磷酸化mTOR在胆囊癌中的表达及其临床意义

目的: 探讨磷酸化雷帕霉素哺乳动物靶标（phosphorylatemammalian target of rapamycin,pmTOR）在人胆囊癌组织中的表达及其临床意义。方法: 应用组织芯片技术和免疫组织化学（EnVision）方法检测来自上海市浦东新区人民医院外科和第二军医大学长征医院肿瘤科20042007年间6例慢性胆囊炎、7例癌旁组织和59例胆囊癌组织中pmTOR的表达, 并分析其与胆囊癌浸润深度、分化、Nevin分期等病理特征之间的相关性。结果: pmTOR在慢性胆囊炎组织、癌旁组织和癌组织中表达的阳性率分别为0、0和47.5%，表达差异有统计学意义（P<0.01）。pmTOR在分化高、中和低/未分化的胆囊癌组织中阳性表达率分别为21.4%、48.1%和66.7%（P<0.01）；在浸润至黏膜层/肌层、浆膜层和周围组织的胆囊癌组织中，pmTOR的阳性表达率分别为30.0%、35.7%和71.4%（P<0.01）；pmTOR在Ⅰ/Ⅱ期、Ⅲ/Ⅳ期和Ⅴ期胆囊癌组织中的阳性表达率分别为11.1%、46.4%和66.7%，呈明显上升趋势（P<0.01）。结论: pmTOR的表达与人胆囊癌的浸润深度、组织分化和Nevin分期密切相关，pmTOR可能参与人胆囊癌的发生发展过程。     

国产雷帕霉素对人淋巴瘤细胞Raji增殖的影响

目的探讨国产雷帕霉素（宜欣可）对人淋巴瘤细胞株Raji细胞体外生长及对mTOR/p 70S6K信号通路的影响。方法MTT法检测不同浓度（0、1、5、10、20、40、50、100 nmol/L）国产雷帕霉素作用不同时间（24、48、72 h）对Raji 细胞增殖的影响。光学显微镜观察Raji细胞形态学变化。流式细胞仪测定国产雷帕霉素对Raji细胞周期分布和凋亡的影响。Western blot 方法检测国产雷帕霉素处理前后对Raji 细胞mTOR、p70S6K、p-p70S6K蛋白的影响。结果国产雷帕霉素对Raji细胞增殖有明显的抑制作用（不同浓度P<0.01或P<0.05）,呈现明显的剂量-效应和时间-效应依赖关系。国产雷帕霉素明显抑制Raji细胞周期发展（P<0.05）,但没有发生明显的凋亡（P>0.05）。0、10、50、100 nmol/L国产雷帕霉作用于Raji细胞的mTOR、p-p70S6K,其蛋白量随药物浓度增大而降低（P<0.05）,p70S6K随药物浓度增大而升高（P<0.05）。结论人淋巴瘤细胞株Raji中存在mTOR/p70S6K信号通路激活状态,宜欣可可抑制该通路激活并通过阻滞细胞周期发展抑制Raji细胞增殖。     

雷帕霉素单独及联合化疗药物应用对胃癌细胞生长的影响

目的:研究mTOR抑制剂雷帕霉素对SGC-7901胃癌细胞增殖的影响及其可能的机制,并探讨其与传统化疗药物的联合作用。方法:体外培养胃癌SGC-7901细胞,取对数生长期的细胞进行试验,用不同浓度的mTOR抑制剂雷帕霉素以及长春新碱分别作用于胃癌SGC-7901细胞24、48、72小时,用MTT法检测雷帕霉素单独以及联合化疗药物对其生长的影响。用流式细胞术检测mTOR抑制剂雷帕霉素、长春新碱单独以及联合应用对胃癌SGC-7901细胞周期的影响。结果:MTT法结果显示:雷帕霉素单独能够显著抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,其作用随着药物浓度以及作用时间的增加而增加,呈现时间-剂量效应关系;与化疗药物长春新碱联合应用其抑制效应明显增强。流式细胞术检测结果显示:雷帕霉素、长春新碱单独作用胃癌细胞将细胞周期主要阻滞在G0/G1期,而联合给药时G0/G1期比例增加。结论:mTOR抑制剂雷帕霉素能够显著抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,其机制可能与通过阻滞细胞周期在G0/G1期相关;并且雷帕霉素可提高传统化疗药物长春新碱对胃癌细胞的敏感性。     

