柔红霉素诱导Jurkat细胞凋亡的实验研究

目的探讨柔红霉素在体外诱导Jurkat细胞发生凋亡的规律.方法应用DNR体外作用于Jurkat细胞,研究DNR诱导Jurkat 细胞凋亡的规律,Annexin V/PI双标法流式细胞仪检测Jurkat细胞凋亡率,PI染色流式细胞仪检测细胞周期分布.结果 0.1～2.0μmol/L浓度范围DNR作用一定时间后,Jurkat细胞的凋亡率随药物浓度的增加与作用时间的延长而升高.DNR作用后Jurkat细胞G2/M期比例明显增加.结论一定浓度的DNR在体外可诱导Jurkat细胞凋亡,在一定的剂量范围内,呈现剂量-效应、时间-效应关系,其机制可能与DNR抑制细胞有丝分裂有关.     

柔红霉素体外对HL-60细胞的凋亡作用

目的：了解柔红霉素（ＤＮＲ）体外作用于ＨＬ－６０　细胞时产生凋亡的规律及一些相关蛋白表达的变化。方法：应用光镜、ＤＮＡ电泳及ＦＣＭ检测ＨＬ－６０细胞发生的凋亡模式；用ＩＣ、ＦＣＭ观察相关蛋白的变化。结果：当ＤＮＲ浓度为０．２μＭ～２μＭ时，ＨＬ－６０细胞发生的凋亡率随浓度的增加与作用时间的延长而升高，可见典型的凋亡细胞及明显的ＤＮＡ梯度条带。１μＭ　ＤＮＲ作用２ｈ时，ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ的荧光强度指数（ＦＩ）降低，ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３　的　ＦＩ　升高；而作用５ｈ时，ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３的ＦＩ值反而降低。结论：一定浓度的ＤＮＲ在体外可诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，它可抑制ｂｃｌ－２与ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达，而激活ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白的表达。     

柔红霉素诱导白血病细胞凋亡和抑制增殖的实验研究

目的 观察不同浓度柔红霉素(DNR)对Jurkat细胞生物学特性的影响.方法 采用不同浓度的DNR作用Jurkat细胞,观察细胞的生长状况,在不同的时间点收获细胞,检测DNR作用前后Jurkat细胞生物学特性的改变.结果 当0.5μmol/L DNR作用12h或18h,可以保证低死亡率的同时,细胞发生凋亡的比率最高;DNR抑制Jurkat细胞bcl-2、PCNA蛋白的表达,使更多细胞受阻于G0/G1期.结论 在合适的DNR浓度及作用时间条件下,可能通过抑制Jurkat细胞bcl-2、PCNA蛋白的表达达到诱导凋亡、抑制增殖的作用.     

柔红霉素对人B细胞淋巴瘤OCI-LY7细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的：探讨柔红霉素对人B细胞淋巴瘤OCI-LY7细胞凋亡的影响及其机制,阐明柔红霉素在弥漫大B细胞淋巴瘤中的耐药机制。方法：将体外培养的OCI-LY7细胞分为0、0.1、1.0和10.0 mg·L^-1柔红霉素组。采用MTT法检测各组OCI-LY7细胞存活率,流式细胞术检测各组OCI-LY7细胞凋亡率,Western blotting法检测各组OCI-LY7细胞中凋亡相关蛋白Bax、cleaved caspase-3和survivin表达水平。后续实验分为对照组、柔红霉素组、柔红霉素+空载体组和柔红霉素+survivin组,按照上述方法检测survivin过表达后各组OCI-LY7细胞存活率、凋亡率和细胞中凋亡相关蛋白表达水平。结果：与0 mg·L^-1组比较,处理48 h后0.1、1.0和10.0 mg·L^-1柔红霉素组OCI-LY7细胞存活率和细胞中survivin蛋白表达水平逐渐降低（P<0.05）,而细胞凋亡率和细胞中cleaved caspase-3及Bax蛋白表达水平逐渐升高（P<0.05）。与对照组比较,柔红霉素组OCI-LY7细胞存活率和细胞中survivin蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,而细胞凋亡率和细胞中cleaved caspase-3及Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与柔红霉素组比较,柔红霉素+survivin组OCI-LY7细胞存活率和细胞中survivin蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,而细胞凋亡率和细胞中cleaved caspase-3及Bax蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。结论：柔红霉素可诱导OCI-LY7细胞凋亡,其作用机制可能与下调survivin蛋白表达有关。     

