家蝇幼虫淋巴液的抑菌作用及其SDS-PAGE分析

目的 观察针刺诱导家蝇幼虫血淋巴抗菌物质抑菌作用与抗菌分子.方法 室内饲养的家蝇三龄幼虫,经针刺体壁处理后48 h,提取其血淋巴,观察单独使用血淋巴和血淋巴与氨苄青霉素混合对9种应试细菌的抑菌效果,血淋巴与抗真菌药氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果,应用SDS-PAGE分析血淋巴抗菌分子表达.结果 针刺家蝇幼虫后48 h的血淋巴,作用于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、变形杆菌、枯草杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、黄色小球菌,结果显示:针刺家蝇幼虫后48 h的血淋巴对试验9个标准株细菌,均产生明显抑菌环,经单因素方差分析,显示各抑菌试验组的抑菌效果,皆有显著差异(P＜0.001).其中对黄色小球菌抑菌活力最强.1 μ1氨苄青酶素与7 μ1针刺诱导家蝇幼虫淋巴液混合对白色葡萄球菌抑菌效果呈现最好的加强抑菌作用.针刺诱导家蝇幼虫血淋巴与抗真菌药物氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果呈现明显协同增强作用.SDS-PAGE分析结果显示:针刺幼虫后发育的成蝇和针刺幼虫血淋巴的电泳条带与未针刺者相比,针刺幼虫后发育的成蝇,在24000～97000范围内表达尤为增强,在12000附近有一条特异性条带.针刺家蝇3龄幼虫血淋巴SDS-PAGE分析显示,在24 000、35000、40 000～96000范围内表达明显增强,其中35 000、12 000条带较为特异.结论 本研究进一步验证了家蝇血淋巴的抑菌活性,发现针刺诱导家蝇幼虫血淋巴对黄色小球菌抑菌活力最强,氨苄青霉素与家蝇幼虫淋巴液混合对白色葡萄球菌抑菌效果呈现最好的加强抑菌作用,针刺诱导家蝇幼虫血淋巴与抗真菌药物氟康唑混合对酵母真菌抑菌效果呈现明显增强作用,上述发现在国内外报道较少,本研究结果,为进一步开发这类抗菌物质,提供了实验资料.     

感染大肠杆菌后家蝇幼虫血淋巴细胞的观察

目的 探讨家蝇三龄幼虫被大肠杆菌感染后的细胞免疫反应.方法 观察家蝇三龄幼虫感染大肠杆菌后4、8、16及24 h血淋巴细胞总数(THC)及各类血细胞数量(DHC)的变化.观察大肠杆菌感染后家蝇幼虫血细胞形态的变化.结果 ①与对照组比较,感染4、8、16、24 h组THC均有显著增加(P<0.01);感染后各时间组的浆血胞和粒血胞数均显著升高(P<0.01);感染后16、24 h组的珠血胞数显著升高(P<0.01);各时间组的原血胞和类绛血胞数量无明显变化(P>0.05).②感染后4、8、16 h组的浆血胞和粒血胞的比例明显增加(P<0.01),感染后各时间组的珠血胞的比例均明显减少(P<0.01),各时间组原血胞和类绛血胞的比例均无明显变化(P>0.05).③感染大肠杆菌后,浆血胞发生空泡、细胞变形等变化.结论 家蝇幼虫感染大肠杆菌后在体内诱发的细胞免疫反应表现为血淋巴细胞数量、分类及形态出现变化,其中浆血胞和粒血胞两类细胞是免疫反应的主要参与者,珠血胞也可能参与细胞免疫反应.     

家蝇免疫血淋巴的抑菌作用及其免疫活性的研究

目的研究家蝇幼虫免疫血淋巴抑菌作用及其机制并探讨其免疫调节功能。方法分未经诱导、针刺诱导、蘸菌液诱导三组提取家蝇幼虫免疫血淋巴,分别针对多个标准菌株做抑菌实验,并设立空白对照和药物对照,观察抑菌效果。淋巴细胞转化实验研究家蝇血淋巴的免疫调节作用。结果三种处理方法所提取的家蝇幼虫血淋巴对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、大肠杆菌、肺炎克氏菌、铜绿假单胞菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等革兰氏阳性菌、阴性菌及单细胞真菌白色念珠菌均有强的抑菌作用,其中带菌诱导的血淋巴抑菌效果较好,并且抑菌活力具有一定的热稳定性。血淋巴对人淋巴细胞的激活作用明显,淋巴细胞的转化率与对照组比较差异有显著性。结论本研究进一步验证了家蝇血淋巴的抑菌活性和免疫功能,为家蝇血淋巴的抗菌机制及免疫调节作用的深入研究和应用提供资料。     