雷帕霉素对人前列腺癌PC-3细胞的作用及其机制

背景与目的：哺乳动物细胞中雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号途径调节细胞生长、增殖、存活和凋亡。本实验是研究雷帕霉素对前列腺癌PC-3细胞的作用及其机制。方法：培养前列腺癌PC-3细胞,采用MTT法检测雷帕霉素1nmol／L作用24h、36h、48h、72h后PC-3细胞增殖的改变,流式细胞术检测作用不同时间细胞周期的改变,Western blot检测雷帕霉素作用PC-3细胞24h、36h、48h、72h后raptor、rietor、Akt、pS6k1-T389、pAkt-s473的表达情况。结果：MTT结果显示雷帕霉素在作用24h时,促进了PC-3细胞增殖,但在36h显著抑制PC-3细胞增殖（P〈0．01）,72h时抑制作用更明显。FCM结果显示雷帕霉素作用24h时S期细胞有所增加,但作用36、48、72h后PC-3细胞的G1期细胞逐渐增加,使PC-3细胞周期主要阻滞在G。期。Western blot检测结果显示雷帕霉素作用24h时显著抑制raptor和pS6k1-T389的表达（P〈0．01）;rictor、Akt表达并没有显著变化;pAkt-s473表达在雷帕霉素作用24h时反而显著增加（P〈0．01）,但在36h后即被显著抑制,72h几乎完全被抑制（P〈0．01）。结论：延长雷帕霉素作用时间可抑制PC-3细胞增殖,其机制可能与雷帕霉素阻滞细胞周期、抑制Akt磷酸化有关。     

干扰mTOR表达增强食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素的敏感性

目的：观察哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性小干扰RNA（mTOR-siRNA）干扰mTOR表达后,食管鳞癌EC9706细胞对雷帕霉素(rapamycin)敏感性的变化。方法：mTOR-siRNA转染EC9706细胞, RT-PCR检测干扰效果。mTOR-siRNA转染前后的EC9706细胞用雷帕霉素处理,Western blotting检测EC9706细胞中mTOR及其下游p70S6K蛋白的表达;流式细胞术检测EC9706细胞的周期及凋亡,CCK-8试剂盒检测EC9706细胞的增殖。结果：mTOR-siRNA下调EC9706细胞中mTOR mRNA的表达（P<0.05或P<0.01);雷帕霉素抑制EC9706细胞中mTOR和p-p70S6K蛋白的表达（P<0.05),并促进p70S6K蛋白表达(P<0.01),且mTOR-siRNA转染后此作用更明显（P<0.05）。雷帕霉素可诱导EC9706细胞凋亡(P<0.01)、抑制EC9706细胞增殖(P<0.05或P<0.01)、使EC9706细胞阻滞于G1期(P<0.01),且mTOR-siRNA转染后这些作用更强（P<0.05）。结论：mTOR-siRNA能特异性下调食管鳞癌EC9706细胞中mTOR表达,提高EC9706细胞对雷帕霉素的敏感性。     

雷帕霉素对食管鳞癌裸鼠移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响

目的:探讨雷帕霉素(rapamycin, RAPA)对荷人食管鳞癌裸鼠移植瘤生长及mTOR/p70S6K信号通路的影响.方法:建立人食管鳞癌细胞株EC9706的裸鼠移植瘤模型,观察经RAPA和RAPA联合顺铂治疗后荷瘤裸鼠的肿瘤生长情况;应用TUNEL、RT-PCR及Western 印迹法观察肿瘤组织中的细胞凋亡、mTOR和p70S6K mRNA以及mTOR、p70S6K和p-p70S6K的蛋白表达.结果:RAPA和顺铂均使肿瘤生长速度减慢(P<0.05),并且2者联合应用效果更好(P<0.01);TUNEL检测发现,RAPA在体内能引起EC9706细胞的凋亡(P<0.05);RT-PCR和Western 印迹法检测结果表明,RAPA在体内降低了mTOR、p70S6K mRNA和mTOR、p-p70S6K的蛋白表达,但可提高p70S6K的蛋白表达水平.结论:RAPA在体内通过抑制mTOR/p70S6K信号通路的活性促进细胞凋亡,从而抑制人食管鳞癌细胞EC9706裸鼠移植瘤的生长.     