TOFA协同柔红霉素诱导肠癌细胞株HCT-8细胞凋亡

目的研究TOFA及柔红霉素（DNR）联合应用对肠癌细胞株HCT-8的作用,探讨其联合应用于临床的可能性。方法将1×10^4个HCT-8细胞种植于96孔板,采用MTT比色法测定不同浓度TOFA或／和DNR对同步化处理后的HCT-8细胞的生长抑制效果;DNA降解分析法（DNA Fragmemation）检测TOFA与DNR联合使用对HCT-8细胞DNA的损伤。Westernh10t检测TOFA与DNR联合使用对凋亡蛋白p53以及PARP的水解作用。结果单用TOFA或DNR均可呈浓度依赖性抑制肠癌细胞HCT-8的生长,其IC50值分别为7．5μg／mL和0．18μmoL／L;当用20μg/mLTOFA或0．6μmol／LDNR处理时,活性细胞只有正常对照组（无药物处理组）的26．2％±5．1％或22．3％±4．5％。当用20μg/mLTOFA和0．6μmol/LDNR两药联合应用时,活性细胞只有正常值的10．4％±3．0％。同时联合应用可显著增加肿瘤细胞DNA的降解;并显著诱导凋亡蛋白p53表达,促进PARP的水解。结论TOFA与DNR联合应用可协同抑制肠癌细胞株HCT-8细胞的生长,其效应与药物诱导细胞凋亡有关。     

鸦胆子油乳注射液对SKMG-4胶质瘤细胞的作用研究

目的 本实验拟研究鸦胆子油乳注射液对人脑胶质瘤细胞SKMG-4细胞生长抑制及诱导细胞凋亡的作用.方法 体外培养人脑胶质瘤细胞SKMG-4,利用MTT比色法检测鸦胆子油乳注射液对于SKMG-4的增殖抑制影响;用流式细胞术(flowcytometry,FCM)分析药物处理前后SKMG-4的细胞周期变化;实时荧光定量pcr检测不同处理组中凋亡基因bcl-2的表达.结果 MTT显示鸦胆子油乳注射液对SKMG-4细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性,当浓度为5 g/L时,对SKMG-4细胞增殖的抑制率达到(72.1±2.2)%(P＜0.05);流式细胞仪分析显示,用5 g/L鸦胆子油乳注射液培养48 h,细胞周期中G1期所占比例增高,S期占细胞周期的比例降低;实时荧光定量pcr结果显示随着鸦胆子油乳注射液的浓度增加凋亡基因bcl-2mRNA的表达逐渐减少.与对照组比较P＜0.01.结论 中药鸦胆子油乳注射液可显著抑制SKMG-4胶质瘤细胞细胞增殖及促进其凋亡.     

姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡的机制

目的 探讨姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡作用及凋亡机制.方法 体外培养Jurkat细胞,用姜黄素处理12 h后,MTT法检测细胞存活率;流式细胞学检测细胞凋亡率;Western Blot检测凋亡相关蛋白和内质网应激蛋白的表达变化.结果 姜黄素显著抑制Jurkat细胞存活率.随着姜黄素浓度增加,Jurkat细胞凋亡率增加,并从早期凋亡发展为晚期凋亡.姜黄素降低Bcl-2蛋白表达,增加Bax蛋白表达,增加GRP78蛋白表达,活化Caspase-3表达增高.结论 姜黄素启动内源性凋亡途径和内质网应激途径诱导Jurkat细胞发生凋亡.     

鸦胆子油乳注射液对喉癌Hep-2细胞抑制作用研究

目的 探讨鸦胆子油乳注射液对喉癌Hep-2细胞增殖活性、凋亡水平、细胞周期及侵袭迁移的影响.方法 不同浓度鸦胆子油乳注射液作用Hep-2细胞后,利用MTT法检测鸦胆子油乳注射液作用后细胞增殖抑制情况;利用Hoechst33258观察细胞的凋亡现象;流式细胞仪检测分析细胞周期分布、凋亡情况;Transwell实验分析细胞侵袭迁移能力的变化情况.结果 经鸦胆子油乳注射液处理后,Hep-2细胞的增殖能力明显受到抑制(P＜0.05),且在一定浓度范围内,呈时间和剂量依赖性;细胞核出现致密的固缩形态及颗粒状荧光,鸦胆子油乳注射液诱导了细胞凋亡;细胞周期都被阻滞在G2/M期;鸦胆子油乳注射液呈剂量依赖性的抑制Hep-2细胞侵袭迁移能力(P＜0.05).结论 鸦胆子油乳注射液可抑制喉癌Hep-2细胞的增殖及侵袭迁移能力,可能与其引起肿瘤细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡有关.     