滞育家蝇幼虫糖的变化

目的观察家蝇幼虫滞育前后血淋巴中总糖、海藻糖、糖原的变化,探讨家蝇幼虫滞育发生的生化机制。方法低温诱导家蝇幼虫滞育,用蒽酮比色法测定滞育10d、15d、20d组及非滞育组血淋巴总糖、海藻糖、糖原的含量。结果滞育组与非滞育组比较,(1)家蝇幼虫血淋巴总糖含量滞育10d组显著升高,15d组、20d组则降低。(2)血淋巴海藻糖含量滞育10d组、20d组明显升高,15d组差异无显著性。(3)血淋巴糖原含量滞育10d组、15d组降低,20d组则升高。结论家蝇滞育幼虫的糖醇积累型属于海藻糖积累型。     

家蝇三龄幼虫血细胞形态的观察

目的通过姬氏染色法以便观察家蝇三龄幼虫的各种血细胞形态。方法取家蝇三龄幼虫血淋巴制作血涂片,姬氏染液染色,油镜观察。结果染色效果良好,家蝇三龄幼虫的各种血细胞结构清晰。可分为原血胞、浆血胞、粒血胞、珠血胞、类绛血胞5种。其中浆血胞可分为大核浆血胞和小核浆血胞两种。结论家蝇三龄幼虫血细胞分为5种。     

猪粪饲养家蝇幼虫的营养成分研究

目的 :分析猪粪饲养家蝇 (Muscadomestica)幼虫的营养成分。方法 :引种野生家蝇 ,用猪粪饲养幼虫 ,收获 3期老熟幼虫 ,测定粗蛋白、粗脂肪、氨基酸和脂肪酸构成及微量元素含量 ,用粮食与农业组织 世界卫生组织 (FAO WHO)提出的参考蛋白模式评价 ,并与麦麸饲养的幼虫及鱼粉比较。结果 :每公斤猪粪平均可产(0 13± 0 0 4)～ (0 2 0± 0 12 )kg鲜蛆 ,鲜蛆烘干比为 1∶0 31± 0 12 ,粗蛋白 42 36 %～ 5 2 33 % ,必须氨基酸含量占总氨基酸的 45 10 % (E % ) ,必须氨基酸与非必需氨基酸总量的比值 (E/N)为 0 82 ,E % /T为 3 0 1,脂肪酸含量为 13 73 %～ 16 83 % ,油酸、亚油酸及亚麻酸等必需脂肪酸分别为 36 99% ,7 6 1%和 0 35 % ,Fe 2 91 5mg/kg ,Cu 87 5 5mg/kg ,Zn 2 46 8mg/kg ,Mn 2 49 45mg/kg ,比麦麸饲养幼虫更接近参考蛋白模式 ,营养价值优于鱼粉。结论 :猪粪饲养的家蝇幼虫比麦麸饲养的幼虫更接近参考蛋白模式 ,营养价值优于鱼粉     

不同诱导源诱导家蝇抗菌物质的动力学研究

目的 比较不同诱导源诱导家蝇血淋巴中产生抗菌物质的动力学变化及抗菌活动。方法 采用抑菌圈法。以＾６０Ｃｏγ射线，活的大肠杆菌及热灭活的金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和生物盐水为诱导源，均能诱导出家蝇血淋巴中的抗菌物质。结果 不同诱导源诱导家蝇产生抗菌物质的活性大小不同，达到最大活性的时间不同，抗菌特性亦有差异。经热灭活细菌诱导的抗菌物质抗菌活性大，抗菌种类多。同时，未经诱导的家蝇血淋巴也有抗菌活性。结论     