雷帕霉素对人肝癌细胞BEL-7402体外抗肿瘤作用研究

目的:观察雷帕霉素体外对肝癌细胞BEL-7402生长、细胞凋亡以及细胞转移能力作用。方法:以5nmol/L,10nmol/L,20nmol/L,30nmol/L,40nmol/L和50nmol/L不同浓度的雷帕霉素作用于体外培养的BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化,细胞粘附分析及体外侵袭试验观察肿瘤细胞的转移能力。结果:雷帕霉素可显著的抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系。雷帕霉素作用肝癌细胞BEL-740248h后,在Hoechst33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征。雷帕霉素能抑制其粘附性和侵袭性,具有剂量依赖性,随浓度增加而抑制增加。结论:雷帕霉素不仅能诱导BEL-7402肝癌细胞凋亡,抑制细胞的生长,而且同时抑制肿瘤细胞的粘附性和侵袭性,阻止肿瘤细胞的转移,雷帕霉素可能成为一种潜在的抗肝癌药物。     

雷帕霉素对食管鳞癌细胞系EC9706的mTOR/p70S6K信号通路的影响

目的：观察雷帕霉素（rapamycin，rapa）对食管鳞癌细胞系EC9706的mTOR／p70S6K信号通路的影响。方法：采用免疫细胞化学证实mTOR／p70S6K信号通路的存在，然后通过DNALadder、RT—PCR、Westernblot及流式细胞术分别从DNA、RNA、蛋白及细胞水平研究rapa对细胞凋亡和信号通路的影响。结果：免疫细胞化学结果显示，在细胞核及细胞质中mTOR均呈阳性；rapa处理后有明显DNALadder产生，且mTOR的mRNA水平及蛋白水平下调。但是，mTOR下游的直接靶点p70S6K的mRNA水平及蛋白水平则升高，二者的变化程度均与rapa剂量的相关；流式细胞术检测结果表明，rapa可使细胞停滞于G1期。结论：食管鳞癌细胞系EC9706中存在mTOR／p70S6K信号通路并且处于激活状态，rapa能明显促进细胞凋亡并抑制该通路激活，从而间接抑制翻译的进行。     

雷帕霉素和罗格列酮对人乳腺癌细胞生长的影响*

目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）特异性抑制剂雷帕霉素和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR γ）激动剂罗格列酮对人乳腺癌细胞株MCF-7 体外培养的抑制作用,为临床靶向治疗提供试验依据。方法:取对数生长期的乳腺癌MCF-7 细胞株,按2.0 × 10 6细胞/孔接种24孔板,按照析因试验安排4 个试验组:①雷帕霉素组（8 ×10-5 mg/L）;②罗格列酮组（50μ mol/L）;③联合组;④、实验对照组（不做任何处理的常规培养细胞）。 各组各浓度分别设3 个复孔,实验重复3 次。采用MTT 比色法观察雷帕霉素和罗格列酮对体外培养的MCF-7 细胞系生长的抑制作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期变化。结果:罗格列酮和雷帕霉素均能有效的抑制体外培养的乳腺癌细胞株MCF-7 的生长,雷帕霉素的抑制率最大（P<0.05）。 联合用药不增加细胞生长抑制率（P<0.05）。 结论:体外培养抑制试验证明雷帕霉素、罗格列酮均能有效的抑制乳腺癌细胞株MCF-7 的生长。雷帕霉素联合罗格列酮不增加细胞凋亡。雷帕霉素和罗格列酮对MCF-7 细胞株的干预作用是通过周期阻滞完成的。      