白藜芦醇诱导急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞凋亡

目的：探讨白藜芦醇抑制急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞增殖、引发S期阻滞和诱导凋亡的作用。方法：白藜芦醇体外处理培养的Jurkat细胞后,采用MTT法测定细胞活力,Wrigh-Giemsa染色、Hoechest 33258/PI荧光染色和透射电镜观察Jurkat细胞的形态学改变;流式细胞术分析细胞周期。结果：白藜芦醇0.2 mmol·L^-1处理组的抑制Jurkat细胞增殖率达64.01%,并具有剂量和时间依赖性。白藜芦醇处理细胞24 h后可见凋亡形态学改变,Hoechest 33258/PI染色显示白藜芦醇处理组细胞部分细胞核呈亮蓝色,随培养时间延长,亮蓝色荧光染色细胞数量逐渐增多。Wrigh-Giemsa染色和透射电镜观察发现部分细胞体积缩小、染色质浓缩及边集等现象的出现。流式细胞术检测表明,0.05 mmol·L^-1白黎芦醇处理48 h组62.57％的细胞被阻滞于细胞周期S期,亚二倍体细胞数量12.01%,未加药对照组细胞亚二倍体细胞数量2.05%。结论：白藜芦醇可以抑制Jurkat细胞的增殖,引起细胞周期的S期阻滞,并诱导其发生凋亡     

Caspase-3在柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡中作用

目的　探讨天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶(caspase)成员 caspase- 3在柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡中的变化 .方法　原代培养的人 RPE细胞经 2 0 0μg· L- 1 柔红霉素诱导 8,2 4和 36 h后 ,按照 caspase- 3荧光检测试剂盒说明处理细胞 ,再通过荧光比色法间接检测细胞碎片中 caspase- 3的活性 .结果　正常 caspase- 3的活性为(0 .0 94± 0 .0 0 5 ) nmol AFC,8h后增加为 (0 .44 6± 0 .0 2 9)nm ol AFC,2 4h后为 (0 .75 4± 0 .0 5 6 ) nmol AFC,36 h又下降到 (0 .486± 0 .0 33) nmol AFC,但都高于正常水平 (P<0 .0 1) .加入特异性四肽抑制物 DEVD- CHO1μL 后活性为 (0 .0 40±0 .0 0 3) nm ol AFC,显著低于正常 (P<0 .0 1) .结论　 Caspase-3参与了柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮细胞的凋亡 ,柔红霉素可使其活性增加 .     

鸦胆子油乳注射液联合化疗治疗非小细胞肺癌的临床观察

目的观察鸦胆子油乳注射液联合化疗治疗非小细胞肺癌的临床疗效及毒副作用。方法61例不能手术或术后复发的非小细胞肺癌患者随机分为治疗组31例,对照组30例,治疗组采用鸦胆子油乳配合TP（即紫杉醇＋顺铂）方案化疗,对照组应用TP方案化疗,连用两个疗程后评价疗效。结果治疗组与对照组相比在KPS评分提高率（77.4%vs 50%）、临床获益率（96.8%vs76.7%）及化疗毒副反应方面均有明显改善（P〈0.05）;治疗组近期有效率为48.4%,对照组为40.0%,二者比较无统计学意义（P〉0.05）。结论鸦胆子油乳注射液联合化疗治疗非小细胞肺癌能明显提高患者的KPS评分,减轻化疗毒副反应,提高生活质量及延缓疾病进展。     

鸦胆子乳合GP方案治疗中晚期非小细胞肺癌

目的:观察鸦胆子乳剂注射液与GP方案化疗联合治疗晚期非小细胞肺癌的近期疗效及毒副反应。方法:将40例晚期非小细胞肺癌患者随机分两组,治疗组用鸦胆子乳剂 GP方案治疗(即泽菲加顺铂);对照组应用GP方案治疗。结果:治疗组有效率50%,对照组有效率45%,两组对比差异无显著意义(P<0.05);两组患者近期疗效差异无统计学意义;治疗组生活质量改善75%,对照组50%,治疗组明显优于对照组(P<0.01);消化道反应,治疗组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度发生率30%,对照组50%,两组比较,差异有显著意义(P<0.01)。结论:鸦胆子乳剂注射液与GP方案联合治疗晚期非小细胞肺癌可明显提高患者的生活质量,改善症状,减轻化疗的毒副反应。     