家蝇幼虫组织匀浆液抗病毒活性的研究

目的 探索家蝇组织匀浆液的抗病毒作用。方法 用鸡胚法检测经针刺或冷冻免疫诱导及同期对照家蝇幼虫组织匀浆液的抗病毒活性。结果 家蝇幼虫组织匀浆液中有抗病毒活性物质存在，针刺或冷冻组抗病毒物质的活性高于同期对照组。结论 家蝇幼虫组织匀浆液中抗病毒活性物质的性质尚待进一步确定。研究结果为抗病毒药物的寻找开辟了新的路径。     

温度和光周期对家蝇幼虫滞育的影响

目的探讨温度和光周期对家蝇幼虫滞育的影响。方法将家蝇卵置于不同温度和光周期下饲养,观察幼虫发育至蛹的时间。结果随着温度的降低,幼虫滞育期延长;随着温度的升高,滞育幼虫发育为蛹的时间缩短,15℃为最佳滞育温度。光周期对幼虫滞育的影响不大。结论温度对家蝇幼虫滞育的维持和终止有重要作用。高温可解除家蝇幼虫的滞育。光周期对家蝇幼虫滞育的影响不大。     

家蝇幼虫抗菌肽Defensins基因的克隆与序列分析

目的：克隆家蝇幼虫的抗菌肽defensins基因并对其进行序列分析。方法：提取家蝇幼虫总RNA，根据家蝇成虫defensins基因cDNA序列设计一对引物，RT-PCR扩增目的基因片段，T-A克隆后测序，应用相关生物信息学软件对该序列进行分析。结果：RT—PCR扩增出一条约310bp的目的片段，序列分析表明，其与家蝇成虫防御素基因同源性高达97％，核酸序列变异主要发生在信号肽区域。结论：成功克隆及分析了家蝇幼虫防御素基因全长编码区cDNA序列，为其下一步的重组表达和生物活性研究奠定了基础。     

溴氰菊酯抗性家蝇酯酶的生化分析

为研究拟除虫菊酯抗性机制 ,通过对溴氰菊酯敏感、抗性和高抗性家蝇的离体酯酶活力测定、酶反应动力学及不连续非变性凝胶电泳 ,观察酯酶在拟除虫菊酯抗性中的作用。结果显示 ,用 α- NA做底物酯酶活力和Vm 在三种品系家蝇中没有差异 ,两个抗性品系之间 Km 和 Vm 也没有差异 ,但敏感品系的 Km 分别高于两抗性品系 ;聚丙烯酰胺凝胶电泳表明其同功酶谱差异很大 ,SS有 6条带 ,R、 RR各有 5条副业 ,且三者之间带的位置和带型均发生改变。结论 ,拟除虫菊酯抗性家蝇酯酶性质发生改变 ,可能参与对拟除虫菊酯的代谢抗性。     

家蝇乙酰胆碱酯酶基因的克隆与序列分析

目的克隆家蝇Ace基因并进行表达,并对家蝇AChE序列进行分析,为利用基因工程进行酶改造提供必要的参考. 方法结合已有的文献资料,利用生物信息学方法对家蝇AChE的序列进行分析,包括密码子偏爱性、系统发生、三维结构预测等. 结果成功克隆家蝇Ace基因,并利用同源模建方法获得了家蝇AChE的三维结构,以果蝇AChE为参考,判断了家蝇AChE应属于AChE 2家族. 结论根据所得家蝇AChE的三维模型从理论上分析了因AChE中一个氨基酸突变导致家蝇产生有机磷抗性的可能原因,并为半理性改造家蝇乙酰胆碱酯酶提供了三维模型.     

广东省家蝇对常用杀虫剂的抗药性现状调查

本文采用自动微量点滴法测定我省家蝇对常用杀虫剂的抗药性。结果显示:我省家蝇对氯菊酯、溴氰菊酯、巴沙、敌敌畏均有一定的抗性;抗性水平比五年前有不同程度的发展。     

广东省家蝇对常用杀虫剂的抗药性现状调查

本文采用自动微量点滴法测定我省家蝇对常用杀虫剂的抗药性。结果显示:我省家蝇对氯菊酯、溴氰菊酯、巴沙、敌敌畏均有一定的抗性;抗性水平比5年前有不同程度的发展。     

Proteomic Analysis of the Peritrophic Matrix from the Midgut of Third Instar Larvae,Musca domestica