雷帕霉素与PD98059联合调控人结直肠癌细胞周期和mTOR信号转导通路

目的探讨雷帕霉素(RPM)与PD98059对人结直肠癌细胞的联合作用及机制。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测RPM和PD98059对人结直肠癌细胞的生长抑制作用,应用流式细胞术检测RPM和PD98059对细胞周期的影响,应用免疫印迹法检测RPM和PD98059对于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路相关蛋白的调控。结果RPM与PD98059对人结直肠癌细胞株SW480、HCT116、HT29均有生长抑制作用,PD98059的作用具有一定的时间-浓度依赖性。在相同作用条件下,RPM与PD98059的联合抑制效果明显优于PD98059单独用药。RPM与PD98059单独或联合用药对人结直肠癌细胞株SW480、HCT116、H129的生长周期均有调控作用(P<0.01),但作用位点不同。RPM与PD98059可下调mTOR、p70s6K、4E-BP1蛋白的磷酸化水平,对SW480和HCT116细胞的总体4E-BP1蛋白水平也具有调控作用,以二者的联合作用最为显著。RPM与PD98059对SW480、HCT116、HT29细胞的mTOR和p70s6K总体水平无明显影响。结论RPM与PD98059可协同抑制人结直肠癌细胞株SW480、HCT116、HT29的生长,并阻滞其细胞周期。其作用机制可能涉及对mTOR信号转导通路相关蛋白磷酸化水平的调控。     

Leptin基因沉默对胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞系侵袭和迁移能力的影响

背景与目的：研究表明,与肥胖症密切相关的源自脂肪细胞的细胞因子瘦素（leptin）在癌变和肿瘤发生中起着重要作用。通过体外实验观察leptin对人胆囊癌细胞系GBC-SD和OCUG侵袭和迁移能力的影响,探讨其可能的作用机制。方法：将胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞分为对照组和实验组。实验组利用小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）技术靶向沉默胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞的leptin表达,应用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）检测转染效率,通过细胞划痕实验和transwell小室法检测胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞的迁移和侵袭能力,采用免疫荧光和免疫细胞化学实验检测siRNA干扰后胆囊癌GBC-SD和OCUG细胞的leptin蛋白水平,利用蛋白质印迹法（Western blot）检测干扰后GBC-SD和OCUG细胞的leptin和p-AKT蛋白表达。结果：细胞划痕实验结果显示,利用siRNA靶向沉默leptin后GBC-SD和OCUG细胞的迁移能力下降（t=26.614,P ＜ 0.01;t=19.338,P ＜ 0.01）。Transwell迁移实验结果显示,利用siRNA靶向沉默leptin后GBC-SD和OCUG细胞的迁移能力也下降（t=7.185,P=0.002;t=8.889,P=0.003）。Transwell侵袭实验结果显示,干扰后GBC-SD和OCUG细胞的侵袭能力下降（t=10.183,P=0.001;t=9.697,P=0.001）。免疫荧光和免疫细胞化学实验结果显示,干扰后GBC-SD和OCUG细胞的leptin蛋白表达下降,Westernblot检测结果表明,靶向沉默GBC-SD细胞后leptin和p-AKT蛋白表达下调（t=26.463,P ＜ 0.01;t=13.904,P ＜ 0.01）,靶向沉默OCUG细胞后leptin和p-AKT蛋白表达也下调（t=21.335,P ＜ 0.01;t=17.914,P ＜ 0.01）。结论：下调GBC-SD和OCUG细胞的leptin表达可抑制细胞侵袭和转移能力,并可能通过AKT信号通路调控胆囊癌细胞的侵袭和迁移。Leptin有望成为胆囊癌治疗的一个重要靶点。     

脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移的抑制作用及相关机制研究

目的:探究脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成能力、侵袭及迁移能力以及细胞周期、细胞凋亡的影响。方法:选取宫颈癌细胞系SiHa,利用不同浓度脂肪抑制素进行培养。通过MTT实验、平板克隆形成实验、Transwell实验及流式细胞术检测实验分别检测脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成能力、侵袭/迁移能力以及细胞周期/细胞凋亡的影响,探究脂肪抑制素对宫颈癌细胞的抗肿瘤作用。结果:MTT实验显示,脂肪抑制素对SiHa细胞的增殖/生长具有明显抑制作用,存在时间和剂量依赖性(P＜0.05);根据细胞增殖率得出72 h时SiHa细胞的IC50为16.98 μmol/L。平板克隆形成实验显示,脂肪抑制素明显降低了SiHa细胞的克隆形成能力,具有剂量依赖性（P＜0.01）。Transwell实验显示,脂肪抑制素也明显降低SiHa细胞侵袭/迁移能力,具有剂量依赖性（P＜0.001）。流式细胞术检测实验显示,较高浓度脂肪抑制素可诱导宫颈癌细胞SiHa的细胞周期停滞在G2/M期,促进其细胞凋亡（P＜0.05）。结论:脂肪抑制素对宫颈癌细胞具有明显抗肿瘤作用,可作为宫颈癌治疗的新药物。     

Rapamycin potentiates the effects of paclitaxel in endometrial cancer cells through inhibition of cell proliferation and induction of apoptosis

Mammalian target of rapamycin (mTOR) inhibitors modulate signaling pathways involved in cell cycle progression, and recent phase II trials demonstrate activity in patients with endometrial cancer. Our objective was to examine the effects of combination therapy with rapamycin and paclitaxel in endometrial cancer cell lines. Paclitaxel inhibited proliferation in a dose‐dependent manner in both cell lines with IC₅₀ values of 0.1–0.5 nM and 1–5 nM for Ishikawa and ECC‐1 cells, respectively. To assess synergy of paclitaxel and rapamycin, the combination index (CI) was calculated by the method of Chou and Talalay. Simultaneous exposure of cells to various doses of paclitaxel in combination with rapamycin (1 nM) resulted in a significant synergistic anti‐proliferative effect (CI <1, range 0.131–0.920). Rapamycin alone did not induce apoptosis, but combined treatment with paclitaxel increased apoptosis over that of paclitaxel alone. Treatment with rapamycin and paclitaxel resulted in decreased phosphorylation of S6 and 4E‐BP1, two critical downstream targets of the mTOR pathway. Rapamycin decreased hTERT mRNA expression by real‐time RT‐PCR while paclitaxel alone had no effect on telomerase activity. Paclitaxel increased polymerization and acetylation of tubulin, and rapamycin appeared to enhance this effect. Thus, in conclusion, we demonstrate that rapamycin potentiates the effects of paclitaxel in endometrial cancer cells through inhibition of cell proliferation, induction of apoptosis and potentially increased polymerization and acetylation of tubulin. This suggests that the combination of rapamycin and paclitaxel may be a promising effective targeted therapy for endometrial cancer.     

沉默SDC1通过ERK信号通路促进胆囊癌细胞的侵袭和迁移

目的:观察沉默黏结蛋白聚糖1（syndecan-1,SDC1）对胆囊癌细胞侵袭和迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法:采用RNA干扰技术敲低胆囊癌细胞系GBC-SD中SDC1的表达,Western blot和qRT-PCR验证转染效果;Transwell侵袭实验、划痕愈合实验检测细胞侵袭和迁移能力;Western blot分析ERK1/2、p-ERK1/2、Snail、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达。结果:成功构建SDC1低表达的胆囊癌细胞系;转染后各组细胞SDC1 蛋白和mRNA表达水平显著低于shNC组（P＜0.05）;与BC组和NC组相比,shSDC1组细胞侵袭和迁移能力明显提高（P＜0.01）;与BC组和NC组相比,shSDC1组细胞p-ERK1/2、Snail、N-cadherin蛋白表达水平显著上调,而E-cadherin蛋白表达水平显著降低。结论:沉默SDC1可能通过ERK信号通路促进胆囊癌细胞的侵袭和迁移。     