鸦胆子油乳膀胱灌注预防膀胱癌术后复发

目的：探讨鸦胆子油乳膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的疗效及安全性。方法：将膀胱癌术后患者62例随机分为鸦胆子油乳组32例乖丝裂霉素C组30例，分别接受鸦胆子油乳、丝裂霉素C治疗，随访18—36个月。结果：鸦胆子组32例中复发5例，复发率15．6％；丝裂霉素C组30例中复发11例，复发率36．7％，鸦胆子组优于丝裂霉素C组（P〈0．05），且副作用小（P〈0．05）。结论：鸦胆子油乳膀胱灌注预防膀胱癌术后复发有较好的疗效，且毒副作用小。     

导管持续引流联合鸦胆子油乳、顺铂治疗恶性胸腔积液的疗效观察

目的观察导管持续引流联合鸦胆子油乳、顺铂治疗恶性胸腔积液的疗效及毒副作用。方法将120例恶性胸腔积液患者随机分为治疗组和对照组,每组60例,留置导管排尽胸水后,治疗组予鸦胆子油乳100ml＋顺铂40mg/m2胸腔内注入;对照组予顺铂40mg/m2胸腔内注入。根据胸水情况,5～7d治疗1次,共4次,观察临床疗效、生活质量及毒副作用。结果治疗组有效率、生活质量改善率高于对照组,化疗毒副反应低于对照组,两组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论导管持续引流联合鸦胆子油乳、顺铂治疗恶性胸腔积液的疗效显著、毒副作用轻,值得推广。     

鸦胆子油乳加阿霉素治疗难治性恶性胸水41例

目的 观察应用鸦胆子油乳联合阿霉素治疗难治性恶性胸腔积液的临床疗效和不良反应。方法 对41例临床难治性恶性胸腔积液进行胸腔引流并行腔内化疗，经2～3d引流干净全部胸水后经导管注入鸦胆子油乳60—100ml，阿霉素40—60mg，封管同时处理相关不良反应。7—9d1次，按疗效重复引流给药，1月后评价疗效和相关不良反应。结果 41例患者中可评价疗效39例，其中CR11例，PR21例，有效率82．1％（32／39），主要不良反应包括轻微胸痛、胃肠反应等。结论 鸦胆子油乳联合阿霉素治疗难治性恶性胸腔积液有明显疗效，不良反应患者可以耐受，值得临床推广应用。     

鸦胆子油乳联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌

目的观察鸦胆子油乳联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法采用鸦胆子油乳联合紫杉醇加卡铂化疗治疗中晚期非小细胞肺癌23例(治疗组),并设单独紫杉醇加卡铂化疗组22例作对照(对照组或化疗组)。结果治疗组客观疗效与化疗组比较差异无统计学意义(P>0.05),在改善症状,提高生活质量、体重、减轻化疗药物的不良反应方面优于化疗组(P<0.05)。结论鸦胆子油乳联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌客观疗效与化疗组相当,但能改善症状,提高生活质量、体重、减轻化疗药物的不良反应。     

复方鸦胆子油微乳处方工艺研究

[目的]制备复方鸦胆子油口服微乳。[方法]通过溶解度实验和伪三元相图的绘制,以形成微乳区域的大小为指标,筛选油相、乳化剂、助乳化剂的最佳搭配与处方中鸦胆子油的配比,研究最佳处方比例。[结果]该微乳的处方质量比为:MCT8%、鸦胆子油4%、RH4021%、无水乙醇7%、水60%。[结论]所制备的复方鸦胆子油微乳理化性质稳定。     

鸦胆子油乳注射液联合GP方案治疗晚期非小细胞肺癌临床研究

目的:探讨鸦胆子油乳注射液联合GP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效和对生存质量的影响。方法:将96例非小细胞肺癌患者随机分为治疗组48例和对照组48例。对照组采用GP方案治疗,治疗组在GP方案化疗的同时给予鸦胆子油乳注射液静脉滴注,比较两组患者临床疗效和生存质量改善情况。结果:治疗后,治疗组有效率为81.25%,对照组有效率为66.67%,两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。生存质量比较,治疗组明显优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:鸦胆子油乳注射液联合GP方案化疗治疗晚期非小细胞肺癌临床疗效显著。     

鸦胆子油注射液联合放疗治疗脑转移瘤疗效分析

目的 观察鸦胆子油注射液联合放疗治疗脑转移瘤的疗效和毒副作用.方法 将近4 a来收住院的70例脑转移瘤患者随机分为单纯放疗组及鸦胆子油注射液联合放疗组,1、3个月后观察疗效和毒副作用.结果 2组患者近期疗效无显著性差异(P>0.05),但联合鸦胆子油注射液放疗组患者生活质量明显提高(P<0.01)、体重增加显著(P<0...