7±0.1)：甲醇(95∶5),检测波长为265 nm。结果：氟尿嘧啶在10.289μg·mL^-1～51.443μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好,线性方程：Y=34.554X+5.479,(r=0.999 98),平均回收率为96%(RSD=0.9%,n=9)。结论：本文所建立高效液相色谱法简便、准确、灵敏度高、重复性好,满足复方氟尿嘧啶口服溶液中氟尿嘧啶的含量测定。     

山奈酚通过调控miR-21/SOX9对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨山奈酚(KAE)对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:将C28/I2细胞分为对照组(正常培养的C28/I2细胞)、模型组(100 ng·ml^-1 LPS)、山奈酚低(KAE-L组,25μmol·L^-1 KAE+100 ng·ml^-1 LPS)、中(KAE-M组,50μmol·L^-1 KAE+100 ng·ml^-1 LPS)、高(KAE-H组,100μmol·L^-1 KAE+100 ng·ml^-1 LPS)剂量组。利用Lipofectamine^TM2000转染试剂盒对C28/I2细胞进行转染,并分为：mimics NC组(转染mimics NC+100 ng·ml^-1 LPS)、miR-21 mimics组(转染miR-21 mimics+100 ng·ml^-1 LPS)、inhibitor NC组(转染inhibitor NC+100 ng·m...     

尼索地平对大鼠离体肺动脉和肺动脉高压的影响

目的 观察尼索地平(nifedipine,NIS)对KCl和去氧肾上腺素(phenylephrine,PHE)所致离体大鼠肺动脉收缩的作用,同时研究其对野百合碱诱导的肺动脉高压(pulmonary hypertention,PH)大鼠的影响。方法 ①采用离体血管实验法,以KCl和PHE在含钙离子和不含钙离子的K-H液中预收缩离体大鼠肺动脉环,观察NIS对血管收缩的影响。②取40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、NIS组和硝苯地平(NIF)组,每组10只,采用野百合碱(50 mg·kg^-1)皮下注射建立大鼠PH模型,连续灌胃给药21 d。采用右心导管法测定mPAP、mRVP、maxPAP和maxRVP,并计算各组大鼠的RVHI和LI。结果 ①在含钙离子的K-H液中,NIS抑制KCl(20,40,60 mmol·L^-1)和PHE(1×10^-7,5×10^-7,1×10^-6 mol·L^-1)所致血管收缩的IC₅₀分别为0.87×10^-8,1.41×10^-8,8.32×10^-8 mol·L^-1和0.56×10^-7,4.27×10^-7,1.28×10^-6 mol·L^-1。在无钙离子K-H液中,NIS无抑制离体血管收缩的作用。②模型组大鼠mPAP、mRVP、maxPAP、maxRVP、RVHI和LI均显著高于正常组(P<0.01),NIS组和NIF组大鼠的上述指标均显著低于模型组(P<0.05)。结论 NIS有抑制大鼠肺动脉收缩的作用,对野百合碱诱导的大鼠PH有治疗作用。     

萝卜硫素通过调控OGG1基因抑制动脉粥样硬化相关巨噬细胞脂质积聚的研究

目的 探讨萝卜硫素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞脂质积聚的影响和作用机制。方法 将细胞分为对照组、ox-LDL组(100μg·mL^-1 ox-LDL)、萝卜硫素低剂量组(100μg·mL^-1 ox-LDL+5μmol·L^-1萝卜硫素)、萝卜硫素高剂量组(100μg·mL^-1 ox-LDL+10μmol·L^-1萝卜硫素)、si-OGG1组(100μg·mL^-1 ox-LDL+10μmol·L^-1萝卜硫素+转染si-OGG1)。以蛋白质印迹法检测各组细胞蛋白表达水平,以酶联免疫吸附测定法检测各组细胞炎性因子及8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平,以氧化酶法检测细胞内胆固醇水平,以探针法检测活性氧(ROS)水平,以流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 对照组、ox-LDL组、萝卜硫素低剂量组、萝卜硫素高剂量组、si-OGG1组的8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶1(OGG1)蛋白相对表达水平分别为0.80±0.03、0.26±0....     

UPLC-MS/MS法同时快速测定消渴丸中3种成分的含量

目的 建立一种UPLC-MS/MS法同时快速测定消渴丸中葛根素、格列本脲、五味子酯甲含量的方法。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH柱(C₁₈ 2.1×50 mm 1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(含10 mmol·L^-1乙酸铵)-乙腈为流动相梯度洗脱,流速：0.3 mL·min^-1,柱温30℃,进样量1μL。质谱采用ESI(电喷雾离子源),以正离子多反应监测模式定量分析。结果 葛根素、格列本脲、五味子酯甲的线性范围分别为0.2054～5.135μg·mL^-1、0.02156～0.5390μg·mL^-1、0.02066～0.5165μg·mL^-1(r²为0.99315～0.99920),平均加标回收率分别为98.5%、94.2%、93.3%,RSD为2.97%、2.04%、3.45%(n=6)。结论 该方法操作方便、快捷、灵敏度高、准确度好,可一次性实现多个不同成分的检测。