胆囊癌组织中Gab1蛋白表达及下调Gab1对胆囊癌细胞增殖、侵袭的影响

目的:探讨胆囊癌组织中Gab1蛋白表达及下调Gab1对胆囊癌细胞增殖、侵袭的影响.方法:选取2013年1月至2015年12月陕西省人民医院肝胆外科诊治的胆囊癌患者48例,免疫组化法检测胆囊癌、癌旁组织中Gab1蛋白表达;通过TargetScan数据库检索调控Gab1的microRNA;通过脂质体将miR-330-mimic转染GBC-SD细胞,利用细胞集落形成实验和裸鼠移植瘤模型研究miR-330下调Gab1蛋白表达对细胞增殖和侵袭能力的影响;通过Transwell小室研究miR-330下调Gab1蛋白对GBC-SD细胞侵袭能力的影响.结果:胆囊癌组织Gab1阳性表达率高于癌旁组织(P<0.000 1),miR-330可能具有下调Gab1表达的作用;miR-330-mimic转染GBC-SD细胞后,Gab1 mRNA表达减少(P<0.000 1),Gab1 蛋白表达减少(P<0.000 1);miR-330转染后,GBC-SD细胞克隆数目减少(P<0.000 1),Balb/c裸鼠肿瘤平均体积减小(P=0.000 3),移至Transwell下室的细胞数减少(P=0.000 2).结论:miR-330通过下调Gab1在体内、外抑制GBC-SD细胞的增殖和侵袭,miR-330、Gab1可作为胆囊癌诊疗工作中新的研究方向.     

Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用

背景与目的:雷帕霉素是从吸水性链霉菌(Streptomyceshygroscopicus)发酵液中提取,最近研究发现雷帕霉素具有免疫抑制作用和广泛的抗肿瘤作用。本研究主要探讨Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用。方法:以不同浓度(5、10、20、30、40、50nmol/L)的雷帕霉素作用于BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化,采用Caspase-3试剂盒和Westernblot蛋白电泳测定Caspase-3活性。结果:雷帕霉素可显著抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,具有量-效与时-效关系;雷帕霉素作用BEL-7402细胞48h后,Hoechst33258荧光染色可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征;凋亡过程中Caspase-3酶原蛋白的激活,出现20ku亚单位,Caspase-3特异性抑制剂z-DEVD-FMK能阻断凋亡的发生。结论:雷帕霉素能抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞凋亡发生,Caspase-3酶的激活在雷帕霉素诱导细胞凋亡机制中起到重要作用。     

Synergistic effect of rapamycin and cisplatin in endometrial cancer cells

BACKGROUND:

Mammalian target of rapamycin (mTOR) inhibitors modulate signaling pathways involved in cell cycle progression, and phase 2 trials for endometrial cancer are currently being conducted. Because rapamycin is known to enhance the cytotoxicity of chemotherapeutic drugs, the authors' goal was to examine the effects of rapamycin and cisplatin in endometrial cancer cell lines.

METHODS:

By using Ishikawa and ECC‐1 cells, cell proliferation was assessed after exposure to rapamycin, cisplatin, or both in combination. The combination index (CI) was calculated using the method of Chou and Talalay. Apoptosis was evaluated by flow cytometry. Immunoblot analysis was performed to assess expression of S6 kinase 1 and the DNA mismatch repair proteins, MSH2 and MSH6. mTOR small interfering (siRNA) was transfected into the cell lines, and proliferation and apoptosis were assessed after exposure to cisplatin.

RESULTS:

Cisplatin inhibited growth in a dose‐dependent manner in both cell lines (median inhibition concentration of 8‐13 μM). Simultaneous exposure of cisplatin in combination with rapamycin resulted in a significant synergistic antiproliferative effect (CI < 1). Rapamycin increased cisplatin‐induced apoptosis and stimulated expression of MSH2 and MSH6 in the cisplatin‐treated cell lines. Cell growth was significantly decreased in cells transfected with mTOR siRNA and treated with cisplatin compared with either alone (CI < 1). Transfection of mTOR siRNA did not induce apoptosis, but combined treatment with cisplatin increased apoptosis over that of cisplatin alone.

CONCLUSIONS:

The results of the current study provide evidence of a synergistic relation between rapamycin and cisplatin in both inhibition of cell growth and induction of apoptosis. This suggests that rapamycin and cisplatin may be a rational combination of a targeted therapy for endometrial cancer. Cancer 2009. © 2009 American Cancer Society.