ObjectiveTo better comprehend the molecular structure and physiological functionof the housefly larval peritrophic matrix (PM), a mass spectrometry approach wasused to investigate the PM protein composition. MethodsThe PM was dissected from the midgut of the third instar larvae,and protein extracted from the PM wasevaluated using SDS-PAGE. A 1D-PAGE lane containing all protein bandswascut fromtop to bottom, the proteins in-geltrypsinised and analysedvia shotgun liquid chromatography- tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). ResultsIn total, 374 proteins, with molecular weightsvarying from 8.225 kD to996.065 kD and isoelectric points ranging from 3.83 to 11.24 were successfully identified, most identified proteins were mainly related to immunity, digestion,nutrient metabolism and PM structure. Furthermore, many of these proteins were functionally associated with pattern binding, polysaccharide binding, structural constituent of peritrophic membrane and chitin binding, according to Gene Ontology annotation. ConclusionThe PM protein composition, which provides a basis for further functional investigations of the identified proteins,will be useful for understanding the housefly larval gut immune system and may help to identify potential targets and exploit new bioinsecticides.     

家蝇触角化学感受器的功能

家蝇依靠多种类型感受器如视觉、听觉、机械感受器和化学感受器把外环境的信息变为有用的生物信号。研究家蝇的化学感受器对防治家蝇有指导作用。用0.5％龙胆紫染色证实家蝇触角后基感觉窝内的感器为中空的。电生理研究证实氨、醋酸、避蚊胺和石碳酸对家蝇触角有刺激作用。证实家蝇触角的外基感觉窝内的化感器有嗅觉功能。     

几种混配杀虫剂对家蝇的KT_(50)的测定

<正> 利用不同种类的杀虫剂进行混配,是延缓家蝇产生抗性和防治抗性家蝇的有效的方法之一。通过试验室试验,将几种混配杀虫剂对家蝇的防治效果介绍如下:1 材料和方法:1.1 药品:1％氯氰菊酯、1％溴氰菊酯、1％菊酯、98％敌敌畏、5％巴沙、5％残杀威、5％S1、5％S2,以上各种药物均由中国科学院动物研究所提供。93％EBT购自上海三灵公司。1.2 试虫:正常品系羽化3～4天的家蝇。1.3 测试方法:采用玻璃柜(70cm×70cm)密闭喷雾法。将各种杀虫剂按不同比例混配     

德国蜚蠊和家蝇的不同品系对吡虫啉的交互抗性

<正> 德国蜚蠊(Blattella germanica)和家蝇(Musca domestica)是重要的两大卫生害虫。使用杀虫剂是防治这两种害虫的主要手段,然而害虫抗药性的发展使得杀虫剂的杀虫活性逐渐丧失,发展安全、新型杀虫剂来控制这些害虫变得非常必要。 吡虫啉作为极有前途的新型杀虫剂,值得用于防治德国蜚蠊和家蝇,其作用靶标是昆虫的烟碱型乙酰胆碱受体(nAchR)。     

家蝇触角感觉窝内感受器的超微结构

本文报道了家蝇触角感受窝内感受器的超微结构,用扫描电镜透射电镜方法对家蝇触角第3节的后基感觉窝和外基感觉窝进行研究,创立了把触角切片后制成扫描电镜标本的方法。观察到后基感觉窝内密布薄壁型多孔感器,这些感器的直径长12.34±0.21μm,中间宽2.02±0.23μm,壁厚65.5±4.38nm,每平方μm分布着26.5±5.32的小孔。几丁质壁上小孔开口向内增大,变成几丁质小室,小室直径约0.1～0.2μm,内壁由15～20个小管向小室内壁延伸,每个小管直径在8.96±0.59nm的范围内,这些树突没有鞘,呈片状树突层。在外基感觉窝内分布着带槽椎形化感器,扫描电镜可见到11～13根纵形排列的细管组成的感器。     

2种铺无菌盘方法比较

无菌盘是将无菌巾铺在清洁干燥的治疗盘内，形成一无菌区，放置无菌物品，以供治疗、护理用，有效时间不超过4h。临床上常用的铺无菌盘法为单层底铺巾法，方法如下：打开无菌包，取1块治疗巾放于治疗盘内，捏住无菌巾一边外面两角，抖开，双折铺于治疗盘上，上层向远端扇形折叠，开口向外，放入无菌物品后，拉平上层盖于物品上，上下边缘对齐，向上翻折开口处2次，两侧边缘向下翻折1次，以保持无菌。